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肿瘤相关糖蛋白-72嵌合锚定T细胞对肝癌的抑癌效应 被引量:3
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作者 徐宏勇 徐立 李开宗 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2014年第5期481-485,共5页
目的制备肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)嵌合锚定T细胞,体内外实验检测其对肝癌的抑癌活性。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),采用脂质体lipofectamineTM2000介导的细胞转染,将已制备的重组真核表达载体抗TAG-72 scFv-CD3ζ-pcDNA3.0... 目的制备肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)嵌合锚定T细胞,体内外实验检测其对肝癌的抑癌活性。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),采用脂质体lipofectamineTM2000介导的细胞转染,将已制备的重组真核表达载体抗TAG-72 scFv-CD3ζ-pcDNA3.0导入PBMC,获得肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)嵌合锚定T细胞,以此为实验组治疗细胞;用SDS-PAGE检测TAG-72嵌合锚定T细胞中抗TAG-72 scFv-CD3ζ嵌合分子的表达,并用Western blotting证实。用转染空载体pcDNA3.0的PBMC作为对照组治疗细胞。将实验组及对照组的治疗细胞分别经尾静脉注射治疗荷TAG-72+肝癌细胞HepG2、荷TAG-72-肝癌细胞BEL7402裸鼠动物模型,观察对裸鼠的抑癌效应。结果 SDS-PAGE检测TAG-72嵌合锚定T细胞嵌合分子抗TAG-72 scFv-CD3ζ的表达,显示大小为47 kDa的融合蛋白片段,与抗TAG-72 scFv-CD3ζ的理论值相符;Western blotting证实该片段CD3呈阳性表达。TAG-72嵌合锚定T细胞与肝癌细胞HepG2共培养后可对后者产生G1期阻滞。用TAG-72嵌合锚定T细胞经尾静脉注射治疗荷瘤裸鼠,发现实验组细胞对荷HepG2细胞裸鼠存活时间、体质量、肿瘤包块大小等方面疗效优于荷BEL7402细胞裸鼠的疗效,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TAG-72嵌合锚定T细胞可特异性抑制荷TAG-72+肝癌细胞裸鼠的肝癌细胞生长;该治疗策略将为肝癌的临床诊治提供一种有希望的途径。 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤相关糖蛋白-72 T细胞
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肿瘤相关糖蛋白-72在结肠癌及癌前病变组织中的表达 被引量:2
2
作者 陈红 谢燕 黄晓楠 《诊断病理学杂志》 CSCD 2010年第6期444-447,共4页
目的观察肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)抗原在结肠癌及癌前病变组织中的表达,并探讨其临床意义。方法应用免疫组化EnVision二步法检测TAG-72抗原在221例结肠癌及癌前病变组织中的表达,其中癌旁正常结肠黏膜32例、结肠增生性息肉24例、结肠... 目的观察肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)抗原在结肠癌及癌前病变组织中的表达,并探讨其临床意义。方法应用免疫组化EnVision二步法检测TAG-72抗原在221例结肠癌及癌前病变组织中的表达,其中癌旁正常结肠黏膜32例、结肠增生性息肉24例、结肠低级别上皮内瘤变75例、结肠高级别上皮内瘤变和结肠管状腺癌各45例。结果 TAG-72抗原在正常结肠黏膜、增生性息肉、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变及腺癌组的表达阳性率分别为3.12%、29.17%、53.33%、88.89%、100%。正常组与息肉组间表达率差异不显著(P>0.05);低级别、高级别上皮内瘤变组、腺癌组抗原表达率显著高于前两组(P<0.05);其中高级别上皮内瘤变组与腺癌组的抗原表达明显增高,但两组间表达差异不显著(P>0.05)。结论 TAG-72在结肠高级别上皮内瘤变及结肠癌中表达增高。由于TAG-72在结肠组织的恶性转化中起着重要作用,故其阳性表达及表达强度对诊断结肠腺癌和监测腺瘤癌变有重要意义。 展开更多
关键词 肿瘤相关糖蛋白-72 结肠癌 癌前病变
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TAG-72嵌合锚定T细胞对乳腺癌的抑癌效应观察 被引量:1
3
作者 徐宏勇 丁蓉 +1 位作者 徐立 李开宗 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2012年第12期1298-1301,共4页
目的制备肿瘤相关糖蛋白-72抗原(TAG-72)嵌合锚定T细胞,通过体外实验检测其对乳腺癌细胞的抑癌活性。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),采用脂质体lipofectamineTM2000介导的细胞瞬时转染方法,将已制备的重组真核表达载体即抗TAG-7... 目的制备肿瘤相关糖蛋白-72抗原(TAG-72)嵌合锚定T细胞,通过体外实验检测其对乳腺癌细胞的抑癌活性。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),采用脂质体lipofectamineTM2000介导的细胞瞬时转染方法,将已制备的重组真核表达载体即抗TAG-72-scFv-CD3ζ-pcDNA 3.0导入PBMC,以获得TAG-72嵌合锚定T细胞,以此为转染组;用转染空载体pcDNA 3.0的PBMC作为对照组。将转染组嵌合锚定T细胞和对照组PBMC细胞分别与乳腺癌细胞系MCF-7及Bcap37共培养,观察两者对乳腺癌细胞G1期的阻滞率。结果转染组对MCF-7细胞系的G1期阻滞率为(82.3±6.9)%,对照组为(43.4±3.9)%,2组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);转染组对Bcap37细胞系的G1期阻滞率为(51.3±4.7)%,对照组为(45.6±2.5)%,2组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TAG-72嵌合锚定T细胞可特异性地抑制TAG-72+乳腺癌细胞的增殖,此将为乳腺癌的临床诊治提供一种有希望的途径。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤相关糖蛋白-72 外周血单个核细胞
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嵌合锚定融合分子在T淋巴细胞的荧光表达及检测 被引量:1
4
作者 徐宏勇 徐立 +1 位作者 李开宗 窦科峰 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2010年第10期1046-1049,共4页
目的构建含有由抗肿瘤相关糖蛋白72(anti-TAG72)单链抗体片段(single chain variable fragment,scFv)及CD28胞内区及跨膜区的融合基因anti-TAG72 scFv-CD28的重组绿色荧光表达载体pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28,并转染获得嵌合锚定T淋... 目的构建含有由抗肿瘤相关糖蛋白72(anti-TAG72)单链抗体片段(single chain variable fragment,scFv)及CD28胞内区及跨膜区的融合基因anti-TAG72 scFv-CD28的重组绿色荧光表达载体pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28,并转染获得嵌合锚定T淋巴细胞。方法将anti-TAG72单链抗体及CD28胞内区及跨膜区基因的嵌合锚定融合分子克隆入绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C3,获得pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28表达载体。用卡那霉素筛选阳性克隆,经酶切和测序鉴定。将上述重组质粒pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28以脂质体法瞬时转染外周血单核细胞(PBMC),以获得嵌合锚定T淋巴细胞,用荧光显微镜检测嵌合分子anti-TAG72 scFv-CD28在PBMC中的表达,并检验嵌合锚定融合分子anti-TAG72 scFv-CD28的表达。结果重组绿色荧光表达载体pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28中anti-TAG72 scFv-CD28片段为1 002 bp,与已知的序列相符。酶切、测序结果表明,嵌合锚定融合分子基因片段anti-TAG72 scFv-CD28被正确插入pEGFP-C3载体;转染后anti-TAG72 scFv-CD28片段及绿色荧光物质表达于嵌合锚定T淋巴细胞胞膜表面及胞浆中,为绿色荧光显色。结论完成了绿色荧光表达载体pEGFP-C3-anti-TAG72 scFv-CD28的构建,并成功在PBMC瞬时表达。 展开更多
关键词 单链抗体片段 CD28 pEGFP-C3载体 肿瘤相关糖蛋白72 转染
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肿瘤相关糖蛋白-72抗原在原发性乳腺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:1
5
作者 王守满 毛杰 +1 位作者 李波 唐利立 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1084-1086,共3页
目的:探讨抗肿瘤相关糖蛋白(TAG-72)抗原的表达与原发性乳腺癌病理特征及预后的关系。方法:随机选取原发性乳腺癌患者118例,应用SABC免疫组化方法检测TAG-72抗原的表达。并对其中的92例原发性乳腺癌患者中作术后为期5年的随访,分析TAG-7... 目的:探讨抗肿瘤相关糖蛋白(TAG-72)抗原的表达与原发性乳腺癌病理特征及预后的关系。方法:随机选取原发性乳腺癌患者118例,应用SABC免疫组化方法检测TAG-72抗原的表达。并对其中的92例原发性乳腺癌患者中作术后为期5年的随访,分析TAG-72抗原与原发性乳腺癌患者预后的相关性。结果:TAG-72抗原在原发性乳腺癌组织中的阳性表达率为78.81%(93/118),并与原发性乳腺癌组织的临床病理学特征及患者的预后均有密切的关系。在直径较大(P<0.05)、TNM分期较高(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)及组织学分级低(P<0.01)的肿瘤组织中,TAG-72抗原高表达。此外,TAG-72抗原阳性表达的原发性乳腺癌患者的生存率明显低于阴性表达的患者(P<0.01)。结论:TAG-72抗原的表达可能与原发性乳腺癌的发生、浸润、转移有关;TAG-72抗原可以作为一个肿瘤标志物在临床中应用,检测其在原发性乳腺癌组织中的阳性表达率,并结合临床病理学分级,可提高对患者预后判断的准确性。 展开更多
关键词 肿瘤相关糖蛋白抗原 原发性乳腺癌 临床病理学
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抗肿瘤相关糖蛋白-72单抗在人乳腺癌中的表达 被引量:4
6
作者 徐宏勇 徐立 +1 位作者 李开宗 高建宏 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2006年第5期540-541,549,共3页
目的检测肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)在人乳腺癌细胞系的表达,为利用抗TAG-72单链抗体(singlechainvariablefragment,scFv)诊治乳腺癌提供实验依据。方法将人乳腺癌细胞系MCF-7和Bcap-37通过细胞培养至对数生长期,并固定于载玻片上。用... 目的检测肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)在人乳腺癌细胞系的表达,为利用抗TAG-72单链抗体(singlechainvariablefragment,scFv)诊治乳腺癌提供实验依据。方法将人乳腺癌细胞系MCF-7和Bcap-37通过细胞培养至对数生长期,并固定于载玻片上。用原核表达的抗TAG-72scFv经免疫细胞化学方法检测TAG-72在乳腺癌细胞中的表达。结果TAG-72在乳腺癌细胞系MCF-7中表达为阳性,在Bcap-37中表达为阴性,表明TAG-72在部分人乳腺癌细胞中得以表达。结论TAG-72在人部分乳腺癌中阳性表达,表明TAG-72抗原可作为一个肿瘤标志物在临床中应用,也为抗TAG-72scFv在乳腺癌诊治中应用奠定了实验基础。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤相关糖蛋白-72 单链抗体
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抗TAG-72抗原单链抗体的原核表达及对人肝癌的检测 被引量:2
7
作者 徐宏勇 徐立 +1 位作者 李开宗 窦科峰 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2010年第7期699-702,共4页
目的探讨抗肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)单链抗体的原核表达及与4种肝癌细胞系和肝癌组织的特异性亲和力。方法将抗TAG-72单链抗体的cDNA片段插入噬菌粒载体pCANTAB5E,获得噬菌粒载体TAG-72-scFv-pCANTAB5E。将后者转化入E.coliHB2151,经... 目的探讨抗肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)单链抗体的原核表达及与4种肝癌细胞系和肝癌组织的特异性亲和力。方法将抗TAG-72单链抗体的cDNA片段插入噬菌粒载体pCANTAB5E,获得噬菌粒载体TAG-72-scFv-pCANTAB5E。将后者转化入E.coliHB2151,经β,D异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得抗TAG-72单链抗体蛋白。采用细胞培养及免疫细胞/组织化学方法 ,检测4种肝癌细胞系及石蜡包埋的肝癌组织中TAG-72抗原的表达。结果 SDS-PAGE及Western blot法证实,抗TAG-72单链抗体蛋白分子得以正确表达。抗TAG-72单链抗体可与肝癌细胞系SMMC7721、HepG2和HHCC结合,表明这3种细胞表达了特异性肿瘤抗原;抗TAG-72单链抗体不能结合BEL7402细胞。40例肝癌组织中TAG-72抗原表达阳性率Ⅰ期、Ⅱ~Ⅲ期分别为23.08%(3/13)和62.96%(17/27),在正常肝组织标本中无TAG-72抗原表达,TAG-72抗原在正常肝组织及肝癌组织中表达的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TAG-72抗原在肝癌细胞或肝癌组织中有特异性表达,有可能成为判断肝癌的标志物。 展开更多
关键词 肝细胞癌 单链抗体 原核表达 肿瘤相关糖蛋白-72抗原
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联合检测胃液中腺癌相关抗原TAG- 72及癌胚抗原对胃癌诊断价值的研究
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作者 王建伟 李一雷 +4 位作者 王群 姜云鹏 陈远耀 郭树彬 宋国培 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1999年第6期713-715,共3页
目的:检测胃液中的癌相关抗原以诊断及筛查胃癌患者。方法:应用酶联免疫吸附实验(ELISA),以泛腺癌相关抗原TAG- 72 的单抗B72.3 及CEA单抗为一抗,检测39 例胃癌患者、2例可疑癌变及17 例其它胃良性病变... 目的:检测胃液中的癌相关抗原以诊断及筛查胃癌患者。方法:应用酶联免疫吸附实验(ELISA),以泛腺癌相关抗原TAG- 72 的单抗B72.3 及CEA单抗为一抗,检测39 例胃癌患者、2例可疑癌变及17 例其它胃良性病变患者的胃液,对结果进行定性分析。结果:胃癌阳性率89.74% ,特异度76.47% ,准确度82.71% 。结论:联合检测上述两个肿瘤标志比只检测其中一个肿瘤标志。 展开更多
关键词 胃癌 诊断 TAG-72 癌胚抗原 胃液 腺癌相关抗原
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肿瘤相关糖蛋白72在胃癌组织和外周血中的表达及临床意义
9
作者 何秋凤 李琳 +1 位作者 张彩丽 朱元民 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2022年第12期1361-1365,1370,共6页
目的研究肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein 72,TAG-72)在胃癌组织中的表达情况及临床意义;分析胃癌组织中TAG-72及术前外周血TAG-72(即糖类抗原724,CA724)在表达、预后判断方面的相关性。方法采用免疫组化法检测149例胃... 目的研究肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein 72,TAG-72)在胃癌组织中的表达情况及临床意义;分析胃癌组织中TAG-72及术前外周血TAG-72(即糖类抗原724,CA724)在表达、预后判断方面的相关性。方法采用免疫组化法检测149例胃癌患者组织TAG-72的表达,用电化学发光法检测71例胃癌患者术前外周血CA724水平。结合临床资料,分析TAG-72表达与胃癌患者病理特征关系。采用Kaplan-Meier法和Log-Rank法评估患者生存率,通过Cox回归分析影响胃癌患者预后的危险因素。结果胃癌组织TAG-72表达阳性率显著高于癌旁正常组织(53.02%vs 12.94%,P<0.05)。TAG-72表达阳性组患者总体生存率(P<0.05)及5年生存率(P<0.01)均低于TAG-72表达阴性组。TAG-72表达是胃癌患者生存预后的独立危险因素(P<0.05)。胃癌组织中TAG-72与术前外周血CA724表达水平呈弱相关(r=0.314,P=0.008),术前外周血CA724表达与胃癌患者生存率无相关性。结论TAG-72在胃癌组织中高表达,是胃癌患者不良预后的独立危险因素。术前外周血CA724与胃癌组织TAG-72表达呈弱相关,术前外周血CA724与患者生存预后无相关性。 展开更多
关键词 肿瘤相关糖蛋白72 糖类抗原724 分子标志物 胃癌 预后
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胃良恶性病变组织中TAG72和GRP94表达及其临床病理意义 被引量:1
10
作者 刘栋才 周建平 +4 位作者 袁联文 舒国顺 任峰 周家鹏 杨竹林 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1071-1074,共4页
目的研究胃良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72(TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(GRP94)表达水平及其临床病理意义。方法将49例胃癌,20例癌旁组织,36例淋巴结转移灶及80例不同类型胃良性病变患者手术切除标本或胃镜活检标本行常规石蜡切片,采... 目的研究胃良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72(TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(GRP94)表达水平及其临床病理意义。方法将49例胃癌,20例癌旁组织,36例淋巴结转移灶及80例不同类型胃良性病变患者手术切除标本或胃镜活检标本行常规石蜡切片,采用免疫组化法检测TAG72和GRP94的表达。结果胃癌组织TAG72和GRP94表达阳性率高于癌旁组织及各类型胃良性病变(P<0.05或P<0.01);TAG72和/或GRP94阳性表达的癌旁组织及胃良性病变黏膜上皮均呈轻至重度不典型增生;胃癌原发灶与相应淋巴结转移灶之间TAG72和GRP94表达阳性率均无统计学差异(均P>0.05);浸润深度T1+T2者、无区域淋巴结转移及无远处器官转移者TAG72和GRP94表达阳性率均明显低于浸润深度T3+T4者、区域淋巴结转移及远处器官转移者(P<0.05或P<0.01);组织学分级II级及N1站淋巴结转移者TAG72和GRP94表达阳性率低于组织学III+IV级及N2+N3站淋巴结转移者,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 TAG72和GRP94表达水平对胃癌发生、进展和临床生物学行为方面可能有促进作用,TAG72和/或GRP94阳性表达的胃癌预后不良。 展开更多
关键词 胃肿瘤/病理学 肿瘤相关糖蛋白72 葡萄糖调节蛋白94 免疫组织化学
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TAG-72在卵巢癌组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 柴晓菲 刘明阁 +2 位作者 宋魏 张建波 于庆凯 《中国实用医药》 2016年第17期36-37,共2页
目的探讨肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)在卵巢癌组织中的表达与意义。方法采用免疫组织化学法检测50例卵巢癌及20例正常卵巢组织中TAG-72的表达情况,并结合临床病理因素进行分析。结果 TAG-72在卵巢癌组织中的表达率(26.0%)明显高于正常卵... 目的探讨肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)在卵巢癌组织中的表达与意义。方法采用免疫组织化学法检测50例卵巢癌及20例正常卵巢组织中TAG-72的表达情况,并结合临床病理因素进行分析。结果 TAG-72在卵巢癌组织中的表达率(26.0%)明显高于正常卵巢组织(0)(P<0.05),其表达与肿瘤临床分期、组织分化程度有关。结论 TAG-72的高表达与卵巢癌的发生、发展和生物学行为密切相关,因此其在卵巢癌的肿瘤标记与早期诊断方面具有重要的意义。 展开更多
关键词 卵巢癌 肿瘤相关糖蛋白-72 表达
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肿瘤相关糖蛋白72和葡萄糖调节蛋白94在乳腺良恶性病变组织中的表达及其意义
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作者 陈干农 杨竹林 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期322-327,共6页
目的:研究乳腺良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein,TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组织化学法检测60例乳腺癌组织和30例乳腺良性病... 目的:研究乳腺良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein,TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组织化学法检测60例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中TAG72和GRP94的表达,并进行评分。应用Kaplan-Meier法对乳腺癌患者进行生存分析。结果:乳腺癌组织中TAG72和GRP94表达的阳性率分别为68.3%和63.3%,其总评分分别为2.53±1.86和2.73±2.23;乳腺良性病变组织的TAG72和GRP94表达阳性率分别为10.0%和13.3%,其总评分分别为0.37±1.13和0.47±1.22;乳腺癌组织与乳腺良性病变组织相比,差异均有统计学意义(P=0.000)。导管内癌、组织学分级为Ⅰ或Ⅱ级、肿瘤最大径≤3cm、无淋巴结转移、雌激素受体阳性、p53阴性及CA15-3阴性乳腺癌患者的TAG72和GRP94表达阳性率及其评分均明显低于浸润性导管癌(P<0.05)、组织学分级Ⅲ级(P<0.01)、肿瘤最大径>3cm(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)、雌激素受体阴性(P<0.05)、p53阳性(P<0.01)和CA15-3阳性(P<0.01)的乳腺癌患者。TAG72和GRP94表达阳性的乳腺癌患者及两者均表达阳性的乳腺癌患者的术后生存期明显短于阴性表达者(P<0.01)。COX多因素分析结果显示,TAG74和(或)GRP94表达阳性均与术后生存率呈负相关,与死亡率呈正相关,均是独立的预后因素。结论:TAG72和GRP94表达在乳腺癌的发生、发展、临床生物学行为及预后方面可能具有重要作用,TAG72和(或)GRP94表达阳性的乳腺癌患者预后不良。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 抗原 肿瘤相关 碳水化合物 肿瘤相关糖蛋白72 葡萄糖调节蛋白94 免疫组织化学
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