树突状细胞的体外培养及其抗癌作用 被引量：8

1

作者 马昌云 吴芳 +1 位作者 孔繁义 周文艳 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第5期483-487,共5页

背景与目的恶性肿瘤患者免疫力低下,缺乏强有力的抗肿瘤免疫应答,其原因是肿瘤细胞的抗原性较弱,而且抗原提呈细胞的功能低下,使肿瘤抗原不能有效地提呈给淋巴细胞。因此如何能有效地诱导出抗肿瘤免疫效应是一个非常关键的问题。本研究... 背景与目的恶性肿瘤患者免疫力低下,缺乏强有力的抗肿瘤免疫应答,其原因是肿瘤细胞的抗原性较弱,而且抗原提呈细胞的功能低下,使肿瘤抗原不能有效地提呈给淋巴细胞。因此如何能有效地诱导出抗肿瘤免疫效应是一个非常关键的问题。本研究通过建立体外培养树突状细胞(dendritic cells,DC)的方法并观察其诱导的抗肺癌作用的研究,为以DC为基础的肺癌免疫瘤苗的临床应用提供实验依据。方法3mol/L氯化钾法提取人肺腺癌细胞GLC-82的可溶性抗原多肽;从人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中用GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导扩增DC,用流式细胞仪FCM及免疫染色法分析鉴定DC;肺癌肿瘤可溶性抗原(tumor soluble antigen,TSA)和超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)联合修饰致敏DC;以联合抗原修饰后的DC、单纯肺癌抗原TSA致敏的DC、单纯超抗原SEA修饰的DC和未经抗原修饰的DC分别与外周血T淋巴细胞共同孵育,刺激T淋巴细胞活化增殖,诱导产生具有识别肺癌抗原的特异性CTL(作为效应细胞分别称为TSA-SEA-DCL、TSA-DCL、SEA-DCL、DCL);采用MTT法检测各效应细胞对靶细胞GLC-82、肺癌CALU-6和人红白血病K562细胞的抗癌活性;镜下观察DC、效应细胞形态及对靶细胞的杀伤过程。结果诱导出高表达CD1a、HLA-DR、CD80具有典型树突状细胞特性的DC;TSA-SEA-DCL对靶细胞GLC-82的杀伤率明显高于TSA-DCL、SEA-DCL及DCL,亦明显高于对K562细胞的杀伤率;与靶细胞共育时镜下发现效应细胞CTL靠近并聚集在肿瘤细胞周围,致使肿瘤细胞发生变性坏死及凋亡。结论本实验方法能成功诱导出具有典型特征的成熟DC,肺癌TSA联合超抗原SEA诱导的DC疫苗对肺癌细胞有高效特异杀伤作用。 展开更多

关键词 树突状细胞 肿瘤可溶性抗原 金黄色葡萄球菌肠毒素A 肺肿瘤 超抗原

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肺癌可溶性抗原致敏的DC诱导CTL特异性杀伤肺癌细胞的实验研究 被引量：6

2

作者 李占清 马昌云 +2 位作者 陈国生 伊雪 邬鹏宇 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期532-535,共4页

目的通过对负载人肺癌GLC-82细胞可溶性抗原的树突状细胞(DC)体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对肺癌细胞的杀伤研究,为以DC为基础的肺癌免疫瘤苗的临床应用提供一定的实验依据。方法通过用3MKCl提取法和弱酸洗脱法获得人肺腺癌细胞G... 目的通过对负载人肺癌GLC-82细胞可溶性抗原的树突状细胞(DC)体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对肺癌细胞的杀伤研究,为以DC为基础的肺癌免疫瘤苗的临床应用提供一定的实验依据。方法通过用3MKCl提取法和弱酸洗脱法获得人肺腺癌细胞GLC-82的可溶性抗原多肽,用GLC-82细胞抗原多肽冲击致敏从人外周血单核细胞(PBMC)中用GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导扩增并经鉴定的DC;利用负载GLC-82细胞抗原多肽的DC,刺激同种异体外周血T淋巴细胞活化增殖,诱导产生具有识别肺癌细胞抗原的特异性CTL;进一步探讨该CTL对GLC-82,肺癌CALU-6和人红白血病K562细胞的体外杀伤效应。结果人PBMC体外经7d诱导出的DC,经光镜、电镜、免疫组化证实具有典型的树突状细胞特性;经GLC-82抗原致敏的DC诱导同种异体T淋巴细胞活化增殖产生CTL,诱导激活的CTL与靶细胞共育时镜下发现CTL靠近并聚集在肿瘤细胞周围,致使肿瘤细胞发生凋亡和坏死。结论肺癌可溶性蛋白抗原能活化致敏DC,无需明确肿瘤特异抗原,获取方法简便可行;联合应用GM-CSF、IL-4和TNF-α诱导人PBMC中的单核细胞,能诱导出功能较强的DC;致敏DC能强烈刺激初始型同种异体T淋巴细胞增殖产生CD8+表达增加的CTL;激活的CTL对肺癌靶细胞发挥高效而特异的细胞毒效应,对非肺组织瘤靶细胞也具有非特异性杀伤效应。 展开更多

关键词 树突状细胞 肿瘤可溶性抗原 细胞毒性T淋巴细胞 肺癌

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可溶性抗原联合超抗原诱导的CTL抗瘤作用的实验研究 被引量：5

3

作者 张庆波 么文博 +4 位作者 徐卫国 苏铁柱 刘洪梅 董雪松 徐丽晓 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第7期1341-1343,共3页

目的:探讨肿瘤可溶性抗原联合超抗原SEC诱导的细胞毒性T细胞(CTLs)对肿瘤细胞杀伤机理。方法:外周血淋巴细胞经肿瘤可溶性抗原、超抗原SEC联合作用,进行体外培养。对其增殖、细胞因子分泌、杀瘤活性和形态学变化进行观察和测定。结果:... 目的:探讨肿瘤可溶性抗原联合超抗原SEC诱导的细胞毒性T细胞(CTLs)对肿瘤细胞杀伤机理。方法:外周血淋巴细胞经肿瘤可溶性抗原、超抗原SEC联合作用,进行体外培养。对其增殖、细胞因子分泌、杀瘤活性和形态学变化进行观察和测定。结果:经肿瘤可溶性抗原、超抗原SEC联合刺激的淋巴细胞组增殖活性最强,诱导的CTLs对靶细胞杀伤活性显著高于单纯淋巴细胞组(P<0.05),对TSA来源的肺癌细胞具有选择性杀伤作用,能够诱导肿瘤细胞出现凋亡的形态学变化。结论:肿瘤可溶性抗原与超抗原SEC联合应用能诱导效应细胞明显增殖、活化、并产生高效特异性的抗肿瘤效果。 展开更多

关键词 淋巴细胞 肿瘤可溶性抗原 金葡素 杀伤活性

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食管癌疫苗抗癌机理研究 被引量：3

4

作者 马淑芹 郑全辉 +4 位作者 张庆波 幺文博 刘洪梅 杨雷 刘丽 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期2066-2069,共4页

目的:对食管癌可溶性抗原和超抗原SEC构建的肿瘤疫苗的抗癌机理进行研究。方法:培养食管癌细胞Eca109,提取其抗原成分,和超抗原金葡素SEC构建成肿瘤疫苗;分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经肿瘤疫苗... 目的:对食管癌可溶性抗原和超抗原SEC构建的肿瘤疫苗的抗癌机理进行研究。方法:培养食管癌细胞Eca109,提取其抗原成分,和超抗原金葡素SEC构建成肿瘤疫苗;分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经肿瘤疫苗联合作用,进行体外培养,进行增殖,成为效应细胞;流式细胞术(FCM)测定效应细胞表型;细胞毒试验检测其杀伤活性,FCM测定效应细胞诱导靶细胞凋亡情况。结果:经肿瘤疫苗刺激的淋巴细胞组增殖活性最强,于72 h达到高峰,并且上调CTLs中CD8^+T细胞群。肿瘤疫苗刺激的淋巴细胞组诱导的CTLs对靶细胞杀伤活性显著高于单纯淋巴细胞组(P<0.01)。经效应细胞作用后,靶细胞的凋亡率为32.44%,而对照组仅6.38%的细胞凋亡,具有统计学差异(P<0.01))。结论:食管癌抗原与超抗原构建的肿瘤疫苗能诱导效应细胞明显增殖、活化、并产生高效、特异的抗肿瘤效果,效应细胞可诱导靶细胞凋亡,从而发挥抗癌作用。 展开更多

关键词 肿瘤疫苗 食管癌 肿瘤可溶性抗原 超抗原SEC 生物治疗

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肿瘤可溶性抗原和金葡菌超抗原构建肿瘤疫苗的基础研究及临床应用 被引量：3

5

作者 王刚 张庆波 +4 位作者 张世伟 王明军 陈力 张晋冀 徐卫国 《中国煤炭工业医学杂志》 2013年第7期1054-1056,共3页

目的探讨肿瘤疫苗在临床应用效果,分析有效成分,为进一步纯化肿瘤疫苗打下良好基础。方法提取肺部肿瘤临床标本的可溶性抗原,和金葡菌超抗原等共同构建肿瘤疫苗,对112例肺癌术后患者(治疗组56例,对照组56例),经3～10年随访,观察临床效果... 目的探讨肿瘤疫苗在临床应用效果,分析有效成分,为进一步纯化肿瘤疫苗打下良好基础。方法提取肺部肿瘤临床标本的可溶性抗原,和金葡菌超抗原等共同构建肿瘤疫苗,对112例肺癌术后患者(治疗组56例,对照组56例),经3～10年随访,观察临床效果;分离提取肿瘤标本中的膜蛋白、DNA、RNA、HSP70以及多肽,分析其有效成分。结果治疗组患者5年生存率高于对照组,其差异有统计学意义(P<0.01);治疗组患者未见全身及局部明显毒副作用;该疫苗的主要有效成分是多肽,膜蛋白也具有免疫活性。结论用该方法构建的肿瘤疫苗用于肺癌术后患者可提高5年生存率,患者耐受性好;该疫苗的主要有效成分是多肽和膜抗原。 展开更多

关键词 可溶性肿瘤抗原 金葡菌超抗原 肿瘤疫苗 肺肿瘤

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食管癌抗原联合金葡素诱导杀瘤性细胞的实验研究 被引量：3

6

作者 李树义 刘洪梅 张庆波 《中国临床医学》 2011年第1期22-24,共3页

目的:体外应用超抗原金葡素C型(SEC)联合食管癌可溶性抗原(TSA)刺激外周血淋巴细胞,诱导产生细胞毒T细胞(CTLs),对肿瘤细胞进行杀伤,探讨其治疗肿瘤的可行性。方法:外周血淋巴细胞经TSA、超抗原SEC联合作用,进行体外培养。用酶联免疫吸... 目的:体外应用超抗原金葡素C型(SEC)联合食管癌可溶性抗原(TSA)刺激外周血淋巴细胞,诱导产生细胞毒T细胞(CTLs),对肿瘤细胞进行杀伤,探讨其治疗肿瘤的可行性。方法:外周血淋巴细胞经TSA、超抗原SEC联合作用,进行体外培养。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法和细胞毒试验测定细胞因子含量和杀伤活性。结果:经TSA与超抗原SEC联合刺激,淋巴细胞增殖活性增强,在刺激后72h达到峰值;与空白对照组相比,SEC、TSA以及SEC与TSA联合刺激,人肿瘤坏死因子α(TNF-α)活性从第1天开始升高,在3d达峰值;并且联合刺激的淋巴细胞组诱导的效应细胞对靶细胞杀伤活性显著高于单纯淋巴细胞组(P<0.05),对TSA来源的食管癌细胞具有选择性杀伤作用。结论:肿瘤可溶性抗原与超抗原SEC联合应用能诱导效应细胞明显增殖、活化、并产生高效特异性的抗肿瘤效果。 展开更多

关键词 淋巴细胞 肿瘤可溶性抗原 超抗原 杀伤活性

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肺癌可溶性抗原联合超抗原诱导的DC疫苗对肺癌细胞杀伤作用的研究 被引量：1

7

作者 马昌云 吴芳 +1 位作者 孔繁义 韩丽荣 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期539-542,共4页

背景与目的通过经肺癌肿瘤可溶性抗原(TSA)和超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合修饰致敏树突状细胞(DC)体外诱导对肺癌细胞杀伤作用的研究,为以DC为基础的肺癌免疫瘤苗的临床应用提供一定的实验依据。方法3MKCl法提取人肺癌可溶性抗... 背景与目的通过经肺癌肿瘤可溶性抗原(TSA)和超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合修饰致敏树突状细胞(DC)体外诱导对肺癌细胞杀伤作用的研究,为以DC为基础的肺癌免疫瘤苗的临床应用提供一定的实验依据。方法3MKCl法提取人肺癌可溶性抗原;从人外周血单个核细胞(PBMC)中诱导扩增DC并鉴定;肺癌TSA和不同质量浓度的SEA联合修饰致敏DC;以联合抗原修饰后的DC、单纯肺癌抗原致敏的DC和未经抗原修饰的DC分别与同种异体T淋巴细胞共同孵育,MTT法测定混合淋巴细胞反应中DC的免疫刺激活性,诱导产生具有识别肺癌抗原的特异性CTL(作为效应细胞分别称为TSA-SEA-DCL、TSA-DCL、DCL);用流式细胞仪FCS及免疫染色法分析鉴定DC和效应细胞表型;MTT法检测各效应细胞对靶细胞体外杀伤效应。结果诱导出表达CD1a,CD80,HLA-DR分子的DC;经肺癌TSA和SEA联合修饰致敏后,上述分子表达上调;联合修饰后的DC具有较强的免疫刺激活性,DC/T比例1:10可能为最适比例;TSA-SEA-DCL中CD3+CD8+细胞的比例大幅度增加;TSA-SEA-DCL对靶细胞GLC-82的杀伤率明显高于TSA-DCL及DCL,亦明显高于对肺癌CALU-6和人红白血病K562细胞的杀伤率。结论经肺癌TSA和SEA联合修饰致敏的DC可诱导同种异体T淋巴细胞活化增殖产生CD8+表达增加的CTL;联合抗原诱导的DC疫苗对肺癌细胞有高效特异性的杀伤作用,肺癌TSA和超抗原SEA联合修饰的DC的活性明显强于单用肺癌TSA修饰。 展开更多

关键词 树突状细胞 肿瘤可溶性抗原 金黄色葡萄球菌肠毒素A 肺癌

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卵巢癌细胞系SKOV3冻融抗原诱导CTL特异性杀瘤效应的研究 被引量：2

8

作者 程琪 朱长焜 +2 位作者 叶枫 陈怀增 谢幸 《实用癌症杂志》 2005年第2期113-115,119,共4页

目的探讨卵巢癌冻融抗原对T淋巴细胞的增殖作用及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在体外杀伤卵巢癌细胞的抗原特异性细胞毒性效应。方法采用免疫磁珠分离法(magneticactivatedcellsorting,MACS)分离纯化正常人外周血CD+3T细胞,体外以SK... 目的探讨卵巢癌冻融抗原对T淋巴细胞的增殖作用及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在体外杀伤卵巢癌细胞的抗原特异性细胞毒性效应。方法采用免疫磁珠分离法(magneticactivatedcellsorting,MACS)分离纯化正常人外周血CD+3T细胞,体外以SKOV3卵巢癌细胞中提取的可溶性肿瘤抗原加以刺激。溴标法检测肿瘤抗原对T细胞增殖的影响;MTT法测定肿瘤抗原诱导的CTL体外杀伤卵巢癌细胞的能力;利用绒毛膜癌细胞抗原对比观察肿瘤抗原诱导CTL杀伤肿瘤细胞的抗原特异性。结果卵巢癌细胞抗原有很强的促进T淋巴细胞增殖的作用,且存在时间依赖性,在24h时促进作用最强。SKOV3抗原诱导的CTL在体外对SKOV3细胞的杀伤率为68.38%,显著高于它对JAR绒毛膜癌细胞的杀伤率(18.31%);而JAR细胞抗原诱导的CTL对JAR和SKOV3细胞的杀伤率分别为61.02%和14.79%,有显著的抗原特异性(P=0.0001)。结论卵巢癌细胞冻融抗原诱导的CTL在体外具有很强的增殖能力和抗原特异性杀伤卵巢癌细胞的作用。 展开更多

关键词 抗原诱导 CTL 卵巢癌细胞系 杀瘤效应 SKOV3细胞 细胞毒性T淋巴细胞 抗原特异性细胞 免疫磁珠分离法 CD3^+细胞 可溶性肿瘤抗原 T淋巴细胞增殖 杀伤肿瘤细胞 体外杀伤 细胞抗原 T细胞增殖 时间依赖性 JAR细胞 特异性杀伤

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食管癌疫苗的研制及临床应用效果观察 被引量：1

9

作者 刘东红 朱丽华 +4 位作者 张庆波 曹秀华 石恩富 丁贺田 刘丽 《中国综合临床》 2015年第7期577-580,共4页

目的探讨食管癌疫苗的抗癌机制及临床应用效果。方法培养食管癌细胞Ecal09，提取其抗原成分和超抗原金黄色葡葡球菌肠毒素C型构建成肿瘤疫苗；分离人外周血单个核细胞（PBMC），与肿瘤疫苗联合作用，进行体外培养增殖，成为效应细胞；... 目的探讨食管癌疫苗的抗癌机制及临床应用效果。方法培养食管癌细胞Ecal09，提取其抗原成分和超抗原金黄色葡葡球菌肠毒素C型构建成肿瘤疫苗；分离人外周血单个核细胞（PBMC），与肿瘤疫苗联合作用，进行体外培养增殖，成为效应细胞；流式细胞仪测定效应细胞表型；细胞毒实验检测其杀伤活性。选取早期食管癌术后患者106例，分为观察组53例，应用食管癌疫苗治疗，对照组53例实施常规治疗。观察对比临床应用效果，对两组患者进行3年随访观察其生存率。结果经肿瘤疫苗刺激的淋巴细胞组增殖活性最强，于72h达到高峰（A值为0．22）；并且上调细胞毒性T细胞（CTLs），CTLs对靶细胞杀伤活性外周血单个核细胞＋超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素C型＋肿瘤可溶性抗原组（97．36-2．11）％显著高于单个核细胞组（79．27-5．57）％，差异有统计学意义（P〈0．01）。3年随访发现观察组生存率[男48．28％（14／29）、女45．83％（11／24）]高于对照组[男21．42％（6／28）、女24．00％（6／25）]，差异有统计学意义（χ^2=5．06、x。6．28，P均〈0．05）。结论食管癌疫苗能诱导效应细胞明显增殖、活化、并产生高效、特异的抗肿瘤效果。临床观察发现其能有效防止食管癌术后患者的复发和肿瘤转移，提高生存率。 展开更多

关键词 肿瘤疫苗 食管癌 肿瘤可溶性抗原 超抗原金黄色葡葡球菌肠毒素C型 生物治疗

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膀胱腔内过继免疫治疗对膀胱局部免疫功能的影响 被引量：1

10

作者 孙东翀 李晓强 +2 位作者 左岭 程爱国 张庆波 《中国综合临床》 北大核心 2001年第6期454-455,共2页

目的观察膀胱腔内细胞过继免疫治疗对膀胱局部免疫功能的影响 ,以探讨一种有效预防浅表性膀胱癌术后复发的新疗法。方法采用盐析法 ,由手术切除的患者自体膀胱肿瘤标本制备膀胱肿瘤可溶性抗原 (BTSA) ,以卡介苗为佐剂 ,共同诱导人外周... 目的观察膀胱腔内细胞过继免疫治疗对膀胱局部免疫功能的影响 ,以探讨一种有效预防浅表性膀胱癌术后复发的新疗法。方法采用盐析法 ,由手术切除的患者自体膀胱肿瘤标本制备膀胱肿瘤可溶性抗原 (BTSA) ,以卡介苗为佐剂 ,共同诱导人外周血单个核细胞成为抗膀胱肿瘤效应细胞 (BT-BAK)细胞。将 BT-BAK细胞应用于肿瘤切除术后浅表性膀胱癌患者的膀胱腔内灌注治疗 ,定期行膀胱镜复查及膀胱粘膜活检 ;采用酶联免疫吸附法测定尿液中细胞因子含量的变化。结果 37例治疗后 ,膀胱粘膜组织学观察显示为轻或中度非特异性炎症性反应 ,仅 1例发现粘膜上皮轻度异型性增生 ,复发率为 2 .7%。治疗后患者尿液中 IL-2、TNF-α及 IFN-γ的水平均较治疗前显著提高。结论 BT-BAK细胞膀胱灌注应用于膀胱癌术后治疗 ,可以有效提高膀胱局部的免疫反应水平 。 展开更多

关键词 膀胱癌 膀胱肿瘤可溶性抗原 过继免疫治疗 卡介苗

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食管癌可溶性抗原和超抗原构建肿瘤疫苗的免疫活性成分分析

11

作者 马淑芹 张庆波 +5 位作者 李博 幺文博 胡万宁 杨雷 王宗会 王静怡 《河北医药》 CAS 2013年第4期485-487,共3页

目的对食管癌可溶性抗原和超抗原SEC构建的肿瘤疫苗中的免疫活性成分进行分析,从而为探讨其抗癌机制打下理论基础。方法提取食管癌抗原,和超抗原SEC构建成肿瘤疫苗;分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),... 目的对食管癌可溶性抗原和超抗原SEC构建的肿瘤疫苗中的免疫活性成分进行分析,从而为探讨其抗癌机制打下理论基础。方法提取食管癌抗原,和超抗原SEC构建成肿瘤疫苗;分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经肿瘤疫苗联合作用,进行体外培养,观察其增殖活性;流式细胞术FCM和细胞毒试验测定效应细胞表型和杀伤活性;提取食管癌细胞中的细胞膜抗原(mAg)、热休克蛋白70(HSP70)、DNA、RNA和细胞内多肽(Peptides),用于诱导PBMC增殖,培养6d,用3H-Tdr掺入法测定细胞增值,确定其有效成分。结果经肿瘤疫苗刺激的PBMC组增殖活性最强,于72h达到高峰,并且特异性刺激CD8+T细胞群增值。肿瘤疫苗刺激的PBMC组诱导的CTLs对靶细胞杀伤活性显著高于单纯PBMC组(P<0.01)。食管癌细胞中的膜抗原和细胞内多肽能显著刺激PBMC增殖。结论食管癌抗原与超抗原构建的肿瘤疫苗能诱导效应细胞明显增殖、活化、并产生高效、特异的抗肿瘤效果,具有免疫活性的成分是细胞中的mAg和细胞内多肽。 展开更多

关键词 肿瘤疫苗 食管癌 肿瘤可溶性抗原 超抗原SEC 生物治疗

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用卵巢癌可溶性抗原体外诱导产生具有肿瘤选择性细胞毒T细胞

12

作者 张庆波 张淑杰 +5 位作者 边洪荣 石卫 李艳芬 万云霞 翟红 陈毓仙 《现代妇产科进展》 CSCD 1998年第1期8-10,共3页

目的：提高治疗卵巢癌的疗效，探讨新的肿瘤生物治疗方法。方法：提取卵巢癌细胞可溶性抗原，用此抗原作细胞免疫体外实验。结果：用卵巢癌可溶性抗原和抗CD3单抗体外诱导产生了具有肿瘤选择性的细胞毒性T细胞，这种细胞体外增殖快，对... 目的：提高治疗卵巢癌的疗效，探讨新的肿瘤生物治疗方法。方法：提取卵巢癌细胞可溶性抗原，用此抗原作细胞免疫体外实验。结果：用卵巢癌可溶性抗原和抗CD3单抗体外诱导产生了具有肿瘤选择性的细胞毒性T细胞，这种细胞体外增殖快，对抗原来源的肿瘤细胞具有选择性杀伤作用，细胞表型分析CD8＋细胞占90％以上。结论；建立了一种新的肿瘤生物治疗方法，并为肿瘤生物治疗和肿瘤疫苗的研制提供了实验基础。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 免疫疗法 CTL 可溶性抗原 诱导 细胞毒

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膀胱癌患者膀胱腔内过继免疫治疗后外周血T细胞亚群的变化

13

作者 孙东翀 丁焕然 +2 位作者 李晓强 左岭 程爱国 《华北煤炭医学院学报》 2001年第3期257-258,共2页

1目的　观察膀胱腔内过继免疫治疗后患者外周血中 T淋巴细胞亚群分布的变化。 2方法　由膀胱肿瘤可溶性抗原与卡介苗 (BCG)共同活化人外周血单个核细胞成为抗膀胱肿瘤特异性杀伤细胞 -BT-BAK细胞。临床随机选择 3 7例膀胱癌术后患者进... 1目的　观察膀胱腔内过继免疫治疗后患者外周血中 T淋巴细胞亚群分布的变化。 2方法　由膀胱肿瘤可溶性抗原与卡介苗 (BCG)共同活化人外周血单个核细胞成为抗膀胱肿瘤特异性杀伤细胞 -BT-BAK细胞。临床随机选择 3 7例膀胱癌术后患者进行膀胱腔内 BT-BAK细胞灌注治疗 ,采用 SAP免疫组化法于治疗前后分别测定患者外周血 T细胞亚群分布的变化。 3结果　治疗 2个疗程后患者外周血 CD3+ 、CD4+ T细胞亚群分别较治疗前增加约 (2 8.5 8± 7.16) %及 (12 .92± 5 .2 2 ) % ,CD8+ T亚群变化不显著。随诊平均 18.16个月 ,仅 1例发现膀胱粘膜轻度异型性增生 ,复发率为 2 .7%。 4结论　 BT-BAK细胞膀胱腔内过继免疫治疗可显著提高膀胱癌患者全身免疫反应能力 ,有效降低患者术后膀胱肿瘤的复发率。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 肿瘤可溶性抗原 BCG 过继免疫治疗 灌注疗法 T细胞亚群

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膀胱癌可溶性抗原诱导细胞毒T细胞的实验研究 被引量：5

14

作者 陈雷 李晓强 +5 位作者 张庆波 袁强 尹淑巧 李涛 左岭 程爱国 《中国煤炭工业医学杂志》 2000年第5期514-515,共2页

目的　观察膀胱癌可溶性抗原诱导细胞毒 T细胞产生 ,为构建膀胱癌疫苗及过继性免疫治疗提供实验基础。方法　提取膀胱癌可溶性抗原 (TSA) ,用 TSA、抗 CD-3单抗、IL -2联合诱导外周血单个核细胞 (PBMC) ,动态观察细胞增殖 ,进行细胞表... 目的　观察膀胱癌可溶性抗原诱导细胞毒 T细胞产生 ,为构建膀胱癌疫苗及过继性免疫治疗提供实验基础。方法　提取膀胱癌可溶性抗原 (TSA) ,用 TSA、抗 CD-3单抗、IL -2联合诱导外周血单个核细胞 (PBMC) ,动态观察细胞增殖 ,进行细胞表型分析和细胞因子测定 ;并与 IL-2诱导的 L AK细胞 ,抗 CD-3单抗、IL -2诱导的 CD3-AK细胞进行比较。结果　实验组细胞第 8d增殖7.5 2倍 ,第 12 d增殖 2 8.92倍 ,第 16 d增殖 32 .8倍 ,第 2 0 d增殖 36 .96倍 ;L AK细胞第 12 d增殖 5 .72倍 ,第 2 0 d增殖 0 .82倍 ;CD3-AK细胞第 12 d增殖 2 4.46倍 ,第 2 0 d增殖 2 7.72倍。实验组与 L AK组、CD3-AK组比较相差有显著性 (P<0 .0 5 )。第 8d实验组细胞表型分析 :CD4+ 细胞为 16 % ,CD8+ 细胞为 89%。第 8d培养上清肿瘤坏死因子 (TNF)活性达到高峰 ,对 L 92 9细胞的细胞毒性为85 .0 8%。结论　 TSA、抗 CD-3单抗、IL-2等诱导 PBMC,产生了以 CD8+ 为主的细胞毒 T细胞 (CTL ) ,这种细胞体外增殖速度快、增殖倍数高、存活时间长 ,并能分泌肿瘤坏死因子。 展开更多

关键词 膀胱癌 可溶性抗原 细胞毒T细胞 过继色疫治疗

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肺癌可溶性抗原联合超抗原修饰致敏DC诱导抗瘤免疫的研究 被引量：4

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作者 马昌云 吴芳 +1 位作者 孔繁义 戴国光 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2010年第1期21-25,共5页

目的观察经肺癌肿瘤可溶性抗原(TSA)和超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合修饰致敏树突状细胞(DC)体外诱导抗肺癌的免疫效应。方法3mol/L氯化钾提取法获得人肺癌细胞GLC-82的可溶性抗原;从人外周血单个核细胞(PBMC)中诱导扩增DC,并... 目的观察经肺癌肿瘤可溶性抗原(TSA)和超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合修饰致敏树突状细胞(DC)体外诱导抗肺癌的免疫效应。方法3mol/L氯化钾提取法获得人肺癌细胞GLC-82的可溶性抗原;从人外周血单个核细胞(PBMC)中诱导扩增DC,并用流式细胞仪(FCM)检测表型;以肺癌TSA和SEA联合修饰致敏的DC、单纯肺癌抗原致敏的DC和未经抗原修饰的DC分别与同种异体外周血T淋巴细胞共同孵育,刺激T淋巴细胞活化增殖(作为效应细胞分别称为TSA-SEA-DCL、TSA-DCL、DCL),直接活细胞计数法观察增殖倍数;MTT法检测不同DC:T淋巴细胞比例的效应细胞对靶细胞GLC-82的体外杀伤效应。结果诱导出高表达CD1a、CD80、HLA-DR的DC,光镜下具有典型的DC特性;联合抗原修饰后的DC具有较强的免疫刺激活性,少量致敏DC即可强烈激发T细胞的增殖;TSA-SEA-DCL对靶细胞GLC-82的杀伤率明显高于TSA-DCL及DCL;联合抗原修饰的DC以1:100与T淋巴细胞共孵后的杀伤肿瘤细胞效应最强。结论经肺癌TSA和SEA联合修饰致敏的DC可强烈激发同种异体T淋巴细胞活化增殖;肺癌TSA联合超抗原SEA诱导的DC疫苗对肺癌细胞有高效杀伤作用,经肺癌TSA与超抗原SEA联合修饰DC的活性明显强于单用肺癌TSA。 展开更多

关键词 树突状细胞 肿瘤可溶性抗原 金黄色葡萄球菌肠毒素A 肺癌

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卵巢癌抗原等诱导杀瘤性免疫细胞的实验研究 被引量：3

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作者 张庆波 刘丽华 +2 位作者 边洪荣 李玉升 燕利学 《实用癌症杂志》 1999年第1期21-23,共3页

为了探讨肿瘤过继细胞免疫治疗和研制肿瘤疫苗的新方法，用卵巢癌细胞（ＣＯＣ１）提取可溶性抗原成份，将其与葡萄球菌超抗原共同诱导外周血单个核细胞，置于含ＩＬ２的培养基中培养，待产生杀瘤性免疫效应细胞后，对这种细胞的某些... 为了探讨肿瘤过继细胞免疫治疗和研制肿瘤疫苗的新方法，用卵巢癌细胞（ＣＯＣ１）提取可溶性抗原成份，将其与葡萄球菌超抗原共同诱导外周血单个核细胞，置于含ＩＬ２的培养基中培养，待产生杀瘤性免疫效应细胞后，对这种细胞的某些生物学特性进行初步研究，并与ＴＡＫ，ＣＤ３ＡＫ，ＬＡＫ细胞进行比较。结果显示培养到第１０ｄ时，实验组效应细胞，ＴＡＫ细胞，ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞的增殖活性分别为４０．２倍，４１．７倍，３２．４倍和２１．５倍；对卵巢癌ＣＯＣ１细胞的细胞毒活性分别为８１．２％，８２．５％，５４．３％和５６．７％。实验组效应细胞对４种卵巢癌细胞ＣＯＣ１，ＣＯＣ２，ＳＫＯＶ３和Ａ２７８０的细胞毒活性分别为８３．１％，５１．４％，３７．６％和４９．７％。结果表明，用ＴＳＡ和超抗原共同诱导产生的免疫效应细胞增殖快，细胞毒活性高，对来源于抗原的肿瘤细胞具有选择性杀伤作用。 展开更多

关键词 卵巢癌 肿瘤可溶性抗原 杀瘤性 免疫细胞 诱导

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BT-BAK细胞和BCG膀胱腔内过继免疫治疗对膀胱癌患者全身免疫功能影响的比较 被引量：1

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作者 李晓强 孙东翀 +1 位作者 左岭 程爱国 《中国煤炭工业医学杂志》 2001年第4期251-253,共3页

目的　观察BT -BAK细胞与BCG膀胱腔内灌注治疗对患者全身免疫功能的影响。方法　由手术切除的膀胱肿瘤标本制备膀胱肿瘤可溶性抗原 ,以BCG为佐剂 ,从PBMNC中诱导出抗膀胱肿瘤特异性细胞毒性BT -BAK细胞 ,临床选择 72例浅表性膀胱癌术后... 目的　观察BT -BAK细胞与BCG膀胱腔内灌注治疗对患者全身免疫功能的影响。方法　由手术切除的膀胱肿瘤标本制备膀胱肿瘤可溶性抗原 ,以BCG为佐剂 ,从PBMNC中诱导出抗膀胱肿瘤特异性细胞毒性BT -BAK细胞 ,临床选择 72例浅表性膀胱癌术后患者随机平均分成 2组分别进行BT -BAK和BCG的膀胱腔内灌注治疗。于不同阶段采用ELISA法测定患者外周血中IL -2、TNF -α及IFN -γ的含量 ;观察治疗后患者PBMNC对T2 4膀胱肿瘤细胞株杀伤活性的变化。结果　BT -BAK组患者血清中IL -2、TNF -α及IFN -γ的水平均较治疗前明显提高 (P <0 .0 1 ) ;患者PBMNC对T2 4膀胱肿瘤细胞株的杀伤活性显著增强 (P <0 .0 1 )。BT -BAK组上述指标均高于BCG组 (P <0 .0 5)。平均随访 1 8.1 6个月 ,两组的复发率分别为 2 .7%和 1 1 .1 1 %。结论　BT -BAK细胞及其培养上清进行膀胱腔内灌注治疗 ,能够有效提高膀胱癌术后患者的全身免疫水平 ,降低膀胱癌的术后复发率。 展开更多

关键词 膀胱癌 膀胱肿瘤可溶性抗原 BCG 腔内过继免疫治疗 细胞因子 BT-BAK细胞

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肿瘤可溶性抗原实验研究

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作者 李建民 张庆波 +2 位作者 边洪荣 徐应军 李军 《中国煤炭工业医学杂志》 1999年第6期620-621,共2页

目的　探讨肿瘤可溶性抗原免疫原性,为肿瘤疫苗的研制和肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法　提取卵巢癌细胞的可溶性成分作为肿瘤可溶性抗原(tumorsolubleantigen,TSA),单独用TSA或联合IL-2,CD-3单抗诱导外周血单个核细胞(PBMC),检测PBMC... 目的　探讨肿瘤可溶性抗原免疫原性,为肿瘤疫苗的研制和肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法　提取卵巢癌细胞的可溶性成分作为肿瘤可溶性抗原(tumorsolubleantigen,TSA),单独用TSA或联合IL-2,CD-3单抗诱导外周血单个核细胞(PBMC),检测PBMC活化、增殖、分泌细胞因子以及活化的细胞对肿瘤的杀伤特性。结果　TSA能刺激正常人PBMC增殖和分泌细胞因子(TNF,IFN)。用TSA联合IL-2和抗CD3单抗诱导正常人PBMC产生杀瘤性效应细胞,对TSA来源的肿瘤细胞具有选择性杀伤作用,证实TSA具有免疫原性。肿瘤细胞提取物中细胞多肽是主要活性成分,但细胞膜成分也具有免疫活性。结论　用该实验方法提取TSA具有免疫原性,可用于肿瘤疫苗的研制和肿瘤过继免疫治疗,该实验方法和结果可为检测和评价肿瘤提取物是否具有免疫原性提供参考。 展开更多

关键词 肿瘤可溶性抗原 免疫原性 卵巢肿瘤

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食管癌疫苗临床应用分析

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作者 刘东红 朱丽华 +3 位作者 张庆波 曹秀华 石恩富 丁贺田 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第22期1459-1461,共3页

目的:对食管癌疫苗在临床应用效果进行分析,以期为临床应用提供参考。方法:从食管癌术后肿瘤组织标本中提取其可溶性抗原成分和超抗原SEC构建成肿瘤疫苗,对食管癌术后328例患者进行临床应用(观察组),并以常规治疗326例患者作为对照组,... 目的:对食管癌疫苗在临床应用效果进行分析,以期为临床应用提供参考。方法:从食管癌术后肿瘤组织标本中提取其可溶性抗原成分和超抗原SEC构建成肿瘤疫苗,对食管癌术后328例患者进行临床应用(观察组),并以常规治疗326例患者作为对照组,观察并分析临床应用效果和5年随访结果。结果:观察组5年生存率为49.71%(173/328),对照组5年生存率为20.55%(67/326),经统计学处理有显著性差异(P<0.05);女性生存率为51.22%(84/164),男性生存率为45.12%(74/164),女性生存率显著高于男性(P<0.05)。观察组中低分化患者的生存率(61.90%)显著高于高分化患者的生存率(41.61%),差异具有统计学意义(P<0.05);而对照组低分化患者生存率(10.75%)显著低于高分化患者的生存率(31.34%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:该疫苗能有效防止食管癌术后患者的复发和肿瘤转移,提高生存率,特别是对女性患者和恶性程度高的患者效果更佳。 展开更多

关键词 肿瘤疫苗 食管癌 肿瘤可溶性抗原 超抗原SEC 生物治疗

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