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超速离心-高效液相色谱测定血清高密度和低密度脂蛋白胆固醇 被引量：14
1
作者 董军 国汉邦 +6 位作者 王抒 李红霞 满永 张江涛 张传保 赵海舰 陈文祥 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期742-746,共5页
目的建立一种新的预期用作参考方法的高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)准确测定方法。方法血清与含2-巯基乙醇(ME)和脯氨酸的溴化钠溶液混合,使背景密度为1．063,超速离心分离高密度脂蛋白(HDL);血清与含脯氨酸的溴... 目的建立一种新的预期用作参考方法的高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)准确测定方法。方法血清与含2-巯基乙醇(ME)和脯氨酸的溴化钠溶液混合,使背景密度为1．063,超速离心分离高密度脂蛋白(HDL);血清与含脯氨酸的溴化钠溶液混合,使背景密度为1．006,超速离心分离HDL和低密度脂蛋白(LDL);用高效液相色谱测定两种脂蛋白组分胆固醇。结果ME和脯氨酸可有效消除脂蛋白(a)对超速离心法分离HDL的影响;新方法测定HDLC和LDLC的总变异系数分别为0．96％～2．07％和0．65％～1．12％。结论建立血清HDLC和LDLC准确测定方法,方法可靠、精密、简便,可望用作HDLC和LDLC测定参考方法。 展开更多
关键词 脂蛋白类 胆固醇 超速离心法 色谱法 高压液相
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凝胶电泳蛋白质组学蛋白样品纯化方法比较 被引量：3
2
作者 卜旺雨 齐义军 +4 位作者 魏华 张娟 马瑾 王明 马远方 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期865-868,共4页
目的探讨超滤法和7种不同沉淀方法纯化含PBS的蛋白样品对蛋白凝胶电泳的影响。方法应用超滤法和7种沉淀方法[包括硫酸铵、氯仿甲醇、酸化丙酮甲醇、乙醇、丙酮、三氯乙酸(TCA)、TCA/丙酮]纯化PBS稀释的混合食管癌组织蛋白(10例),二喹啉... 目的探讨超滤法和7种不同沉淀方法纯化含PBS的蛋白样品对蛋白凝胶电泳的影响。方法应用超滤法和7种沉淀方法[包括硫酸铵、氯仿甲醇、酸化丙酮甲醇、乙醇、丙酮、三氯乙酸(TCA)、TCA/丙酮]纯化PBS稀释的混合食管癌组织蛋白(10例),二喹啉甲酸(BCA)、Bradford及2D法测定蛋白浓度并进行一维和二维聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳,Image Master软件分析二维电泳图谱蛋白点。结果 Bradford法和2D法适用于二维电泳水化液溶解的蛋白样品浓度测定。超滤法和硫酸铵沉淀法的蛋白回收率分别为40%和4%,其他方法的蛋白回收率约为22%。丙酮沉淀法纯化蛋白的二维电泳图谱蛋白点边界清晰、分辨率高且数目最多;其次是乙醇沉淀和氯仿甲醇沉淀法;再其次是超滤法,该法纯化蛋白的二维电泳图谱蛋白点表现不同程度的弥散;酸化丙酮甲醇沉淀蛋白的二维电泳图谱中蛋白点丢失最多。结论丙酮沉淀法适用于原始浓度高、体积小的蛋白样品除盐及浓缩,超滤法是原始体积较大、浓度较低蛋白样品浓缩纯化的首选方法。 展开更多
关键词 食管 蛋白样品制备 蛋白质组 蛋白沉淀 超滤 二维电泳
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血清高密度脂蛋白的超速离心、氧化修饰及DiI标志 被引量：4
3
作者 周立尧 陈爱华 宋旭东 《实用医学杂志》 CAS 2007年第7期937-940,共4页
目的:探讨一种方便快捷地从血浆中分离高密度脂蛋白(HDL)及氧化修饰、荧光标记的方法。方法:采用一次性密度梯度超速离心法,经超速离心分离后获得HDL(10℃,50000r/min,5h),并用Cu2+进行氧化修饰(37℃,50μmol/L,24h)及DiI进行荧光标记(3... 目的:探讨一种方便快捷地从血浆中分离高密度脂蛋白(HDL)及氧化修饰、荧光标记的方法。方法:采用一次性密度梯度超速离心法,经超速离心分离后获得HDL(10℃,50000r/min,5h),并用Cu2+进行氧化修饰(37℃,50μmol/L,24h)及DiI进行荧光标记(37℃,15mg/mL,15h)。结果:5h内成功分离出脂蛋白,并氧化、标记了HDL;琼脂糖凝胶电泳、Bradford蛋白质定量及MDA测定证实其为纯度和浓度较高的HDL及氧化HDL(OX-HDL);标记的HDL(DiI-HDL)结合到体外培养的ECV-304细胞,表明DiI-HDL保持了正常脂蛋白的配体功能。结论:本方法缩短了超速离心时间并降低了标记成本,效果理想,可成功应用于脂蛋白受体的研究。 展开更多
关键词 脂蛋白类 HDL 超速离心法 氧化 DII
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登革病毒3型病毒样颗粒在酵母体内的表达与鉴定 被引量：2
4
作者 付春云 方丹云 +4 位作者 刘岩 喻治准 江汉宁 江丽芳 周俊梅 《热带医学杂志》 CAS 2011年第6期613-616,656,共5页
目的探讨登革病毒3型病毒样颗粒(DENV3-VLPs)的免疫原性。方法用PCR法扩增登革病毒3型prME基因,插入载体pGAPZaA构建重组质粒pGAPZaA-prME-D3,将其转化毕赤酵母X33构建转化子pGAPZaA-prME-D3/X33。对转化子表达上清和细胞裂解液进行SDS-... 目的探讨登革病毒3型病毒样颗粒(DENV3-VLPs)的免疫原性。方法用PCR法扩增登革病毒3型prME基因,插入载体pGAPZaA构建重组质粒pGAPZaA-prME-D3,将其转化毕赤酵母X33构建转化子pGAPZaA-prME-D3/X33。对转化子表达上清和细胞裂解液进行SDS-PAGE和Western blotting分析。用蔗糖密度梯度离心纯化表达的DENV3-VLPs并进行鉴定和电镜观察。结果成功构建重组载体pGAPZaA-prME-D3,获得酵母转化子pGAPZaA-prME-D3/X33,并应用毕赤酵母表达了DENV3-VLPs,表达蛋白约50000Mr,电镜观察VLPs直径为20～50nm。结论应用酵母表达系统成功表达了DENV-3VLPs,经鉴定表明其具有免疫反应性,为后续免疫原性研究及四价登革VLPs疫苗的构建奠定了基础。 展开更多
关键词 登革病毒 病毒样颗粒 蔗糖密度梯度离心 毕赤酵母
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储存mRNA在大豆胚根萌发过程的作用
5
作者 莫蓓莘 黄彪 +2 位作者 刘丽 叶浩 徐晓峰 《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS 北大核心 2013年第1期84-90,共7页
为研究种子是否能完全依靠储存的mRNA或储存的蛋白质完成萌发过程,分别利用转录抑制剂α-鹅膏蕈碱(α-amanitin)和制剂放线菌酮处理大豆胚根,抑制新的mRNA或新的蛋白质的合成,观察大豆胚根的萌发情况.结果发现,在转录抑制的条件下,大豆... 为研究种子是否能完全依靠储存的mRNA或储存的蛋白质完成萌发过程,分别利用转录抑制剂α-鹅膏蕈碱(α-amanitin)和制剂放线菌酮处理大豆胚根,抑制新的mRNA或新的蛋白质的合成,观察大豆胚根的萌发情况.结果发现,在转录抑制的条件下,大豆胚根能够完成萌发,种子萌发后,种苗生长停止;在翻译被抑制的条件下,大豆胚根不能完成萌发.说明大豆胚根萌发能够依赖发育过程合成并贮存在干种子中的mRNA;但种苗的发育不能完全依赖储存的RNA,需要新合成的mRNA参与.大豆胚根不能依赖储存蛋白质完成萌发过程.对大豆胚根细胞内容物进行超速离心并对不同组分中mRNA含量进行定量分析发现,干种子中的mRNA主要存在于多核糖体之外的细胞结构中,而在萌发过程中,mRNA主要存在于多核糖体中.这表明干种子中的mRNA主要以储存状态存在于mRNA的储存结构中,萌发过程大部分mRNA从储存结构中转移到多核糖体中变为活跃的翻译状态.不同萌发时期多核糖体的特征曲线也体现mRNA在细胞内存在位置的这种变化. 展开更多
关键词 植物细胞生理学 贮存信使核糖核酸 大豆胚根 种子萌发 转录抑制剂 α-鹅膏蕈碱 翻译抑制剂 放线菌酮 实时定量聚合酶链式反应 蔗糖密度梯度超速离心
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基于贝叶斯网络的超速离心机故障诊断专家系统研究 被引量：6
6
作者 韩延喆 刘波峰 +2 位作者 张俊 向阳 卓思成 《传感器与微系统》 CSCD 北大核心 2012年第2期39-41,44,共4页
研究了一种超速离心机故障诊断专家系统。系统采用人机对话方式,以专家知识库为基础,对离心机运转时的实时数据采样或者通过人工对界面输入故障征兆知识;采用贝叶斯网络方法进行推理,从而诊断出故障原因和各原因可能发生的概率。使维修... 研究了一种超速离心机故障诊断专家系统。系统采用人机对话方式,以专家知识库为基础,对离心机运转时的实时数据采样或者通过人工对界面输入故障征兆知识;采用贝叶斯网络方法进行推理,从而诊断出故障原因和各原因可能发生的概率。使维修更具针对性,实现智能化超速离心机故障诊断,提高了设备可靠性与安全性。 展开更多
关键词 超速离心机 贝叶斯网络 专家系统 故障诊断
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