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阴道毛滴虫双链RNA病毒感染及其对甲硝唑耐药性的影响 被引量：6
1
作者 王丽娟 王东 +2 位作者 袁玉青 杜纪英 薛长贵 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第8期588-590,共3页
目的调查河南地区阴道毛滴虫临床分离株阴道毛滴虫病毒感染情况,探索病毒感染对阴道毛滴虫甲硝唑耐药性的影响。方法 TYM(trypticase-yeast extract-maltose)无菌培养基培养阴道毛滴虫临床分离株,达到纯培养后提取虫体总核酸(DNA和RNA)... 目的调查河南地区阴道毛滴虫临床分离株阴道毛滴虫病毒感染情况,探索病毒感染对阴道毛滴虫甲硝唑耐药性的影响。方法 TYM(trypticase-yeast extract-maltose)无菌培养基培养阴道毛滴虫临床分离株,达到纯培养后提取虫体总核酸(DNA和RNA),进行1%琼脂糖凝胶电泳分析;连续稀释法测量每株虫体的甲硝唑最小致死浓度。结果对30株阴道毛滴虫总核酸进行电泳,其中6株有5.5 kb双链RNA病毒带,病毒感染率为20.0%。阴道毛滴虫病毒阴性组甲硝唑最小致死浓度为(24.27±20.899)μg/ml,病毒阳性组为(5.68±3.588)μg/ml,差异有统计学意义(t=2.143,P<0.05)。结论河南地区阴道毛滴虫临床分离株中检测到阴道毛滴虫病毒,无阴道毛滴虫病毒寄生的虫体易发生甲硝唑抵抗。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 阴道毛滴虫病毒 甲硝唑 最小致死浓度
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阴道毛滴虫病毒研究进展 被引量：3
2
作者 赵月平 张西臣 +1 位作者 刘晓峰 宫鹏涛 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第5期396-399,共4页
阴道毛滴虫病毒是专性寄生于阴道毛滴虫体内的一种寄生性原虫病毒,阴道毛滴虫病毒的发现为研究其细胞分子生物学特性提供了新的思路和工具。本文综述了近年来对阴道毛滴虫病毒的研究进展。
关键词 阴道毛滴虫病毒 研究进展 综述
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阴道毛滴虫病毒介导的EGFP在阴道毛滴虫细胞内的表达 被引量：2
3
作者 郭瑞娟 李淑红 +4 位作者 张西臣 李建华 宫鹏涛 杨举 张国才 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第1期44-47,共4页
目的研究阴道毛滴虫病毒(Trichomonas vaginalis virus,TVV)介导外源基因进入阴道毛滴虫体内表达的能力,探索TVV作为双链RNA病毒转染载体的可能性。方法根据TVV基因组的序列特征,用绿色荧光蛋白(EG-FP)编码基因替换TVV的全部或部分基因... 目的研究阴道毛滴虫病毒(Trichomonas vaginalis virus,TVV)介导外源基因进入阴道毛滴虫体内表达的能力,探索TVV作为双链RNA病毒转染载体的可能性。方法根据TVV基因组的序列特征,用绿色荧光蛋白(EG-FP)编码基因替换TVV的全部或部分基因编码区,构建TVV与增强型EGFP编码基因的嵌合体pTVV-EGFP,其体外转录体经电穿孔方法转染携病毒阴道毛滴虫株,RT-PCR及SDS-PAGE方法检测EGFP的表达情况。结果电穿孔转染后培养的虫体在荧光显微镜下观察到绿色荧光信号,且续传15代后仍然存在;RT-PCR检测到EGFP的mRNA,SDS-PAGE检测到转染后虫体及培养上清中有分子质量单位为27 ku的蛋白,与已知EGFP的分子质量相符。结论TVV能成功介导外源性EGFP编码基因在阴道毛滴虫体内表达。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 阴道毛滴虫病毒 增强型绿色荧光蛋白 电穿孔
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妇科门诊患者阴道毛滴虫及其病毒感染情况分析 被引量：2
4
作者 罗倩 李兴玉 +3 位作者 廖永丽 罗跃梅 陈旭辉 周必英 《成都医学院学报》 CAS 2018年第5期577-580,585,共5页
目的了解妇科门诊患者阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis,TV)及阴道毛滴虫病毒(trichomonas vaginalis virus,TVV)感染情况及感染因素。方法对就诊于遵义医学院附属医院妇科门诊的3 321例患者进行调查,通过形态学及分子生物学方法鉴定TV... 目的了解妇科门诊患者阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis,TV)及阴道毛滴虫病毒(trichomonas vaginalis virus,TVV)感染情况及感染因素。方法对就诊于遵义医学院附属医院妇科门诊的3 321例患者进行调查,通过形态学及分子生物学方法鉴定TV及TVV感染情况,使用2检验对检出率和感染因素进行统计分析。结果 3 321例患者中TV阳性数为76例,检出率为2.29%。30～39岁患者检出率最高,达4.16%(39/937);不同职业中农民组检出率最高,达3.60%(34/945);有良好卫生习惯的女性检出率较低。TV在培养基中生长良好,未筛选出TVV。结论 TV感染率相对较低,感染以中年期女性居多,与职业、个人卫生习惯等密切相关。在体外成功培养出TV,但未找到携病毒株。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 阴道毛滴虫病毒 感染 感染因素
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阴道毛滴虫病毒对虫体基因多态性的影响 被引量：2
5
作者 王丽娟 王黎 薛长贵 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第1期34-36,7,共4页
目的分析阴道毛滴虫病毒对阴道毛滴虫临床分离株基因多态性的影响。方法用MGE-PCR扩增阴道毛滴虫病毒阳性株和病毒阴性株Tvmar1基因位置,应用软件MEGA 5.0构建系统进化树。结果阴道毛滴虫临床分离株之间的遗传差异明显,6株阴道毛滴虫病... 目的分析阴道毛滴虫病毒对阴道毛滴虫临床分离株基因多态性的影响。方法用MGE-PCR扩增阴道毛滴虫病毒阳性株和病毒阴性株Tvmar1基因位置,应用软件MEGA 5.0构建系统进化树。结果阴道毛滴虫临床分离株之间的遗传差异明显,6株阴道毛滴虫病毒阳性株之间的遗传距离较近,分布在同一分支上。结论阴道毛滴虫病毒会对阴道毛滴虫的基因多态性产生影响。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 阴道毛滴虫病毒 MGE-PCR 基因多态性
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阴道毛滴虫dsRNA病毒部分基因的克隆与序列分析 被引量：3
6
作者 赵月平 张西臣 +4 位作者 陈丽凤 李建华 尹继刚 刘全 宫鹏涛 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期389-390,共2页
提取阴道毛滴虫总核酸为模板,根据GenBank中发表的阴道毛滴虫病毒序列(U08999,NC003873,NC003824,NC003834)设计1对简并引物,经RT-PCR得到与预计大小一致的PCR特异性产物,将其进行克隆、测序,得到目的基因片段长度为1454bp,与阴道毛滴... 提取阴道毛滴虫总核酸为模板,根据GenBank中发表的阴道毛滴虫病毒序列(U08999,NC003873,NC003824,NC003834)设计1对简并引物,经RT-PCR得到与预计大小一致的PCR特异性产物,将其进行克隆、测序,得到目的基因片段长度为1454bp,与阴道毛滴虫病毒T1株(U08999)的序列同源性最高为82.9%。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 dsRNA病毒 克隆 序列分析
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阴道毛滴虫病毒RDRP基因的克隆与分析 被引量：1
7
作者 赵月平 张西臣 +2 位作者 李建华 尹继刚 宫鹏涛 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期42-44,共3页
目的对阴道毛滴虫病毒RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)基因的克隆,以便探讨其功能。方法提取阴道毛滴虫总核酸为模板,根据所克隆的阴道毛滴虫病毒部分序列和GenBank中发表的阴道毛滴虫病毒TVV-T1序列设计一对引物,经RT-PCR得到与预计大小一致... 目的对阴道毛滴虫病毒RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)基因的克隆,以便探讨其功能。方法提取阴道毛滴虫总核酸为模板,根据所克隆的阴道毛滴虫病毒部分序列和GenBank中发表的阴道毛滴虫病毒TVV-T1序列设计一对引物,经RT-PCR得到与预计大小一致的PCR特异性产物,将其克隆到pMD-18T载体后测序,并与GenBank中核苷酸序列进行同源性搜索与分析。结果目的基因片段长度为2271bp,与阴道毛滴虫病毒T1株(U08999)的同源性最高为85.2%。结论国内首次成功克隆出阴道毛滴虫病毒RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)基因序列。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫病毒 RDRP 克隆 分析
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阴道毛滴虫dsRNA病毒的鉴定 被引量：1
8
作者 赵月平 张西臣 +5 位作者 陈丽凤 李建华 尹继刚 刘全 张国才 宫鹏涛 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期170-173,共4页
临床收集阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis)进行体外纯培养,通过总核酸电泳筛选携病毒株。分别用DNA酶和RNA酶处理携病毒株总核酸后电泳。电镜观察阴道毛滴虫及其病毒粒子。根据已发表的阴道毛滴虫病毒基因序列设计合成1对引物,进行RT-... 临床收集阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis)进行体外纯培养,通过总核酸电泳筛选携病毒株。分别用DNA酶和RNA酶处理携病毒株总核酸后电泳。电镜观察阴道毛滴虫及其病毒粒子。根据已发表的阴道毛滴虫病毒基因序列设计合成1对引物,进行RT-PCR,将其产物连接到pMD18-T载体,进行克隆并测序,通过BLAST在GenBank进行同源性搜索,并用DNAStar分子生物学软件进行分析。用放射自显影测定阴道毛滴虫病毒的RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)活性。结果显示,阴道毛滴虫病毒呈球形、二十面体、直径33 nm。病毒基因组约5.5 kb,病毒核酸不能被DNA酶(100 mg/L)降解,但可被RNA酶(1.0 mg/L)降解,病毒基因组有RDRP活性。经RT-PCR扩增后得到1条1 454 bp的片段,与预计大小基本相符,其序列与阴道毛滴虫病毒T1基因的同源性为82.9%。结果表明,在我国阴道毛滴虫长春分离株发现阴道毛滴虫病毒,该病毒属于dsRNA病毒。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫 dsRNA病毒 鉴定
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阴道毛滴虫病毒衣壳蛋白基因cap_(2037)的克隆与表达
9
作者 赵月平 张西臣 +3 位作者 陈丽凤 李建华 尹继刚 宫鹏涛 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期718-721,724,共5页
目的对阴道毛滴虫病毒衣壳蛋白基因的克隆与原核表达。方法提取阴道毛滴虫总核酸为模板,根据所克隆的阴道毛滴虫病毒部分序列和GenBank中发表的阴道毛滴虫病毒TvV-T1序列设计一对引物,经RT-PCR得到与预计大小一致的PCR特异性产物,将其... 目的对阴道毛滴虫病毒衣壳蛋白基因的克隆与原核表达。方法提取阴道毛滴虫总核酸为模板,根据所克隆的阴道毛滴虫病毒部分序列和GenBank中发表的阴道毛滴虫病毒TvV-T1序列设计一对引物,经RT-PCR得到与预计大小一致的PCR特异性产物,将其克隆到pMD-18T载体后测序,并与GenBank中核苷酸序列进行同源性搜索与分析,再将其克隆至表达载体pET28a。并以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果目的基因片段长度为2037bp,与阴道毛滴虫病毒T1株(U08999)的同源性最高为82.9%,构建原核表达载体pET-Cap2037;IPTG诱导后,SDS-PAGE显示表达产物的大小约75kDa。结论成功克隆出阴道毛滴虫病毒衣壳蛋白基因序列,与TVV-T1株序列有82.9%的同源性,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明,75kDa蛋白基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达。 展开更多
关键词 阴道毛滴虫病毒 衣壳蛋白 克隆 原核表达
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