八宝丹对骨肉瘤细胞U-2OS的抑制增殖和诱导凋亡实验研究 被引量：8

1

作者 周忠 林建华 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2006年第S2期93-95,共3页

目的:探讨八宝丹(BBD)对骨肉瘤U-2OS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:应用形态学观察、Ki-67染色、MTT实验检测八宝丹对细胞增殖的抑制,原位末端标记、电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测细胞凋亡。结果:MTT实验显示八宝丹抑... 目的:探讨八宝丹(BBD)对骨肉瘤U-2OS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:应用形态学观察、Ki-67染色、MTT实验检测八宝丹对细胞增殖的抑制,原位末端标记、电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测细胞凋亡。结果:MTT实验显示八宝丹抑制U-2OS细胞的增殖呈时间、浓度依赖的方式,实验组Ki-67指数降低,TUNEL检测阳性,琼脂糖凝胶电泳出现DNA的片段化,流式细胞仪可以检测到凋亡峰,随着作用时间延长和浓度增加,凋亡率增高;电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体。结论:八宝丹对骨肉瘤细胞U-2OS有抑制增殖和诱导凋亡作用,其作用表现出时间和剂量依赖关系。 展开更多

关键词 增殖抑制 诱导凋亡 八宝丹 骨肉瘤u-2os细胞

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U-2 OS细胞/CCK-8法测定1型单纯疱疹病毒溶瘤活性 被引量：5

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作者 胡金盼 李永红 +4 位作者 史新昌 李响 于雷 郑红梅 饶春明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期31-36,共6页

目的:建立U-2 OS细胞/CCK-8比色法,用于测定1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)溶瘤活性。方法:选择3株对HSV-1敏感的的细胞株,在细胞培养板上以梯度浓度的HSV-1感染一定时间后,加入CCK-8进行显色,用酶标仪检测后采用... 目的:建立U-2 OS细胞/CCK-8比色法,用于测定1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)溶瘤活性。方法:选择3株对HSV-1敏感的的细胞株,在细胞培养板上以梯度浓度的HSV-1感染一定时间后,加入CCK-8进行显色,用酶标仪检测后采用四参数曲线法进行量效关系拟合。在选择出量效关系最好的细胞株基础上,对方法的各项实验条件进行优化,并采用活性测定标准品对结果进行校正分析。对建立的方法初步验证准确性和精密度,并用上述方法对3批样品的溶瘤活性进行检测。结果:优化后的实验采用U-2 OS细胞株,1∶4的样品系列稀释比例,5×10^4 PFU·mL^-1的样品系列稀释初始浓度,每孔2.5×10^4个细胞的铺板数量,72 h感染时间和4 h CCK-8试剂反应时间等条件进行样品测定,得到的四参数方程拟合的量效关系曲线R^2大于0.99,信噪比较高,初步验证结果显示该方法的回收率为113.4%,日间精密度分析的几何变异系数(GCV)为21.8%。3批测试样品的溶瘤活性分别为3.52×10^3、3.93×10^4和1.61×10^5 U·mL^-1。结论:建立的U-2 OS细胞/CCK-8法可用于以HSV-1为载体的基因治疗药物溶瘤活性测定。 展开更多

关键词 1型单纯疱疹病毒(HSV-1) 溶瘤活性 标准品校正 量效关系拟合 四参数曲线法 u-2 os细胞 CCK-8显色法

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枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用

3

作者 唐捷 张丕军 +1 位作者 林维 李超艺 《中国药业》 CAS 2022年第4期37-43,共7页

目的探讨枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用。方法分别以0,5,10,20,40,80,160μmol/L的枸橘苷处理U-2 OS细胞,检测细胞活力并计算枸橘苷对U-2 OS细胞的半数抑制浓度(IC_(50));U-2 OS细胞实验分为空白对照组[等体积磷酸盐缓冲液(PBS)... 目的探讨枸橘苷对人骨肉瘤U-2 OS细胞的抑制作用。方法分别以0,5,10,20,40,80,160μmol/L的枸橘苷处理U-2 OS细胞,检测细胞活力并计算枸橘苷对U-2 OS细胞的半数抑制浓度(IC_(50));U-2 OS细胞实验分为空白对照组[等体积磷酸盐缓冲液(PBS)]和枸橘苷高、低剂量组(52,26μmol/L),慢病毒转染细胞实验分为枸橘苷组(A组,52μmol/L)、空白对照组(B组,等体积PBS)、枸橘苷对照组(C组,52μmol/L+50 MOI pLVX-EGFP-C1)、枸橘苷+FBXO2组(D组,52μmol/L+50 MOI pLVX-EGFP-C1-FBXO2)。采用CCK-8法检测细胞活力,集落形成实验检测细胞增殖情况,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞FBXO2 mRNA表达水平,Western blot法检测细胞FBXO2,LC3Ⅰ,LC3Ⅱ,Beclin1,p62,p-STAT3,STAT3蛋白表达水平。结果枸橘苷对U-2 OS细胞的IC_(50)为52.08μmol/L。与空白对照组比较,枸橘苷高、低剂量组细胞在24,48,72 h时的细胞活力显著减弱(P<0.05),克隆形成数显著减少(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),p62蛋白表达水平、FBXO2 mRNA和蛋白表达水平、p-STAT3/STAT3均显著降低(P<0.05);与C组比较,D组细胞在24,48,72 h时的活力显著增强(P<0.05),克隆形成数显著增加(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),p62蛋白表达水平、FBXO2 mRNA和蛋白表达水平、p-STAT3/STAT3均显著升高(P<0.05)。结论枸橘苷可抑制U-2 OS细胞的增殖,并促进其自噬,其机制可能与抑制FBXO2的表达从而抑制STAT3通路激活有关。 展开更多

关键词 骨肉瘤细胞 u-2 os细胞 枸橘苷 FBXO2 增殖 自噬

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新型钌(Ⅱ)配合物抑制人骨肉瘤U-2OS细胞增殖及其机制

4

作者 文晖龙 刘四红 +2 位作者 徐绘华 梁俊波 郭奇峰 《解剖学研究》 CAS 2015年第3期209-213,222,共6页

目的研究新型钌（Ⅱ）多吡啶配合物[Ru（dmp）2Nadpip]（Cl O4）2（Ru 1）对人骨肉瘤U-2 OS细胞增殖抑制及相关机制。方法 MTS法检测细胞增殖抑制情况,DAPI染色观察细胞吸收Ru1作用部位情况,Hoechst-33258染色观察Ru1作用后细胞核的形... 目的研究新型钌（Ⅱ）多吡啶配合物[Ru（dmp）2Nadpip]（Cl O4）2（Ru 1）对人骨肉瘤U-2 OS细胞增殖抑制及相关机制。方法 MTS法检测细胞增殖抑制情况,DAPI染色观察细胞吸收Ru1作用部位情况,Hoechst-33258染色观察Ru1作用后细胞核的形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期情况。结果 （6.25~100.00）μmol/L的Ru 1均能不同程度抑制骨肉瘤细胞增殖,其24、48、72 h半数抑制浓度（IC50）分别为113.26、45.52、41.00μmol/L,对骨肉瘤细胞增殖抑制作用呈时间-剂量依赖关系。细胞吸收结果显示Ru 1能进入细胞质,聚集并作用于细胞核内。药物处理后的细胞经Hoechst-33258染色,细胞核出现致密浓染,或呈碎块状致密浓染。100.0、50.0、25.0μmol/L Ru 1作用于细胞48 h后的凋亡率分别为（38.51±3.72）%、（21.13±2.03）%、（11.75±2.54）%,与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。流式检测药物作用后的U-2 OS细胞呈现G0/G1期阻滞,并呈时间-剂量依赖效应。结论 Ru 1能抑制U-2 OS细胞增殖,诱导其发生凋亡并呈现G0/G1期阻滞,均与时间、剂量正相关。 展开更多

关键词 钌(Ⅱ)多吡啶配合物 u-2os细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期

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中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-2OS细胞诱导凋亡的作用 被引量：14

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作者 张俐 于波 林建华 《中国骨伤》 CAS 2009年第4期265-268,共4页

目的:研究中药片仔癀对骨肉瘤U-2OS细胞的诱导凋亡作用。方法:①采用1月龄SD大鼠16只,雌雄各半,体重120g左右,随机分为2组(空白血清组和片仔癀治疗组),每组8只。空白血清组大鼠灌服PBS,片仔癀治疗组大鼠灌服中药片仔癀溶液。②人骨肉瘤U... 目的:研究中药片仔癀对骨肉瘤U-2OS细胞的诱导凋亡作用。方法:①采用1月龄SD大鼠16只,雌雄各半,体重120g左右,随机分为2组(空白血清组和片仔癀治疗组),每组8只。空白血清组大鼠灌服PBS,片仔癀治疗组大鼠灌服中药片仔癀溶液。②人骨肉瘤U-2OS细胞培养于含10%胎牛血清,青霉素100IU/ml,链霉素100μg/ml的RPMI1640培养液中,置于37℃、5%CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养。用MTT法检测不同含药血清浓度对骨肉瘤U-2OS细胞增殖的影响,筛选对骨肉瘤U-2OS细胞作用最佳的片仔癀含药血清浓度。③在倒置相差显微镜和电镜下观察骨肉瘤U-2OS细胞形态。④TUNEL原位末端标记法检测细胞的凋亡。⑤提取基因DNA,琼脂糖凝胶电泳,以DNA琼脂糖凝胶电泳和透射电镜检测细胞凋亡。结果:①20%片仔癀含药血清对骨肉瘤细胞的增殖抑制作用最佳。②倒置相差显微镜观察可见空白血清组细胞呈梭形贴壁生长,在20%片仔癀胶囊含药血清组,可见部分细胞体积变小、变圆,细胞膜完整但出现发泡现象,折光性增强。随作用时间延长,变圆细胞逐渐增多,部分贴壁细胞皱缩、变圆、脱落,可见坏死细胞及碎片。③20%片仔癀胶囊含药血清组TUNEL检测阳性。④DNALadder电泳结果:含药血清组细胞基因DNA凝胶电泳出现明显的梯状带。⑤透射电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体。结论:中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-2OS细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用。 展开更多

关键词 细胞凋亡 中药 片仔癀 骨肉瘤u-2os细胞

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首批1型单纯疱疹病毒溶瘤活性测定国家候选标准品的研制

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作者 秦玺 胡金盼 +7 位作者 李永红 史新昌 丁有学 毕华 韩春梅 郑红梅 饶春明 梁成罡 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期663-670,共8页

目的:研制首批1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 1,HSV-1)溶瘤活性测定国家标准品。方法:按2020年版《中华人民共和国药典》三部相关要求,分别进行HSV-1溶瘤活性测定液体标准品和冻干标准品的制备和质量检测,并使用热加速试验进行... 目的:研制首批1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 1,HSV-1)溶瘤活性测定国家标准品。方法:按2020年版《中华人民共和国药典》三部相关要求,分别进行HSV-1溶瘤活性测定液体标准品和冻干标准品的制备和质量检测,并使用热加速试验进行稳定性考察,以U-2 OS细胞/CCK-8法分别在3家实验室对标准品的溶瘤活性进行协作标定。对比研究液体标准品和冻干标准品,选择其中更为适用的1种作为国家标准品。结果:制备的2种HSV-1溶瘤活性测定标准品的质量检测结果均符合要求,其中冻干标准品水分含量为1.09%,分装精度为0.15%。稳定性试验结果用阿伦尼乌斯公式计算,初步预测液体标准品溶瘤活性在-70℃下降低10%需7.7年;冻干标准品溶瘤活性在-70℃下降低10%需6.1×10^(5)年,其稳定性得到很大提高。3个实验室协作标定进行了共21次测定,液体标准品的溶瘤活性值几何均数为7.08×10^(4)U·mL^(-1),冻干标准品的溶瘤活性值几何均数为1.82×10^(4)U·支^(-1)。HSV-1标准品原液在冻干后溶瘤活性由7.08×10^(4)U·mL^(-1)下降至3.03×10^(4)U·mL^(-1),但因其溶瘤活性在预稀释100倍后仍然出现良好的S型量效关系曲线,并不影响它作为标准品使用的要求。将液体标准品作为样品,用冻干标准品作为标准品进行校准后,3家实验室结果的几何变异系数(GCV)由64.4%下降到29.2%,实验的精密度得到较大提高。结论:该批HSV-1溶瘤活性测定冻干标准品各项指标均符合相关要求,与液体标准品相比更适合作为国家标准品使用,其溶瘤活性赋值为1.82×10^(4)U·支^(-1)。 展开更多

关键词 1型单纯疱疹病毒(HSV-1) u-2 os细胞/CCK-8法 溶瘤活性 标准品 冻干 稳定性

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白芦藜醇对骨肉瘤细胞U-2OS增殖和凋亡的影响及其分子机制 被引量：2

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作者 王浩 唐宁曼 +1 位作者 张雄 王进 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第1期39-44,共6页

目的观察白芦藜醇(resveratrol,Res)对骨肉瘤细胞U-2OS增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞U-2OS,用不同浓度的Res(5、10、20、40、80μmol/L)作用不同时间(24、48、72 h)后,MTT法检测Res对U-2OS细胞增... 目的观察白芦藜醇(resveratrol,Res)对骨肉瘤细胞U-2OS增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞U-2OS,用不同浓度的Res(5、10、20、40、80μmol/L)作用不同时间(24、48、72 h)后,MTT法检测Res对U-2OS细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测Res对细胞周期和凋亡的影响;应用Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3酶活性;Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2和Caspase 3蛋白的表达水平。结果 Res作用24 h时,与空白对照组及DMSO组比较,20和40μmol/L Res组的细胞增殖抑制率、G0/G1和G2/M期的细胞比例、细胞凋亡率、Caspase-3酶活性显著升高(P<0.05),S期细胞比例显著降低(P<0.05);20μmol/L Res组U-2OS细胞中Bax和Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论 Res通过诱导提高Caspase-3酶活性,上调促凋亡基因Bax、Caspase-3及下调抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表达水平,从而抑制U-2OS细胞的增殖,促进其凋亡,为Res治疗骨肉瘤提供了实验依据。 展开更多

关键词 白芦藜醇 骨肉瘤细胞u-2os 细胞增殖 细胞凋亡

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Gab2在人骨肉瘤细胞U2-OS中的表达及意义 被引量：8

8

作者 平勇 邸平山 +3 位作者 李卫兵 李凤梅 陈为一 陈萍萍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期568-571,共4页

目的:探讨Grb2协同结合蛋白2(Gab2)在人骨肉瘤细胞系中的表达及其与人骨肉瘤细胞侵袭转移的关系。方法:应用小RNA干扰技术,将合成的小RNA干扰质粒转染给人骨肉瘤U2-OS细胞,采用Western blotting和RT-PCR法检测转染后Gab2的蛋白和mRNA表... 目的:探讨Grb2协同结合蛋白2(Gab2)在人骨肉瘤细胞系中的表达及其与人骨肉瘤细胞侵袭转移的关系。方法:应用小RNA干扰技术,将合成的小RNA干扰质粒转染给人骨肉瘤U2-OS细胞,采用Western blotting和RT-PCR法检测转染后Gab2的蛋白和mRNA表达水平;体外细胞趋化运动实验和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果:Gab2在人骨肉瘤U2-OS细胞系中高表达,且转染Gab2 siRNA后的细胞(Si Gab2/U2-OS)中Gab2蛋白及mRNA的表达水平低于转染scramble siRNA细胞(Scr/U2-OS)和U2-OS;趋化运动实验发现在10μg/L表皮生长因子(EGF)的诱导下Si Gab2/U2-OS细胞的迁移能力较U2-OS和Scr/U2-OS细胞明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);Si Gab2/U2-OS细胞侵袭并穿透Matrigel膜基质的细胞数量均比Scr/U2-OS细胞和U2-OS细胞少,Si Gab2/U2-OS细胞的体外侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论:利用siRNA干扰技术降低Gab2的表达对人骨肉瘤U2-OS细胞的迁移和侵袭能力有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 Grb2协同结合蛋白2 小干扰RNA 细胞侵袭 u2-os细胞

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LncRNA LOC730101通过Wnt/β-catenin信号通路对骨肉瘤U2OS细胞生物学特性的研究 被引量：8

9

作者 曹亚伟 肖鹏 +3 位作者 孙金鹏 宋晓东 郑飞 吴学建 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2020年第2期161-166,共6页

目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)LOC730101对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法 2019年2月至2019年10月,将体外培养的U2OS细胞分为对照组(正常培养)、阴性组(转染阴性对照)和干扰组(转染靶向LOC730101的干扰序列),采... 目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)LOC730101对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法 2019年2月至2019年10月,将体外培养的U2OS细胞分为对照组(正常培养)、阴性组(转染阴性对照)和干扰组(转染靶向LOC730101的干扰序列),采用RT-PCR检测细胞中LOC730101表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成率,流式细胞仪检测细胞周期分布情况, Transwell小室检测细胞侵袭与迁移,Western blotting法检测细胞中上皮间质转化相关蛋白波形蛋白(Vi- mentin)、N-钙黏附素(N-cadherin)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、c-Myc、细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)和基质金属蛋白酶-7 (MMP-7)蛋白的表达水平。结果进行统计学分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果 与对照组比较,干扰组细胞中LOC730101表达水平(干扰组、对照组分别为0.25±0.03、1.00±0.06,下同)、细胞成活率[(57.65±3.26)%、(100.00±7.39)%]、克隆形成率[(13.03 ± 2.12)%、(25.35±3.58)%]、侵袭细胞数(51.36±3.48、92.85±6.62)、迁移细胞数(77.15 ± 5.05、136.92 ± 15.35)和细胞在S期[(20.54±2.15)%、(28.15±2.38)%]、G2/M期所占百分比[(16.87±2.12)%、(23.36±3.12)%]以及细胞中Vimentin (0.52 ± 0.04、1.17 ± 0.13)、N-cadherin (0.31 ± 0.03、0.65 ± 0.04)、β-catenin (0.42 ± 0.03、0.73 ± 0.04)、c-Myc (0.29±0.03、0.65±0.03)、Cyclin D1 (0.26±0.02、0.58±0.04)、MMP-7蛋白表达水平(分别为0.55± 0.03、0.86±0.06)均明显降低,而细胞在G0/G1期所占百分比[分别为(62.62±5.15)%、(48.46±3.65)%]以及细胞中E-cadherin蛋白的表达水平(分别为0.82±0.06、0.38±0.03)均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);但阴性组的各指标与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 下调LOC730101可抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有 展开更多

关键词 骨肉瘤 LOC730101 细胞增殖 侵袭 迁移 Wnt/β-连环蛋白信号通路 u2os细胞

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Akt激酶抑制剂MK-2206诱导U2OS人骨肉瘤细胞凋亡与自噬 被引量：4

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作者 王雪莹 李照梅 +2 位作者 周运生 郭文莉 王凤泽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1580-1583,共4页

目的:研究Akt抑制剂MK-2206对U2OS细胞凋亡和自噬的影响。方法:采用MTT法检测MK-2206对U2OS细胞活力的影响,DNA片段末端标记试剂盒检测细胞凋亡的变化,免疫印迹法检测细胞内蛋白的表达,用LC3-II的表达量用来确定细胞的自噬水平。结果:MK... 目的:研究Akt抑制剂MK-2206对U2OS细胞凋亡和自噬的影响。方法:采用MTT法检测MK-2206对U2OS细胞活力的影响,DNA片段末端标记试剂盒检测细胞凋亡的变化,免疫印迹法检测细胞内蛋白的表达,用LC3-II的表达量用来确定细胞的自噬水平。结果:MK-2206剂量依赖性地降低了U2OS细胞的活力;MK-2206能够促进caspase-9、caspase-3和PARP的活化切割而诱导U2OS细胞发生凋亡;MK-2206给药后可促进细胞内LC3-II的表达,氯喹阻断自噬后明显增强了MK-2206对U2OS细胞活力的抑制作用。结论:Akt抑制剂MK-2206能够诱导U2OS细胞发生凋亡和自噬;抑制自噬可促进MK-2206对U2OS细胞的毒性。 展开更多

关键词 MK-2206 细胞凋亡 细胞自噬 u2os细胞

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胡桃醌通过Caspase-3/GSDME信号通路诱导骨肉瘤细胞焦亡

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作者 赵杰瑞 张钰涵 +5 位作者 王馨 郭玉苗 陈姝彤 王一 吴其标 彭鹏 《广东药科大学学报》 CAS 2024年第5期8-14,共7页

目的探讨胡桃醌诱发焦孔素E(Gasdermin E,GSDME)依赖性细胞焦亡对骨肉瘤细胞(U2OS细胞)增殖的影响及相关机制。方法体外培养U2OS细胞,用CCK-8法检测不同浓度胡桃醌处理24 h后对细胞存活率的影响,倒置显微镜观察胡桃醌处理后U2OS细胞形... 目的探讨胡桃醌诱发焦孔素E(Gasdermin E,GSDME)依赖性细胞焦亡对骨肉瘤细胞(U2OS细胞)增殖的影响及相关机制。方法体外培养U2OS细胞,用CCK-8法检测不同浓度胡桃醌处理24 h后对细胞存活率的影响,倒置显微镜观察胡桃醌处理后U2OS细胞形态的变化,流式细胞术检测线粒体膜电位的变化,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞的LDH释放量,Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Parp1)以及GSDME、GSDME-N、caspase-3、cleave-Caspase-3相关蛋白水平变化,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测细胞因子白介素IL-1β和IL-18。结果与对照组相比,不同浓度胡桃醌明显抑制细胞增殖(P<0.05,P<0.01),IC50为19.4μmol/L;倒置显微镜下观察到胡桃醌处理后的细胞出现肿胀、吐泡现象;诱导U2OS细胞线粒体膜电位降低,并使LDH释放增加(P<0.05,P<0.01);ELISA实验表明胡桃醌可以上调IL-1β和IL-18的表达水平;Western blot实验结果显示,胡桃醌能明显上调Bax和Parp、cleave-Caspase-3、GSDME-N的表达,降低BCL-2的表达。结论胡桃醌可抑制骨肉瘤细胞增殖,其机理可能是通过激活Bax/Caspase-3/GSDME信号通路介导细胞焦亡发挥作用。 展开更多

关键词 胡桃醌 骨肉瘤 u2os细胞 Caspase-3/GSDME 细胞焦亡

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汉黄芩素体外抗骨肉瘤作用的研究 被引量：4

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作者 陈新美 贾强 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2009年第36期2813-2814,共2页

目的:研究汉黄芩素的体外抗骨肉瘤作用。方法:应用MTT比色法测定汉黄芩素对U2OS细胞活性的影响,检测其抑制骨肉瘤细胞的时间效应和剂量效应;应用形态学观察、流式细胞仪测定汉黄芩素对U2OS细胞的凋亡作用,并进行细胞周期的分析。结果:... 目的:研究汉黄芩素的体外抗骨肉瘤作用。方法:应用MTT比色法测定汉黄芩素对U2OS细胞活性的影响,检测其抑制骨肉瘤细胞的时间效应和剂量效应;应用形态学观察、流式细胞仪测定汉黄芩素对U2OS细胞的凋亡作用,并进行细胞周期的分析。结果:汉黄芩素对U2OS细胞具有生长抑制及诱导凋亡作用,且呈时间和剂量依赖性。细胞在G0/G1期生长受到阻滞,出现明显的凋亡峰;有核碎裂、染色体凝集;汉黄芩素对U2OS细胞的IC50为(37.18±1.57)μmol.mL-1。结论:汉黄芩素对骨肉瘤U2OS细胞的增殖有抑制及促进凋亡的作用。 展开更多

关键词 汉黄芩素 u2os细胞 凋亡

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三七总皂苷通过阻断Notch1通路抑制U2OS骨肉瘤细胞的增殖、侵袭和迁移并促进其凋亡 被引量：4

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作者 徐慧 许涛 +3 位作者 方梦影 周智敏 马童童 常林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期716-721,共6页

目的探讨三七总皂苷(PNS)对U2OS人骨肉瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭迁移生物学行为的影响及机制。方法培养U2OS人骨肉瘤细胞,采用(0、200、400、600、800、1000)μg/mL PNS处理细胞后,CCK-8法检测骨肉瘤细胞的增殖,异硫氰酸荧光素标记的膜... 目的探讨三七总皂苷(PNS)对U2OS人骨肉瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭迁移生物学行为的影响及机制。方法培养U2OS人骨肉瘤细胞,采用(0、200、400、600、800、1000)μg/mL PNS处理细胞后,CCK-8法检测骨肉瘤细胞的增殖,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,集落形成实验检测细胞的集落形成能力,TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭、TranswellTM迁移实验和划痕愈合实验检测细胞迁移;Western blot法检测U2OS细胞缺刻基因1(Notch1)、发状分裂增强子1(Hes1)的蛋白表达。结果与对照组相比,PNS可以呈剂量依赖性抑制U2OS细胞的增殖与集落形成,细胞凋亡率增加,细胞侵袭、迁移能力减弱,细胞Notch1及Hes1的蛋白水平降低。结论PNS通过阻断Notch1的信号通路抑制U2OS骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移并促进其凋亡。 展开更多

关键词 三七总皂苷(PNS) u2os骨肉瘤细胞 缺刻基因1(Notch1)

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穿心莲内酯对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞株增殖、侵袭、迁移的影响及机制 被引量：3

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作者 柳勋法 马凤清 张翠灵 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第5期536-541,共6页

目的探讨穿心莲内酯(AG)对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞株增殖、侵袭及迁移的影响和机制。方法取对数生长期的人骨肉瘤细胞HOS、U2OS细胞株,分别予不含AG及10、20 mmol/L AG处理72 h,采用细胞增殖实验检测各组HOS、U2OS细胞0、24、48及72 h的... 目的探讨穿心莲内酯(AG)对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞株增殖、侵袭及迁移的影响和机制。方法取对数生长期的人骨肉瘤细胞HOS、U2OS细胞株,分别予不含AG及10、20 mmol/L AG处理72 h,采用细胞增殖实验检测各组HOS、U2OS细胞0、24、48及72 h的吸光度,采用划痕试验和Transwell法分别检测各组HOS、U2OS细胞处理48 h的迁移能力和侵袭能力,采用Western blot检测各组HOS、U2OS细胞处理72 h的周期素依赖性激酶4(CDK4)和CDK6蛋白表达。结果20 mmol/L AG组HOS、U2OS细胞培养24、48及72 h的吸光度低于不含AG组和10 mmol/L AG组,差异均有统计学意义(P<0.05);20 mmol/L AG组HOS、U2OS细胞的侵袭数目及迁移率分别低于不含AG组和10 mmol/L AG组,差异均有统计学意义(P<0.05);20 mmol/L AG组HOS、U2OS细胞CDK4、CDK6蛋白水平分别低于不含AG组和10 mmol/L AG组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论AG可抑制人骨肉瘤HOS、U2OS细胞株的增殖、侵袭及迁移能力,其机制可能与调控细胞内CDK4、CDK6表达有关。 展开更多

关键词 细胞增殖 细胞运动 穿心莲内酯 人骨肉瘤 Hos细胞 u2os细胞 侵袭

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RNA干扰神经膜蛋白2基因表达对骨肉瘤细胞生物学特性的影响 被引量：3

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作者 张凌飞 邵林 李丽 《临床和实验医学杂志》 2018年第12期1275-1278,共4页

目的探究神经膜蛋白2(NRSN2)对骨肉瘤U2-OS细胞增殖、侵袭、迁移的影响以及作用机制。方法实验分为对照组、siRNA阴性组、siRNA-NRSN2组。对照组为常规培养的细胞,siRNA阴性组和siRNA-NRSN2组通过siRNA技术干扰骨肉瘤细胞中NRSN2基因的... 目的探究神经膜蛋白2(NRSN2)对骨肉瘤U2-OS细胞增殖、侵袭、迁移的影响以及作用机制。方法实验分为对照组、siRNA阴性组、siRNA-NRSN2组。对照组为常规培养的细胞,siRNA阴性组和siRNA-NRSN2组通过siRNA技术干扰骨肉瘤细胞中NRSN2基因的表达,分别将siRNA-NC和siRNA-NRSN2转染入U2-OS细胞。CCK-8实验检测干扰NRSN2基因表达对细胞增殖的影响。Transwell小室法检测干扰NRSN2对骨肉瘤U2-OS细胞侵袭、迁移的影响。采用免疫印迹试验(Western Blot)检测NRSN2、钙黏蛋白E(E-cadherin)、钙黏蛋白N(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)水平。结果与对照组相比,siRNA-NRSN2组U2-OS细胞中NRSN2蛋白的表达量显著降低(P<0.05)。干扰NRSN2表达显著抑制U2-OS细胞增殖(P<0.05),降低其侵袭、迁移能力(P<0.05),显著增加Ecadherin蛋白水平,明显降低N-cadherin、Vimentin蛋白水平(P<0.05)。结论干扰NRSN2通过抑制上皮-间质转化(EMT)的发生,阻碍骨肉瘤U2-OS细胞的增殖、侵袭、迁移。 展开更多

关键词 骨肉瘤 神经膜蛋白2 上皮-间质转化 u2-os细胞

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顺铂对人骨肉瘤U2OS细胞增殖、迁移和凋亡的影响 被引量：2

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作者 陈继铭 蒋华生 +5 位作者 陈祝明 邹尚浏 黄虹铭 吴晓静 李琴 何生 《广东医科大学学报》 2020年第4期386-390,共5页

目的探讨顺铂(DDP)对人骨肉瘤U2OS细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法U2OS细胞用不同浓度(10、20、40μmol/L)DDP处理6、12、24、48、72 h,分别用划痕实验、CCK-8法、流式细胞术、Western blot观察细胞迁移、增殖、凋亡、凋亡相关蛋白变... 目的探讨顺铂(DDP)对人骨肉瘤U2OS细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法U2OS细胞用不同浓度(10、20、40μmol/L)DDP处理6、12、24、48、72 h,分别用划痕实验、CCK-8法、流式细胞术、Western blot观察细胞迁移、增殖、凋亡、凋亡相关蛋白变化。结果U2OS细胞迁移能力随DDP浓度增大、时间延长而降低。DDP作用24 h后,U2OS细胞生长活性随着DDP浓度增加而下降(P<0.01或0.05),而细胞凋亡率明显升高(P<0.01或0.05)。U2OS细胞凋亡相关蛋白cleaved-PARP、p-ERK/ERK、caspase-9、Bax表达随DDP浓度升高而增加(P<0.01),而Bcl-2表达减少(P<0.01)。结论DDP可抑制U2OS细胞增殖和迁移,并通过上调cleaved-PARP、p-ERK/ERK、caspase-9、Bax表达及下调Bcl-2表达促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 u2os细胞 顺铂 增殖 凋亡

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转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2 shRNA的人骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡能力观察 被引量：2

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作者 于云祥 龚泰芳 +2 位作者 刘小涛 柯文 李彬彬 《山东医药》 CAS 2020年第12期10-13,共4页

目的观察转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)shRNA的骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡的变化。方法以qRT-PCR法和Western blotting法分别检测人骨肉瘤细胞(U2-OS、MG-63、SaOS-2)和人正常成骨细胞(h FOB1.19)中ATAD2 mRNA、蛋白。在U2-OS细... 目的观察转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)shRNA的骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡的变化。方法以qRT-PCR法和Western blotting法分别检测人骨肉瘤细胞(U2-OS、MG-63、SaOS-2)和人正常成骨细胞(h FOB1.19)中ATAD2 mRNA、蛋白。在U2-OS细胞中转染ATAD2 shRNA慢病毒载体,采用qRT-PCR法和Western blotting法检测转染效果,CCK8方法检测细胞增殖变化,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数目,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-Caspase-3)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK2)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(C-Caspase-9)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白。结果骨肉瘤细胞中ATAD2 mRNA、蛋白表达水平高于正常成骨细胞(P均<0.05)。ATAD2 shRNA慢病毒载体转染后的骨肉瘤细胞中ATAD2表达水平下降(P<0.05)。转染ATAD2 shRNA后的骨肉瘤细胞增殖能力和克隆形成能力均降低,细胞G1期比例升高,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达升高,CDK2、CyclinD1蛋白表达降低(P均<0.05)。结论转染ATAD2 shRNA可抑制U2-OS细胞增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 三磷酸腺苷酶家族蛋白2 shRNA慢病毒载体 骨肉瘤 u2-os细胞 细胞增殖能力 细胞凋亡能力

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HTLV-1病毒蛋白Tax对U-2 OS骨肉瘤细胞有丝分裂的影响 被引量：2

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作者 蒋贤杰 高林枫 +1 位作者 武敏 张渝君 《兰州大学学报（医学版）》 CAS 2017年第3期7-12,共6页

目的研究人1型T淋巴细胞白血病病毒(HTLV-1)所编码的病毒蛋白Tax对骨肉瘤细胞生长周期的影响。方法通过构建慢病毒表达载体在人骨肉瘤细胞株U-2 OS中表达Tax;荧光显微镜检测表达Tax所引起的骨肉瘤细胞形态和细胞分裂的变化;流式细胞方... 目的研究人1型T淋巴细胞白血病病毒(HTLV-1)所编码的病毒蛋白Tax对骨肉瘤细胞生长周期的影响。方法通过构建慢病毒表达载体在人骨肉瘤细胞株U-2 OS中表达Tax;荧光显微镜检测表达Tax所引起的骨肉瘤细胞形态和细胞分裂的变化;流式细胞方法分析表达Tax对骨肉瘤细胞周期产生的影响。结果与亲本骨肉瘤细胞比较,表达Tax的骨肉瘤细胞形态由正常的椭圆形转化为长梭形;出现了胞质分裂异常;有双核或多核细胞形成;细胞的生长周期在G2/M期发生了停滞。结论 Tax的表达破坏了骨肉瘤细胞有丝分裂的胞质分裂过程,造成异倍体现象的出现,使细胞停滞在有丝分裂的晚期。这或许是HTLV-1感染导致正常细胞转化为癌细胞的原因之一。 展开更多

关键词 人1型T淋巴细胞白血病病毒 u-2 os骨肉瘤细胞 TAX 胞质分裂异常

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Atg2基因敲除对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和迁移的影响

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作者 古丽妮尕尔·司马义 伊力亚斯·艾萨 +3 位作者 张金佩 刘世玉 席庆 米娜 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第10期1273-1277,共5页

目的 探讨自噬相关基因2(Autophagy-related gene 2,Atg2)对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和迁移的影响。方法 蛋白质免疫印迹法鉴定两组细胞,即腺病毒介导CRISPR/Cas9系统靶向剪切AAVS1位点的基因未敲除组(AAVS1细胞)和Atg2ab基因双敲除组(Atg2... 目的 探讨自噬相关基因2(Autophagy-related gene 2,Atg2)对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和迁移的影响。方法 蛋白质免疫印迹法鉴定两组细胞,即腺病毒介导CRISPR/Cas9系统靶向剪切AAVS1位点的基因未敲除组(AAVS1细胞)和Atg2ab基因双敲除组(Atg2ab DKO细胞);细胞划痕实验和Transwell小室法检测两组细胞的迁移能力;CCK-8法和细胞平板克隆形成实验检测两组细胞的增殖能力。结果 Atg2ab DKO细胞在24、48及72 h的光密度值(OD值)均较对照AAVS1细胞有所降低,但在72 h时,两种细胞的OD值差异有统计学意义(P<0.01)。Atg2ab DKO细胞形成的克隆数量少于对照组AAVS1细胞(6.33±2.31 vs15.00±1.00),差异有统计学意义(P<0.01)。Atg2ab DKO细胞创面愈合率(0.22±0.05)%显著低于对照组AAVS1细胞(0.82±0.05)%,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组AAVS1细胞相比,Atg2ab DKO细胞穿过Transwell小室的细胞数量显著减少(308.11±64.68 vs 79.78±48.95)(P<0.01)。结论 Atg2基因敲除有效抑制U2OS细胞的迁移和增殖等生物学功能,Atg2基因可能在人骨肉瘤发展中发挥重要作用。 展开更多

关键词 Atg2 u2os细胞 细胞增殖 细胞迁移

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人端粒酶逆转录酶基因转染U2OS细胞对其基质金属蛋白酶2活性的影响 被引量：1

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作者 姜成威 杨媚 +2 位作者 石英爱 于晓霞 吴珊 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期812-816,共5页

目的:观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转染U2OS细胞对其基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,探讨hTERT基因与端粒酶的关系及端粒酶活性在肿瘤浸润和转移中的作用。方法:利用重组质粒PCI-Neo-hTERT转染人骨肉瘤细胞系U2OS,选取转染的2个阳性... 目的:观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转染U2OS细胞对其基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,探讨hTERT基因与端粒酶的关系及端粒酶活性在肿瘤浸润和转移中的作用。方法:利用重组质粒PCI-Neo-hTERT转染人骨肉瘤细胞系U2OS,选取转染的2个阳性克隆株进行实验,同时以未转染的U2OS细胞为对照。通过RT-PCR和TRAP-ELISA法检测阳性克隆株hTERT基因的转染效果,明胶酶谱法和RT-PCR检测转染hTERT基因对细胞MMP-2的表达和活性的影响。结果:与对照组比较,2个阳性克隆株可见特异性hTERT表达,并表现出明显的端粒酶活性状态(ΔA>0.2 U)。阳性克隆株MMP-2 mRNA的表达无明显改变(P>0.05),而酶原型MMP-2减少(P<0.01)。结论:hTERT稳定转染克隆U2OS细胞株中异位表达hTERT可以产生端粒酶活性,而且端粒酶活性的出现,可能通过调节MMP的分泌影响细胞外基质成分的降解和构建而对肿瘤的浸润和转移产生一定影响。 展开更多

关键词 HTERT基因 u2os细胞 端粒酶活性 基质金属蛋白酶

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