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猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用
被引量：
1
1
作者
夏芳
何玲
+1 位作者
罗满林
陈瑞爱
《广东畜牧兽医科技》
2011年第5期30-33,共4页
针对CSFV基因组5′端非编码区序列设计并合成了高度特异的一对引物和一条探针,用于猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立。将提取的病毒的总RNA做为模板进行反转录和PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行大肠杆菌转化,提取阳性质粒...
针对CSFV基因组5′端非编码区序列设计并合成了高度特异的一对引物和一条探针,用于猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立。将提取的病毒的总RNA做为模板进行反转录和PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行大肠杆菌转化,提取阳性质粒做为标准品绘制标准曲线,成功地建立了特异性检测CSFV的荧光定量RT-PCR方法,其灵敏度达到100拷贝/μL。将猪瘟活疫苗(细胞源)采用不同剂量免疫猪后,取全血及组织,用所建立的方法进行检测,发现病毒主要分布在猪的血液、脾脏、淋巴结、扁桃体中。
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关键词
猪瘟病毒
荧光定量
猪瘟活疫苗
病毒分布
下载PDF
职称材料
实用WSSV定量检测方法的建立及其应用于脊尾白虾病毒感染规律的研究
被引量：
14
2
作者
李新苍
周俊芳
+3 位作者
房文红
董建波
朱磊
王元
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1554-1562,共9页
为优化当前白斑综合征病毒(WSSV)定量检测方法,实验结合当前WSSV诊断与定量方法应用的实际,试图通过设计两对普通PCR引物来建立一种实用的WSSV绝对定量方法,并利用此方法进一步探明WSSV在脊尾白虾体内的增殖规律及致病性。首先根据WSSV...
为优化当前白斑综合征病毒(WSSV)定量检测方法,实验结合当前WSSV诊断与定量方法应用的实际,试图通过设计两对普通PCR引物来建立一种实用的WSSV绝对定量方法,并利用此方法进一步探明WSSV在脊尾白虾体内的增殖规律及致病性。首先根据WSSV的囊膜蛋白VP28基因序列设计了两对特异引物(F1,R1)和(RF2,RR2),分别用于标准品质粒的构建和扩增子的扩增,以开展SYBR Green染料法定量检测WSSV的研究;随后利用该定量检测方法分析了WSSV在脊尾白虾体内的组织分布及感染规律。研究结果显示:(1)以定量引物RF2和RR2建立的SYBR Green绝对定量检测方法具有敏感度高、特异性强、定量范围广且准确等特点;(2)WSSV能感染脊尾白虾鳃、肝胰腺、肌肉、头胸甲下结缔组织、胃及肠等组织,其中头胸甲下结缔组织病毒含量最高(1.1×107copies/μg),其次是鳃组织(4.1×106copies/μg);正常脊尾白虾感染WSSV,首先经过一个约48 h潜伏期,而后开始大量增殖并造成部分虾死亡,死亡率约为20%。
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关键词
脊尾白虾
白斑综合征病毒
检测与定量
感染规律
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职称材料
题名
猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用
被引量：
1
1
作者
夏芳
何玲
罗满林
陈瑞爱
机构
广东大华农动物保健品股份有限公司
华南农业大学兽医学院
出处
《广东畜牧兽医科技》
2011年第5期30-33,共4页
文摘
针对CSFV基因组5′端非编码区序列设计并合成了高度特异的一对引物和一条探针,用于猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立。将提取的病毒的总RNA做为模板进行反转录和PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行大肠杆菌转化,提取阳性质粒做为标准品绘制标准曲线,成功地建立了特异性检测CSFV的荧光定量RT-PCR方法,其灵敏度达到100拷贝/μL。将猪瘟活疫苗(细胞源)采用不同剂量免疫猪后,取全血及组织,用所建立的方法进行检测,发现病毒主要分布在猪的血液、脾脏、淋巴结、扁桃体中。
关键词
猪瘟病毒
荧光定量
猪瘟活疫苗
病毒分布
Keywords
Classical swine fever virus
Fluorogenic quantitative PCR
Classical swine fever cell vaccine
virusdistribution
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
实用WSSV定量检测方法的建立及其应用于脊尾白虾病毒感染规律的研究
被引量：
14
2
作者
李新苍
周俊芳
房文红
董建波
朱磊
王元
机构
中国水产科学研究院东海水产研究所
江苏省海洋渔业指挥部
出处
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1554-1562,共9页
基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2011M07)
国家自然科学基金青年基金项目(31101920)
文摘
为优化当前白斑综合征病毒(WSSV)定量检测方法,实验结合当前WSSV诊断与定量方法应用的实际,试图通过设计两对普通PCR引物来建立一种实用的WSSV绝对定量方法,并利用此方法进一步探明WSSV在脊尾白虾体内的增殖规律及致病性。首先根据WSSV的囊膜蛋白VP28基因序列设计了两对特异引物(F1,R1)和(RF2,RR2),分别用于标准品质粒的构建和扩增子的扩增,以开展SYBR Green染料法定量检测WSSV的研究;随后利用该定量检测方法分析了WSSV在脊尾白虾体内的组织分布及感染规律。研究结果显示:(1)以定量引物RF2和RR2建立的SYBR Green绝对定量检测方法具有敏感度高、特异性强、定量范围广且准确等特点;(2)WSSV能感染脊尾白虾鳃、肝胰腺、肌肉、头胸甲下结缔组织、胃及肠等组织,其中头胸甲下结缔组织病毒含量最高(1.1×107copies/μg),其次是鳃组织(4.1×106copies/μg);正常脊尾白虾感染WSSV,首先经过一个约48 h潜伏期,而后开始大量增殖并造成部分虾死亡,死亡率约为20%。
关键词
脊尾白虾
白斑综合征病毒
检测与定量
感染规律
Keywords
Exopalaemon carinicauda
white spot syndrome virus（WSSV）
absolute quantification
virusdistribution
and proliferation pattern
分类号
Q175 [生物学—水生生物学]
S945.1 [生物学—普通生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用
夏芳
何玲
罗满林
陈瑞爱
《广东畜牧兽医科技》
2011
1
下载PDF
职称材料
2
实用WSSV定量检测方法的建立及其应用于脊尾白虾病毒感染规律的研究
李新苍
周俊芳
房文红
董建波
朱磊
王元
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
14
下载PDF
职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
统计分析
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