乙型肝炎病毒DNA超敏定量检测试剂盒的研制和性能评价

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作者 吴大治 《生物化工》 2023年第2期1-7,共7页

目的:研制一种基于双波长荧光PCR技术的乙型肝炎病毒DNA超敏定量检测试剂盒,并对其性能进行评价。方法:根据乙型肝炎病毒不同基因型中的保守序列设计特异性引物与TaqMan荧光探针,并设计非竞争性的外源性内参引物与探针,优化确定双波长荧... 目的:研制一种基于双波长荧光PCR技术的乙型肝炎病毒DNA超敏定量检测试剂盒,并对其性能进行评价。方法:根据乙型肝炎病毒不同基因型中的保守序列设计特异性引物与TaqMan荧光探针,并设计非竞争性的外源性内参引物与探针,优化确定双波长荧光PCR反应体系和扩增条件;同时根据磁珠法原理,优化确定适合血清、血浆样本的病毒DNA高效提取方法,完成乙型肝炎病毒DNA超敏定量检测试剂盒的研制;最后测试本试剂盒的最低检出限、准确度、线性范围、精密度、基因型覆盖及特异性等性能指标,并完成166例临床样本的对比测试,评价试剂盒的临床应用性能。结果:自主研制的乙型肝炎病毒DNA超敏定量检测试剂盒最低检出限为5 IU/mL,线性范围为20~2.0×109 IU/mL,精密度CV值≤5%、覆盖型别包括A~H八种基因型,对常见的病原体检测无交叉反应。166例临床样本的对比检测结果表明,本试剂盒与已上市流通试剂盒的定性检测结果符合性良好,临床阳性符合率为98.67%(95%置信区间:95.27%,99.84%)、阴性符合率93.75%(95%置信区间:69.77%,99.84%)、总体符合率98.19%(95%置信区间:94.81%,99.63%);同时定量检测结果具有较高相关性(斜率0.99,相关系数|R|=0.982)。结论:自主研制试剂盒可实现乙型肝炎病毒DNA超敏精准定量检测,适合临床推广应用。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒DNA 超敏检测 荧光PCR 性能评价

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低温促进表面等离激元共振效应及肌酐的超灵敏表面增强拉曼散射探测 被引量：1

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作者 厉桂华 张梦雅 +9 位作者 马慧 田悦 焦安欣 郑林启 王畅 陈明 刘向东 李爽 崔清强 李冠华 《物理学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2022年第14期182-191,共10页

肌酐是肾脏疾病诊断和监测的关键生物标志物,因此,快速、灵敏的肌酐检测非常重要.本文提供了一种通过提高低温下的光子诱导电荷转移效率来促进表面增强拉曼散射光谱(SERS)活性的有效策略.采用种子生长法获得纳米金二十面体(Au_(20)),以... 肌酐是肾脏疾病诊断和监测的关键生物标志物,因此,快速、灵敏的肌酐检测非常重要.本文提供了一种通过提高低温下的光子诱导电荷转移效率来促进表面增强拉曼散射光谱(SERS)活性的有效策略.采用种子生长法获得纳米金二十面体(Au_(20)),以此作为SERS活性基底.采用极低温(98 K)SERS检测技术实现对染料分子结晶紫(CV)和生理盐水中的肌酐含量的快速、灵敏检测.实验结果表明:常温296 K下,Au_(20)基底对CV分子的检测限(LOD)低至10^(-12) mol/L,并且信号均匀;低温98 K时,CV分子的LOD可达10^(-14) mol/L,比296 K时降低2个数量级.最后,使用Au20基底对生理盐水中的肌酐进行无标记检测.结果表明,常温296 K时该SERS基底对肌酐的LOD为10^(-6) mol/L,1619 cm^(-1)峰的线性相关系数为0.9839.低温98 K时,肌酐的浓度探测极限低至10^(-8) mol/L,1619 cm^(-1)峰的线性相关系数变为0.9973.可知,低温使肌酐浓度检测限和特征峰线性度都进一步提高.本文的工作为生物医药领域肌酐浓度的精确检测提供了新的思路. 展开更多

关键词 低温 表面增强拉曼散射 肌酐 超灵敏检测

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磁纳米散射探针暗场超灵敏检测具核梭杆菌 被引量：1

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作者 都美婧 白亚南 +1 位作者 侯金秀 周昕 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期3346-3357,共12页

【背景】具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)作为机会致病菌,能够引起许多感染性疾病,已被证实是促直肠癌发展的潜在重要危险因素,临床检测中亟需一种快速简单检测F.nucleatum的方法。【目的】通过建立一种磁纳米探针结合暗场显微镜... 【背景】具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)作为机会致病菌,能够引起许多感染性疾病,已被证实是促直肠癌发展的潜在重要危险因素,临床检测中亟需一种快速简单检测F.nucleatum的方法。【目的】通过建立一种磁纳米探针结合暗场显微镜直接观察计数的方法,可方便快速地检测样本中具核梭杆菌的数量。【方法】在磁纳米颗粒(magnetic nanoparticle,MNP)表面修饰制备的抗F.nucleatum抗体,构建一种特异性结合F.nucleatum的MNP探针。此外,比较MNP探针-暗场显微计数法与实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测F.nucleatum的灵敏度。【结果】该方法的检测限可低至3.42×10^(1) copies/µL,比qPCR的灵敏度高5倍左右。在实际样本的检测中,该方法与qPCR方法所检测F.nucleatum数量保持一致。【结论】本研究建立的方法用于检测F.nucleatum,操作简单、检测快速(约30 min)、灵敏且成本低,有应用于临床样本检测的前景。 展开更多

关键词 具核梭杆菌 磁纳米探针 暗场显微镜 超灵敏检测

原文传递

免标记型免疫传感器的构建及其对毛织品微痕迹的检测 被引量：1

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作者 王钟元 宋珊珊 +2 位作者 翟雨洁 杨海亮 王秉 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2021年第4期478-482,共5页

为检测毛织品微痕迹,设计了一种针对羊毛角蛋白的免标记型免疫传感器。通过层层自组装技术构建免疫传感器,用3-巯基丙酸(MPA)在电极表面形成单分子层,活化羧基端后与抗体结合,利用免疫反应检测羊毛角蛋白。选用5种抗原分析了免疫传感器... 为检测毛织品微痕迹,设计了一种针对羊毛角蛋白的免标记型免疫传感器。通过层层自组装技术构建免疫传感器,用3-巯基丙酸(MPA)在电极表面形成单分子层,活化羧基端后与抗体结合,利用免疫反应检测羊毛角蛋白。选用5种抗原分析了免疫传感器的特异性,利用不同浓度的羊毛角蛋白溶液分析了免疫传感器的敏感性。结果显示:免疫传感器对于羊毛角蛋白具有选择性,并且在检测羊毛角蛋白时表现出了优异的灵敏度。免疫传感器的线性检测范围为0.10~100.00μg/mL,最低检测限可以达到11.53 ng/mL。研究结果表明,该免疫传感器可以用于毛织品微痕迹的鉴定分析和定量计算,并且对其具有极高的检测灵敏性。毛织品的电化学免疫检测体系的建立,为毛织品的超灵敏检测提供了一种新的思路,拓展了毛织品文物的分析方法。 展开更多

关键词 毛织品 微痕迹 电化学 免疫传感器 超灵敏检测

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基于滚环扩增技术的蛋白质高灵敏检测 被引量：1

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作者 张俊 曾照芳 鲁卫平 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期43-45,共3页

目的:基于滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)结合免疫反应建立一种蛋白质的高灵敏检测方法。方法:根据双抗体夹心法原理,以链酶亲和素为桥梁,生物素修饰的单链寡核苷酸引物可以高亲和力地链接到生物素标记的免疫复合物上... 目的:基于滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)结合免疫反应建立一种蛋白质的高灵敏检测方法。方法:根据双抗体夹心法原理,以链酶亲和素为桥梁,生物素修饰的单链寡核苷酸引物可以高亲和力地链接到生物素标记的免疫复合物上,建立蛋白质的滚环扩增技术检测平台,并将其用于血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的检测。结果:在优化实验条件下,对VEGF检测的灵敏度达到10fM。结论:与常规的酶标二抗体系ELISA法相比,本方法具有更高的灵敏度,适于低丰度蛋白质的检测,此方法的进一步完善将为疾病新的蛋白标志物的筛选以及临床诊断提供有力的工具。 展开更多

关键词 滚环扩增 VEGF 高灵敏度 蛋白质检测

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超灵敏激光光谱检测与微量原子的检测系统

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作者 张在宣 张艺 +12 位作者 黄孝华 方晓 何加铭 王林 陈庆根 晏于模 金钦汉 丁大军 彭慰先 邴贵德 金硕 任玉林 袁怿谦 《光电子．激光》 CSCD 北大核心 1995年第1期7-14,28,共9页

本文综述了近十年来联合研究组采用激光增强电离（ＬＥＩ）光谱、共振电离光谱（ＲＩＳ）和激光感生荧光（ＬＩＦ）光谱方法对稀土元素、稀贵金属元素，ⅢＡ族元素、碱土金属等２８种元素几百条ＬＥＩ光谱线进行了测量，激光光谱的测量... 本文综述了近十年来联合研究组采用激光增强电离（ＬＥＩ）光谱、共振电离光谱（ＲＩＳ）和激光感生荧光（ＬＩＦ）光谱方法对稀土元素、稀贵金属元素，ⅢＡ族元素、碱土金属等２８种元素几百条ＬＥＩ光谱线进行了测量，激光光谱的测量系统是一个典型的光电子系统。对样品的原子化、原子的激发过程、高激发态和电离过程进行了研究［１］［２］，确定了与ＬＥＩ光谱线对应的原子能位、电子组态，谱项和检出限。首次研究了稀土铕（Ｅｕ）［２］、钐（Ｓｍ）［３］、铈（ｃｅ）、镥（Ｌｕ）［２］、钬（Ｈｏ）和稀有金属锇（Ｏｓ）、钌（Ｒｕ）、铪（Ｈｆ）、铱（Ｉｒ）、铂（Ｐｔ）的ＬＥＩ光谱。 展开更多

关键词 激光光谱检测 微量原子 检测系统

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白血病融合基因(b3a2) SERS光谱超灵敏检测研究

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作者 王运燚 林学亮 +5 位作者 许云超 谢佳文 秦添俤 黄鋆 黄慧芳 冯尚源 《光散射学报》 2019年第4期373-380,共8页

在慢性髓系白血病(CML)人体内,会出现融合基因并产生相应的蛋白质,这些蛋白质具有激酶功能,严重影响细胞的代谢,并导致细胞周期异常,最后恶化成癌细胞。BCR-ABL融合基因(b3a2)在临床上可作为慢性髓性白血病的诊断标志物,但目前临床检测... 在慢性髓系白血病(CML)人体内,会出现融合基因并产生相应的蛋白质,这些蛋白质具有激酶功能,严重影响细胞的代谢,并导致细胞周期异常,最后恶化成癌细胞。BCR-ABL融合基因(b3a2)在临床上可作为慢性髓性白血病的诊断标志物,但目前临床检测方法存在灵敏度和特异性低等缺陷。本研究采用硅烷偶联剂修饰二氧化硅片,并使其质子化,吸附合成的带负电的银纳米粒子(AgNPs),最终通过银和氨基行成化学键牢固组装在二氧化硅片上构建二维表面增强拉曼光谱(SERS)基底。接着通过修饰在带正电的AgNPs的信号链和修饰在SERS基底的捕获链一起结合BCR-ABL融合基因(b3a2),信号链上有Cy5拉曼标记分子,通过检测Cy5的拉曼光谱信号实现对BCR-ABL融合基因(b3a2)定量检测。实验结果表明,本研究可以实现BCR-ABL融合基因(b3a2)的高灵敏度、特异性检测,检测限可达到42.28 fmol/L。本方法为临床上超灵敏检测BCR-ABL融合基因提供了一个潜在方案,可以很好的解决临床上检测灵敏度低与特异性弱等问题。 展开更多

关键词 慢性髓系白血病(CML) BCR-ABL融合基因(b3a2) 表面增强拉曼光谱(SERS) 超灵敏检测

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基于脉冲石英增强光声光谱的中红外超高灵敏CO探测 被引量：13

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作者 董磊 马维光 +2 位作者 张雷 尹王保 贾锁堂 《光学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期287-291,共5页

发展了一种超高灵敏的CO痕量气体测量装置，该装置采用4．65nm脉冲式中红外外腔量子级联激光器作为激发光源，结合石英增强光声光谱技术，对2135～2225cm-1之间的CO基频振动光谱带R支进行连续光谱扫描。水被加入到被测气体中，以加快较... 发展了一种超高灵敏的CO痕量气体测量装置，该装置采用4．65nm脉冲式中红外外腔量子级联激光器作为激发光源，结合石英增强光声光谱技术，对2135～2225cm-1之间的CO基频振动光谱带R支进行连续光谱扫描。水被加入到被测气体中，以加快较慢的CO分子振动-平动弛豫率。在锁相放大器时间常数为3ms，激光器占空比和扫描速率为50％和18cm-1／s时，获得的最小探测极限为4．6×10^-8（体积分数），与之对应的归一化噪声等特吸忻桑麴为1．07×10—8cm-1W／√Hz． 展开更多

关键词 光谱学 超高灵敏CO测量 石英增强光声光谱 中红外量子级联激光器

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温度对石墨烯真空标准漏孔漏率的影响研究

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作者 刘楚彦 刘招贤 +4 位作者 任国华 韩琰 孙立臣 闫荣鑫 孟冬辉 《真空》 CAS 2024年第2期37-41,共5页

石墨烯真空标准漏孔是基于石墨烯衍生材料研制的新型真空标准漏孔,其漏率下限低于一般的石英渗氦型标准漏孔,可用于超灵敏度检漏系统的校准。基于石墨烯的材料特性,石墨烯真空标准漏孔的漏率会随温度变化。本文针对温度对石墨烯真空标... 石墨烯真空标准漏孔是基于石墨烯衍生材料研制的新型真空标准漏孔,其漏率下限低于一般的石英渗氦型标准漏孔,可用于超灵敏度检漏系统的校准。基于石墨烯的材料特性,石墨烯真空标准漏孔的漏率会随温度变化。本文针对温度对石墨烯真空标准漏孔漏率的影响进行了研究,通过测量漏孔在不同温度环境下的漏率,得到该种漏孔的温度系数与变化规律。研究结果表明,石墨烯真空标准漏孔的漏率随温度呈线性变化,且温度系数低于2.5%/℃。 展开更多

关键词 石墨烯 标准漏孔 超灵敏度检漏 温度系数

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基于选择性抽气原理的超灵敏检漏方法分析 被引量：1

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作者 冯天佑 成永军 +3 位作者 陈联 赵澜 孙雯君 丁栋 《真空与低温》 2020年第2期120-124,共5页

随着科研生产对仪器设备精密程度与长寿命要求的不断提高,对超灵敏检漏需求的不断增加,氦质谱检漏仪已无法完全满足要求。利用超高真空材料处理降低本底氦信号,采用非蒸散型吸气剂泵选择性抽气实现静态真空的维持,运用静态累积比较法放... 随着科研生产对仪器设备精密程度与长寿命要求的不断提高,对超灵敏检漏需求的不断增加,氦质谱检漏仪已无法完全满足要求。利用超高真空材料处理降低本底氦信号,采用非蒸散型吸气剂泵选择性抽气实现静态真空的维持,运用静态累积比较法放大被检件的氦信号,实现了对10-13~10-15 Pa·m3/s极小漏率的检测。依据改进方案设计的超灵敏检漏仪和极小气体流量校准装置,为航空航天、核工业等多家单位的产品提供了可靠性保证。 展开更多

关键词 超灵敏检漏 超高真空材料处理 选择性抽气 静态累积比较法

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超灵敏度检漏技术在高抽速自动排气系统中的应用

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作者 田明利 邱立 +4 位作者 董云宁 陈俊儒 陈又琦 唐榕 张吉峰 《真空》 CAS 2022年第3期63-67,共5页

为解决行波管排气和真空封装工艺过程中的微小漏率检测问题,将超灵敏度检漏技术集成在高抽速自动排气系统中。设计的装置主要由主真空系统、外真空及烘箱系统、累积比较检漏系统、标准气体流量系统及控制系统等组成。排气系统设计为八... 为解决行波管排气和真空封装工艺过程中的微小漏率检测问题,将超灵敏度检漏技术集成在高抽速自动排气系统中。设计的装置主要由主真空系统、外真空及烘箱系统、累积比较检漏系统、标准气体流量系统及控制系统等组成。排气系统设计为八工位结构,空载时极限真空度达到超高真空范围,烘箱可进行高温加热,该系统采用程序控制,具有自动采集、存储、分析和传输功能,实现排气工艺全过程自动化。标准气体流量系统可提供5×10^(-7)~5×10^(-16)Pa·m^(3)/s范围的标准气体流量,集成的超灵敏度检漏下限可达5×10^(-16)Pa·m^(3)/s,整套装置对行波管漏率检测结果的合成标准不确定度小于15%。 展开更多

关键词 行波管 超灵敏检漏 气体微流量 不确定度

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汽车排放污染物的共振增强多光子电离光谱分析 被引量：1

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作者 彭慰先 娄小杰 +1 位作者 徐淮良 戴振文 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期955-957,共3页

汽车排放的主要污染物为CO, HC, NOx(x=1,2), SO2, Pb, 苯丙芘, 固体颗粒等[1], 其尾气的检测对维护人类自身健康具有十分重要的意义. 共振增强多光子电离光谱(Resonant Enhanced Multi-Photonionization, REMPI)是一种超灵敏光谱检测技... 汽车排放的主要污染物为CO, HC, NOx(x=1,2), SO2, Pb, 苯丙芘, 固体颗粒等[1], 其尾气的检测对维护人类自身健康具有十分重要的意义. 共振增强多光子电离光谱(Resonant Enhanced Multi-Photonionization, REMPI)是一种超灵敏光谱检测技术, 它的灵敏度比LIF(Laser Induced Fluorescence)还要高. 1979年, Brophy和Rentttner[2]提出了REMPI可以作为检测大气污染的方法. 展开更多

关键词 光谱分析 超灵敏检测 汽车 污染物 共振增强多光子电离子 尾气 环境污染

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超灵敏检漏的实时校准 被引量：14

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作者 肖立波 陈旭 +1 位作者 黄天斌 查良镇 《真空科学与技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期54-56,共3页

超灵敏检漏的实时校准是国际上尚未解决且未标准化的一个难题,本文利用自建的微流量参考漏率系统对商用检漏仪和超灵敏检漏系统进行了实时校准的实验研究,在10-14Pa.m3/s^10-10Pa.m3/s宽范围漏率内实现了对检漏仪器的实时校准。

关键词 实时校准 超灵敏检漏 可变参考漏孔 静态累积模式

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金纳米颗粒修饰的粉末状多孔材料用于固相萃取及原位超灵敏度表面增强拉曼光谱检测 被引量：1

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作者 汪宣 杜一平 +3 位作者 徐莹 张涵 潘英骋 吴婷 《光散射学报》 北大核心 2014年第3期224-228,共5页

本文合成了一种基于金纳米颗粒修饰的粉末状聚甲基丙烯酸缩水甘油酯-二甲基丙烯酸乙二酯(GMA-EDMA)材料的表面增强拉曼光谱基底。将此基底作为固相萃取剂用于富集和原位的SERS检测。利用此方法对亚胺硫磷进行检测,可以得到5"g/L的... 本文合成了一种基于金纳米颗粒修饰的粉末状聚甲基丙烯酸缩水甘油酯-二甲基丙烯酸乙二酯(GMA-EDMA)材料的表面增强拉曼光谱基底。将此基底作为固相萃取剂用于富集和原位的SERS检测。利用此方法对亚胺硫磷进行检测,可以得到5"g/L的样品分子信号。进一步对橙子表面亚胺硫磷进行检测,结果表明此方法对于农药残留的检测有着好的应用前景。 展开更多

关键词 表面增强拉曼光谱(SERS) 聚甲基丙烯酸缩水甘油酯-二甲基丙烯酸乙二酯材料(GMA-EDMA) 固相萃取 超灵敏度检测 亚胺硫磷

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用于红外探测器组件检测的超高灵敏检测仪研究

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作者 王冀 《科技与创新》 2015年第2期76-76,共1页

将超高灵敏度检测仪作为研究对象,在超高灵敏度检测仪的研制中,引入了对红外探测器组件的应用,研究了整个检测仪的基本工作原理和系统设计要点,希望能够在后续的实践工作中得到进一步的推广和应用。

关键词 红外探测器 超高灵敏检测仪 电子器件 累积法

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