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结核分支杆菌Ag85B分泌蛋白基因疫苗的构建和免疫原性的研究 被引量：22
1
作者 范雄林 徐志凯 +3 位作者 李元 薛莹 李别虎 白光春 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期548-550,共3页
目的　构建编码结核分支杆菌 (MTB)Ag85B分泌蛋白的重组真核表达质粒 ,并研究其免疫原性。方法　采用聚合酶链反应 (PCR)方法从结核分支杆菌H3 7Ra 基因组DNA中扩增出Ag85B分泌蛋白基因 ,用HindⅢ和EcoRⅠ消化后 ,与同样酶消化的pcDNA3... 目的　构建编码结核分支杆菌 (MTB)Ag85B分泌蛋白的重组真核表达质粒 ,并研究其免疫原性。方法　采用聚合酶链反应 (PCR)方法从结核分支杆菌H3 7Ra 基因组DNA中扩增出Ag85B分泌蛋白基因 ,用HindⅢ和EcoRⅠ消化后 ,与同样酶消化的pcDNA3连接 ,转化大肠杆菌JM10 9,阳性克隆用酶切鉴定 ;重组表达质粒肌注免疫小鼠 4周后 ,分别用dotblotting和ELISA方法检测抗体的产生和滴度。结果　酶切鉴定重组表达质粒pTB30s构建成功 ;dotblotting检测免疫小鼠血清抗Ag85B特异性抗体阳性 ,ELISA检测抗体几何平均滴度为 1∶12 0。结论　应进一步研究pTB30s刺激机体的细胞免疫应答 ,以用于结核病 (TB) 展开更多
关键词 结核分支杆菌 基因疫苗 免疫原性 85B抗原 结核 免疫
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疑似卵巢癌的盆腔结核20例分析 被引量：26
2
作者 李晓江 吴令英 +1 位作者 李晓光 孙阳春 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期462-464,共3页
目的　分析极易与卵巢癌相混淆的女性盆腔结核的临床特征 ,寻求两者鉴别诊断的依据。方法　对 1994年 3月～ 2 0 0 2年 5月间收治的 2 0例确诊为盆腔结核的患者进行回顾性分析。结果　经济条件差、有结核病史或明确的结核接触史、发热... 目的　分析极易与卵巢癌相混淆的女性盆腔结核的临床特征 ,寻求两者鉴别诊断的依据。方法　对 1994年 3月～ 2 0 0 2年 5月间收治的 2 0例确诊为盆腔结核的患者进行回顾性分析。结果　经济条件差、有结核病史或明确的结核接触史、发热是鉴别晚期卵巢癌与盆腔结核的重要依据。 2 0例中有盆腹腔肿物者 2 0例 ,腹胀 18例 ,腹痛 12例 ,腹水 2 0例 ,发热 18例 ,消瘦 13例 ,腹泻6例。血清CA12 5检测结果最小 6 4U/L ,最高 10 6 9U/L。术前经腹水细胞学检查 16例 ,14例未发现癌细胞 ,1例见可疑癌细胞 ,1例见癌细胞 (手术病理排除 )。结论　女性盆腔结核与晚期卵巢癌鉴别诊断极为困难 ,盆腔肿物、腹水、CA12 5升高的年轻妇女 ,若有结核史或结核接触史、发热 ,且腹水细胞学未发现癌细胞 。 展开更多
关键词 卵巢癌 盆腔结核 鉴别诊断 临床特征 发热
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人γδT细胞TCR分子与结核杆菌多肽抗原特异性结合的证据 被引量：20
3
作者 陈勇 李柏青 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期15-20,共6页
目的　探讨γδT细胞对结核杆菌抗原 (Mtb Ag)识别的分子机制。方法　采集人外周血 (PB) ,分别经抗TCRγδ PE和FITC标记的Mtb Ag及其纯化的不同组分 ,结核杆菌高分子量蛋白组分 (Mtb HW Ag)、低分子量多肽组分 (Mtb LW Ag)或Mtb Ag峰 ... 目的　探讨γδT细胞对结核杆菌抗原 (Mtb Ag)识别的分子机制。方法　采集人外周血 (PB) ,分别经抗TCRγδ PE和FITC标记的Mtb Ag及其纯化的不同组分 ,结核杆菌高分子量蛋白组分 (Mtb HW Ag)、低分子量多肽组分 (Mtb LW Ag)或Mtb Ag峰 3单一主肽抗原 (Mtb Ag Pk3)进行双标记染色 ,或使用过量Mtb Ag先与细胞预处理 ,然后再做上述染色 ,用流式细胞仪检测γδT细胞上结合的抗TCRγδ PE荧光强度变化。将人外周血PBMC经Mtb Ag刺激 2 4h后 ,使用抗TCRγδ PE和Mtb Ag FITC染色 ,用激光共聚焦显微镜观察γδT细胞表面TCRγδ分子的聚集。结果　经流式细胞仪分析 ,Mtb Ag及其纯化的Mtb LW Ag、Mtb Ag Pk3均可与γδT细胞发生特异性直接结合 ,而且Mtb Ag可有效阻断抗TCRγδ单抗与γδT细胞的结合。而Mtb HW Ag与γδT细胞并无特异性结合效应。经激光共聚焦显微镜观察 ,Mtb Ag可显著激活γδT细胞而诱导TCRγδ分子发生功能性聚集化。结论　γδT细胞通过其表面的TCRγδ分子可直接结合Mtb Ag ,而Mtb Ag Pk3多肽可能是Mtb Ag发挥其结合效应的有效成分。Mtb Ag可激活γδT细胞并诱导TCRγδ分子聚集 ,而可能参与功能性脂筏 (raft)的形成。 展开更多
关键词 ΓΔT细胞 TCR 结核杆菌 多肽抗原 人外周血 FITC 激光共聚焦显微镜 特异性结合 脂筏 分子
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TB-Ab-IgG ADA和CEA对良恶性胸水鉴别诊断意义 被引量：19
4
作者 冯月娟 邵华军 《中国防痨杂志》 CAS 北大核心 2004年第1期21-23,共3页
目的　探讨胸水结核抗体 (TB Ab IgG)、腺苷脱氨酶 (ADA)、癌胚抗原 (CEA)联合检测对良恶性胸腔积液的鉴别价值。方法　采用DIGFA法、Giusti改良法和放射免疫法对 92例胸腔积液行胸水TB Ab IgG、ADA和CEA检测分析。 结果　TB Ab IgG在... 目的　探讨胸水结核抗体 (TB Ab IgG)、腺苷脱氨酶 (ADA)、癌胚抗原 (CEA)联合检测对良恶性胸腔积液的鉴别价值。方法　采用DIGFA法、Giusti改良法和放射免疫法对 92例胸腔积液行胸水TB Ab IgG、ADA和CEA检测分析。 结果　TB Ab IgG在结核性、癌性和其它组胸腔积液中的阳性率分别是 81.8%、12 .8%和 1.1% ,特异性为 87.5 % ;ADA活性在结核性和癌性胸腔积液中分别为 (5 9.6± 2 8.8)U/L和 (2 4 .7± 11.5 )U/L(P <0 .0 1) ,CEA为 (8.5± 7.3)ng/mL和 (6 0 .2± 39.6 )ng/mL(P <0 .0 1) ,ADA在其它组胸腔积液中为 (44 .6± 2 6 .5 )U /L ,与结核性胸腔积液相比 (P >0 .0 5 )。结论　胸腔积液TB Ab IgG、ADA、CEA检测对良恶性胸腔积液有鉴别价值。 展开更多
关键词 TB-Ab-IgG ADA CEA 胸水 鉴别诊断 胸腔积液 腺苷脱氨酶 癌胚抗原 结核抗体
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结核分枝杆菌特异性蛋白抗原研究进展及其应用策略探讨 被引量：17
5
作者 聂恒 吴利先 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第2期180-182,187,共4页
结核病是当今世界主要的致死疾病之一,早期诊断是控制结核病的关键,血清学实验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。本文概述了38ku蛋白、Ag85复合体、MPT64蛋白、ESAT-6蛋白、CFP-10蛋白、16ku蛋... 结核病是当今世界主要的致死疾病之一,早期诊断是控制结核病的关键,血清学实验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。本文概述了38ku蛋白、Ag85复合体、MPT64蛋白、ESAT-6蛋白、CFP-10蛋白、16ku蛋白、MTB81、MTB84和U1蛋白等9种结核分枝杆菌重要抗原的研究进展,并对其应用策略进行了探讨。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 蛋白抗原 诊断 综述
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多层螺旋CT联合肿瘤相关抗原对肺结核合并肺癌的诊断价值 被引量：14
6
作者 苏国钿 陈泽勉 蔡沁宇 《中国CT和MRI杂志》 2018年第2期64-67,共4页
目的探寻多层螺旋CT联合肿瘤相关抗原对肺结核合并肺癌的诊断价值。方法选择我院2013年1月至2016年12月住院治疗的肺结核合并肺癌及继发型肺结核患者各50例作为研究对象,对其资料进行回顾性分析。结果多层螺旋CT诊断肺结核合并肺癌的敏... 目的探寻多层螺旋CT联合肿瘤相关抗原对肺结核合并肺癌的诊断价值。方法选择我院2013年1月至2016年12月住院治疗的肺结核合并肺癌及继发型肺结核患者各50例作为研究对象,对其资料进行回顾性分析。结果多层螺旋CT诊断肺结核合并肺癌的敏感性较高,但特异度较低;而肿瘤相关抗原诊断肺结核合并肺癌的敏感性较低,特异度较高;两者联合可以提高肺结核合并肺癌的诊断敏感性。结论多层螺旋CT与肿瘤相关抗原联合诊断能及早确诊肺结核合并肺癌,有效避免误诊、漏诊,有助于提高患者生存率。 展开更多
关键词 肺结核 肺癌 多层螺旋CT 肿瘤相关抗原 联合诊断
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血清CEA,CA125及CA199在肺结核诊断中的价值 被引量：10
7
作者 张婷 王亚楠 +1 位作者 苗琪 田娟 《临床与病理杂志》 2020年第8期2040-2043,共4页
目的:探讨肺结核患者血清肿瘤标志物癌胚抗原(carcinoembr yonic ant igen,CEA)糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、糖类抗原199(carbohydrate antigen 199,CA199)水平变化及其临床价值。方法:选取111例肺结核患者(肺结核组)... 目的:探讨肺结核患者血清肿瘤标志物癌胚抗原(carcinoembr yonic ant igen,CEA)糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、糖类抗原199(carbohydrate antigen 199,CA199)水平变化及其临床价值。方法:选取111例肺结核患者(肺结核组)、60例肺癌患者(肺癌组)以及60例健康体检者(对照组),检测并比较各组血清肿瘤标志物CEA,CA125,CA199水平,评估各肿瘤标志物在肺结核中的诊断价值。结果:各组血清CEA,CA125,CA199水平比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。肺癌组血清CEA,CA199水平明显高于肺结核组和对照组(P<0.05);肺结核组血清CA125明显高于肺癌组和对照组(均P<0.01);肺癌组CA199水平明显高于对照组(P<0.05)。血清CA125的受试者工作特征曲线下面积(AUC)值为0.745(95%CI:0.711~0.861,P<0.001),其灵敏度为81.8%,特异度为62.3%。各肿瘤标志物联合检测的AUC值为0.776(95%CI:0.703~0.849,P<0.001),其灵敏度为85.6%,特异度为65.3%。结论:血清CA125可作为肺结核的重要鉴别诊断指标,联合检测CEA,CA125及CA199可明显提高肺结核诊断的灵敏度。 展开更多
关键词 肺结核 癌胚抗原 糖类抗原125 糖类抗原199
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结核分支杆菌Ag85B DNA疫苗的构建及其免疫作用的研究 被引量：9
8
作者 游力 赵跃然 +4 位作者 高春义 张建 冯进波 许晓群 田志刚 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期736-739,共4页
目的　研究pcDNA3 Ag85B质粒DNA疫苗的免疫原性及其诱生细胞免疫应答的作用。方法　将结核分支杆菌Ag85B基因插入载体pcDNA3中 ,制备pcDNA3 Ag85BDNA疫苗。分别以生理盐水、pcDNA3及pcDNA3 Ag85B免疫BALB/c小鼠 ,检测小鼠抗Ag85B抗体水... 目的　研究pcDNA3 Ag85B质粒DNA疫苗的免疫原性及其诱生细胞免疫应答的作用。方法　将结核分支杆菌Ag85B基因插入载体pcDNA3中 ,制备pcDNA3 Ag85BDNA疫苗。分别以生理盐水、pcDNA3及pcDNA3 Ag85B免疫BALB/c小鼠 ,检测小鼠抗Ag85B抗体水平 (ELISA)和体外特异抗原刺激诱导的免疫小鼠脾细胞IL 2、IL 4、IL 10、IFN γ表达水平。结果　pcDNA3 Ag85B诱生的抗Ag85B效价明显高于生理盐水组和pcDNA3组 ;pcDNA3 Ag85B免疫小鼠脾细胞在Ag85B抗原刺激下 ,IL 2和IFN γmRNA转录水平明显高于对照组 ,而IL 4和IL 10mRNA转录水平在 3组中无明显变化。结论　pcDNA3 Ag85B质粒DNA疫苗不仅能增强体液免疫 。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 DNA疫苗 免疫原性 AG85B 抗原 抗结核菌苗
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几种结核分支杆菌重组蛋白诱发豚鼠迟发型超敏反应的研究 被引量：8
9
作者 张灵霞 吴雪琼 +2 位作者 史迎昌 梁建琴 张俊仙 《中国防痨杂志》 CAS 北大核心 2002年第3期116-118,共3页
目的　了解结核分支杆菌重组抗原ESAT6 (E)、MPT6 4 (M )、Ag85A(A)及两两混合物诱发豚鼠产生迟发型超敏 (DTH)反应的能力。方法　常规皮肤实验法 :灭活H3 7Rv全菌体致敏豚鼠 ,皮肤试验以生理盐水为阴性对照 ,5UPPD标准品为阳性对照 ,0... 目的　了解结核分支杆菌重组抗原ESAT6 (E)、MPT6 4 (M )、Ag85A(A)及两两混合物诱发豚鼠产生迟发型超敏 (DTH)反应的能力。方法　常规皮肤实验法 :灭活H3 7Rv全菌体致敏豚鼠 ,皮肤试验以生理盐水为阴性对照 ,5UPPD标准品为阳性对照 ,0 .8μgE、0 .8μgM、0 .8μgA、0 .4 μgA + 0 .4 μgM、0 .4 μgA + 0 .4 μgE、0 .4 μgE + 0 .4 μgM分别于背部皮内注射 ,注射后 2 4、4 8、72h分别测量硬结反应横、纵直径 (mm ) ,取二者的平均值。皮肤试验轮圈法 :生理盐水、5UPPD及 0 .8μgE、0 .8μgM、0 .8μgA、0 .4 μgA + 0 .4 μgM、0 .4 μgA + 0 .4 μgE、0 .4 μgE + 0 .4 μgM ,以轮圈法注射于同一只豚鼠背部两侧 ,每批 6只 ,共 3批。注射后 2 4、4 8、72h分别测量硬结反应横、纵直径 (mm) ,取二者的平均值。结果　常规皮肤试验 0 .8μgM、A、M +E及E +A诱发豚鼠DTH的平均直径与PPD相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,而 0 .8μgE抗原及M +A诱发豚鼠DTH的平均直径与PPD相比有显著性差异(P <0 .0 5 )。时间效应 :重组抗原及其混合物诱发豚鼠DTH的平均直径 2 4h平均直径显著高于 4 8h平均直径 (P <0 .0 5 ) ,2 4h测量效果较好。轮圈法皮肤试验排除个体差异后 ,结果与常规皮肤试验结果一致。结论　从试验结果? 展开更多
关键词 结核分支杆菌 重组结核分支杆菌蛋白抗原 迟发超敏反应
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T细胞免疫在抗结核杆菌感染中的研究进展 被引量：9
10
作者 董毅 吴利先 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第18期3593-3595,共3页
结核分枝杆菌是引起结核病的病原体,该细菌可侵犯全身各组织器官。结核病是一种慢性传染性疾病,具有持久性特点。该细菌为胞内寄生菌,特异性免疫以细胞免疫为主,主要包括CD4+T细胞免疫和CD8+T细胞免疫。结核分枝杆菌特异性免疫应答的特... 结核分枝杆菌是引起结核病的病原体,该细菌可侵犯全身各组织器官。结核病是一种慢性传染性疾病,具有持久性特点。该细菌为胞内寄生菌,特异性免疫以细胞免疫为主,主要包括CD4+T细胞免疫和CD8+T细胞免疫。结核分枝杆菌特异性免疫应答的特点之一是感染早期T细胞免疫应答延迟。其机制与结核杆菌抑制免疫细胞(CD4+和CD8+T细胞及DC)凋亡延迟应答,通过特异性Treg细胞抑制作用延迟应答以及结核杆菌慢性感染期间存在IFN-γ信号调节网络和ESAT-6抗原的慢性刺激作用有关,以此可调节和维持免疫应答。深入了解抗原特异性T细胞特异性免疫应答的机制,有益于抗结核疫苗的研制,为临床工作提供理论依据和科学方法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 T细胞 抗原 细胞免疫
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结核分枝杆菌4种抗原的基因克隆、表达、纯化和抗原性初步检测 被引量：9
11
作者 冯晓燕 Albert W.Tam +4 位作者 陈坤 王国华 宋晓国 朱翠侠 张贺秋 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期865-867,共3页
目的:克隆38kD、ESAT-6、CFP10和MPT64等4种结核分枝杆菌抗原基因,利用大肠杆菌表达系统分别表达重组蛋白,纯化并初步评价其抗原性。方法:通过PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中扩增38kD、ESAT-6、CFP10和MPT64抗原的基因,连接入pBV... 目的:克隆38kD、ESAT-6、CFP10和MPT64等4种结核分枝杆菌抗原基因,利用大肠杆菌表达系统分别表达重组蛋白,纯化并初步评价其抗原性。方法:通过PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中扩增38kD、ESAT-6、CFP10和MPT64抗原的基因,连接入pBVIL1表达载体,在大肠杆菌HB101株中进行表达,以间接ELISA方法初步评价其抗原性。结果:获得了结核分枝杆菌抗原38kD、ESAT-6、CFP10和MPT64的基因,并在大肠杆菌中进行了高效表达,初步验证所纯化获得的抗原具有良好的抗原性。结论:pBVIL1表达载体可以高效表达多种结核分枝杆菌抗原,38kD、ESAT-6和CFP10抗原均可作为结核病血清学诊断的候选抗原。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 抗原 38kD ESAT-6 CFP10 MPT64
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四种结核抗原用于结核病血清学诊断的初步评价 被引量：9
12
作者 林楠 吴小翠 +3 位作者 赵平 余琴 庞慧 万康林 《实用预防医学》 CAS 2014年第6期655-657,731,共4页
目的对MPT63、Ag85A、RV2031c和融合蛋白CFP10-ESAT6四种结核分枝杆菌抗原进行诊断效能评价,优选出最佳的抗原组合,分析其应用价值。方法基于酶联免疫吸附试验,分别用MPT63、Ag85A、RV2031c和融合蛋白CFP10-ESAT6四种重组结核抗原,对19... 目的对MPT63、Ag85A、RV2031c和融合蛋白CFP10-ESAT6四种结核分枝杆菌抗原进行诊断效能评价,优选出最佳的抗原组合,分析其应用价值。方法基于酶联免疫吸附试验,分别用MPT63、Ag85A、RV2031c和融合蛋白CFP10-ESAT6四种重组结核抗原,对199份血清（含94份结核病患者血清和105份健康者血清）进行检测。结合受试者工作特征曲线法计算不同抗原的最佳临界值（cut-off value）并以此确立各抗原组合的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和诊断效率,对它们的诊断效能和应用价值进行综合评价。结果 11种组合中Rv2031c与CFP10-ESAT6的组合诊断效能最好,灵敏度为63.8%,特异度为82.9%,阳性预测值为76.9%,阴性预测值为71.9%,诊断效率为73.9%。其余组合的灵敏度的范围30.9%～66%,特异度范围76.2%～90.5%。结论 Rv2031c和CFP10-ESAT6组合后的诊断效能最佳,有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 结合分枝杆菌 抗原组合 酶联免疫吸附试验 受试者工作特征曲线
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抗原诱发的γ干扰素测定在结核诊断中的应用 被引量：7
13
作者 石瑞如 张国龙 +2 位作者 苑雪芹 刘新 王国斌 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2008年第6期441-444,共4页
目的探讨结核分枝杆菌特异性抗原早期分泌抗原靶6000（ESAT-6）体外诱发的-γ干扰素反应在结核感染和结核病诊断中的价值。方法外周全血中加入ESAT-6抗原，诱导产生γ干扰素，以酶联免疫吸附法测定γ干扰素浓度，以增加的百分率为ESAT-... 目的探讨结核分枝杆菌特异性抗原早期分泌抗原靶6000（ESAT-6）体外诱发的-γ干扰素反应在结核感染和结核病诊断中的价值。方法外周全血中加入ESAT-6抗原，诱导产生γ干扰素，以酶联免疫吸附法测定γ干扰素浓度，以增加的百分率为ESAT-6抗原诱发的γ干扰素反应值。对比结核密切接触者（60例）、痰培养证实的结核患者（46例）以及健康人（55例）及追踪调查儿童（68例）、青少年（52例）、老年（45例）的反应值。动态观察20例结核患者治疗过程中的反应值变化，比较HIV（＋）TB（＋）者（78例）和HIV（＋）TB（-）者（60例）的反应值。结果结核密切接触者与痰培养证实的结核患者的ESAT-6反应具有很高的敏感性。儿童与青少年的ESAT-6反应与临床诊断和预后具有很高的-致性。65％的结核患者在治疗过程中ESAT-6反应呈下降趋势。ESAT-6反应在HIV（＋）TB（＋）的诊断中敏感度为87．2％。结论体外ESAT-6诱发的γ干扰素测定对活动胜结核病尤其是儿童和青少年结核病的诊断有-定意义，也可用于鉴别HIV阳性者合并结核。 展开更多
关键词 Γ干扰素 分枝杆菌 结核 结核 肺 感染 抗原
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结核分枝杆菌早期分泌抗原ESAT-6的高效表达及其在结核分枝杆菌特异性细胞免疫检测中的应用 被引量：7
14
作者 张晶 刘威龙 +6 位作者 周伯平 张明霞 杨倩婷 朱秀云 陆坚 邓群益 陈心春 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期55-59,共5页
目的获得纯化的MTB早期分泌抗原ESAT-6，并对其抗原性及在MTB特异性细胞免疫检测中的应用价值进行评价。方法采用基因工程技术表达MTBESAT-6蛋白，通过Western blot法分析ESAT-6与特异性抗体的反应性。以纯化ESAT-6为抗原，用酶联免疫... 目的获得纯化的MTB早期分泌抗原ESAT-6，并对其抗原性及在MTB特异性细胞免疫检测中的应用价值进行评价。方法采用基因工程技术表达MTBESAT-6蛋白，通过Western blot法分析ESAT-6与特异性抗体的反应性。以纯化ESAT-6为抗原，用酶联免疫斑点技术（Elispot）检测肺结核患者、健康医务工作者、自然村居民外周血γ-干扰素的应答水平，同时与用于隐性结核感染及结核病诊断的QFT-G检测法进行平行比较，对其在MTB感染细胞免疫检测中的应用价值进行评价。结果成功表达和纯化了ESAT-6重组蛋白，所表达的蛋白能被特异性抗ESAT-6抗体识别，同时与肺结核外周血单核细胞反应，刺激后者产生γ-干扰素。Elispot技术检测肺结核患者、健康医务工作者、自然村居民的阳性率分别为36／49（73．5％）、11／62（17．7％）、17／194（8．8％），同时用QFT-G法对肺结核患者和健康医务工作者进行检测阳性率分别为38／49（77．6％）、14／58（24．1％），两种检测方法比较敏感度（73．5％，77．6％；X^2=0．381，P〉0．05）和特异度（82．3％，75．9％；X^2=0．406，P〉0．05），差异无统计学意义。结论利用pET原核表达系统可成功地表达和纯化MTBESAT-6重组蛋白，以ESAT-6为抗原建立的Elispot外周血IFN-γ检测技术与QFT-G的特异性和敏感性相当，可用于结核病的辅助诊断。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗原 酶联免疫吸附测定
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以结核分枝杆菌38kD重组蛋白为抗原的血清学诊断 被引量：5
15
作者 岳乔红 苏明权 +3 位作者 杨军兰 程晓东 段艳 郝晓柯 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期633-635,共3页
目的克隆表达结核分枝杆菌38kD抗原基因,并以此蛋白为抗原,进行分枝杆菌的血清学诊断。方法采用PCR自结核分枝杆菌基因组DNA中扩增38kD抗原基因,经测序鉴定正确后,克隆于pGEX-4T-2表达载体,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达,利用GSTrapFF... 目的克隆表达结核分枝杆菌38kD抗原基因,并以此蛋白为抗原,进行分枝杆菌的血清学诊断。方法采用PCR自结核分枝杆菌基因组DNA中扩增38kD抗原基因,经测序鉴定正确后,克隆于pGEX-4T-2表达载体,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达,利用GSTrapFF蛋白柱纯化表达产物,经ELISA检测其抗原的灵敏度与特异性。结果目的蛋白表达量约占菌体总蛋白量的28%,ELISA检测灵敏度为79.8%,特异性为99.0%。结论重组38kD抗原可用于结核分枝杆菌的诊断。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 抗原 基因表达 血清学诊断
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结核分枝杆菌重组蛋白的制备及抗原性分析 被引量：6
16
作者 苏明权 岳乔红 +5 位作者 周萍 段艳 杨柳 杨军兰 刘家云 郝晓柯 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2006年第11期987-990,共4页
目的:克隆表达结核分枝杆菌Mr16×103和Mr38×103重组蛋白,测定其抗原性和特异性.方法:利用聚合酶链反应自结核分枝杆菌基因组DNA扩增Mr16×103和Mr38×103抗原基因,经测序鉴定后克隆于pGEX4T2表达载体,转化于大肠杆菌B... 目的:克隆表达结核分枝杆菌Mr16×103和Mr38×103重组蛋白,测定其抗原性和特异性.方法:利用聚合酶链反应自结核分枝杆菌基因组DNA扩增Mr16×103和Mr38×103抗原基因,经测序鉴定后克隆于pGEX4T2表达载体,转化于大肠杆菌BL21菌株进行诱导表达,利用GSTrapFF蛋白柱纯化表达产物,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测其抗原性与特异性.结果:携带重组质粒的菌株经诱导产生的表达量分别为42%和18%;Mr16×103和Mr38×103蛋白量分别为:688mg/L和217mg/L.其中Mr16×103蛋白作为包被抗原ELISA法检测的灵敏度为67.0%,特异性为100%,准确性为84.0%;Mr38×103蛋白作为包被抗原ELISA检测的灵敏度为79.8%,特异性为99%,准确性为89.7%.结论:以Mr16×103,Mr38×103重组蛋白为抗原具有良好的抗原性和特异性,可用于结核分枝杆菌诊断方法的建立及临床诊断. 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 抗原 基因表达 ELISA
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不同浓度结核特异性转移因子对巨噬细胞呈递抗原作用的影响 被引量：7
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作者 肖凌 刘胜武 夏飞 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2004年第3期233-235,共3页
目的 :通过研究结核特异性转移因子 (transferfectortuberculosis,TFtb)对巨噬细胞促进BCG预致敏淋巴细胞增殖反应的影响 ,探讨转移因子 (TF)在传递特异性抗原信息过程中的作用机制。方法 :将小鼠腹腔巨噬细胞作为刺激细胞 ,脾脏非贴壁... 目的 :通过研究结核特异性转移因子 (transferfectortuberculosis,TFtb)对巨噬细胞促进BCG预致敏淋巴细胞增殖反应的影响 ,探讨转移因子 (TF)在传递特异性抗原信息过程中的作用机制。方法 :将小鼠腹腔巨噬细胞作为刺激细胞 ,脾脏非贴壁细胞为效应细胞 ,PPD作为抗原 ,以不同浓度的TFtb为刺激剂 ,用MTT法检测T细胞的增殖率。结果 :预致敏鼠的淋巴细胞增殖率随TFtb浓度升高而增高 ,0 .5mg·ml-1 时达到峰值 ,随后浓度升高增殖率反而下降。TFtb促预致敏淋巴细胞增殖是巨噬细胞依赖性和抗原特异性的。对未致敏鼠的淋巴细胞增殖率无明显改变。结论 :TFtb能够增强巨噬细胞促结核抗原预致敏淋巴细胞增殖反应的作用 ,可能与增强巨噬细胞呈递抗原的作用有关 。 展开更多
关键词 转移因子 结核杆菌 抗原呈递 巨噬细胞
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不同结核杆菌抗原刺激外周血T细胞亚群产生干扰素的比较 被引量：6
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作者 盛玲玲 夏惠 +2 位作者 孙悝 陈勇 李柏青 《蚌埠医学院学报》 CAS 2014年第4期426-428,432,共4页
目的：比较磷酸化抗原（HDMAPP）、结核杆菌耐热抗原（Mtb-HAg）和结核杆菌低分子耐热抗原Mtb-HAg（10 k）刺激外周血T细胞产生γ-干扰素（IFN-γ）的反应能力方面的特点及差异.方法：采集正常人外周血,分别用HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg... 目的：比较磷酸化抗原（HDMAPP）、结核杆菌耐热抗原（Mtb-HAg）和结核杆菌低分子耐热抗原Mtb-HAg（10 k）刺激外周血T细胞产生γ-干扰素（IFN-γ）的反应能力方面的特点及差异.方法：采集正常人外周血,分别用HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg（10 k）刺激培养14 h,再加入莫能霉素继续培养6h,收集细胞,加入荧光标记单抗进行表面分子和胞内染色,然后在流式细胞仪上检测各实验组中CD3＋ αβ细胞和CD3＋ γδ细胞胞内IFN-γ的表达.结果：正常人各抗原实验组CD3＋ αβ细胞和CD3＋γδ细胞胞内产生IFN-γ＋细胞比率较阴性组对照组升高（P＜0.01）.各抗原刺激组CD3＋γδ细胞产生IFN-γ＋细胞比率明显高于CD3＋αβ细胞（P ＜0.05 ～P＜0.01）.3种抗原刺激组间CD3＋αβ细胞和CD3＋γδ细胞无明显不同（P＞0.05）.结论：HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg（10 k）均可以刺激外周血中T细胞中αβ和γδ细胞群产生IFN-γ,均可特异性诱导刺激CD3＋γδ细胞产生IFN-γ,HDMAPP、Mtb-HAg（10 k）对CD3＋γδ细胞产生IFN-γ的表达量高于Mtb-HAg. 展开更多
关键词 结核杆菌 抗原 干扰素 γδ T细胞 αβ T细胞
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胰岛素样生长因子结合蛋白2和癌胚抗原对恶性胸腔积液与结核性胸腔积液的鉴别诊断价值分析 被引量：6
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作者 周晓明 康大海 +2 位作者 侯刚 尹燕 赵立 《实用心脑肺血管病杂志》 2017年第1期95-98,共4页
目的分析胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)和癌胚抗原(CEA)对恶性胸腔积液(MPE)与结核性胸腔积液(TPE)的鉴别诊断价值。方法选取2012年6月—2013年12月中国医科大学附属第一医院、中国医科大学附属盛京医院及沈阳市胸科医院收治的MP... 目的分析胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)和癌胚抗原(CEA)对恶性胸腔积液(MPE)与结核性胸腔积液(TPE)的鉴别诊断价值。方法选取2012年6月—2013年12月中国医科大学附属第一医院、中国医科大学附属盛京医院及沈阳市胸科医院收治的MPE患者52例作为A组,TPE患者43例作为B组。比较两组患者一般资料、IGFBP-2和CEA水平,并分析IGFBP-2和CEA水平对MPE与TPE的鉴别诊断价值。结果两组患者性别比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组患者年龄大于B组(P<0.05)。A组患者IGFBP-2、CEA水平高于B组(P<0.05)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线发现,IGFBP-2鉴别诊断MPE与TPE的曲线下面积(AUC)为0.862〔95%CI(0.808,0.959)〕,当其为8.78μg/L时,灵敏度为65.4%,特异度为94.7%,阳性预测值为90.0%,阴性预测值为66.7%;CEA鉴别诊断MPE与TPE的AUC为0.852〔95%CI(0.780,0.935)〕,当其为16.43μg/L时,灵敏度为63.2%,特异度为100.0%,阳性预测值为90.0%,阴性预测值为90.0%。结论 IGFBP-2和CEA对MPE与TPE的鉴别诊断价值相当,鉴别诊断价值均较高,可互为补充。 展开更多
关键词 胸腔积液 恶性 结核 胸膜 胰岛素样生长因子结合蛋白质2 癌胚抗原 诊断 鉴别
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结核分枝杆菌4种新抗原的克隆表达及血清学评价 被引量：6
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作者 罗巧 李霜君 +4 位作者 肖彤洋 李马超 刘海灿 楼永良 万康林 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期514-518,共5页
目的 初步评价结核分枝杆菌4种新抗原Rv0432、Rv0674、Rv1566c和Rv1547的血清学诊断价值。方法 以结核分枝杆菌实验室标准参照菌株H37Rv全基因组DNA为模板PCR扩增Rv0432、Rv0674、Rv1566c基因的完整序列，Rv1547基因分为两段（Rv1547-1... 目的 初步评价结核分枝杆菌4种新抗原Rv0432、Rv0674、Rv1566c和Rv1547的血清学诊断价值。方法 以结核分枝杆菌实验室标准参照菌株H37Rv全基因组DNA为模板PCR扩增Rv0432、Rv0674、Rv1566c基因的完整序列，Rv1547基因分为两段（Rv1547-1和Rv1547-2）扩增，与PET-32a表达载体构建重组质粒，重组蛋白利用亲和层析的方法进行纯化。待检测血清和BL21（DE3）菌体蛋白孵育进行预处理。各重组抗原用ELISA对151份待检血清（41份健康组血清和110份细菌学阳性结核患者组血清）进行IgG抗体检测。检测结果用受试者工作特征曲线对其诊断效能进行分析和评价。采用t检验比较目的蛋白在结核患者组和健康组的差异性。结果 成功克隆表达和纯化了蛋白Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2，ELISA结果显示Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数和曲线下面积分别为43.64%~92.73%、80.49%~92.68%、0.92~0.94、0.38~0.80、0.363~0.732和0.649~0.915。目的蛋白在结核组检测到的IgG抗体水平均大于健康组（P〈0.000 1）。结论 结核分枝杆菌新抗原Rv0432、Rv0674、Rv1566c、Rv1547-1和Rv1547-2具有良好的血清学检测价值，可作为结核病免疫学诊断的候选抗原。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 抗原 免疫学诊断 酶联免疫吸附试验
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