目的:研究miR218是否通过下调SOX4影响滋养层细胞系HTR-8细胞的迁移和侵袭。方法:妊娠期高血压疾病(HDCP)患者46例,平均年龄(31±4.6)岁,收缩期血压≥140 mm Hg和/或舒张期血压>90 mm Hg;以血压正常孕妇50例为对照,实时荧光定量P...目的:研究miR218是否通过下调SOX4影响滋养层细胞系HTR-8细胞的迁移和侵袭。方法:妊娠期高血压疾病(HDCP)患者46例,平均年龄(31±4.6)岁,收缩期血压≥140 mm Hg和/或舒张期血压>90 mm Hg;以血压正常孕妇50例为对照,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测两组患者静脉血中miR218的表达情况。转染miR218mimic和miRNC至离体培养的HTR-8细胞中,将细胞分为对照组(加入DMEM)、空质粒组(加入miRNC)和过表达miR218组(加入miR218 mimic)3组,检测细胞的迁移侵袭情况以及细胞中MMP-2和MMP-9的表达,,生物信息学预测miR-218潜在靶基因为SOX4,利用荧光素酶素试验验证SOX4是miR218的靶基因;再通过转染过表达SOX4的质粒至HTR-8细胞,HTR-8细胞分为过表达miR218组、过表达miR218+空质粒组、过表达miR218+SOX4组,以上方法检测HTR-8细胞的迁移侵袭情况。结果:相比于正常孕妇组,HDCP组患者血清中miR218表达减少(P<0.01)。相比于空质粒组,转染miR218mimic后,HTR-8细胞中MMP-2、MMP-9、SOX4的表达减少(P<0.01),细胞迁移和侵袭能力下降(P<0.01);荧光素酶试验结果显示,miR218能够显著降低SOX4-3'-UTR质粒的荧光素活性(P<0.01);相比于miR218+空质粒组,转染过表达SOX4质粒后,HTR-8细胞迁移和侵袭能力增加(P<0.01)。结论:HDCP患者血清中miR218表达减少,miR218可以通过下调SOX4从而抑制HTR-8细胞的迁移和侵袭。展开更多
文摘目的:研究miR218是否通过下调SOX4影响滋养层细胞系HTR-8细胞的迁移和侵袭。方法:妊娠期高血压疾病(HDCP)患者46例,平均年龄(31±4.6)岁,收缩期血压≥140 mm Hg和/或舒张期血压>90 mm Hg;以血压正常孕妇50例为对照,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测两组患者静脉血中miR218的表达情况。转染miR218mimic和miRNC至离体培养的HTR-8细胞中,将细胞分为对照组(加入DMEM)、空质粒组(加入miRNC)和过表达miR218组(加入miR218 mimic)3组,检测细胞的迁移侵袭情况以及细胞中MMP-2和MMP-9的表达,,生物信息学预测miR-218潜在靶基因为SOX4,利用荧光素酶素试验验证SOX4是miR218的靶基因;再通过转染过表达SOX4的质粒至HTR-8细胞,HTR-8细胞分为过表达miR218组、过表达miR218+空质粒组、过表达miR218+SOX4组,以上方法检测HTR-8细胞的迁移侵袭情况。结果:相比于正常孕妇组,HDCP组患者血清中miR218表达减少(P<0.01)。相比于空质粒组,转染miR218mimic后,HTR-8细胞中MMP-2、MMP-9、SOX4的表达减少(P<0.01),细胞迁移和侵袭能力下降(P<0.01);荧光素酶试验结果显示,miR218能够显著降低SOX4-3'-UTR质粒的荧光素活性(P<0.01);相比于miR218+空质粒组,转染过表达SOX4质粒后,HTR-8细胞迁移和侵袭能力增加(P<0.01)。结论:HDCP患者血清中miR218表达减少,miR218可以通过下调SOX4从而抑制HTR-8细胞的迁移和侵袭。
