转糖基β-半乳糖苷酶产生菌筛选和鉴定及酶催化生成低聚半乳糖 被引量：19

1

作者 王红妹 肖敏 +2 位作者 李正义 李玉梅 钱新民 《山东大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期133-139,共7页

通过水解活性和转糖基活性筛选,从实验室97株保存菌种中获得1株具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶产生菌,克隆并序列分析了该菌株16S rDNA基因片断,GenBank收录号为DQ267829.综合其形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列同源性分析结果,... 通过水解活性和转糖基活性筛选,从实验室97株保存菌种中获得1株具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶产生菌,克隆并序列分析了该菌株16S rDNA基因片断,GenBank收录号为DQ267829.综合其形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列同源性分析结果,将其鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)2-37-4-1.确定了该菌株β-半乳糖苷酶产酶培养基的碳源为乳糖1%,氮源为蛋白胨0.5%和酵母膏0.5%,培养条件为37℃摇床培养18 h;碳源实验证明,该菌株β-半乳糖苷酶产生为乳糖诱导型.利用薄层层析技术研究了pH值、乳糖底物浓度、反应温度和反应时间对该菌株β-半乳糖苷酶以乳糖为底物转糖基合成低聚半乳糖的影响,确定最适反应条件为pH7.5、50 mmol/L(磷酸缓冲液)配制的40%乳糖溶液,55℃反应24 h.转糖基反应产物高压液相色谱分析其组成为低聚半乳糖25.68%,双糖(包括乳糖和转移二糖)33.02%,葡萄糖26.37%和半乳糖14.92%. 展开更多

关键词 巨大芽孢杆菌 16S RDNA Β-半乳糖苷酶 转糖基作用 低聚半乳糖

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β-半乳糖苷酶催化乳糖合成低聚半乳糖 被引量：9

2

作者 李美玲 江波 张涛 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期234-239,共6页

通过对环状芽孢杆菌B.circulans SK28.003的发酵获得β-半乳糖苷酶酶液,经过浓缩、盐析沉淀和低温冷冻干燥,制备酶粉。利用β-半乳糖苷酶的转糖苷功能催化乳糖合成低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),采用单因素和正交试验优化,... 通过对环状芽孢杆菌B.circulans SK28.003的发酵获得β-半乳糖苷酶酶液,经过浓缩、盐析沉淀和低温冷冻干燥,制备酶粉。利用β-半乳糖苷酶的转糖苷功能催化乳糖合成低聚半乳糖(Galactooligosaccharides,GOS),采用单因素和正交试验优化,通过高效液相色谱法检测,以GOS产率为评价指标,确定最佳合成条件为:乳糖起始质量浓度为50 g/d L,加酶量为6 U/g,反应温度为60℃,p H 7.5。在此条件下反应12 h,GOS产率可达45.5%。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖 转糖苷功能 条件优化 正交试验

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双歧杆菌和乳酸菌β-半乳糖苷酶转糖基作用的研究进展 被引量：5

3

作者 姜陈波 杭锋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期335-341,共7页

双歧杆菌和乳酸菌作为一般认为安全的微生物,是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)的较好来源。部分双歧杆菌和乳酸菌菌株能够产生具有转糖基活力的β-gal,以乳糖为底物可合成具有益生作用的低聚半乳糖(galactooligosaccharides,GO... 双歧杆菌和乳酸菌作为一般认为安全的微生物,是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)的较好来源。部分双歧杆菌和乳酸菌菌株能够产生具有转糖基活力的β-gal,以乳糖为底物可合成具有益生作用的低聚半乳糖(galactooligosaccharides,GOS),而GOS产物的产量和组成受到β-gal的来源以及反应条件的影响。因此,本文总结了能够产生具有转糖基活力的β-gal的双歧杆菌和乳酸菌菌株,比较了两类来源的β-gal的酶学性质,并重点阐述了这两类β-gal在GOS合成中的应用。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 乳酸菌 双歧杆菌 转糖基作用 低聚半乳糖

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异紫杉脂素的酶法糖基化 被引量：3

4

作者 杨亚波 王旻 +1 位作者 梁研 梁敬钰 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期526-528,共3页

目的　以异紫杉脂素为例 ,探索酶法糖基化的可行性 ,为其他具有重要生理活性的天然化合物提供可行的生物转化方法。方法　利用半乳糖苷酶转糖基活性对异紫杉脂素进行了糖基化修饰。结果　通过薄层层析、质谱、红外光谱、1 HNMR、1 3CNM... 目的　以异紫杉脂素为例 ,探索酶法糖基化的可行性 ,为其他具有重要生理活性的天然化合物提供可行的生物转化方法。方法　利用半乳糖苷酶转糖基活性对异紫杉脂素进行了糖基化修饰。结果　通过薄层层析、质谱、红外光谱、1 HNMR、1 3CNMR数据显示产物即是异紫杉脂素半乳糖苷。结论　 E.coli和脆壁酵母来源的 展开更多

关键词 异紫杉脂素 半乳糖苷酶 糖基化 天然化合物 生物转化

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耐高温β-糖苷酶的乳糖水解活性及转糖基活性 被引量：2

5

作者 王卿卿 冯惠勇 +2 位作者 康辉 卢楠 张丽丽 《生物加工过程》 CAS CSCD 2009年第1期49-53,共5页

β-糖苷酶(ttβGLY)是Thermus thermophilus产生的一种耐高温酶,以乳糖为底物的酶反应研究表明:该酶具有较高的乳糖水解活性,其最适温度为70℃,最适pH为7.0,乳糖水解的Km=1.566 mmol/L,Vm ax=0.406 mmol/m in,在70℃有较好的热稳定性。... β-糖苷酶(ttβGLY)是Thermus thermophilus产生的一种耐高温酶,以乳糖为底物的酶反应研究表明:该酶具有较高的乳糖水解活性,其最适温度为70℃,最适pH为7.0,乳糖水解的Km=1.566 mmol/L,Vm ax=0.406 mmol/m in,在70℃有较好的热稳定性。该酶同时具有较强的转糖基活性,在以40%乳糖为底物,加酶量42.5 U/mL、反应温度70℃、反应时间16 h的条件下,低聚半乳糖的合成率达到35.3%。水解产物葡萄糖对乳糖水解反应和转糖基反应具有抑制作用,是影响GOS合成的重要因素。 展开更多

关键词 β-糖苷酶 低聚半乳糖 水解 转糖基

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高转苷活性乳糖酶快速筛选方法的建立与初步应用 被引量：1

6

作者 赵继华 牛丹丹 +3 位作者 NOKUTHULA Peace Mchunu 田康明 苗佳 王正祥 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期17-20,共4页

具有良好半乳糖基转移酶活性的乳糖酶是工业制备低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)的主要酶制剂。通过筛选获得了以GOS为唯一碳源生长良好,在乳糖-葡萄糖-半乳糖中生长不良的长双歧杆菌B1172,确立了其GOS-生物量相关关系,进一... 具有良好半乳糖基转移酶活性的乳糖酶是工业制备低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)的主要酶制剂。通过筛选获得了以GOS为唯一碳源生长良好,在乳糖-葡萄糖-半乳糖中生长不良的长双歧杆菌B1172,确立了其GOS-生物量相关关系,进一步基于GOS-生物量相关关系建立起乳糖酶转苷活性的高通量筛选方法。运用此方法,从菌种库中筛选获得了5株具有较高转苷活性的乳糖酶产生菌株,可为后续此酶的克隆与分子进化奠定基础。 展开更多

关键词 乳糖酶 转半乳糖基活性 乳糖酶生产菌 高通量筛选

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乳果糖生产方法及其在肉鸡生产中的应用 被引量：1

7

作者 吕路芳 谢文惠 +1 位作者 姜宁 张爱忠 《中国饲料》 北大核心 2018年第19期15-19,共5页

乳果糖的工业生产主要是乳糖在碱性溶液中通过化学法获得,由于考虑到环境污染和繁琐的分离过程,所以酶法催化合成乳果糖一直被视为更好的选择。本文介绍了化学异构法和酶法催化合成乳果糖的方式,并对乳果糖在肉鸡生产中的应用进行了总结... 乳果糖的工业生产主要是乳糖在碱性溶液中通过化学法获得,由于考虑到环境污染和繁琐的分离过程,所以酶法催化合成乳果糖一直被视为更好的选择。本文介绍了化学异构法和酶法催化合成乳果糖的方式,并对乳果糖在肉鸡生产中的应用进行了总结,同时对乳果糖生产技术未来的发展进行了展望,以期为乳果糖的后续开发与利用提供一定的参考。 展开更多

关键词 乳果糖 转糖基作用 化学异构法 Β-半乳糖苷酶 纤维二糖差向异构酶 肉鸡

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高转苷活性乳糖酶编码基因的克隆与酶学特征研究 被引量：1

8

作者 田康明 赵继华 +3 位作者 牛丹丹 Nokuthula Peace MCHUNU 王彩喆 王正祥 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第15期8-13,共6页

运用鸟枪克隆术,从环状芽胞杆菌B2301基因组中克隆出乳糖酶编码基因,其完整读框大小为5133 bp,编码1710个氨基酸残基,不含典型细菌信号肽序列,与已有报道的β-半乳糖苷酶的最高一致性为93.6%。初步表达和纯化了此乳糖酶,重组乳糖酶在50... 运用鸟枪克隆术,从环状芽胞杆菌B2301基因组中克隆出乳糖酶编码基因,其完整读框大小为5133 bp,编码1710个氨基酸残基,不含典型细菌信号肽序列,与已有报道的β-半乳糖苷酶的最高一致性为93.6%。初步表达和纯化了此乳糖酶,重组乳糖酶在50℃(ONPG)/60℃(乳糖)和pH 6.0~6.5下表现出最高催化活性,Zn 2+、Fe 2+、Cu 2+、EDTA和SDS对重组酶表现出不同程度的抑制作用;该酶在50和55℃下催化合成低聚半乳糖的V max分别为2.21和2.47 g/(L·h),K m分别为10.46和14.37 g/L。所获得的乳糖酶具有以乳糖为底物酶法合成低聚半乳糖的优良应用属性,可为后续针对此酶的高效表达与工业化应用奠定基础。 展开更多

关键词 乳糖酶 转半乳糖基活性 克隆 酶学性质 低聚半乳糖

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一株曲霉(Aspergillus sp.AF)β-半乳糖苷酶的转糖基活性研究 被引量：9

9

作者 袁绍鹏 肖敏 +1 位作者 孙正 钱新民 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期31-34,共4页

确定了 1株曲霉的 β 半乳糖苷酶产酶培养基的氮源为蛋白胨 1%、酵母膏 0 3 %、KNO3 0 2 % ,碳源为葡萄糖 1% ,培养条件为 3 0℃摇床培养 48h。碳源实验证明 ,β 半乳糖苷酶在该菌株中属组成型表达。研究了该菌株的 β 半乳糖苷酶转... 确定了 1株曲霉的 β 半乳糖苷酶产酶培养基的氮源为蛋白胨 1%、酵母膏 0 3 %、KNO3 0 2 % ,碳源为葡萄糖 1% ,培养条件为 3 0℃摇床培养 48h。碳源实验证明 ,β 半乳糖苷酶在该菌株中属组成型表达。研究了该菌株的 β 半乳糖苷酶转糖基反应体系中的pH、乳糖浓度、反应温度、反应时间对转糖基作用的影响 ,并利用薄层层析、高效液相层析技术分析了转糖基反应的产物。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 曲霉 低聚半乳糖 转糖基活性 微生物酶法

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发酵乳杆菌β-半乳糖苷酶转糖基活性研究 被引量：7

10

作者 陆文伟 孔文涛 +1 位作者 孔健 季明杰 《山东大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期83-87,共5页

从传统发酵乳制品中筛选到1株转糖基活性较高的乳杆菌，经16SrDNA菌种鉴定为发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum，EU621851）K4。以乳糖为底物，研究β-半乳糖苷酶粗酶液在不同pH、乳糖浓度、反应温度和时间的转糖基活性。结果表明在... 从传统发酵乳制品中筛选到1株转糖基活性较高的乳杆菌，经16SrDNA菌种鉴定为发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum，EU621851）K4。以乳糖为底物，研究β-半乳糖苷酶粗酶液在不同pH、乳糖浓度、反应温度和时间的转糖基活性。结果表明在pH5．5、乳糖20％、温度50℃条件下反应48h，转糖基活性最高，能生成多种低聚半乳糖。研究发现在低乳糖含量（5％）和pH5～7范围内都具有明显的转糖基活性。用牛奶为原料进行转糖基能力测定，结果该酶既能降低牛乳中的乳糖含量，又能生成低聚半乳糖。因此，菌株Lb．fermentum K4在乳制品发酵中具有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 发酵乳杆菌 半乳糖苷酶 转糖基活性 低聚半乳糖

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亲水改性聚氨酯纳米纤维酶膜催化油水两相体系转糖苷反应

11

作者 栾盼盼 张羽飞 +4 位作者 张松平 姜艳军 李鹏举 苏志国 高静 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期469-475,共7页

利用静电纺丝法制备含LiCl的聚氨酯（PU）纳米纤维,用牛血清白蛋白（BSA）对纤维亲水改性,于其上固定β-D-半乳糖苷酶,提高酶在油水两相介质中催化转糖苷反应的活力.结果表明,以PU浓度26%（ω）的电纺液制备的直径240～300 nm的PU纤维膜... 利用静电纺丝法制备含LiCl的聚氨酯（PU）纳米纤维,用牛血清白蛋白（BSA）对纤维亲水改性,于其上固定β-D-半乳糖苷酶,提高酶在油水两相介质中催化转糖苷反应的活力.结果表明,以PU浓度26%（ω）的电纺液制备的直径240～300 nm的PU纤维膜在LiCl辅助作用下吸附BSA高达222 mg/g,使纤维膜的水接触角由103.7o降至77.3o.改性PU膜固定化酶比活力为1.59 U/mg,而未改性PU膜仅为其79.2%.改性膜固定化酶55℃下的活力半衰期高达游离酶的14倍,在4℃下储存45 d活力仍保持80%,而游离酶活力仅剩余16.3%;改性膜固定化酶重复催化42次转糖苷反应活力仍能保持31%. 展开更多

关键词 静电纺丝 聚氨酯纳米纤维 半乳糖苷酶 油水两相 转糖苷反应 亲水改性

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