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应用双向电泳和质谱技术筛选口腔扁平苔藓差异蛋白 被引量:13
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作者 王文梅 蒋文晖 +1 位作者 胡勤刚 郑春兰 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期120-123,共4页
目的:筛选口腔扁平苔藓及正常黏膜组织的差异表达蛋白,为口腔扁平苔藓的发病机制及诊断治疗的研究提供实验室依据。方法:收集口腔扁平苔藓组织及正常口腔黏膜组织,提取组织蛋白,蛋白定量,进行双向电泳,图象分析寻找差异点,基质辅助激光... 目的:筛选口腔扁平苔藓及正常黏膜组织的差异表达蛋白,为口腔扁平苔藓的发病机制及诊断治疗的研究提供实验室依据。方法:收集口腔扁平苔藓组织及正常口腔黏膜组织,提取组织蛋白,蛋白定量,进行双向电泳,图象分析寻找差异点,基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析鉴定表达差异量较大的蛋白质点,确定所分析的蛋白质类型和功能。结果:(1)人口腔扁平苔藓及正常黏膜组织的双向电泳图谱的平均蛋白质点数分别为1576±67和1608±73,同一组织凝胶在蛋白质点位置上重复性较好。(2)通过比较人口腔扁平苔藓与正常黏膜组织的双向凝胶电泳图谱,得到差异表达蛋白质点数为13个,其中7个点在口腔扁平苔藓中为高表达,6个点在口腔扁平苔藓中为低表达。选择10个表达差异量较大的蛋白质点进行质谱和生物信息学分析,鉴定了其中的4个点,包括有锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD),膜联蛋白I,波形蛋白,未知蛋白等。结论:锰超氧化物歧化酶,膜联蛋白I,波形蛋白,未知蛋白可能参与了口腔扁平苔藓的发生和发展,其相关机制尚待进一步阐明。双向电泳-质谱分析技术为口腔扁平苔藓发生发展过程中差异表达蛋白的研究提供了有效的技术手段。 展开更多
关键词 口腔 扁平苔藓 双向凝胶电泳 蛋白质组 肽质量指纹图谱 锰超氧化物歧化酶 膜联蛋白I 波形蛋白 未知蛋白
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宫颈癌患者β-Catenin、Vimentin、Ezrin及P63水平与临床病理特征及预后的关系 被引量:9
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作者 郑小妹 李伟宏 +3 位作者 吴丹梅 万章彩 陈曼玲 李翔 《肿瘤药学》 CAS 2017年第4期416-420,共5页
目的探究宫颈癌患者β-链蛋白(β-Catenin)、波形蛋白(Vimentin)、埃兹蛋白(Ezrin)及P63蛋白水平与临床病理特征及预后的关系。方法选取2012年1月~2015年12月在我院进行子宫切除术的宫颈标本119例作为研究对象,其中86例为宫颈癌,33例为... 目的探究宫颈癌患者β-链蛋白(β-Catenin)、波形蛋白(Vimentin)、埃兹蛋白(Ezrin)及P63蛋白水平与临床病理特征及预后的关系。方法选取2012年1月~2015年12月在我院进行子宫切除术的宫颈标本119例作为研究对象,其中86例为宫颈癌,33例为正常宫颈,采用免疫组化法检测宫颈组织中β-Catenin、Vimentin、Ezrin及P63蛋白表达变化,分析各类因子表达与宫颈癌患者临床病理及患者预后间的关系。结果β-Catenin、Vimentin、Ezrin及P63蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率明显高于正常宫颈组织(P<0.05)。β-Catenin、Vimentin、Ezrin及P63蛋白表达在不同临床分期、淋巴转移、不同分化程度的宫颈癌组织中有明显差异(P<0.05)。β-Catenin、Vimentin、Ezrin强阳性表达者生存率均明显低于弱阳性和阴性表达者,P63强阳性表达者生存率显著高于弱阳性和阴性表达者(P<0.05)。结论β-Catenin、Vimentin、Ezrin高表达及P63蛋白低表达与宫颈癌的发生相关,通过检测其表达水平可以对患者病情程度及预后进行预测。 展开更多
关键词 宫颈癌 Β-链蛋白 波形蛋白 埃兹蛋白 P63蛋白 临床病理特征
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波形蛋白介导猪繁殖与呼吸综合征病毒感染Marc-145细胞作用的初步研究 被引量:9
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作者 王伟伟 张璐 +3 位作者 马晓春 高继明 肖一红 周恩民 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期456-461,共6页
为了研究波形蛋白在介导PRRSV感染过程中的作用,根据GenBank中已发表的波形蛋白序列,设计特异性引物,利用RT-PCR方法从Marc-145细胞中扩增目的基因,克隆入pET-28a,转化表达菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达... 为了研究波形蛋白在介导PRRSV感染过程中的作用,根据GenBank中已发表的波形蛋白序列,设计特异性引物,利用RT-PCR方法从Marc-145细胞中扩增目的基因,克隆入pET-28a,转化表达菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物,将表达产物纯化后免疫BALB/c小鼠制备血清,用病毒阻断实验验证PRRSV与波形蛋白及其抗体的关系。用ELISA方法确定了重组波形蛋白与PRRSV结构蛋白N蛋白和囊膜蛋白GP5蛋白之间的关系。结果表明,成功的从Marc-145细胞中扩增出全长的波形蛋白基因,将其克隆入pET-28a,诱导后得到高效表达,表达蛋白纯化后免疫小鼠抗体效价达到105,病毒阻断实验表明波形蛋白能部分阻断PRRSV感染,其抗血清能完全阻断PRRSV感染。ELISA结果表明波形蛋白能与N蛋白结合而不与GP5蛋白结合。此结果为PRRSV感染的细胞的受体机制增添了新的内容,为PRRSV感染过程中受体间的相互作用关系研究奠定基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 波形蛋白 表达 病毒阻断 N蛋白
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上皮钙黏蛋白、波形蛋白和Snail蛋白表型在乳腺浸润性导管癌中表达的相关性及其与预后的关系 被引量:7
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作者 周博鑫 张敏 +3 位作者 于洋 许鹏程 叶国麟 周丹 《国际免疫学杂志》 CAS 2016年第1期19-25,共7页
目的 检测上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和Snail蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达情况与乳腺癌病理特征的关系及其与浸润性导管癌预后的关系.方法 采用Envision免疫组织化学方法对89例乳腺浸润性导管癌组织中的上E-c... 目的 检测上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和Snail蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达情况与乳腺癌病理特征的关系及其与浸润性导管癌预后的关系.方法 采用Envision免疫组织化学方法对89例乳腺浸润性导管癌组织中的上E-cadhenn,Vimentin和Snail蛋白表达情况进行检测并分析表达程度与临床病理特征之间的关系;统计分析采用卡方检验、Fisher精确概率法检验Spearman等级相关检验、配对计数资料检验、Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,Cox比例风险模型进行生存的多因素分析.结果 E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白在浸润性导管癌组织中的阳性表达率分别为、47.1%、53.9%和55.0%,三者呈负相关,(P=0.003);E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白的表达与临床TNM分期有关(P <0.005).浸润性导管癌中Snail蛋白、Vimentin表达明显增高,Snail蛋白与淋巴结转移有关(P =0.029);Vimentin与淋巴结转移、雌激素状态有关(P =0.006,P<0.001);E-cadherin表达明显降低,与孕激素状态有关(P =0.030);分子分型结果显示,管腔A型、HER-2阳性型组的Vimentin、Snail蛋白阳性表达率低于基地细胞样型组(P =0.012),而E-cadherin表达率则高于基地细胞样型组(P =0.004).Cox分析发现,E-cadherin低表达和Vimentin的过度表达与患者总生存期(P =0.019、P=0.045)及患者无病生存期(P =0.032、P=0.024)显著相关,但Snail蛋白的表达与总生存期及无病生存期无相关性(P =0.879、P=0.835).结论 E-cadhern、Vimentin和Snail蛋白在乳腺浸润性导管癌的发生、发展、侵袭及转移中起重要作用,对认识乳腺癌的生物学特性以及对指导乳腺癌的诊疗及预后具有重要意义. 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 上皮钙黏蛋白 波形蛋白 SNAIL蛋白 预后
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宫颈病变组织中Vimentin、P16^(INK4A)、Smad4的定位、表达及其在EMT中的作用 被引量:6
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作者 韩淑珍 熊晖 +2 位作者 王小英 陈小毅 王森 《山东医药》 CAS 2014年第7期1-4,共4页
目的观察Vimentin、P16INK4A和Smad4在宫颈癌及前期病变中的定位与表达水平,探讨其对宫颈癌细胞上皮—间质转化(EMT)的影响和可能机制。方法免疫组织化学染色方法检测30例慢性子宫颈炎、30例低级别宫颈上皮内瘤变(CIN)、30例高级别CIN... 目的观察Vimentin、P16INK4A和Smad4在宫颈癌及前期病变中的定位与表达水平,探讨其对宫颈癌细胞上皮—间质转化(EMT)的影响和可能机制。方法免疫组织化学染色方法检测30例慢性子宫颈炎、30例低级别宫颈上皮内瘤变(CIN)、30例高级别CIN和30例宫颈癌中Vimentin、P16INK4A和Smad4的表达水平和定位。结果 Vimentin、P16INK4A和Smad4在各宫颈病变组织中呈不同程度阳性表达,在细胞质和细胞核均可表达。宫颈癌组织Vimentin表达水平较慢性子宫颈炎、低级别CIN、高级别CIN高(P均<0.01)。慢性子宫颈炎组织中P16INK4A阴性表达,在CIN和宫颈癌组织中表达水平升高(P均<0.01)。慢性子宫颈炎组织中Smad4在细胞核与细胞质均高表达,低级别CIN、高级别CIN和宫颈癌组织中Smad4细胞核表达水平降低(P均<0.01)。Spearman相关分析显示,120例宫颈病变组织中Smad4核表达与P16INK4A核质表达均呈负相关(r分别为-0.274、-0.387,P均<0.01),Smad4核表达与Vimentin核表达亦呈负相关(r=-0.209,P<0.05),P16INK4A核质表达与Vimentin核表达均呈正相关(r分别为0.334、0.443,P均<0.01)。宫颈癌中Vimentin、P16INK4A和Smad4无论细胞核表达或细胞质表达均与宫颈癌的分化和年龄无相关关系(P均>0.05)。结论 Vimentin、P16INK4A和Smad4在各宫颈病变组织细胞质和细胞核中呈不同程度阳性表达。Vimentin核表达是反映宫颈癌细胞EMT的良好指标,P16INK4A核表达和Smad4核表达与宫颈癌细胞EMT密切相关。 展开更多
关键词 P16INK4A蛋白 SMAD4蛋白 vimentin蛋白 宫颈癌 上皮—间质转化
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扶肾方对UUO大鼠肾脏病理及CTGF、FN、Vimentin表达的影响 被引量:5
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作者 赵晰 张笑恬 +1 位作者 李蔓 王耀光 《天津中医药》 CAS 2022年第2期232-237,共6页
[目的]研究扶肾方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)、纤连蛋白(FN)、波形蛋白(Vimentin)表达的影响。[方法]健康雄性SD大鼠50只,适应性饲养1周后,按照随机原则将大鼠分为假手术组(12只)与造模组(38只),造模组在... [目的]研究扶肾方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)、纤连蛋白(FN)、波形蛋白(Vimentin)表达的影响。[方法]健康雄性SD大鼠50只,适应性饲养1周后,按照随机原则将大鼠分为假手术组(12只)与造模组(38只),造模组在手术后7 d随机选取大鼠2只以验证造模是否成功,余造模组大鼠随机分为模型组(12只)、中药低、高剂量组(各12只)。除假手术组外,其余各组均以单侧输尿管结扎的方法制作肾间质纤维化模型,假手术组仅游离输尿管。各组大鼠在术后7 d开始灌胃给药,所有大鼠均按照每只每天2 mL进行灌胃,假手术组与模型组灌服生理盐水,中药低剂量组和高剂量组分别按照扶肾方溶度2.52和5.04 g/mL进行灌胃。用苏木精-伊红(HE)染色及电镜观察肾脏病理形态变化;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测肾组织CTGF、FN、Vimentin的表达。[结果]光镜下观察,HE染色示假手术组肾小球形态完整,肾小管结构正常,肾间质正常;模型组术后28 d,肾小球数量减少,肾皮质显著变薄,肾小管萎缩、坏死、消失明显,肾间质纤维化程度严重;中药低、高剂量组肾组织病变较模型组轻。电镜示对比假手术组,模型组肾组织病变明显,中药低、高剂量组肾组织病变较模型组轻。Western Blot检测显示,在术后14、28 d时,与假手术组比较,模型组、中药各剂量组CTGF、FN、Vimentin表达明显增多(P<0.05);中药低、高剂量组与模型组比较,在术后14 d CTGF、FN、Vimentin表达明显下降(P<0.05);与低剂量组比较,在术后28 d高剂量组CTGF、FN、Vimentin表达明显下降(P<0.05)。[结论]扶肾方可以降低UUO大鼠CTGF、FN、Vimentin的表达,随着梗阻时间的延长,高剂量效果更好。 展开更多
关键词 扶肾方 肾间质纤维化 结缔组织生长因子 纤连蛋白 波形蛋白
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脂肪酸结合蛋白5结合Vimentin蛋白在肝癌中的作用机制
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作者 唐艳萍 李科志 +5 位作者 蔡政民 陶昊 唐嘉营 李学宇 李炎娟 曹骥 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期756-761,767,共7页
目的 筛选和验证与脂肪酸结合蛋白5(FABP5)结合的互作蛋白,同时研究FABP5与候选蛋白的调控关系,进一步探讨FABP5在肝癌中的作用机制。方法 采用免疫沉淀联合串联质谱分析方法(IP-MS)筛选出与FABP5相互结合的蛋白;通过免疫共沉淀实验(Co-... 目的 筛选和验证与脂肪酸结合蛋白5(FABP5)结合的互作蛋白,同时研究FABP5与候选蛋白的调控关系,进一步探讨FABP5在肝癌中的作用机制。方法 采用免疫沉淀联合串联质谱分析方法(IP-MS)筛选出与FABP5相互结合的蛋白;通过免疫共沉淀实验(Co-IP)从外源性和内源性层面验证FABP5与候选互作蛋白的结合关系;利用RT-qPCR、Western blot和免疫荧光法观察敲低FABP5对肝癌细胞中波形蛋白(Vimentin)转录和翻译水平的影响;通过鬼笔环肽染色实验观察过表达FABP5对肝癌细胞骨架的影响。结果 IP-MS鉴定出336个与FABP5相互结合的潜在靶蛋白,结合文献,挑选出5个与肿瘤相关的候选蛋白,分别为PRDX1、PRSS3、PKM、HSP90AA1和Vimentin蛋白。通过外源性和内源性Co-IP实验证实FABP5与Vimentin蛋白存在结合关系。敲低FABP5对肝癌细胞中Vimentin mRNA的表达没有显著作用,但可抑制Vimentin蛋白的表达,而过表达FABP5会影响肝癌细胞的骨架。结论 FABP5促进肝癌细胞的迁移和侵袭,其机制可能与FABP5结合调控Vimentin蛋白和影响细胞骨架重塑有关,有望成为抗肝癌的潜在靶点,为肝癌的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 脂肪酸结合蛋白5 波纹蛋白 肝癌 质谱 互作蛋白
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乳腺癌组织中E-cadherin和Vimentin表达水平与新辅助化疗疗效分析 被引量:1
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作者 安程程 马梦娇 +2 位作者 张超 吴琼 岳喜成 《齐齐哈尔医学院学报》 2023年第11期1011-1015,共5页
目的 对乳腺癌穿刺组织标本进行免疫组化分析,收集E-Cadherin和Vimentin的表达水平,探讨两者的表达水平与新辅助化疗疗效是否具有相关性。方法 收集2019—2021年在本院甲乳病区治疗的新辅助化疗乳腺癌患者作为研究对象,所有患者术前完... 目的 对乳腺癌穿刺组织标本进行免疫组化分析,收集E-Cadherin和Vimentin的表达水平,探讨两者的表达水平与新辅助化疗疗效是否具有相关性。方法 收集2019—2021年在本院甲乳病区治疗的新辅助化疗乳腺癌患者作为研究对象,所有患者术前完成新辅助化疗疗程,且成功实施手术,通过免疫组化的方法检测术前穿刺标本中E-Cadherin和Vimentin的表达情况,术后对新辅助化疗疗效进行MP分级。结果 最终筛选出符合入选标准并接受全程治疗的患者共96例,均为女性患者,其中E-Cadherin高表达42例,低表达54例;Vimentin高表达60例,低表达36例。E-Cadherin和Vimentin的表达水平与初治时的相关病理资料密切相关(P<0.05),包括肿瘤的大小、HER-2表达、ki-67水平以及腋窝淋巴结有没有出现转移。对新辅助化疗疗效进行分析显示,高表达的E-Cadherin且低表达的Vimentin的组别化疗疗效高于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。进一步对不同分子分型的患者进行分析,显示HER-2阳性型的疗效好于三阴型,好于Luminal型,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 新辅助化疗在E-Cadherin高表达且vimentin低表达以及分子型HER-2阳性型的人群中,有着更好的效果。因此在新辅助化疗治疗前检测乳腺癌穿刺标本中E-Cadherin和vimentin的表达情况,能够成为NAC疗效的预测因子。 展开更多
关键词 乳腺癌 新辅助化疗 E-CADHERIN蛋白 vimentin蛋白
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Electroacupuncture ameliorates cardiac dysfunction in myocardial ischemia model rats:a potential role of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis 被引量:2
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作者 WANG Kun ZHOU Jie +4 位作者 CUI Shuai WU Xin ZHU Guoqi WU Shengbing ZHOU Meiqi 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CSCD 2023年第5期944-954,共11页
OBJECTIVE:To verify the hypothesis that electroacupuncture inhibits the hyperactivity of the hypothalamic-pituitary-adrenal(HPA)axis via regulating the expression of glial fibrillary acidic protein(GFAP)in the hippoca... OBJECTIVE:To verify the hypothesis that electroacupuncture inhibits the hyperactivity of the hypothalamic-pituitary-adrenal(HPA)axis via regulating the expression of glial fibrillary acidic protein(GFAP)in the hippocampus of acute myocardial ischemia(AMI)rats.METHODS:Sixty-six healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into five groups:Sham,AMI(Model),electroacupuncture at Shenmen(HT7)-Tongli(HT5)segment(EA),non-acupoint electroacupuncture(Control),and Model+corticosterone(Model+CORT).AMI was induced via occlusion of the left anterior descending coronary artery,followed by 3 d of electroacupuncture at Shenmen(HT7)-Tongli(HT5)segment.In the Control group,electroacupuncture was applied at points lying 5 and 10 mm from the base of the tail.The AMI+CORT group was injected with CORT(20 mg/kg)in saline.Hemorheology,electrocardiography(ECG),hematoxylin and eosin staining,and expression of glycogen phosphorylase BB(GPBB)and heart-type fatty acid-binding protein(H-FABP)were used to assess cardiac function.The effects of adrenocorticotropic hormone(ACTH)and CORT were evaluated by enzymelinked immunosorbent assay.Protein expression in the Sham and Model groups were screened by tandem mass tag-based quantitative proteomics analysis.Protein expression was evaluated by Western blotting(vimentin and GFAP)and immunofluorescence staining(GFAP).RESULTS:Compared with the Sham group,the hemorheology indicators,heart rate,ECG-ST segment elevation,and GPBB and H-FABP levels were higher in Model rats.The EA group showed reductions in these indicators compared with the Model group.Similarly,in Model rats,the expression of ACTH and CORT were significantly increased compared with the Sham group.The EA group also showed reduced expression of ACTH and CORT.Importantly,proteomics analysis showed that vimentin was differentially expressed in Model rats.Compared with the Sham group,vimentin and GFAP expression in the hippocampus was increased in the Model group but decreased in the AMI+EA group.Additionally,intraperitoneal injectio 展开更多
关键词 acupuncture myocardial ischemia HIPPOCAMPUS vimentin glial fibrillary acidic protein hypothalamic-pituitary-adrenal
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miRNA-138模拟物转染对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制 被引量:3
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作者 董超 黄远丽 徐正丰 《山东医药》 CAS 2019年第3期5-8,共4页
目的观察miRNA-138模拟物(miRNA-138 mimics)对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其可能机制。方法选取人高侵袭性乳腺细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-468)及人低侵袭性乳腺癌细胞系(MCF-7)和人正常乳腺上皮细胞系(HBL-100),qRT-PCR... 目的观察miRNA-138模拟物(miRNA-138 mimics)对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其可能机制。方法选取人高侵袭性乳腺细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-468)及人低侵袭性乳腺癌细胞系(MCF-7)和人正常乳腺上皮细胞系(HBL-100),qRT-PCR法检测微小RNA-138(miRNA-138);取MDA-MB-231并分为两组,miRNA-138 mimics组细胞系以miRNA-138 mimics转染,miR-NC组细胞系以miR阴性对照模拟物(miR-NC)转染,qRT-PCR法检测miRNA-138,Transwell迁移和侵袭实验测算迁移细胞数、侵袭细胞数,Western blotting法检测SOX4蛋白及上皮间质转化(EMT)相关标志物(E-cadherin、Fibronectin、Vimentin蛋白)。结果 MDA-MB-231、MDA-MB-468、MCF-7、HBL-100中miRNA-138相对表达量分别为0.23±0.08、0.42±0.05、0.56±0.11、1.03±0.04,MDAMB-231、MDA-MB-468、MCF-7与HBL-100比较,MDA-MB-231、MDA-MB-468与MCF-7比较,P均<0.05。miRNA-138 mimics组和miR-NC组miRNA-138相对表达量分别为13.35±0.35、0.98±0.05,两组比较,P <0.05。miRNA-138 mimics组和miR-NC组迁移细胞数分别为(210±30)、(340±18)个,侵袭细胞数分别为(100±16)、(190±26)个,两组比较,P均<0.05。miRNA-138 mimics组SOX、E-cadherin、Fibronectin、Vimentin蛋白灰度值分别为0.16±0.08、0.59±0.16、0.42±0.14、0.17±0.09,miR-NC组分别为0.77±0.19、0.12±0.06、1.19±0.21、0.44±0.12,两组比较,P均<0.05。结论 miRNA-138 mimics能够抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移,机制可能与其调控SOX4基因抑制乳腺癌细胞EMT有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 乳腺癌 微小RNA-138 细胞侵袭能力 细胞迁移能力 SOX4蛋白 E-CADHERIN蛋白 Fibronectin蛋白 vimentin蛋白
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胃癌组织中E-cadherin、Vimentin和错配修复相关蛋白的表达及与患者预后的关系
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作者 张磊 孙晓娜 +2 位作者 张丽 高媛媛 申志华 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第18期3420-3427,共8页
目的:通过观察胃癌(gastric cancer,GC)患者E-cadherin、Vimentin和错配修复(mismatch repair,MMR)相关蛋白的表达,分析其影响GC患者预后的临床意义,探讨其与GC患者临床病理特征的关系。方法:选取2020年05月至2020年12月在承德市中心医... 目的:通过观察胃癌(gastric cancer,GC)患者E-cadherin、Vimentin和错配修复(mismatch repair,MMR)相关蛋白的表达,分析其影响GC患者预后的临床意义,探讨其与GC患者临床病理特征的关系。方法:选取2020年05月至2020年12月在承德市中心医院行GC手术并资料完整的患者104例,采用免疫组化染色检测E-cadherin、Vimentin、MMR相关蛋白表达,并分为E-cadherin、Vimentin阴性和阳性组,dMMR和pMMR组;采用Cox比例风险模型预测三者对GC患者总生存时间的影响,分为高低风险组,并用Kaplan-Meier进行生存分析。结果:104例患者中dMMR的概率为22.12%,E-cadherin阳性率为28.85%,Vimentin阳性率为51.92%。其中,dMMR和pMMR组相比,Lauren分型、pT和pTNM分期、肿瘤分化差异均有统计学意义(P<0.05);Lauren分型、pT和pTNM分期、肿瘤分化、脉管癌栓在Vimentin阳性和阴性组相比,差异均有显著意义(P<0.05);而E-cadherin阳性和阴性组仅在pTNM分期间相比有统计学差异(P<0.05)。随访结束后,GC患者的中位生存时间为19(15,24)个月,总生存率为76.9%;dMMR、E-cadherin阳性和Vimentin阳性生存率分别为83.6%、76.5%和63.0%(P<0.001)。根据预后模型的cutoff值(1.447)分为高风险和低风险,高风险GC患者发生死亡是低风险GC患者的8.20倍(2.75,24.40),前者中位生存时间(20个月)明显劣于后者(30个月),差异有统计学意义(P<0.001)。预后模型热图可知,dMMR的患者预后相对好,生存优势是pMMR患者的1.420倍,而Vimentin阳性的患者预后相对差,发生死亡的风险是阴性患者的2.433倍(P<0.001)。通过校准曲线和ROC分析,模型的预测和实测率比较接近(P=0.341>0.05),ROC下面积为0.88(0.78~0.97),敏感度和特异度分别为83.3%和57.5%(P<0.001);说明模型的区分度和校准度在接受范围内。结论:具有dMMR的患者预后更好,而Vimentin阳性表达的患者预后较差。基于MMR、E-cadherin、Vimentin蛋白的表达,预后模型的建立对GC患者疗后监测有一� 展开更多
关键词 胃癌 E-CADHERIN蛋白 vimentin蛋白 dMMR 预后模型
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波形纤维蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达 被引量:5
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作者 周健 惠延年 +3 位作者 李燕 林英华 张平 蔡翔 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期342-345,T002,共5页
目的 观察波形纤维蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞的变化。方法 用卵白素 生物素过氧化物酶法对 2 2例老年性白内障患者晶状体前囊膜上皮细胞进行波形纤维蛋白染色 ,采用包埋前免疫酶电镜技术处理 6个晶状体前囊膜标本 ,并观察其... 目的 观察波形纤维蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞的变化。方法 用卵白素 生物素过氧化物酶法对 2 2例老年性白内障患者晶状体前囊膜上皮细胞进行波形纤维蛋白染色 ,采用包埋前免疫酶电镜技术处理 6个晶状体前囊膜标本 ,并观察其超微结构 ;利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳及Westernblot法分析 4个晶状体表层组织 (前囊膜、上皮细胞和表层皮质 )中的波形纤维蛋白。结果 老年性白内障晶状体上皮细胞的波形纤维蛋白表达减弱 ,与对照组比较差异有显著性 (t=2 0 948,P <0 0 5 ) ;其纤维分布稀疏 ,聚集成束 ,细胞器变性 ;未成熟期白内障晶状体可检测到波形纤维蛋白 ,成熟期白内障晶状体的波形纤维蛋白含量极少。结论 老年性白内障晶状体上皮细胞及表层皮质中波形纤维蛋白的减少 ,与各种因素引起的波形纤维蛋白降解有关 ,可能是晶状体中细胞结构和功能破坏的表现 ,是白内障形成的重要机制。 展开更多
关键词 白内障 晶体上皮细胞 波形纤维蛋白 免疫组织化学 蛋白质印迹法 老年人
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The tumor suppressor RASSF1A is a novel effector of small G protein Rap1A 被引量:3
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作者 Sunil K.Verma Trivadi S.Ganesan +1 位作者 Uday Kishore Peter J.Parker 《Protein & Cell》 SCIE CSCD 2011年第3期237-249,共13页
Rap1A is a small G protein implicated in a spectrum of biological processes such as cell proliferation,adhesion,differentiation,and embryogenesis.The downstream effectors through which Rap1A mediates its diverse effec... Rap1A is a small G protein implicated in a spectrum of biological processes such as cell proliferation,adhesion,differentiation,and embryogenesis.The downstream effectors through which Rap1A mediates its diverse effects are largely unknown.Here we show that Rap1A,but not the related small G proteins Rap2 or Ras,binds the tumor suppressor Ras association domain family 1A(RASSF1A)in a manner that is regulated by phosphorylation of RASSF1A.Interaction with Rap1A is shown to influence the effect of RASSF1A on microtubule behavior. 展开更多
关键词 RASSF1A Rap1A MICROTUBULE vimentin protein-protein interaction
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LMP1-CTAR3调节CK19和vimentin蛋白在鼻咽上皮与鼻咽癌中的表达 被引量:2
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作者 张志伟 赵强 +4 位作者 刘重元 张婕 陈家明 王莉莉 贺修胜 《诊断病理学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第4期302-304,共3页
目的观察LMP1-CTAR3调节的CK19和vimentin蛋白在鼻咽上皮和鼻咽癌中的表达,揭示蛋白质之间的相互作用规律。方法采用SP免疫组化染色检测LMP1、CTAR3、CK19和vimentin在30例鼻咽上皮组织和60例鼻咽低分化鳞状细胞癌中的表达。结果①LMP1... 目的观察LMP1-CTAR3调节的CK19和vimentin蛋白在鼻咽上皮和鼻咽癌中的表达,揭示蛋白质之间的相互作用规律。方法采用SP免疫组化染色检测LMP1、CTAR3、CK19和vimentin在30例鼻咽上皮组织和60例鼻咽低分化鳞状细胞癌中的表达。结果①LMP1在鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为73.3%和90%;②与LMP1(-)组织比较,CK19蛋白在LMP1(+)的鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中的表达降低(P<0.05);③与LMP1(-)组织比较,vimentin蛋白在LMP1(+)的鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌的表达升高(P<0.05)。结论 LMP1-CTAR3在鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中下调CK19蛋白和上调vimentin蛋白的表达。 展开更多
关键词 LMP1-CTAR3 CK19蛋白 vimentin蛋白 鼻咽上皮 鼻咽癌
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Twist和Vimentin蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及其意义 被引量:2
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作者 高文峰 王治平 +2 位作者 许竞 宋治锋 曾曙光 《口腔疾病防治》 2018年第10期639-643,共5页
目的探讨Twist和Vimentin蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中的表达情况及其临床意义。方法收集85例OSCC标本和15例正常口腔黏膜组织标本,应用免疫组化SP法检测在标本中Twist和Vimentin蛋白的表达水平,分析其... 目的探讨Twist和Vimentin蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中的表达情况及其临床意义。方法收集85例OSCC标本和15例正常口腔黏膜组织标本,应用免疫组化SP法检测在标本中Twist和Vimentin蛋白的表达水平,分析其与口腔鳞癌患者临床病理因素的相关性。结果 Twist蛋白在正常组织中的阳性率为13.3%(2/15),在OSCC组织的阳性率为80.0%(68/85),两组相比差异具有统计学意义(χ~2=26.98,P <0.001),同时其在OSCC中的表达与性别(χ~2=0.23,P=0.63)、年龄(χ~2=0.31,P=0.58)、部位(χ~2=1.46,P=0.23)、组织学分化(χ~2=1.52,P=0.47)等因素无关,与临床分期(χ~2=5.40,P=0.02)、淋巴结转移(χ~2=8.35,P=0.006)等因素有关;Vimentin蛋白在正常组中的阳性率为6.7%(1/15),在OSCC组中为74.1%(63/85),两组差异有统计学意义(χ~2=20.71,P <0.001),同时其表达与性别(χ~2=0.40,P=0.53)、年龄(χ~2=0.17,P=0.68)、部位(χ~2=0.74,P=0.39)、组织学分化(χ~2=4.58,P=0.10)等因素无关,与临床分期(χ~2=4.51,P=0.034)、淋巴结转移(χ~2=6.75,P=0.009)等因素有关。Spearman等级相关分析显示,Twist与Vimentin蛋白存在正相关(r=0.578,P<0.05)。结论在OSCC中Twist和Vimentin蛋白表达增加,并且两者存在正相关关系,提示在OSCC中两者可能共同参与肿瘤的发生和发展。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 TWIST蛋白 vimentin蛋白 上皮间质转化 免疫组化
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长链非编码RNA HOTTIP对肺腺癌A549细胞侵袭转移能力及上皮间质转化的影响 被引量:2
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作者 金文静 杨华 +2 位作者 王林宣 李珊珊 顾文超 《山东医药》 CAS 2020年第2期18-21,共4页
目的观察长链非编码RNA HOTTIP对肺腺癌A549细胞侵袭转移能力的影响,通过上皮间充质转化(EMT)相关蛋白变化探讨其机制。方法将A549细胞分为HOTTIP-shRNA组、HOTTIP组和空载对照组,分别感染携带HOTTIP-shRNA的慢病毒、HOTTIP全长序列的... 目的观察长链非编码RNA HOTTIP对肺腺癌A549细胞侵袭转移能力的影响,通过上皮间充质转化(EMT)相关蛋白变化探讨其机制。方法将A549细胞分为HOTTIP-shRNA组、HOTTIP组和空载对照组,分别感染携带HOTTIP-shRNA的慢病毒、HOTTIP全长序列的慢病毒和空白慢病毒;采用Transwell实验观察细胞侵袭能力,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞间质标志蛋白Vimentin、上皮标志蛋白E-cadherin。结果HOTTIP-shRNA组、HOTTIP组、空载对照组穿膜细胞的数量分别为(12.85±3.25)、(305.65±53.45)、(45.25±10.75)个,细胞迁移率为35.62%±10.45%、13.84%±4.12%、64.52%±14.24%,HOTTIP-shRNA组穿膜细胞数量、细胞迁移率低于空载对照组,而HOTTIP组穿膜细胞数量、细胞迁移率均高于HOTTIP-shRNA组和空载对照组(P均<0.05)。与空载对照组比较,HOTTIP-shRNA组细胞Vimentin表达减少、E-cadherin表达增加(P均<0.05);与HOTTIP-shRNA组和空载对照组比较,HOTTIP组细胞Vimentin表达增加、E-cadherin表达减少(P均<0.05)。结论HOTTIP可增强肺腺癌A549细胞侵袭转移能力,与其调控E-cadherin、Vimentin蛋白表达促进EMT形成有关。 展开更多
关键词 肺癌 长链非编码RNA HOTTIP 上皮间充质转化 细胞侵袭 细胞迁移 E-CADHERIN蛋白 vimentin蛋白
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苯并咪唑对体外培养大鼠睾丸支持细胞影响研究 被引量:3
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作者 于功昌 谢琳 +4 位作者 郭启明 赛林霖 李莉 薄存香 王筱芬 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期11-15,共5页
目的研究苯并咪唑对体外培养大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和微管蛋白表达的影响。方法取18—20日龄Wistar雄性大鼠睾丸支持细胞,通过Tris-Hcl低渗处理进行细胞纯化,用MTT法检测阴性对照组、溶剂对照组、苯并咪唑剂量组(0.1、1、10和100... 目的研究苯并咪唑对体外培养大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和微管蛋白表达的影响。方法取18—20日龄Wistar雄性大鼠睾丸支持细胞,通过Tris-Hcl低渗处理进行细胞纯化,用MTT法检测阴性对照组、溶剂对照组、苯并咪唑剂量组(0.1、1、10和100μg/m1)中大鼠睾丸支持细胞的生长抑制率。用免疫细胞化学法检测细胞中波形蛋白、α/β-微管蛋白的表达。结果10和100μg/ml苯并咪唑剂量组在24、48和72h时均明显抑制了支持细胞的增殖;10和100pg/ml苯并咪唑剂量组中支持细胞波形蛋白、α/β-微管蛋白表达明显减少。结论苯并咪唑对体外培养大鼠支持细胞毒作用明显,抑制睾丸支持细胞的增殖,影响波形蛋白、α/β-微管蛋白的表达。 展开更多
关键词 苯并咪唑 支持细胞 波形蛋白 微管蛋白 大鼠
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Vimentin蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 池丽敏 肖鹏 +4 位作者 陈定科 孙一 方佳彦 曹红敏 胡莹莹 《现代医学》 2015年第10期1216-1218,共3页
目的:探讨Vimentin蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:对44例子宫内膜样腺癌(子宫内膜样腺癌组)患者的临床资料进行回顾性分析,另外分别选择同期40例确诊为子宫内膜良性肿瘤患者(良性肿瘤组)与38名健康者(正常对照组... 目的:探讨Vimentin蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:对44例子宫内膜样腺癌(子宫内膜样腺癌组)患者的临床资料进行回顾性分析,另外分别选择同期40例确诊为子宫内膜良性肿瘤患者(良性肿瘤组)与38名健康者(正常对照组)作为对照。采用免疫组化法(SP法)对3组的Vimentin蛋白的表达水平进行检测分析。结果:(1)子宫内膜样腺癌组、良性肿瘤组及正常对照组组织Vimentin蛋白表达评分分别为(3.27±0.86)分、(0.85±0.16)分及(0.12±0.07)分,Vimentin蛋白阳性表达率分别为81.82%、17.50%及2.63%,子宫内膜样腺癌组组织Vimentin蛋白表达评分及阳性表达率均显著高于良性肿瘤组与正常对照组(P<0.01);(2)在子宫内膜样腺癌组织中,Vimentin蛋白表达与肿瘤大小、是否局部侵袭、分化程度及是否癌细胞转移存在显著的相关性(P<0.05)。结论:Vimentin蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达水平较高,对子宫内膜样腺癌的诊断具有十分重要的临床意义。 展开更多
关键词 子宫内膜样腺癌 vimentin蛋白 表达 临床意义
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基于酵母双杂交技术的绒山羊波形蛋白互作蛋白鉴定 被引量:2
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作者 肖红梅 胡小玉 +3 位作者 梁加越 冯娟 王笑冰 王东 《畜牧与兽医》 北大核心 2022年第2期78-84,共7页
为进一步探索波形蛋白(vimentin)调控绒山羊绒毛生长的作用机制,以内蒙古遗传种子资源阿尔巴斯白绒山羊皮肤中的毛囊组织为材料,利用PCR技术和酵母双杂交技术对根据GenBank中山羊的vimentin蛋白序列,运用蛋白质互作在线软件预测和液相... 为进一步探索波形蛋白(vimentin)调控绒山羊绒毛生长的作用机制,以内蒙古遗传种子资源阿尔巴斯白绒山羊皮肤中的毛囊组织为材料,利用PCR技术和酵母双杂交技术对根据GenBank中山羊的vimentin蛋白序列,运用蛋白质互作在线软件预测和液相色谱质谱联用采集免疫共沉淀数据筛选出肌动蛋白(ACTB)和vimentin进行基因引物设计、克隆、酵母表达载体构建和蛋白互作鉴定。结果显示:成功克隆出绒山羊vimentin基因CDS区序列的长度为1 401 bp, ACTB基因CDS区序列的长度为1 128 bp;构建了酵母表达载体;试验组共转化pGBKT7-vimentin与pGADT7-ACTB的Y2HGold菌株在二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基和四缺板SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-GaL/AbA培养基上,均能生长出淡蓝色菌落,而在对照组共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基上长出白色菌落,表明共转化的pGBKT7-vimentin与pGADT-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac被激活,共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac未被激活。提示:vimentin与ACTB两种蛋白间存在相互作用。 展开更多
关键词 波形蛋白 酵母双杂交 互作蛋白 绒山羊 表达载体
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大肠癌组织中TAMs、TGF-β1表达与上皮间质转化的关系 被引量:2
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作者 刘宇 张银旭 +1 位作者 左腾 张俊华 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第50期7-9,共3页
目的探讨大肠癌组织中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达与上皮间质转化(EMT)的关系。方法采用免疫组化法检测80例大肠癌及癌旁正常组织中CD68标记的TAMs、TGF-β1、上皮标志物E-cadherin、间质标志物Vimentin蛋白... 目的探讨大肠癌组织中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达与上皮间质转化(EMT)的关系。方法采用免疫组化法检测80例大肠癌及癌旁正常组织中CD68标记的TAMs、TGF-β1、上皮标志物E-cadherin、间质标志物Vimentin蛋白。结果大肠癌组织中TAM计数为(30.6±8.2)个/HP,TGF-β1蛋白阳性58例(72.5%),E-cadherin蛋白阳性31例(38.8%),Vimentin蛋白阳性38例(47.5%);而癌旁正常组织中分别为(16.4±7.2)个/HP、23例(28.8%)、64例(80.0%)、0例。两者比较,P均<0.01。TAMs计数及TGF-β1、E-cadherin、Vimentin蛋白表达与大肠癌分化程度、浸润深度、Duke分期和淋巴结转移有关(P均<0.05)。TAMs计数、TGF-β1与E-cadherin蛋白表达呈负相关(r值分别为-0.64、-0.39,P均<0.01),而与Vimentin蛋白表达成正相关(r值分别为0.62、0.33,P均<0.05)。结论大肠癌组织中TAMs浸润及TGF-β1高表达所造成的炎症环境可能与大肠癌的EMT有关。 展开更多
关键词 肿瘤相关巨噬细胞 上皮间质转化 转化生长因子 钙黏附蛋白-E 波形蛋白 大肠肿瘤
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