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用UDPE技术检测和鉴定鼠疫耶尔森氏菌 被引量:13
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作者 郭兆彪 张敏丽 +5 位作者 汪晓辉 王津 杨瑞馥 张春华 丛显斌 张景林 《中国地方病防治》 1999年第5期262-265,共4页
我们建立了用UDG(尿嘧啶糖基化酶)防PCR产物污染,以两个不同基因为靶序列扩增检测同一病原菌和用微孔板杂交-酶联显色检测PCR产物的UDPE(UDG-Duplex PCR-EIA)技术,并用于鼠疫耶尔森氏菌的检测与鉴定。结果表明,该系统可以特异地检测和... 我们建立了用UDG(尿嘧啶糖基化酶)防PCR产物污染,以两个不同基因为靶序列扩增检测同一病原菌和用微孔板杂交-酶联显色检测PCR产物的UDPE(UDG-Duplex PCR-EIA)技术,并用于鼠疫耶尔森氏菌的检测与鉴定。结果表明,该系统可以特异地检测和鉴定鼠疫耶尔森菌,检测灵敏度可以达到1CFU/ml。 展开更多
关键词 PCR 鼠疫 耶尔森氏菌 UDPE
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稳定剂保护PCR扩增dU-DNA效果研究 被引量:4
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作者 杜绍财 张敏 +3 位作者 韩建德 吴娟 冯百芳 陶其敏 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期4-6,共3页
目的 :了解 94℃灭活UDG与不灭活及扩增产物加稳定剂与不加稳定剂对DNA杂交效率的影响。方法 :采用微孔板DNA杂交技术检测PCR扩增dU -DNA杂交效果。以不加UDG组DNA杂交A值为对照、计算杂交百分率。结果 :不加UDG组扩增前后未经 94℃灭... 目的 :了解 94℃灭活UDG与不灭活及扩增产物加稳定剂与不加稳定剂对DNA杂交效率的影响。方法 :采用微孔板DNA杂交技术检测PCR扩增dU -DNA杂交效果。以不加UDG组DNA杂交A值为对照、计算杂交百分率。结果 :不加UDG组扩增前后未经 94℃灭活处理 - 2 0℃保存 2 0h杂交效率为 90 .2 93% ,加UDG组在 4℃、室温、37℃放置 2 0h ,杂交效率为 2 0 .15 % ,2 1.37% ,2 9.37%。加UDG并增加 94℃灭活步骤、37℃水浴放置 2 0h ,杂交效率为 73.5 7% ,78.82 %。在此基础上加入稳定剂 37℃水浴 4 3h杂交效率达到 99.88%~ 10 0 %。 37℃水浴 6 7h杂交效率仍达到 86 .0 6 %~ 97.10 %。结论 :上述结果证实用于抗污染时 ,扩增前后增设 94℃灭活 10min可提高杂交效率。加入稳定剂可使杂交A值 1.80达到对照组A值 1.81水平。提示稳定剂对保护PCR扩增dU -DNA有极其重要作用。 展开更多
关键词 udg 稳定剂 微孔板DNA杂交 PCR
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ETG Galaxies (<400 [My]) from JWST Already Predicted in 2019 from This Cosmological Model AΛΩ (Slow Bang Model, SB)
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作者 Jean Perron 《Journal of High Energy Physics, Gravitation and Cosmology》 2023年第3期800-834,共35页
A model of the universe (preprint 2019), based on a quantum approach to the evolution of space-time as well as on an equation of state that retains all the infinitesimal terms, has made it possible to estimate a large... A model of the universe (preprint 2019), based on a quantum approach to the evolution of space-time as well as on an equation of state that retains all the infinitesimal terms, has made it possible to estimate a large number of parameters relating to the universe and in particular the estimation of a colossal phantom energy E<sub>Λ</sub> represented by the existence of a hidden photon &ycirc;present everywhere. This energy undergoes dilution in H<sup>4</sup> due to expansion of the universe. In order to introduce the effects of this energy on the curvature of space-time, we chose to express it by the cosmological constant Λ in the equation of the GR via the element tensor T<sup>00</sup>. This positive energy E<sub>Λ</sub> which acts as additional effect to gravity and we have expressed this energy in the form of an equation which expresses a so-called cosmological force F<sub>Λ</sub>. We estimated that this photon or hidden particle of spin 1 has an energy ~1 [meV] at our cosmic position t<sub>0</sub> which makes it an ultra-light axion ULA. Subsequently, with the action of this augmented force, especially in the first 400 [My] we were able to explain, in part, the rapid development of galaxy formation as seen by JWST as well as several observed dynamic behaviors of the barionic mass of some galaxies as MW, M33, UGC12591, NGC3198, UGC2885 and NGC253 whose observations raise questions and require additional explanations that led to the likely existence of unobserved matter called DM. However, it appears that this cosmological force makes it possible to explain several observations without the use of this DM. A first conclusion was drawn, namely the much earlier formation of galaxies by the action of this cosmological force coupled with gravity (GLASS z12). In addition, the model made it possible to explain the need or not to use the concept of DM for ETGs and LTGs by the more or less early and long period of the beginning of galaxy formation over a period ranging from ~170 to 1200 [My]. Thus, the model makes i 展开更多
关键词 Model of Universe ETG LTG udg Cosmological Constant Hidden Photon Hidden Boson GLASS z12
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类鼻疽伯克霍尔德氏菌UDPE检测方法的建立和应用 被引量:1
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作者 宋亚军 王津 +2 位作者 张敏丽 郭兆彪 杨瑞馥 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期35-37,共3页
目的 建立防止产物污染的UDPE(UDG -DuplexPCR -EIA)技术 ,用于检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌。方法 选择类鼻疽伯克霍尔德氏菌FUR(FerricUptakeRegulator)基因为靶序列 ,设计两对引物进行PCR扩增 ,用UDG(尿嘧啶糖基化酶 )防止PCR产物污... 目的 建立防止产物污染的UDPE(UDG -DuplexPCR -EIA)技术 ,用于检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌。方法 选择类鼻疽伯克霍尔德氏菌FUR(FerricUptakeRegulator)基因为靶序列 ,设计两对引物进行PCR扩增 ,用UDG(尿嘧啶糖基化酶 )防止PCR产物污染 ,并用微孔板杂交 -酶联显色检测扩增的PCR产物片段 ;用不同的模板考察方法的特异性和灵敏度。结果 该检测系统可以特异性地检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌 ;对于纯DNA模板 ,检测灵敏度可以达到 10fg/ μl;对于系列稀释菌液提取的模板 ,灵敏度可达 0 1个菌 / μl;对于模拟污水标本、模拟组织标本和模拟土壤标本的检测灵敏度分别为 10个菌 / μl,10 0个菌 / μl和 10 0个菌 / μl;检测系统可以防止 10 9个PCR产物分子的污染 ;检测系统可以在 37℃下稳定保存 7d。结论 本研究建立了稳定的 ,防止产物污染 。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德氏菌 尿嘧啶糖基化酶 udg PCR 微孔板杂交 UDPE
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UDG在两种水生动物病毒核酸片段检测中的抗污染效果研究 被引量:1
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作者 陈凡 丁能水 +2 位作者 李奕雅 汪小东 许弟群 《闽南师范大学学报(自然科学版)》 2022年第1期84-92,共9页
尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)作为生物体内的DNA修复酶系,能有效水解单链或双链DNA上的尿嘧啶,可用于PCR过程中残留污染物的清除.本研究以PCR预混液试剂盒作为检测工具,以鲤浮肿病和罗非鱼湖病的阳性核酸片段检测为例,探讨了巢式和荧光定量... 尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)作为生物体内的DNA修复酶系,能有效水解单链或双链DNA上的尿嘧啶,可用于PCR过程中残留污染物的清除.本研究以PCR预混液试剂盒作为检测工具,以鲤浮肿病和罗非鱼湖病的阳性核酸片段检测为例,探讨了巢式和荧光定量PCR检测时,UDG的抗污染效果.研究结果表明:(1)向PCR反应体系中添加200μmol/L的dUTP,可保证扩增产物中有足够的尿嘧啶掺入,且对扩增效率影响较小.(2)使用0.2 U/10μL的UDG浓度,可清除常规PCR中99.9%以上(多数大于99.95%)的阳性污染物,或清除荧光定量PCR(探针法)中96.5%以上的阳性污染物.继续增加UDG用量,则污染物清除效率的提高有限.本研究为特定条件下UDG对污染性模板的清除效果做了定量统计,能为该技术的具体应用与进一步优化提供实验依据. 展开更多
关键词 PCR udg 抗污染 水生动物病毒 核酸片段 检测
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用尿嘧啶-DNA-糖基化酶控制聚合酶链反应的产物污染 被引量:4
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作者 陆建荣 章幼奕 +1 位作者 华文久 倪丽萍 《南通医学院学报》 1995年第2期337-339,共3页
聚合酶链反应(PCR)灵敏度极高,痕量的PCR产物能污染新的PCR体系(称为产物污染)导致假阳性结果,我们通过在所有的PCR扩增中掺入dUTP使PCR产物含“dU”,在以后的PCR扩增前用尿嘧啶-DNA糖基化酶(Ur... 聚合酶链反应(PCR)灵敏度极高,痕量的PCR产物能污染新的PCR体系(称为产物污染)导致假阳性结果,我们通过在所有的PCR扩增中掺入dUTP使PCR产物含“dU”,在以后的PCR扩增前用尿嘧啶-DNA糖基化酶(Uracil-DNA-Glycolase,UDG)处理,然后加热去除UDG活性防止了产物污染。UDG切割磷酸糖骨架上的尿嘧啶,可阴止DNA聚合酶对它的复制,而对普通DNA(即含”dT”)无影响。因为UDG不与dUTP反应,而且在PCR扩增前加热变性失活,使含尿嘧啶的污染物的污染得到很好控制。 展开更多
关键词 污染 肝炎 聚合酶链反应 udg
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GLFR:一种新的基于地理位置信息Ad Hoc网络路由算法 被引量:1
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作者 黄骥 周继鹏 《计算机技术与发展》 2009年第10期145-148,共4页
在经典的基于地理位置信息的Ad Hoc网络路由算法GPSR的基础上,为了提高数据分组成功传输率,提出了一种适用于无线网络的路由算法GLFR,该算法以RNG图作为无线网络的拓扑结构,利用节点中存储的邻节点位置信息和局部面上的节点位置信息实... 在经典的基于地理位置信息的Ad Hoc网络路由算法GPSR的基础上,为了提高数据分组成功传输率,提出了一种适用于无线网络的路由算法GLFR,该算法以RNG图作为无线网络的拓扑结构,利用节点中存储的邻节点位置信息和局部面上的节点位置信息实现了数据分组的转发,随着网络中节点数的增加以及节点移动性的增强,该路由算法具有良好的可扩展性和适应性。通过仿真可以看出GLFR算法在数据分组成功传输率方面具有良好的性能。 展开更多
关键词 无线AD HOC网络 单位圆图 相关邻近图 局部面 路由
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脱氧尿嘧啶及尿嘧啶DNA糖基化酶抗PCR产物污染能力研究 被引量:2
8
作者 郑子君 《职业卫生与病伤》 2008年第2期67-70,共4页
目的探讨脱氧尿嘧啶及尿嘧啶DNA糖基化酶抗PCR产物污染的能力。方法用Taq-Man荧光定量PCR检测方法进行定量检测。将一系列不同浓度的含dUTP的HBVvDNA PCR扩增产物作为污染源,分别加至含dUTP/UDC的PCR反应体系和普通荧光定量PCR反应体系... 目的探讨脱氧尿嘧啶及尿嘧啶DNA糖基化酶抗PCR产物污染的能力。方法用Taq-Man荧光定量PCR检测方法进行定量检测。将一系列不同浓度的含dUTP的HBVvDNA PCR扩增产物作为污染源,分别加至含dUTP/UDC的PCR反应体系和普通荧光定量PCR反应体系中,在荧光定量PCR仪上进行定量检测,从而得出含dUTP/UDC的PCR反应体系的抗污染能力。结果最佳抗污染实验条件:UDG酶含量0.05 U,消化时间37℃5 min,灭活时间92℃1 min;dUTP100%代替dTTP。含0.05 U的UDG抗污染反应体系对每管浓度为103拷贝/ml的污染物可完全消化,并随UDC含量的增高及消化时间的延长,抗污染能力增强。结论dUTP/UDG反应体系的应用能有效防止PCR产物污染,但抗污染能力是有一定限度的,尚需加强实验室标准化管理,才能真正达到抗污染效果。 展开更多
关键词 尿嘧啶DNA糖基化酶(UDC) 脱氧尿嘧啶(dUTP) 荧光定量PCR
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BIM闲谈——UDG联创国际-宁波万年基业梅山湾港城售楼处示范区工程 被引量:1
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作者 俞侃 屈峰 《建筑师》 2015年第3期133-138,共6页
一、什么是BIM?1999年,美国科幻电影《黑客帝国》横空出世,其异常前卫的世界观设定,即使放到今天来看也未过时,随着人类科技水平的日新月异,虚拟现实[1]逐渐呈现于人们的视野之中。作为建筑行业的虚拟现实技术,BIM的概念首先于1975年,... 一、什么是BIM?1999年,美国科幻电影《黑客帝国》横空出世,其异常前卫的世界观设定,即使放到今天来看也未过时,随着人类科技水平的日新月异,虚拟现实[1]逐渐呈现于人们的视野之中。作为建筑行业的虚拟现实技术,BIM的概念首先于1975年,由美国乔治亚理工大学Charles Eastman教授提出,其全称为"Building Information Modeling",在中国被称为"建筑信息模型"。简单来说,BIM是指某将建工程在现场动工以前,与该工程相关的所有人员,包括业主。 展开更多
关键词 BIM udg 虚拟现实技术 建筑信息模型 黑客帝国 科幻电影 EASTMAN 在现场 成本造价
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含尿嘧啶DNA糖基化酶的聚合酶链反应检测血清HBV DNA 被引量:1
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作者 刘文恩 谭德明 张铮 《湖南医科大学学报》 CSCD 1998年第3期278-280,共3页
为探讨含dUTP/尿嘧啶DNA糖基化酶(dUTP/UDG)PCR试剂(抗污染PCR试剂,PCR-dUTP/UDG)抗PCR产物污染的能力及其在临床检测中的应用,采用该试剂检测204份病毒性肝炎患者血清中HBVDNA,... 为探讨含dUTP/尿嘧啶DNA糖基化酶(dUTP/UDG)PCR试剂(抗污染PCR试剂,PCR-dUTP/UDG)抗PCR产物污染的能力及其在临床检测中的应用,采用该试剂检测204份病毒性肝炎患者血清中HBVDNA,并与普通PCR试剂比较。结果显示:抗污染PCR试剂有较强的抗污染能力,至少可阻止100ng的PCR产物的污染。该试剂与地戈辛素探针分子杂交所测结果的符合率(89.32%)高于普通PCR与分子杂交所测的符合率(81.45%)。表明抗污染PCR试剂的应用有利于防止PCR产物的污染,提高PCR的准确性和特异性。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 乙型肝炎病毒 udg
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功能的置换 上海国际设计谷&UDG联创国际设计集团办公区 被引量:1
11
作者 钱强 《室内设计与装修》 2016年第4期122-127,共6页
坐落于上海市杨浦区控江路1500号的新凤城宾馆,原为杨浦区政府经营的具有住宿、餐饮和娱乐功能的宾馆,但随着城市发展和政府政策的变化,这里逐渐衰落。初到现场的时候,我们感受到的是这座曾经盛极一时的宾馆浓浓的衰败气息:脱落的墙砖... 坐落于上海市杨浦区控江路1500号的新凤城宾馆,原为杨浦区政府经营的具有住宿、餐饮和娱乐功能的宾馆,但随着城市发展和政府政策的变化,这里逐渐衰落。初到现场的时候,我们感受到的是这座曾经盛极一时的宾馆浓浓的衰败气息:脱落的墙砖、生锈的金属件、茂盛却无人打理的绿化、来不及处理的家具…… 展开更多
关键词 上海市杨浦区 设计集团 udg 城市发展 国际设计 政府政策 墙砖 原有建筑 金属件 办公空间
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60后 50+ 风格谈——访东南大学建筑学院教授/UDG联创国际设计集团首席总建筑师 钱强
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作者 王小静 姚力 《设计家》 2014年第5期112-117,共6页
1960年代出生的人有很多共同点:曾经历过多次社会变革,遭遇过社会由封闭到开放带来的思潮流变,价值观不断被冲击与融合,遭遇社会转型中的机遇与危机,在纷繁现实中追寻自我,在理想与现实中平衡取舍,到对自我身份的认知与认同。60后建筑... 1960年代出生的人有很多共同点:曾经历过多次社会变革,遭遇过社会由封闭到开放带来的思潮流变,价值观不断被冲击与融合,遭遇社会转型中的机遇与危机,在纷繁现实中追寻自我,在理想与现实中平衡取舍,到对自我身份的认知与认同。60后建筑师也不例外,这一代建筑师赶上了中国建筑业的大发展,随着大量设计经验的积累,设计方法和理念的沉淀,心智成熟,处事从容,心境平和是如今这代建筑师普遍的特点,正如圣人所言:"五十而知天命",刚过五十岁的钱强也是如此。 展开更多
关键词 钱强 udg 设计集团 建筑学院 知天命 这一代 建筑学专业 室内设计 大学建筑系 上海市建筑学会
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尿嘧啶DNA糖基化酶在丙肝病毒多聚酶链反应检测技术中抗DNA产物污染的研究
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作者 高广甫 李新月 +4 位作者 赵清霞 张桂华 韩黎民 李胜堂 孙燕 《河南预防医学杂志》 1998年第5期265-267,共3页
尿嘧啶DNA糖基化酶在丙肝病毒多聚酶链反应检测技术中抗DNA产物污染的研究高广甫李新月赵清霞张桂华韩黎民李胜堂孙燕丙型肝炎病毒(HCV)逆转录套式多聚酶链反应检测技术(RT-nested-PCR)因其高度的特异性及敏... 尿嘧啶DNA糖基化酶在丙肝病毒多聚酶链反应检测技术中抗DNA产物污染的研究高广甫李新月赵清霞张桂华韩黎民李胜堂孙燕丙型肝炎病毒(HCV)逆转录套式多聚酶链反应检测技术(RT-nested-PCR)因其高度的特异性及敏感性成为丙型肝炎病毒临床检测必不可... 展开更多
关键词 HCV 尿嘧啶 PCR udg dUTP
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知识产权损害赔偿的市场价值分析:理论、规则与方法 被引量:43
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作者 吴汉东 《法学评论》 CSSCI 北大核心 2018年第1期65-74,共10页
知识产权意义上的损害,实质上是对知识产权所蕴含资产价值的损害。损害赔偿客体的资产价值特征,是关于知识产权市场价值观的基本认识;损害赔偿数额的认定,包括价值判断标准的法理论与价值计算方法的法技术;司法定价的运行模式,即是以知... 知识产权意义上的损害,实质上是对知识产权所蕴含资产价值的损害。损害赔偿客体的资产价值特征,是关于知识产权市场价值观的基本认识;损害赔偿数额的认定,包括价值判断标准的法理论与价值计算方法的法技术;司法定价的运行模式,即是以知识产权的"合理价值"为基础,计算其收益能力(市场价值)在特定时间的市场条件下的货币表现(市场交易价格)的分析框架。基于此,形成损害赔偿数额计算的"三步观察法",即市场类型分析法、市场占有份额分析法和市场交易机会分析法。 展开更多
关键词 知识产权损害赔偿 资产价值特征 价值判断标准 三步观察法
原文传递
PCR技术应用的新进展 被引量:6
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作者 张红缨 张今 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第6期509-513,共5页
近年来,随着PCR技术方法学的逐步改进和完善,更加显示出它的实用性这不仅扩大了其用武之地,也促进了分子生物学的快速发展文章着重介绍PCR在基因工程和蛋白质工程应用中的某些新进展,包括不需连接的克隆技术、随机引导/定位... 近年来,随着PCR技术方法学的逐步改进和完善,更加显示出它的实用性这不仅扩大了其用武之地,也促进了分子生物学的快速发展文章着重介绍PCR在基因工程和蛋白质工程应用中的某些新进展,包括不需连接的克隆技术、随机引导/定位PCR、CDNA末端随机快速扩增、重组PCR和大引物PCR. 展开更多
关键词 聚合酶链反应 分子生物学 应用
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dUTP/UDG反应体系在荧光定量PCR中抗污染能力评价 被引量:4
16
作者 王忠永 吴文兵 +2 位作者 陶志华 陈晓东 戴菁 《中国实验诊断学》 2003年第2期94-97,共4页
目的 探讨dUTP/UDG反应体系在荧光定量PCR中抗PCR产物污染的能力。方法 用TaqMan荧光定量PCR检测方法进行定量检测。将一系列不同浓度的含dUTP的HBV DNA PCR扩增产物作为污染源 ,分别加至含dUTP/UDG的PCR反应体系和普通荧光定量PCR... 目的 探讨dUTP/UDG反应体系在荧光定量PCR中抗PCR产物污染的能力。方法 用TaqMan荧光定量PCR检测方法进行定量检测。将一系列不同浓度的含dUTP的HBV DNA PCR扩增产物作为污染源 ,分别加至含dUTP/UDG的PCR反应体系和普通荧光定量PCR反应体系中 ,在荧光定量PCR仪上进行定量检测 ,从而得出含dUTP/UDG的PCR反应体系的抗污染能力。结果  1.最佳抗污染实验条件 :UDG酶含量 0 .0 5U ,消化时间 37℃ 5min ,灭活时间 92℃ 1min ;dUTP10 0 %代替dTTP ,四种底物浓度相等。 2 .含 0 .0 5U的UDG抗污染反应体系对每管浓度为 10 3 拷贝 /ml的污染物可完全消化 ,并随UDG含量的增高及消化时间的延长 ,抗污染能力增强。结论 dUTP/UDG反应体系的应用能有效防止PCR产物污染 ,但抗污染能力是有一定限度的 ,尚需加强实验室标准化管理 ,才能真正达到抗污染效果。 展开更多
关键词 DNA糖基化酶 荧光定量PCR dUTP/udg反应体系 抗污染能力 评价
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一种新型的基于地理位置信息的Ad Hoc路由算法 被引量:2
17
作者 贺鹏 李建东 陈彦辉 《西安电子科技大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期218-222,共5页
提出了一种适用于无线Ad Hoc网络的路由算法GLFCFR(G reedy and Local F in ite C lose FaceRouting),该算法以RNG(Relative Ne ighborhood G raph)图作为无线网络的拓扑结构,利用节点中存储的邻节点位置信息和网络局部有限闭平面上的... 提出了一种适用于无线Ad Hoc网络的路由算法GLFCFR(G reedy and Local F in ite C lose FaceRouting),该算法以RNG(Relative Ne ighborhood G raph)图作为无线网络的拓扑结构,利用节点中存储的邻节点位置信息和网络局部有限闭平面上的节点位置信息实现了数据分组的转发.随着网络中节点数的增加以及节点移动性的增强,该路由算法具有良好的可扩展性和适应性,通过仿真可看出GLFCFR算法在路由分组开销和数据分组的成功传输率方面具有良好的性能. 展开更多
关键词 无线AD HOC网络 单位圆图(udg) 相关邻近图(RNG) 路由(Routing)
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一种基于Quasi-UDG模型的无线传感器网络非测距定位算法 被引量:3
18
作者 牛延超 高德云 张思东 《北京交通大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期89-93,共5页
针对Quasi-UDG模型下无线传感器网络随机部署的拓扑特征,提出了一种非测距基于权重的定位算法EWLS(Enhanced Weighted Least Square).首先,设计出一种节点跳数和距离关系估计的方法,然后依据跳数值与距离关系的概率表达式,给出EWLS定位... 针对Quasi-UDG模型下无线传感器网络随机部署的拓扑特征,提出了一种非测距基于权重的定位算法EWLS(Enhanced Weighted Least Square).首先,设计出一种节点跳数和距离关系估计的方法,然后依据跳数值与距离关系的概率表达式,给出EWLS定位算法中节点测量距离信息的权重.仿真实验表明,在不同的锚节点密度、Quasi-UDG模型因子和平均邻居节点数的参数下,EWLS算法定位误差较小,同最小均方误差相比,有效地提高了节点定位的精度. 展开更多
关键词 无线传感器网络 非测距定位 Quasi—udg模型 跳数和距离的关系
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不依赖连接反应的高通量克隆方法 被引量:5
19
作者 李华琴 林陈水 张文倩 《氨基酸和生物资源》 CAS 2013年第4期43-46,共4页
基因表达及功能分析需要高通量的表达系统,因而简单、经济且高效地将PCR产物或其他来源的目的基因片段构建到质粒载体中就成为了亟需解决的问题。传统克隆方法使用限制性内切酶和连接酶,其缺点是受到基因序列中原有的酶切位点的限制以... 基因表达及功能分析需要高通量的表达系统,因而简单、经济且高效地将PCR产物或其他来源的目的基因片段构建到质粒载体中就成为了亟需解决的问题。传统克隆方法使用限制性内切酶和连接酶,其缺点是受到基因序列中原有的酶切位点的限制以及依赖连接酶导致的较低的连接转化率。为了克服这些缺点,一些不需要限制酶和连接酶的克隆方法被开发出来并运用到基因克隆中,获得了更佳的实验结果。该文就LIC、UDG克隆和Gateway重组克隆这三种不依赖连接反应的高通量克隆方法的原理及特性进行介绍。 展开更多
关键词 不依赖连接克隆 Gateway重组克隆 udg克隆
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防气溶胶污染的UDG-LAMP-LFD核酸检测体系的建立 被引量:1
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作者 陈星湘 费樱 +3 位作者 黄月明 汪浪 王榕 吴青青 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第2期147-152,共6页
目的 建立一种基于热敏UDG酶防污染的、环介导等温扩增(LAMP)技术及横向流动试纸条(LFD)联合使用的核酸检测方法,实现对HPV18的快速、可视化检测。方法 使用LAMP在线引物设计软件设计HPV18特异性引物,同时引入热敏UDG酶,建立UDG-LAMP检... 目的 建立一种基于热敏UDG酶防污染的、环介导等温扩增(LAMP)技术及横向流动试纸条(LFD)联合使用的核酸检测方法,实现对HPV18的快速、可视化检测。方法 使用LAMP在线引物设计软件设计HPV18特异性引物,同时引入热敏UDG酶,建立UDG-LAMP检测体系,优化T/U碱基比例,设置对照试验验证热敏UDG酶防污染能力;根据LFD要求,设计特异性同化探针及淬灭探针,建立UDG-LAMP-LFD核酸检测体系并对LAMP反应时间进行优化;对该体系进行灵敏度、特异性及临床样品的验证,并与QPCR结果进行比较。结果 优化的LAMP反应时间为40 min, T/U比例为1∶1;热敏UDG酶孵育时间为10 min,防污染效果显著;LFD结果判读耗时5 min,整个检测时间为55 min。该UDG-LAMP-LFD核酸检测体系在以HPV18作为检测对象时,灵敏度10^(3)拷贝/μl;29例临床样品的验证结果与QPCR检测结果完全一致。结论 建立的UDG-LAMP-LFD检测体系可快速、特异、灵敏、可视化的检测HPV18,同时可避免气溶胶污染导致的假阳性。该方法对实验设备及工作人员要求较低,适合在偏远地区及基层医院使用。 展开更多
关键词 热敏udg 环介导等温扩增技术 横向流动试纸条 人乳头瘤病毒18型 气溶胶污染
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