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鹅细小病毒VP2和VP3蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及验证
被引量:
1
1
作者
徐浩
孟繁兴
+4 位作者
胡桂学
董浩
张双
齐宇
李勇勇
《经济动物学报》
CAS
2014年第2期77-80,共4页
为筛选与鹅细小病毒VP2和VP3蛋白相互作用的鹅胚成纤维细胞蛋白,构建VP2和VP3蛋白的诱饵载体pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3。从pGEX-4T-VP1质粒中PCR扩增VP2和VP3基因,克隆至pMD-18T载体中,经测序验证鉴定后定向克隆到酵母双杂交载体pGBKT7中...
为筛选与鹅细小病毒VP2和VP3蛋白相互作用的鹅胚成纤维细胞蛋白,构建VP2和VP3蛋白的诱饵载体pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3。从pGEX-4T-VP1质粒中PCR扩增VP2和VP3基因,克隆至pMD-18T载体中,经测序验证鉴定后定向克隆到酵母双杂交载体pGBKT7中。将2个重组诱饵载体经PCR、酶切和测序验证后分别转化酵母菌H2YGold中,检测其在酵母细胞中有无自激活和毒性作用。结果表明:成功构建了pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3诱饵载体,且其对报告基因无自激活作用,对酵母细胞无毒性。由此说明,诱饵载体pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3可用于酵母双杂交系统筛选与VP2和VP3蛋白相互作用的细胞结合蛋白。
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关键词
鹅细小病毒
vp
2
和
vp
3
蛋白
酵母双杂交
下载PDF
职称材料
题名
鹅细小病毒VP2和VP3蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及验证
被引量:
1
1
作者
徐浩
孟繁兴
胡桂学
董浩
张双
齐宇
李勇勇
机构
吉林农业大学动物科学技术学院
吉林农业大学生命科学学院
出处
《经济动物学报》
CAS
2014年第2期77-80,共4页
基金
博士导联合基金项目(20112223110002)
吉林省现代农业产业技术体系建设专项资金项目(201231)
吉林省科技厅项目(20130522086JH)
文摘
为筛选与鹅细小病毒VP2和VP3蛋白相互作用的鹅胚成纤维细胞蛋白,构建VP2和VP3蛋白的诱饵载体pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3。从pGEX-4T-VP1质粒中PCR扩增VP2和VP3基因,克隆至pMD-18T载体中,经测序验证鉴定后定向克隆到酵母双杂交载体pGBKT7中。将2个重组诱饵载体经PCR、酶切和测序验证后分别转化酵母菌H2YGold中,检测其在酵母细胞中有无自激活和毒性作用。结果表明:成功构建了pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3诱饵载体,且其对报告基因无自激活作用,对酵母细胞无毒性。由此说明,诱饵载体pGBKT7-VP2和pGBKT7-VP3可用于酵母双杂交系统筛选与VP2和VP3蛋白相互作用的细胞结合蛋白。
关键词
鹅细小病毒
vp
2
和
vp
3
蛋白
酵母双杂交
Keywords
goose
parvovirus
vp
2
and
vp
3
proteins
the
yeast
two-hybrid
分类号
S852.657 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鹅细小病毒VP2和VP3蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及验证
徐浩
孟繁兴
胡桂学
董浩
张双
齐宇
李勇勇
《经济动物学报》
CAS
2014
1
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