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斜带石斑鱼3种致病性弧菌的分子生物学鉴定 被引量：34
1
作者 李宁求 白俊杰 +5 位作者 吴淑勤 劳海华 石存斌 潘厚军 叶星 简清 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期356-361,共6页
从患病斜带石斑鱼分离到3株病原菌EcGS020802、EcGS021001、EcGS020801,经常规生理生化鉴定均属于弧菌属的种类。为了进一步确定其分类地位,测定了3株病原菌的16SrRNA和HSP60(heatshockprotein,HSP60)基因部分序列。16SrRNA基因系统进... 从患病斜带石斑鱼分离到3株病原菌EcGS020802、EcGS021001、EcGS020801,经常规生理生化鉴定均属于弧菌属的种类。为了进一步确定其分类地位,测定了3株病原菌的16SrRNA和HSP60(heatshockprotein,HSP60)基因部分序列。16SrRNA基因系统进化分析表明,3株病原菌与哈维氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌亲缘关系较近,相互之间同源性均大于98.6%,差异不明显。HSP60基因序列分析表明,菌株EcGS020802、EcGS021001、EcGS020801HSP60基因序列分别与哈维氏弧菌(AF230934)、溶藻弧菌(AF230931)、副溶血弧菌(AF230951)HSP60基因的同源性最高,依次为95.7%、99.8%和99.8%,而与其它弧菌HSP60基因的同源性均低于90.6%,3株病原菌相互之间的同源性低于91.0%。HSP60基因构建的系统进化树表明,EcGS020802、EcGS021001、EcGS020801分别与Vibrioharveyi、Vibrioalginolyticus、Vibrioparahaemolyticus聚类。综合上述结果,菌株EcGS020802、EcGS021001、EcGS020801可分别鉴定为哈维氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌。结果表明,HSP60基因比16SrRNA基因更适合用于海水鱼致病性弧菌种间的分类研究。 展开更多
关键词 哈维氏弧菌 溶藻弧菌 副溶血弧菌 16S rRNA基因 热激蛋白(HSP60) 系统进化
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5种海洋致病弧菌对34种中草药敏感性的测定 被引量：40
2
作者 王玉娥 邢晨光 王国良 《水产科学》 CAS 北大核心 2008年第5期221-225,共5页
采用纸片扩散(K-B)法,测试了溶藻弧菌、哈氏弧菌、副溶血弧菌、河流弧菌、麦氏弧菌对34种中草药的敏感性,结果表明:试验菌株对中草药乌梅、黄连、木瓜、五味子、五倍子、马齿苋、白头翁、地榆、公丁香、大黄具有较高的敏感性。采用倍比... 采用纸片扩散(K-B)法,测试了溶藻弧菌、哈氏弧菌、副溶血弧菌、河流弧菌、麦氏弧菌对34种中草药的敏感性,结果表明:试验菌株对中草药乌梅、黄连、木瓜、五味子、五倍子、马齿苋、白头翁、地榆、公丁香、大黄具有较高的敏感性。采用倍比稀释法,测定10种敏感性较好的中草药对5种海洋致病弧菌的抑菌试验,并测定了最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:五倍子抑菌和杀菌能力最强,五倍子对溶藻弧菌、副溶血弧菌、河流弧菌、麦氏弧菌的MIC和MBC均为1.56 mg/ml,对哈氏弧菌的MIC和MBC为3.125 mg/ml;其次是黄连,对溶藻弧菌、河流弧菌、麦氏弧菌的MIC和MBC分别为3.125 mg/ml和6.25 mg/ml,对哈氏弧菌、副溶血弧菌的MIC和MBC分别为6.25 mg/ml和12.5 mg/ml;乌梅对5种弧菌有相同的抑菌和杀菌作用,其MIC和MBC均为12.5 mg/ml。最终确定五倍子和黄连可以作为防治水产养殖动物弧菌病的首选中草药药物。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 哈氏弧菌 副溶血弧菌 河流弧菌 麦氏弧菌 中草药 最小抑菌浓度 最小杀菌浓度
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养殖大黄鱼(Pseudosciaena crocea)3种致病弧菌的分子鉴定及其系统发育学分析 被引量：32
3
作者 王国良 祝璟琳 金珊 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期162-167,共6页
从患病养殖大黄鱼分离到3株病原菌H040823-1、H050704-1、H050815-1,经常规生理生化鉴定均属于弧菌属的种类,API20E快速鉴定菌株H040823-1为副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyti-cus),菌株H050815-1为溶藻弧菌(V.alginolyticus),菌株H05070... 从患病养殖大黄鱼分离到3株病原菌H040823-1、H050704-1、H050815-1,经常规生理生化鉴定均属于弧菌属的种类,API20E快速鉴定菌株H040823-1为副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyti-cus),菌株H050815-1为溶藻弧菌(V.alginolyticus),菌株H050704-1不在API20E鉴定谱内。为了进一步确定其分类地位,测定了3株病原菌的16S rRNA和HSP60(heat shock protein,HSP60)基因部分序列。16S RNA基因系统进化分析表明,3株病原菌与副溶血弧菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌亲缘关系较近,相互之间同源性均大于96.9%,差异不明显。HSP60基因序列分析表明,菌株H040823-1、H050704-1、H050815-1的HSP60基因序列分别与V.parahaemolyticus(AF230951)、V.harveyi(EU036994)、V.alginolyticus(DQ664545)的同源性最高,分别为96.7%、99.8%和98.0%,而与其他弧菌HSP60基因的同源性均低于91.9%,3株病原菌相互之间同源性低于92.3%,差异显著。HSP60基因构建的系统进化树表明,H040823-1、H050704-1、H050815-1分别与V.parahaemolyticus、V.harveyi、V.alginolyticus聚类。综合以上结果,菌株H040823-1、H050704-1、H050815-1可分别鉴定为副溶血弧菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌。结果表明,HSP60基因比16S rRNA基因更适合用于海水鱼类致病性弧菌种间的分类研究。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 哈维氏弧菌 溶藻弧菌 16SrRNA 热激蛋白(HSP60)
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华南地区海水养殖鱼类主要弧菌病原的分离与鉴定 被引量：18
4
作者 崔婧 范雪亭 +4 位作者 刘文竹 李红月 周永灿 王世锋 谢珍玉 《海南大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第3期244-251,共8页
对海南、广东、广西等华南地区的主要海水养殖系统的斜带石斑鱼、红鳍笛鲷、褐点石斑鱼和珍珠龙胆(棕点石斑鱼♀×鞍带石斑鱼♂)等多种海水鱼类的弧菌病开展了流行病学调查,从病鱼体内共分离获得弧菌63株,人工感染试验结果表明,其中... 对海南、广东、广西等华南地区的主要海水养殖系统的斜带石斑鱼、红鳍笛鲷、褐点石斑鱼和珍珠龙胆(棕点石斑鱼♀×鞍带石斑鱼♂)等多种海水鱼类的弧菌病开展了流行病学调查,从病鱼体内共分离获得弧菌63株,人工感染试验结果表明,其中4株为强毒株,17株为弱毒株,42株为无毒株.经鉴定,哈维氏弧菌有43株(19株毒力株)、溶藻弧菌7株(1株毒力株)、副溶血弧菌5株、轮虫弧菌2株(1株毒力株)、需钠弧菌1株、无法确定的弧菌属其他细菌5株. 展开更多
关键词 海水鱼类 溃烂 哈维氏弧菌 分离 鉴定
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哈维氏弧菌TS-628菌株抗原性研究 被引量：2
5
作者 覃映雪 王军 +1 位作者 王世锋 鄢庆枇 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期393-396,共4页
哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是海水鱼虾养殖中常见的致病菌,由该菌引发的病害给世界各地的养殖业带来重大经济损失,但对其有效抗原的筛选或相关疫苗的研究报道相当少,对其病害的防治也尚无有效措施.本文以患病青石斑鱼分离到的病原菌哈... 哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是海水鱼虾养殖中常见的致病菌,由该菌引发的病害给世界各地的养殖业带来重大经济损失,但对其有效抗原的筛选或相关疫苗的研究报道相当少,对其病害的防治也尚无有效措施.本文以患病青石斑鱼分离到的病原菌哈维氏弧菌TS-628菌株为研究对象,分别提取它的鞭毛蛋白、脂多糖(LPS)和外膜蛋白(OMP),并采用Western blot技术分析检测这3种成分的抗原性.结果显示,鞭毛蛋白主要的免疫印迹带约有4条,其中435、2 ku为主要免疫反应显色带;OMP主要的免疫印迹带约有5条,其中43 ku为最主要免疫反应显色带,35、38、47和52 ku也具有较强的免疫显色反应.LPS没有检测到免疫印迹反应.这一研究结果将为灵敏检测哈维氏弧菌以及研制高效疫苗奠定基础. 展开更多
关键词 哈维氏弧菌 抗原性 鞭毛蛋白 脂多糖 外膜蛋白
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二种佐剂对哈氏弧菌OMPC-溶藻弧菌LPS偶联疫苗的增效作用 被引量：1
6
作者 李华 钱永华 +2 位作者 石存斌 潘厚军 吴淑勤 《水产科学》 CAS 北大核心 2007年第9期489-493,共5页
制备哈氏弧菌SpGY020601外膜蛋白复合物(OMPC)和溶藻弧菌EpGS021001脂多糖(LPS)偶联疫苗,设置偶联疫苗组、偶联疫苗+ISA763佐剂组、偶联疫苗+β-葡聚糖佐剂(DEAE)组以及生理盐水对照组,并以相同程序免疫卵型鲳鲹。溶菌酶活性检测、微量... 制备哈氏弧菌SpGY020601外膜蛋白复合物(OMPC)和溶藻弧菌EpGS021001脂多糖(LPS)偶联疫苗,设置偶联疫苗组、偶联疫苗+ISA763佐剂组、偶联疫苗+β-葡聚糖佐剂(DEAE)组以及生理盐水对照组,并以相同程序免疫卵型鲳鲹。溶菌酶活性检测、微量凝集反应试验结果显示:各疫苗组血清中的溶菌酶含量无显著差异(P>0.05),但均远高于生理盐水对照组(P<0.05);ISA763佐剂组抗哈氏弧菌SpGY020601抗体滴度较其他组出现的早,抗溶藻弧菌EpGS021001抗体滴度较其他组持续时间长;β-葡聚糖佐剂组次之,其次是无佐剂组,对照组始终未检测到抗体。各组分为腹腔注射攻毒与浸泡攻毒,对EpGS021001的攻击,ISA763佐剂组相对保护率分别为90%和70%,高于β-葡聚糖佐剂组的85%和55%,以及无佐剂组的80%和55%;对SpGY020601的攻击,ISA763佐剂组相对保护率分别为95%和80%,高于或相当于β-葡聚糖佐剂组的95%和75%,以及无佐剂组的90%和75%。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 哈氏弧菌 偶联疫苗 佐剂 卵型鲳鲹
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VHH/TLH溶血素基因在海洋弧菌中分布的研究(英文) 被引量：1
7
作者 王淑娴 张晓华 +2 位作者 钟英斌 孙铂光 陈吉祥 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期874-881,共8页
哈维氏弧菌（V.harveyi）的VHH溶血素是对海水养殖鱼类的潜在致病因子。哈维氏弧菌的VHH溶血素基因与副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）的TLH热不稳定性溶血素基因具有高度相似性,其氨基酸序列的相似性达到85.6 %。根据哈维氏弧菌vhhA... 哈维氏弧菌（V.harveyi）的VHH溶血素是对海水养殖鱼类的潜在致病因子。哈维氏弧菌的VHH溶血素基因与副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）的TLH热不稳定性溶血素基因具有高度相似性,其氨基酸序列的相似性达到85.6 %。根据哈维氏弧菌vhhA溶血素基因序列,合成一个地高辛标记的VHH基因探针,利用其进行Southern Blot ,检测VHH溶血素基因在57株弧菌（包括26株国际标准菌株,20株哈维氏弧菌,11株副溶血弧菌）中的分布情况。结果显示,VHH基因探针与13株弧菌标准菌株有强杂交信号,包括2株溶藻胶弧菌（V.alginolyticus） ,2株哈维氏弧菌以及1株霍氏格里蒙菌（Grimontia hollisae） ,坎贝氏弧菌（V.campbellii） ,辛辛那提弧菌（V.cincinatiensis） ,费氏弧菌（V.fischeri） ,拟态弧菌（V.mimicus） ,飘浮弧菌（V.natriegens） ,副溶血弧菌,解蛋白弧菌（V.proteolyticus）和火神弧菌（V.logei）。与6株弧菌标准菌株有弱杂交信号,包括鳗弧菌（V.anguillarum） ,河口弧菌（V.aestuarianus） ,美人鱼发光杆菌（Photobacterium damselae subsp.damselae） ,河弧菌（V.fluvialis） ,弗尼斯弧菌（V.furnissii）和创伤弧菌（V.vulnificus） ,而另外7株弧菌标准菌株中无杂交信号。所有的哈维氏弧菌菌株至少含有一条杂交带,其中菌株VIB645 , VIB 648和SF-1分别含有2条杂交带。11株副溶血弧菌中均含有一条杂交带。上述数据表明,vhh/tlh溶血素基因广泛分布于弧菌中,尤其是哈维氏弧菌相关菌株和费氏弧菌相关菌株中。另外对鳗弧菌VIB 72 ,坎贝氏弧菌VIB 285 ,飘浮弧菌VIB 299和哈维氏弧菌VIB 647的vhh/tlh溶血素基因进行克隆并测序,其氨基酸序列与VHH溶血素和TLH溶血素氨基酸序列的同源性分别为67 %~99 %和69 %~91 %。对vhh/tlh溶血素基因在弧菌中的分布研究,将有助于进一步确定这类溶血素基因在病原弧菌致病性中的作用。 展开更多
关键词 弧菌 哈维氏弧菌 副溶血弧菌 溶血素基因 vHH tlh
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盐度对哈维弧菌耐药性的影响及耐药基因gyrB的表达实验研究
8
作者 陈秀程 王江勇 孙敬锋 《生态科学》 CSCD 2022年第6期123-129,共7页
为研究不同盐度对哈维弧菌生理生化和耐药性的影响,探讨不同盐度对哈维弧菌的耐药表型与携带耐药基因的变化,以哈维弧菌9H7R为主要研究对象,在盐度为5、10、15、20、25 ppt下,采用纸片扩散法(Kirby-Bauer纸片扩散法,简称K-B法),参照NCCL... 为研究不同盐度对哈维弧菌生理生化和耐药性的影响,探讨不同盐度对哈维弧菌的耐药表型与携带耐药基因的变化,以哈维弧菌9H7R为主要研究对象,在盐度为5、10、15、20、25 ppt下,采用纸片扩散法(Kirby-Bauer纸片扩散法,简称K-B法),参照NCCLS抗生素敏感试验操作标准,研究哈维弧菌在不同盐度下耐药性的变化。然后提取细菌RNA、经反转录及qPCR,再根据特定基因计算相对表达量。结果显示:不同盐度生长的哈维弧菌,对喹诺酮类药物的耐药性发生了变化,且耐药基因gyrB的表达量受到了影响。 展开更多
关键词 哈维弧菌 盐度 抗生素 耐药性 荧光定量PCR
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哈维氏弧菌TS-628菌株趋化性研究 被引量：3
9
作者 刘力铭 钱爱霞 +1 位作者 鄢庆枇 覃映雪 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2010年第6期104-109,共6页
采用平板趋化和毛细管趋化的方法,研究了病原性哈维氏弧菌TS-628菌株的趋化性。哈维氏弧菌对青石斑鱼肌肉、表皮黏液、肠黏液及血清的趋化性研究结果表明,该菌对青石斑鱼肌肉提取物的趋化性最强,且哈维氏弧菌的趋化运动明显受到温度、p... 采用平板趋化和毛细管趋化的方法,研究了病原性哈维氏弧菌TS-628菌株的趋化性。哈维氏弧菌对青石斑鱼肌肉、表皮黏液、肠黏液及血清的趋化性研究结果表明,该菌对青石斑鱼肌肉提取物的趋化性最强,且哈维氏弧菌的趋化运动明显受到温度、pH及盐度等环境因子的影响。哈维氏弧菌对青石斑鱼肌肉18种主要氨基酸的趋化性研究表明,该菌对其中多种氨基酸均表现出很强的趋化性,但氨基酸浓度也会对该菌的趋化性造成影响,浓度过高趋化性反而减弱。 展开更多
关键词 趋化性 哈维氏弧菌 青石斑鱼
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