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黄瓜属Ty1-copia类逆转座子逆转录酶序列的克隆及分析 被引量:18
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作者 江彪 娄群峰 +3 位作者 刁卫平 陈龙正 张万萍 陈劲枫 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1147-1154,共8页
根据Tyl-copia类逆转座子逆转录酶的保守区设计简并引物,通过PCR扩增,从黄瓜属野生种酸黄瓜(Cucumishystrix Chakr.)和栽培黄瓜(CucumissativusL.)中均扩增出260bp左右的目标条带。扩增产物经纯化后克隆于pGEM-T Easy质粒载体... 根据Tyl-copia类逆转座子逆转录酶的保守区设计简并引物,通过PCR扩增,从黄瓜属野生种酸黄瓜(Cucumishystrix Chakr.)和栽培黄瓜(CucumissativusL.)中均扩增出260bp左右的目标条带。扩增产物经纯化后克隆于pGEM-T Easy质粒载体,选择阳性克隆,再经菌落PCR鉴定,然后进行测序及序列分析,获得了21条来源于酸黄瓜和栽培黄瓜的逆转录酶序列,通过核苷酸聚类分为5个家族。这些核苷酸序列具有较高的异质性,主要表现为缺失突变,序列长度变化范围为255~272bp,同源性范围为27.0%~98.1%。翻译成氨基酸后,有4条序列出现终止密码子突变,6条序列表现出移框突变。将这些逆转录酶的氨基酸序列与已登录的不同物种同一类型逆转录酶的氨基酸序列进行聚类分析,表明它们可能有共同的起源。 展开更多
关键词 黄瓜 Ty1-copia类逆转座子 逆转录酶 异质性
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Impact of Low-Energy Ion Beam Implantation on the Expression of Ty1-copia-like Retrotransposons in Wheat(Triticum aestivum) 被引量:6
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作者 押辉远 焦浈 +3 位作者 谷运红 王卫东 秦广雍 霍裕平 《Plasma Science and Technology》 SCIE EI CAS CSCD 2007年第5期626-633,共8页
Retrotransposon-like elements are major constituents of most eukaryotic genomes. For example, they account for roughly 90% of the wheat (Triticum aestivum) genome, Previous study on a wheat strain treated by low-ene... Retrotransposon-like elements are major constituents of most eukaryotic genomes. For example, they account for roughly 90% of the wheat (Triticum aestivum) genome, Previous study on a wheat strain treated by low-energy N^+ ions indicated the variations in AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism ) markers, One such variation was caused by the re-activation of Tyl-copia-like retrotransposons, implying that the mutagenic effects of lowenergy ions might work through elevated activation of retrotransposons, In this paper an expression profile of Tyl-copia-like retrotransposons in wheat treated by low-energy N^+ ions is reported, The reverse transcriptase (RT) domains of these retrotransposons were amplified by reverse-transcriptional polymerase chain reaction (RT-PCR) and sequentially cloned, 42 and 65 clones were obtained from the treated (CL) and control materials (CK), respectively, Sequence analysis of each clone was performed by software. Phylogeny and classification were calculated responding to the sequences of the RT domains. All the results show that there is much difference in the RT domain between the control sample and the treated sample, Especially, the RT domains from the treated group encode significantly more functional ORF (open reading frames) than those from the control sample, This observation suggests that the treated sample has higher activation of retrotransposons, possibly as a consequence of low-energy ion beam irradiation, It also suggests that retrotransposons in the two groups impact the host gene expression in two different ways and carry out different functions in wheat cells. 展开更多
关键词 low-energy ion beam mutation mechanism tyl-copia-like retrotransposons phylogeny gene expression
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组织培养条件下苹果Ty1-copia类逆转座子的转录活性(英文) 被引量:5
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作者 孙俊 房经贵 +2 位作者 陶建敏 蔡斌华 章镇 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期441-445,共5页
研究了苹果基因组中Ty1-copia类逆转座子的转录活性、多样性及其甲基化水平。在培养基MS+2,4-D2mg/L+BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L上诱导了1个月的愈伤组织中用RT-PCR方法检测到了270bp的目的条带,而对照、继代组培苗和不含2,4-D的愈伤中均没... 研究了苹果基因组中Ty1-copia类逆转座子的转录活性、多样性及其甲基化水平。在培养基MS+2,4-D2mg/L+BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L上诱导了1个月的愈伤组织中用RT-PCR方法检测到了270bp的目的条带,而对照、继代组培苗和不含2,4-D的愈伤中均没有目的条带的扩增,说明一定浓度的2,4-D可以诱导苹果中Ty1-copia类逆转座子的表达活性。将目的条带回收、克隆和测序后进行分析:所克隆的21条序列虽都为Ty1-copia类逆转座子逆转录酶保守序列,但存在很大的异质性,21个克隆的核甘酸序列变化范围为196-290bp;翻译成氨基酸后存在缺失、插入、移框和终止密码子突变,7个克隆在氨基酸保守序列‘SLYGLKQ’处有1-2氨基酸位点的突变,说明这些序列对应的逆转录酶多数可能已失去了其原有功能。将21条序列进行聚类分析,除ART20外,其它克隆可聚为3类,并分别与GenBank上某些物种的相应序列同源性很高,表明在不同物种间可能存在逆转座子的横向传递作用。甲基化试验表明苹果基因组内Ty1-copia类逆转座子甲基化水平高。这些都表明Ty1-copia类逆转座子对苹果基因型的多样性及基因组的进化具有重要意义。 展开更多
关键词 苹果 tyl-copia类逆转座子 转录活性 组织培养
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硝普钠(SNP)和茉莉酸甲酯(MeJA)诱导的白桦Ty1-copia类逆转座子的克隆及分析 被引量:2
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作者 梁楠松 曾凡锁 +2 位作者 李博 郭梁 詹亚光 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期69-74,共6页
利用Tvl—copia类逆转座子逆转录酶(RT)的保守区域设计引物,优化了扩增条件后利用RT—PCR从白桦愈伤组织中得到了1条逆转录酶序列。利用硝普钠(SNP)和茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后分别扩增克隆了11条和9条逆转录酶序列。这2l条逆转录... 利用Tvl—copia类逆转座子逆转录酶(RT)的保守区域设计引物,优化了扩增条件后利用RT—PCR从白桦愈伤组织中得到了1条逆转录酶序列。利用硝普钠(SNP)和茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后分别扩增克隆了11条和9条逆转录酶序列。这2l条逆转录酶序列(命名Bprtl-21)变化范围为205—290bp,一致性为71.93%,异质性为1.1%。50.9%,翻译成氨基酸的异质性为0~57.1%。经SNP和MeJA处理的样品中,获得的逆转录酶序列基本是分别聚类.初步证明不同的Tvl-copia类逆转座子能够分别响应不同的信号而被转录激活。分析所获得的21逆转录酶序列和苹果中19务逆转录转座子序列(DQ410748-DQ410766)进化关系发现.逆转录酶基本各自聚类。但是Bprt9、Bprtll和OQ4m750进化关系比较接近,Bprt15、Bprt19、DQ410751和DQ410753聚为一类,证明逆转座子存在水平传递。 展开更多
关键词 白桦 tyl-copia类逆转座子 逆转录酶 转录活性 系统进化 异质性 简并杂交寡核苷酸引物
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瓠瓜Ty1-copia型逆转座子RT基因的分离与序列分析 被引量:1
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作者 赵芹 谢大森 +4 位作者 何晓明 江彪 罗少波 彭庆务 李明珠 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第8期1577-1585,共9页
以3个瓠瓜栽培种为供试材料,利用Ty1-copia逆转座子逆转录酶保守序列设计简并引物,PCR扩增获得260bp左右序列条带,回收产物克隆至T载体进行测序,利用生物信息学软件分析获得的25条逆转录酶序列。结果表明,这些序列长度变化范围为218~267... 以3个瓠瓜栽培种为供试材料,利用Ty1-copia逆转座子逆转录酶保守序列设计简并引物,PCR扩增获得260bp左右序列条带,回收产物克隆至T载体进行测序,利用生物信息学软件分析获得的25条逆转录酶序列。结果表明,这些序列长度变化范围为218~267bp,经DNAStar软件比对同源性在26.1%~99.6%之间,存在高度异质性,主要表现为缺失突变,核苷酸序列聚类分析分为6个家族,家族1与家族3分别占总序列数的24.0%与36.0%。翻译成氨基酸序列后,分别有2条与11条序列发生移码与终止密码子突变。与已发表物种的相应序列构建系统发育进化树,发现瓠瓜Ty1-copia型逆转座子RT序列具有一定保守性,同时也与杨树、草莓、马铃薯等有很近的亲缘关系。本研究为后续利用逆转座子开发分子标记研究瓠瓜遗传变异及进化途径奠定基础。 展开更多
关键词 瓠瓜 Ty1-copia逆转座子 逆转录酶 克隆 序列分析
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矮牵牛Ty1-copia类逆转座子逆转录酶序列的克隆与分析
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作者 魏跃 颜志明 +2 位作者 吴志明 江彪 张蜀宁 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期1627-1632,共6页
采用植物Tyl-cop/a类逆转座子逆转录酶的保守区设计筒井引物,经PCR扩增从矮牵牛(Paun/ahybr/daVflm.)中扩增出260bp左右的目标条带,扩增产物经测序及序列分析,总共获得了24条逆转录酶序列。结果表明,24条逆转录酶序列长度变... 采用植物Tyl-cop/a类逆转座子逆转录酶的保守区设计筒井引物,经PCR扩增从矮牵牛(Paun/ahybr/daVflm.)中扩增出260bp左右的目标条带,扩增产物经测序及序列分析,总共获得了24条逆转录酶序列。结果表明,24条逆转录酶序列长度变化范圈为260—272bp,同源性范圈为49.8%-97%,经核苷破聚类分析分为7个家族。Tyl-cop/a类逆转录酶在序列长度、碱基组成上具有高度异质性,翻译成氨基硬后,有18条序列是完整的,另外6条序列出现终止密码子突变或移框突变。终止密码子突变和移框突变是矮牵牛Tyl-copia类逆转座子商度异质性的童要表现。与已登陆的不同植物物种的Tyl-cop/,,类逆转录酶序列进行同源性分析,结果与部分植物物种具有较高的同源性,可能有共同起源。 展开更多
关键词 矮牵牛tyl-cop a类逆转座子 异质性 同源性
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