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血浆Ⅳ型胶原酶含量显色测定法的建立及其应用 被引量：1
1
作者 余谨 赵云斌 +1 位作者 黄巍 尹建平 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期245-249,共5页
目的建立一种显色法检测血浆Ⅳ型胶原酶活性，探讨健康人群血浆中活性形式Ⅳ型胶原酶的参考区间范围。方法以琥珀酰明胶作为酶切底物，采用TNBS显色剂对酶切产生的末端氨基显色，使用酶标仪在405nm处测量其吸光度。通过对其显色剂用量... 目的建立一种显色法检测血浆Ⅳ型胶原酶活性，探讨健康人群血浆中活性形式Ⅳ型胶原酶的参考区间范围。方法以琥珀酰明胶作为酶切底物，采用TNBS显色剂对酶切产生的末端氨基显色，使用酶标仪在405nm处测量其吸光度。通过对其显色剂用量、显色稳定性和最佳检测波长等因素进行探讨，得出测定血浆Ⅳ型胶原酶的最优分析条件，采用回收实验、精密度实验对其进行方法学评价，并与夹心ELISA进行比较。采用该方法检测了112名健康人血浆Ⅳ型胶原酶含量。使用SPSS软件进行统计学分析，建立健康人血浆Ⅳ型胶原酶含量双侧95％可信区间。结果显色法检测血浆Ⅳ型胶原酶，总测定时间〈1．5h，线性范围1．5—10．0mg／L，最低检出限为0．965mg／L，与ELISA法相关性良好（R2=0．9997，P〈0．01），批内变异系数〈3．564％，批间变异系数〈9．821％。健康人血浆Ⅳ型胶原酶含量双侧95％的可信区间为33．38～49．80mg／L。结论血浆Ⅳ型胶原酶含量显色法可以应用于检测血浆中活性形式Ⅳ型胶原酶的含量，并建立了健康人血浆Ⅳ型胶原酶含量参考区间。 展开更多
关键词 胶原酶类 三硝基苯磺酸 染色与标记
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