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HPLC法测定tremor大鼠脑组织中谷氨酸和GABA含量 被引量：19
1
作者 俞军龄 陈再兴 +6 位作者 毛小元 孟秀君 郭凤 刘睿 吴坤灿 谢妮 蔡际群 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1530-1533,共4页
目的建立测定tremor大鼠(tm)脑内海马组织中GLU及GABA浓度的高效液相色谱(HPLC)方法。方法冰上剥离13wk的tm/Wistar大鼠海马组织,低温匀浆处理,利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生HPLC法结合荧光检测器测定GLU和GABA的含量。0.1mol·L-1... 目的建立测定tremor大鼠(tm)脑内海马组织中GLU及GABA浓度的高效液相色谱(HPLC)方法。方法冰上剥离13wk的tm/Wistar大鼠海马组织,低温匀浆处理,利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生HPLC法结合荧光检测器测定GLU和GABA的含量。0.1mol·L-1醋酸钾和甲醇进行二元梯度洗脱,峰面积定量。结果GLU的线性方程为Y^=1E+06X(r2=0.9937),线性范围为0.15～5.88mg·L-1,具有良好的线性关系,在0.74、1.47、3.68mg.L-13个浓度下样本回收率分别为97.7%、98.9%、100.5%;样品中GLU日内变异系数为3.8%,隔日测定后,日间变异系数为5.9%;GABA的线性方程为Y^=4E+06X(r2=0.998),线性范围为0.10～2.15mg·L-1,具有良好的线性关系,在0.2、0.5、1.0mg·L-13个浓度下样本回收率分别为98.3%、101.0%、102.7%;样品GABA日内变异系数为2.3%,隔日测定后,日间变异系数为3.9%。结论该方法较简便、快速且干扰相对较小,满足测定要求,可用于氨基酸的含量测定研究。 展开更多
关键词 谷氨酸 Γ-氨基丁酸 OPA柱前衍生化 反相高效液相色谱法 tremor大鼠 WISTAR大鼠 癫痫
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托吡酯对遗传性癫痫大鼠脑内GAT-1和GAT-3表达的影响 被引量：6
2
作者 毛小元 程振国 +7 位作者 俞军龄 闵冬雨 郭凤 刘睿 吴坤灿 张宇轩 谢妮 蔡际群 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1069-1074,共6页
目的探讨托吡酯对TRM大鼠脑内GAT-1和GAT-3 mRNA和蛋白表达的影响。方法分别应用实时定量PCR法和Western blot方法检测Wistar正常组、TRM组、TPM40组和TPM80组脑内GAT-1和GAT-3 mRNA和蛋白表达。结果 GAT-1、GAT-3和β-actin标准曲线相... 目的探讨托吡酯对TRM大鼠脑内GAT-1和GAT-3 mRNA和蛋白表达的影响。方法分别应用实时定量PCR法和Western blot方法检测Wistar正常组、TRM组、TPM40组和TPM80组脑内GAT-1和GAT-3 mRNA和蛋白表达。结果 GAT-1、GAT-3和β-actin标准曲线相关性良好,基因特异性强。GAT-1 mRNA在TRM组的海马高于正常组(P<0.01);与TRM组比较,TPM80组海马中GAT-1 mRNA明显降低(P<0.05);GAT-3 mRNA在TRM组海马中的表达高于正常组(P<0.05);GAT-1蛋白表达在TRM组的海马高于正常组(P<0.01);与TRM组比较,TPM80组海马中GAT-1蛋白明显降低(P<0.01);GAT-3蛋白在TRM组海马中的表达高于正常组(P<0.05)。结论 TRM组海马内GAT-1及GAT-3的表达增加可能促进了癫痫的发生。托吡酯的抗癫痫作用可能是通过降低海马内GAT-1的表达来实现的,这种调节存在剂量依赖性。 展开更多
关键词 GAT-1 GAT-3 TRM大鼠 癫痫 托吡酯 实时定量PCR Western BLOT
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遗传性癫痫大鼠海马内GAT-1和GAT-3表达上调 被引量：4
3
作者 毛小元 俞军龄 +6 位作者 闵冬雨 郭凤 刘睿 吴坤灿 张宇轩 谢妮 蔡际群 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期629-633,共5页
目的探讨遗传性癫痫大鼠(TRM)海马内GAT-1和GAT-3mRNA与蛋白的表达。方法应用RT-PCR技术检测GAT-1和GAT-3mRNA的表达;应用Westernblot方法检测GAT-1和GAT-3蛋白的表达;应用免疫组化方法定位GAT-1和GAT-3蛋白的分布。结果TRM大鼠海马内GA... 目的探讨遗传性癫痫大鼠(TRM)海马内GAT-1和GAT-3mRNA与蛋白的表达。方法应用RT-PCR技术检测GAT-1和GAT-3mRNA的表达;应用Westernblot方法检测GAT-1和GAT-3蛋白的表达;应用免疫组化方法定位GAT-1和GAT-3蛋白的分布。结果TRM大鼠海马内GAT-1mR-NA和蛋白表达均高于正常Wistar大鼠(P<0.01);GAT-3mRNA表达高于正常Wistar大鼠(P<0.05);GAT-3蛋白表达亦高于正常Wistar大鼠(P<0.01);免疫组化结果显示GAT-1在TRM和Wistar大鼠海马的CA1、CA3和DG区均有明显分布,且在TRM鼠海马的CA1、CA3和DG区中均比在正常Wistar鼠中明显;而GAT-3蛋白只在TRM和Wistar大鼠海马的CA1区中表达丰富,同时,和正常Wistar鼠比较,TRM鼠海马CA1区中GAT-3蛋白的表达明显增加。结论TRM大鼠海马内GAT-1和GAT-3表达上调可能促进了癫痫的发生,可能是癫痫治疗的靶点。 展开更多
关键词 GAT-1 GAT-3 TRM大鼠 癫痫 RT-PCR 免疫组化 WESTERN BLOT
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Tremor大鼠皮质内ERK信号通路相关蛋白表达的变化
4
作者 姜虹 王皓晨 +1 位作者 王杰 施宪宝 《辽宁医学院学报》 CAS 2016年第1期1-3,I0001,共4页
目的研究ERK!信号通路相关蛋白在癫痫状态下的改变,以探讨ERK信号转导通路在癫痫发病机制中的作用。方法实验分为两组,分别为Tremor大鼠组和Wistar大鼠组。通过Western Blot方法检测两组大脑皮质内ERK蛋白和p-ERK蛋白含量的异常变化。... 目的研究ERK!信号通路相关蛋白在癫痫状态下的改变,以探讨ERK信号转导通路在癫痫发病机制中的作用。方法实验分为两组,分别为Tremor大鼠组和Wistar大鼠组。通过Western Blot方法检测两组大脑皮质内ERK蛋白和p-ERK蛋白含量的异常变化。结果通过PCR鉴定了Tremor大鼠,试验分为Tremor组(实验组)和Wistar组(对照组)。利用western Blot方法测定ERK1/2和p-ERK1/2蛋白在Tremor大鼠和Wistar大鼠的皮质中均有表达,Tremor大鼠的ERK1/2和p-ERK的蛋白含量分别为0.140 3和0.734 4,Wistar组大鼠的ERK1/2和p-ERK的蛋白含量分别为0.170 9和0.975 4。结论 ERK1/2和p-ERK蛋白在癫痫大鼠皮质内的表达显著减少,说明ERK信号通路在癫痫状态下被抑制。 展开更多
关键词 癫痫 胞外信号转导蛋白激酶ERK tremor大鼠 PCR WESTERN BLOT
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自发性癫痫大鼠脑内神经肽Y受体Y2R和Y5R的表达及分布
5
作者 徐晓雪 郭凤 +4 位作者 王千慧 杨军 赵久晗 张朝东 蔡际群 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2015年第2期101-105,共5页
目的研究自发性癫痫大鼠(tremor rat,TRM)海马和颞叶皮质中神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)Y2和Y5受体(Y2R和Y5R)的表达和分布。方法以TRM大鼠作为癫痫组,正常Wistar大鼠作为对照组,每组7只,以RT-PCR法检测Y2R和Y5R mRNA水平表达,Western B... 目的研究自发性癫痫大鼠(tremor rat,TRM)海马和颞叶皮质中神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)Y2和Y5受体(Y2R和Y5R)的表达和分布。方法以TRM大鼠作为癫痫组,正常Wistar大鼠作为对照组,每组7只,以RT-PCR法检测Y2R和Y5R mRNA水平表达,Western Blot法检测其蛋白水平表达,免疫荧光法分析癫痫组和对照组大鼠海马CA1、CA3和齿状回(DG)区以及颞叶皮质中Y2R与Y5R的分布和定位。结果RT-PCR和Western Blot结果显示,与对照组大鼠相比较,癫痫组海马和颞叶皮质中Y2R mRNA相对表达水平(相对灰度值为海马:0.75±0.06 vs.0.51±0.07;颞叶皮质:0.70±0.05 vs.0.55±0.03)及蛋白相对表达水平(相对灰度值为海马:0.79±0.08 vs.0.42±0.05;颞叶皮质:0.72±0.05 vs.0.51±0.07)均显著上调(均P<0.01),Y5R mRNA(相对灰度值为海马:0.52±0.10 vs.0.54±0.06;颞叶皮质:0.46±0.03 vs.0.42±0.04)及蛋白(相对灰度值为海马:0.28±0.06 vs.0.27±0.03;颞叶皮质:0.31±0.05 vs.0.27±0.07)表达均没有明显变化(均P>0.05)。免疫荧光分析发现Y2R与Y5R在癫痫组大鼠海马CA1、CA3区神经元和DG区颗粒细胞以及颞叶皮质神经元中分布广泛且主要定位在细胞膜上。结论在TRM中Y2R表达在海马和颞叶皮质中均表达上调,但是Y5R的表达没有明显改变。 展开更多
关键词 癫痫 NPY受体 Y2R Y5R 自发性癫痫大鼠
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