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乙型肝炎病毒(adr亚型)重组逆转录病毒包装及滴度测定
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作者 王岚 杨世忠 +1 位作者 于志凤 赵颖 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1217-1219,共3页
目的包装乙型肝炎病毒(adr亚型)重组逆转录病毒并进行滴度测定,为下一步构建乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠奠定基础。方法将乙型肝炎病毒(adr)全基因组插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了乙型肝炎(adr)重组逆转录病毒载体,鉴定正反向... 目的包装乙型肝炎病毒(adr亚型)重组逆转录病毒并进行滴度测定,为下一步构建乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠奠定基础。方法将乙型肝炎病毒(adr)全基因组插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了乙型肝炎(adr)重组逆转录病毒载体,鉴定正反向后,脂质体转染PA317包装细胞,G418抗性压力下进行筛选得到阳性细胞克隆,扩大培养后进行滴度测定,选取产毒率高细胞克隆株,然后扩大培养、浓缩,进行滴度测定。结果分别获得HBV(adr)全基因组正向和反向插入的重组逆转录病毒。正连重组逆转录病毒载体经PA317细胞包装,经筛选、浓缩后滴度为106CFU/m l,反连重组逆转录病毒载体经PA317细胞包装,经筛选、浓缩后滴度为105CFU/m l。结论PA317细胞包装了含乙型肝炎病毒(adr)全基因组的重组逆转录病毒。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒(adr) 重组逆转录病毒载体 转染 包装 滴度测定
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