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番茄质体多顺反子定点整合表达载体的构建及其转烟草的研究
被引量:
4
1
作者
陆云华
马立新
蒋思婧
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期755-761,共7页
根据烟草叶绿体高频同源重组片段的已知序列(GenBank Z00044.1)设计引物,用PCR的方法克隆到1个3.663 kb的番茄叶绿体DNA片段(psbD/trnG),命名为ctDNA。该片段与GenBank中烟草的相应片段有96.7%同源性,与本文所用的烟草的相应片段有95.8...
根据烟草叶绿体高频同源重组片段的已知序列(GenBank Z00044.1)设计引物,用PCR的方法克隆到1个3.663 kb的番茄叶绿体DNA片段(psbD/trnG),命名为ctDNA。该片段与GenBank中烟草的相应片段有96.7%同源性,与本文所用的烟草的相应片段有95.8%同源性。以其为外源多顺反子定点整合介导的同源重组片段,与来自烟草叶绿体的强启动子Prrn和终止子psbA3′,以及甘露聚糖酶基因man、绿荧光蛋白基因gfp、氨基糖苷3′-腺苷酰基转移酶基因aadA构建番茄质体多顺反子定点整合表达载体pLM2(-psbD-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3′t-rnG-)。将该载体用基因枪轰击烟草叶片,用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选,获得质体转基因烟草3株。用PCR、激光扫描、Western blot、RFLP等方法检测都证实man、gfp、aadA基因已整合到烟草质体基因组中,且均得到表达。用番茄质体多顺反子定点整合表达载体成功实现在烟草质体中的表达。
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关键词
多顺反子
番茄质体载体构建
烟草质体转化
基因枪法
下载PDF
职称材料
烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建和转化
被引量:
3
2
作者
陆云华
马立新
+1 位作者
陈俊
蒋思婧
《植物生理与分子生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期581-588,共8页
构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM4(-psaA-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3'-psbC-)。用基因枪将该载体轰击烟草叶片5次,用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选,获得质体转基因烟草6株。用PCR、激光扫描、Westernblo...
构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM4(-psaA-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3'-psbC-)。用基因枪将该载体轰击烟草叶片5次,用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选,获得质体转基因烟草6株。用PCR、激光扫描、Westernblot和RFLP等方法检测都证实多顺反子表达盒中的3个基因甘露聚糖酶基因(man)、绿荧光蛋白基因(gfp)、氨基糖苷3'-腺苷酰基转移酶基因(aadA)已整合到烟草质体基因组中,且均得到表达。
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关键词
多顺反子
表达载体的构建
烟草
叶绿体
转化
基因表达
基因枪法
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职称材料
题名
番茄质体多顺反子定点整合表达载体的构建及其转烟草的研究
被引量:
4
1
作者
陆云华
马立新
蒋思婧
机构
湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期755-761,共7页
基金
国家高新技术研究发展计划(863计划)(2002AA227011)
国家"十五"科技攻关计划(2001BA70BB
+1 种基金
2004BA7BB)
湖北省自然科学基金(2003ABA118)项目资助
文摘
根据烟草叶绿体高频同源重组片段的已知序列(GenBank Z00044.1)设计引物,用PCR的方法克隆到1个3.663 kb的番茄叶绿体DNA片段(psbD/trnG),命名为ctDNA。该片段与GenBank中烟草的相应片段有96.7%同源性,与本文所用的烟草的相应片段有95.8%同源性。以其为外源多顺反子定点整合介导的同源重组片段,与来自烟草叶绿体的强启动子Prrn和终止子psbA3′,以及甘露聚糖酶基因man、绿荧光蛋白基因gfp、氨基糖苷3′-腺苷酰基转移酶基因aadA构建番茄质体多顺反子定点整合表达载体pLM2(-psbD-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3′t-rnG-)。将该载体用基因枪轰击烟草叶片,用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选,获得质体转基因烟草3株。用PCR、激光扫描、Western blot、RFLP等方法检测都证实man、gfp、aadA基因已整合到烟草质体基因组中,且均得到表达。用番茄质体多顺反子定点整合表达载体成功实现在烟草质体中的表达。
关键词
多顺反子
番茄质体载体构建
烟草质体转化
基因枪法
Keywords
Mnlticistron
Construction
of
Tomato
chloroplast
expression
vector
tobacco
plastid
genetic
transformation
Bombardment
microprojectiles
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
S572 [农业科学—园艺学]
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职称材料
题名
烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建和转化
被引量:
3
2
作者
陆云华
马立新
陈俊
蒋思婧
机构
湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室
出处
《植物生理与分子生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期581-588,共8页
基金
国家"863"项目(No.2002AA227011)
国家"十五"科技攻关项目(No.2001BA70BB)
湖北省自然科学基金项目(No.2003ABA118)资助。~~
文摘
构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM4(-psaA-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3'-psbC-)。用基因枪将该载体轰击烟草叶片5次,用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选,获得质体转基因烟草6株。用PCR、激光扫描、Westernblot和RFLP等方法检测都证实多顺反子表达盒中的3个基因甘露聚糖酶基因(man)、绿荧光蛋白基因(gfp)、氨基糖苷3'-腺苷酰基转移酶基因(aadA)已整合到烟草质体基因组中,且均得到表达。
关键词
多顺反子
表达载体的构建
烟草
叶绿体
转化
基因表达
基因枪法
Keywords
multicistron
construction
of
expression
vector
tobacco
plastid
genetic
transformation
gene
expression
bombardment
microprojectiles
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
番茄质体多顺反子定点整合表达载体的构建及其转烟草的研究
陆云华
马立新
蒋思婧
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
下载PDF
职称材料
2
烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建和转化
陆云华
马立新
陈俊
蒋思婧
《植物生理与分子生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
3
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职称材料
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