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对虾组织蛋白质和同工酶表型及其在病虾中的变化 被引量：17
1
作者 王金星 赵小凡 +4 位作者 张红卫 于士广 刘昌彬 张文学 高守华 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期46-51,共6页
利用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性聚丙烯酸胺凝胶电泳对中国对 虾四种组织的蛋白质、酯酶、乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶等同工酶进行了分析研 究，并将健康虾与流行病病虾进行了比较。结果表明，肝胰脏和肌肉组织的蛋白质 表型... 利用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性聚丙烯酸胺凝胶电泳对中国对 虾四种组织的蛋白质、酯酶、乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶等同工酶进行了分析研 究，并将健康虾与流行病病虾进行了比较。结果表明，肝胰脏和肌肉组织的蛋白质 表型、肝胰脏酯酶和超氧化物歧化酶的表型在健康虾和病虾之间存在着较明显的 差异。说明肝胰脏内蛋白质代谢有明显的紊乱现象。肝胰脏和肌肉的组织蛋白、肝 酯酶和超氧化物歧化酶的特异性变化，可作为虾病早期诊断的辅助指标。 展开更多
关键词 中国对虾 组织蛋白质 同工酶 虾病诊断 对虾
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素肉排组织蛋白生产工艺
2
作者 孙保剑 王笛 +2 位作者 崔相勇 王立华 刘军 《食品工业》 CAS 2024年第6期65-69,共5页
素食在现代社会中受到越来越多人的关注,而素肉产品的研发和创新成为了食品行业的热点。论文旨在研究素肉排组织蛋白的制作工艺,并通过优化工艺提升产品质量,包括颜色、外形、质地和口感。首先,介绍素肉的定义、特点和市场需求,随后详... 素食在现代社会中受到越来越多人的关注,而素肉产品的研发和创新成为了食品行业的热点。论文旨在研究素肉排组织蛋白的制作工艺,并通过优化工艺提升产品质量,包括颜色、外形、质地和口感。首先,介绍素肉的定义、特点和市场需求,随后详细阐述素肉排组织蛋白的制作工艺流程,包括原料选择、配方设计、加工工艺等方面。接着,重点讨论如何通过工艺优化来改善素肉排组织蛋白的质地、口感和咀嚼性等方面的研究,得出影响素肉排组织蛋白生产的水分、温度、转速因素中,温度为显著性因素,素肉排组织蛋白的最佳生产工艺条件为水分含量55%,温度175℃,转速20 r·min^(-1)。在此工艺条件下制作的素肉排组织蛋白色泽红润,外形规则,肉质结构明显,咀嚼感强。 展开更多
关键词 素肉排 组织蛋白 植物肉 正交 工艺
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胆囊癌差异蛋白质组学分析
3
作者 黄海林 杨志刚 《武警医学》 CAS 2024年第4期318-324,共7页
目的运用蛋白质组学经典技术,双向凝胶电泳、质谱鉴定及生物信息学分析在胆囊癌组、正常胆囊对照组中寻找差异蛋白,发现和鉴定胆囊癌相关的肿瘤标志物及潜在的治疗靶点。方法标本分两组:胆囊癌组-胆囊癌组标本59例;正常对照组-胆囊癌癌... 目的运用蛋白质组学经典技术,双向凝胶电泳、质谱鉴定及生物信息学分析在胆囊癌组、正常胆囊对照组中寻找差异蛋白,发现和鉴定胆囊癌相关的肿瘤标志物及潜在的治疗靶点。方法标本分两组:胆囊癌组-胆囊癌组标本59例;正常对照组-胆囊癌癌旁组织标本59例。组织样品通过洗涤、裂解、离心收集总蛋白样本,分装冻存。经过第一向等点聚焦、第二向SDS-PAGE电泳,凝胶经考马斯亮蓝染色显色后,用Gs-800光密度仪获得凝胶图像。经PD-Quest凝胶图像分析软件进行分析后,找出有差异的蛋白点。通过蛋白指纹谱鉴定(PMF),基质辅助激光解吸附质谱技术(MALDI-TOF)获得差异蛋白碎片的二级质谱,利用Biotools软件采集肽碎片质荷比信息;利用Mascot搜索引擎对数据库进行检索,鉴定差异蛋白质的氨基酸序列,获得相应特异蛋白质信息。结果发现66个差异表达蛋白。其中在胆囊癌中上调表达蛋白21个,下调表达蛋白45个。21个差异蛋白得分大于56,在胆囊癌中上调表达的10个,下调表达的11个。主要包括膜联蛋白、膜突蛋白、热休克蛋白、波形蛋白、视黄醛脱氢酶1、半乳凝素等。结论上述蛋白可能在肿瘤的发生发展机制中起着重要的作用,是诊断、治疗的潜在靶点,值得后续进一步研究。 展开更多
关键词 胆囊癌 组织蛋白质 双向凝胶电泳 质谱分析
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双螺杆挤压处理对小麦蛋白组织化程度的影响 被引量：5
4
作者 徐添 赵妍嫣 +2 位作者 袁蓓蕾 许骏 姜绍通 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第15期87-90,96,共5页
应用双螺杆挤压技术,以谷朊粉、面粉、小苏打、单甘酯、水作为原料,研究不同配方对小麦蛋白组织化特性的影响,采用四因素三水平响应面分析法优化配方。结果表明,制备小麦组织蛋白的最优配方为:以面粉100g作为基准,水添加量70.19g,谷朊... 应用双螺杆挤压技术,以谷朊粉、面粉、小苏打、单甘酯、水作为原料,研究不同配方对小麦蛋白组织化特性的影响,采用四因素三水平响应面分析法优化配方。结果表明,制备小麦组织蛋白的最优配方为:以面粉100g作为基准,水添加量70.19g,谷朊粉添加量16.17g,单甘酯添加量2.54g,小苏打添加量2.52g,该条件下预测挤压产物的组织化度为1.133。经实验验证组织化度为1.112±0.018。 展开更多
关键词 小麦蛋白 组织蛋白 双螺杆挤压 组织化度
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Cyp4 A2,Apoa1,ANXA2及DPYD为金雀异黄酮抗肝纤维化大鼠的关键蛋白 被引量：2
5
作者 霍亚妮 张学荣 廖明 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第30期4808-4815,共8页
目的:分析金雀异黄酮作用肝纤维化大鼠后,肝组织中蛋白质的差异表达,以探讨药物作用的关键蛋白.方法:将SD大鼠分为对照组、模型组和金雀异黄酮组,除对照组外,其余各组灌胃50%CCl4溶液连续15 wk,于第9周开始以金雀异黄酮组进行给药治疗,... 目的:分析金雀异黄酮作用肝纤维化大鼠后,肝组织中蛋白质的差异表达,以探讨药物作用的关键蛋白.方法:将SD大鼠分为对照组、模型组和金雀异黄酮组,除对照组外,其余各组灌胃50%CCl4溶液连续15 wk,于第9周开始以金雀异黄酮组进行给药治疗,连续6 wk之后,取大鼠肝组织,提取蛋白质,以同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,i TRAQ)技术标记蛋白,经质谱定量、鉴定蛋白质,采用生物信息学分析蛋白质的功能;以Western blot对有代表性的药物作用关键蛋白细胞色素C 4A2(Cyp4 A2)和载脂蛋白A1(apolipoprotein A-1,Apoa1)进行验证.结果:质谱共鉴定到585种蛋白质,其中差异蛋白为63个,含上调蛋白32个,下调蛋白31个.对这些差异表达蛋白进行功能分析,发现参与信号传导、分子催化、分子绑定等过程,差异表达蛋白之间存在紧密的相互作用.Western blot验证显示,与模型组相比,蛋白质相互作用的关键节点蛋白Cyp4 A2的表达明显降低,而Apoa1的表达明显增加.结论:金雀异黄酮能通过调节肝组织中的多种蛋白质表达从而达到抗肝纤维化的效果,其中对Cyp4 A2、Apoa1、膜联蛋白A2、二氢嘧啶脱氢酶等蛋白的调节可能是其抗肝纤维化作用的关键. 展开更多
关键词 金雀异黄酮 ITRAQ 肝纤维化 肝组织蛋白
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氨基末端脑利钠肽前体在室间隔缺损合并心力衰竭诊断中的价值 被引量：37
6
作者 武育蓉 陈树宝 +3 位作者 黄美蓉 张玉奇 孙锟 陈笋 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期161-164,共4页
目的探讨血浆氨基末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)水平在室间隔缺损合并心力衰竭(简称心衰)诊断及心功能评估中的价值.方法 51例室间隔缺损患儿,按照小儿心衰改良Ross标准分为0～2分(无心衰)、3～6分(轻度心衰)、7～12分(中-重度心衰)三组... 目的探讨血浆氨基末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)水平在室间隔缺损合并心力衰竭(简称心衰)诊断及心功能评估中的价值.方法 51例室间隔缺损患儿,按照小儿心衰改良Ross标准分为0～2分(无心衰)、3～6分(轻度心衰)、7～12分(中-重度心衰)三组;对照组15例.应用ELASA方法测定血浆NT-proBNP浓度.同时测定左室舒张末期容量指数(left ventricular end diastolic volume index,LVEDVI)、左室收缩末期室壁应力(left ventricular end systolic wall stress,LVESWS)、心率校正的平均周径缩短速率(heart rate corrected mean velocity of circumferential fiber shortening,mVcFc)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室缩短分数(left ventricular fractional shortening,LVFS)、心肌收缩力(contractility index,Con)等超声心动图指标.结果 (1)血浆NT-proBNP水平与临床评分之间呈明显正相关(r＝0.75,P＜0.01),中-重度心衰组[(2061±908)fmol/ml]高于轻度心衰组[(810±335)fmol/ml];轻度心衰组高于无心衰组[(309±68)fmol/ml];但是无心衰组与正常对照组间[(275±62)fmol/ml]差异无统计学意义.(2)血浆NT-proBNP水平与LVESWS、 LVEDVI呈正相关;与LVEF、LVFS、Con、mVcFc等无明显相关性.(3)血浆NT-proBNP水平≥400 fmol/ml的情况下诊断充血性心衰的敏感度为89.3%,特异度为91.2%,ROC曲线下面积为0.944.结论血浆NT-proBNP水平可用于室间隔缺损合并心衰患儿心功能的评估,可以用于该类患儿心衰的诊断及分度. 展开更多
关键词 诊断 心衰 NT-PROBNP 血浆 室间隔缺损 轻度 脑利钠肽 水平 标准分 合并
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阿尔茨海默病尿神经丝蛋白检测方法的建立及其临床意义 被引量：19
7
作者 王蓉 姬志娟 +6 位作者 盛树力 朱建安 赵志炜 曹子青 王培昌 孟祥宏 张景燕 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期46-50,共5页
目的研制检测尿中AD7C—NTP诊断试剂盒，并分析评价其在诊断AD中的临床应用价值。方法固相法合成具有免疫原件的AD7C—NTP抗原决定簇多肽片段，通过免疫动物、制备抗体、配对筛选，以小鼠抗AD7C—NTP抗体作为包被抗体，以生物素标记兔抗... 目的研制检测尿中AD7C—NTP诊断试剂盒，并分析评价其在诊断AD中的临床应用价值。方法固相法合成具有免疫原件的AD7C—NTP抗原决定簇多肽片段，通过免疫动物、制备抗体、配对筛选，以小鼠抗AD7C—NTP抗体作为包被抗体，以生物素标记兔抗AD7C—NTP抗体和辣根过氧化物酶标记亲和素建立ELISA检测尿AD7C—NTP的方法；并用以检测和分析121例AD患者与118名同龄健康人清晨中段尿液中AD7C—NTP的水平差异。结果经过鉴定，小鼠抗AD7C—NTP抗体的ELISA检测效价为1：8000，兔抗AD7C—NTP抗体的ELISA检测效价为1：32000；WB检测人脑标本中抗AD7C—NTP抗体的相对分子质量为41000。自建ELISA检测AD7C—NTP的灵敏度为0．2μg／L，线性范围为0～10μg/L，正常参考值1．5μg/L，平均回收率为100．2％，批内CV为3．8％和4．5％，批间CV为7．6％和6．8％。AD组尿AD7C—NTP[2．25（0．43—8．62）μg/L]高于健康对照组[0．82（0．47～2．77）μg/L，P〈0．01]，AD组和健康对照组阳性率分别为89．3％和15．3％，AD7C—NTP检测的敏感度为89．3％、特异度为84．7％。结论用自行设计合成的多肽片段免疫动物，成功制备了抗AD7C—NTP抗体，初步建立的尿AD7C—NTP的ELISA检测方法精密度和灵敏度高，有可成为临床诊断AD的辅助手段。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 尿分析 神经组织蛋白质类 酶联免疫吸附测定
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脊髓性肌萎缩症运动神经元生存基因2拷贝数与临床表型的关系 被引量：11
8
作者 陈万金 吴志英 +2 位作者 王柠 林珉婷 慕容慎行 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期673-676,共4页
目的探讨运动神经元生存基因2(SMN2)拷贝数与临床表型的关系,进一步阐明脊髓性肌萎缩症(SMA)的发病机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术特异性扩增50名健康人、51例临床确诊SMA患者SMN2基因7号外显子及其邻近区域,并以已... 目的探讨运动神经元生存基因2(SMN2)拷贝数与临床表型的关系,进一步阐明脊髓性肌萎缩症(SMA)的发病机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术特异性扩增50名健康人、51例临床确诊SMA患者SMN2基因7号外显子及其邻近区域,并以已确定只有3个拷贝的SMN2样品作为标准对照。结果50名健康人中有2名SMN2拷贝数为0;51例患者中SMN2拷贝数为1、2、3、4的例数分别为8、22、16、5例;患者两性之间SMN2拷贝数差异无统计学意义;SMN2拷贝数与病情严重程度之间呈负相关(r=0.682,P=0.000);24例死亡患者中,具有1及2个拷贝SMN2患者的平均生存时间分别为13.8及22.7个月,两组间生存时间及生存率的差异具有统计学意义(P<0.01)。结论对于SMA患者,SMN2可能对SMN1基因缺失起到一定的代偿作用,SMN2拷贝数可作为判断患者预后的一个指标。对患者SMN2拷贝数的研究也为基于增加SMN2全长功能蛋白表达的基因治疗策略提供了理论依据。 展开更多
关键词 肌萎缩 脊髓性 聚合酶链反应 DNA结合蛋白质类 神经组织蛋白质类 RNA结合蛋白质类 表型
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前列腺癌肿瘤微环境树突状细胞与T细胞免疫的关系 被引量：8
9
作者 丘少鹏 陈辉熔 +1 位作者 邓春华 赵良运 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期127-128,131,F004,共4页
【目的】了解前列腺癌组织树突状细胞与肿瘤微环境T细胞免疫的关系。【方法】对 2 2例前列腺癌组织和周围正常前列腺组织用S10 0、CD3、CD2 1和CD14mAb分别作SP免疫组化染色 ,光镜下对阳性细胞计数并计算细胞指数 ,对癌组织S10 0 + 和CD... 【目的】了解前列腺癌组织树突状细胞与肿瘤微环境T细胞免疫的关系。【方法】对 2 2例前列腺癌组织和周围正常前列腺组织用S10 0、CD3、CD2 1和CD14mAb分别作SP免疫组化染色 ,光镜下对阳性细胞计数并计算细胞指数 ,对癌组织S10 0 + 和CD3+ 细胞指数行相关性分析。【结果】前列腺癌组织和正常组织可观察到S10 0 + DCs和CD3+ T细胞分布 ,而CD2 1+ B细胞和CD14+ 单核 /巨噬细胞均少见。癌组织中S10 0 + DCs指数和CD3+ T细胞指数均明显少于周围正常组织 (P<0 0 5 ) ,癌组织S10 0 + DCs指数与CD3+ T细胞指数呈正相关 (r =0 86 ,P <0 0 5 )。【结论】DCs是前列腺癌肿瘤微环境中的主要抗原提呈细胞 ,癌组织DCs数量减少可能与前列腺癌肿瘤微环境T细胞免疫功能低下有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 肿瘤微环境 树突状细胞 T细胞免疫 CD3抗原 神经组织蛋白质S100
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Neurturin基因转染c17·2神经干细胞移植保护帕金森病大鼠模型的实验研究 被引量：9
10
作者 刘卫国 陈生弟 +4 位作者 陆国强 李彪 王宝奇 陈琰 杜芸兰 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期184-188,共5页
目的探讨neurturin(NTN)基因转染c17·2神经干细胞脑内移植后对帕金森病大鼠模型的保护作用。方法构建高表达NTN蛋白的NTN-c17·2细胞克隆。实验分成NTN(12只)、空质粒(Mock,9只)和PBS组(9只),分别在各组大鼠的纹状体区移植入NT... 目的探讨neurturin(NTN)基因转染c17·2神经干细胞脑内移植后对帕金森病大鼠模型的保护作用。方法构建高表达NTN蛋白的NTN-c17·2细胞克隆。实验分成NTN(12只)、空质粒(Mock,9只)和PBS组(9只),分别在各组大鼠的纹状体区移植入NTN-c17·2、Mock-c17·2和PBS,16d后再注入6-羟多巴胺(6-OHDA)。通过免疫组化、原位杂交、旋转行为和神经递质变化观察c17·2神经干细胞的分化,NTN基因的表达和NTN蛋白的保护作用。结果NTN-c17·2细胞移植后,细胞分化但仍持续分泌NTN蛋白。NTN蛋白可逆向运输到黑质,保护酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元免受6-OHDA的损害。动物模型旋转行为动态观测显示NTN的保护作用至少持续了4个月,NTN组要明显好于Mock和PBS组。移植后10个月,NTN和Mock组动物移植侧与健侧纹状体的神经递质如多巴胺浓度比值分别为95%(P<0·05)和93%(P<0·05),PBS组为75%。结论用带有NTN基因的神经干细胞移植治疗帕金森病,显示出良好的保护效果。 展开更多
关键词 干细胞移植 神经组织蛋白质类 帕金森病 转染 大鼠
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以认知功能障碍为首发症状的齿状核红核苍白球路易体萎缩症一家系的临床、基因特点 被引量：10
11
作者 陈涓涓 曾振兴 +2 位作者 吴军 童晓欣 易黎 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期692-696,共5页
目的报道1个以认知功能障碍为白发症状的齿状核红核苍白球路易体萎缩症（dentatorural—pallidoluysianatrophy，DRPLA）的家系，分析其临床、基冈特点。方法收集该家系患者的临床资料。对先证者及其余4名健康家系成员进行肌萎缩蛋白-1... 目的报道1个以认知功能障碍为白发症状的齿状核红核苍白球路易体萎缩症（dentatorural—pallidoluysianatrophy，DRPLA）的家系，分析其临床、基冈特点。方法收集该家系患者的临床资料。对先证者及其余4名健康家系成员进行肌萎缩蛋白-1（atrophin-1，ATNI）基因5号外显子CAG毫复序列检测。将先证者的PCR产物进行TA克隆测序。结果该家系共有患者5例，成年发病4例，儿童发病1例。先证者以认知功能障碍为首发症状，其余成年患者则以共济失调为首发症状。1例2岁发病的患者表现为肌阵挛性癫痫。PCR反应产物直接测序显示先证者DNA链CAG拷贝!数为61次，而TA克隆检测发现患者存在61和64次两种不同CAG拷贝数。结论DRPLA存在显著的临床异质性，个别患者可以认知功能障碍为首发症状，ATN1基因的CAG重复次数检测对于诊断DRPLA非常重要，我国患者可能也存存体细胞嵌合现象。 展开更多
关键词 肌阵挛性癫痫 进行性 神经组织蛋白类 系谱 镶嵌现象 认知障碍
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碱性成纤维细胞生长因子对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用 被引量：8
12
作者 孙金峤 曹云涛 +1 位作者 刘华庆 邓卫安 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期354-359,共6页
目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用。方法 7日龄新生 Wistar 大鼠96只,制备 HIBD 模型,随机分为生理盐水对照组和 bFGF治疗组;另取48只为假手术组。通过免疫组化方法检测三组大鼠(每组40只... 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用。方法 7日龄新生 Wistar 大鼠96只,制备 HIBD 模型,随机分为生理盐水对照组和 bFGF治疗组;另取48只为假手术组。通过免疫组化方法检测三组大鼠(每组40只)不同时点(术后第4、7、10、17、24天)海马 CA1区巢蛋白(Nestin)、生长相关蛋白(GAP-43)的表达。各组余8只大鼠于生后30d 开始进行 Morris 水迷宫测试,观察其学习记忆功能。结果 (1)Nestin 表达:对照组术后第4、7、10、17、24天 Nestin 阳性细胞数(9.51±1.45、11.35±1.87、17.12±2.13、11.17±1.11、2.92±1.02)较假手术组(6.17±1.85、4.92±1.88、3.75±1.22、3.08±1.20、2.83±1.12)增加,治疗组各时点 Nestin 阳性细胞数(14.83±1.75、19.17±1.69、24.50±1.45、28.33±1.67、16.17±1.69)增加较对照组更明显,三组各时点比较差异有统计学意义(P<0.01)。(2)GAP-43表达:三组新生鼠 GAP-43表达均于术后第10天达高峰,积分光密度值对照组术后第4、7、10、17、24天(9.35±1.10、12.94±1.01、14.29±1.21、13.28±1.26、6.51±0.99)较假手术组(7.88±1.27、11.75±1.30、13.06±1.54、11.79±1.18、4.66±0.91)均升高,治疗组(10.63±1.02、13.98±0.79、15.11±0.89、14.60±1.28、7.40±1.08)升高更明显,三组各时点比较差异有统计学意义(P<0.01)。(3)对照组逃避潜伏期(51.75±11.27s)较治疗组(40.32±11.48s)和假手术组(36.58±10.83s)明显延长(P<0.05);对照组拆除平台后跨越平台的次数(2.34±2.42次)较治疗组(5.08±3.86次)和假手术组(7.03±3.62次)明显减少(P<0.05);治疗组与假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)新生鼠HIBD 后海马 CA1区 Nestin、GAP-43的表达增加,可能与脑损伤后神经再生和轴突重塑有关;(2)bFGF 可明显改善大鼠 HIBD 后的学习记忆能力;(3)外源性 bFGF 可增强新生鼠脑缺氧缺血后损伤区 Nestin、GAP-43的表达,在神经细胞损伤的修复中发挥一定的保� 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子2 缺氧缺血 脑 中间系蛋白类 神经组织蛋白质类 GAP-43蛋白 Morris水迷宫学习
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苦参碱诱导大鼠肝星状细胞凋亡的体外研究 被引量：8
13
作者 翁山耕 胡雨云 +2 位作者 田雄英 林丽娟 林永堃 《福建医科大学学报》 2009年第6期443-446,共4页
目的研究苦参碱对体外培养的大鼠肝星状细胞系rHSC-99凋亡的影响,并探讨其机制。方法体外培养rHSC-99,随机分成4组:对照组(A组),苦参碱0.12 mg/kg组(B组),苦参碱0.24 mg/kg组(C组),苦参碱0.48 mg/kg组(D组)。苦参碱作用24 h后,TUNEL法检... 目的研究苦参碱对体外培养的大鼠肝星状细胞系rHSC-99凋亡的影响,并探讨其机制。方法体外培养rHSC-99,随机分成4组:对照组(A组),苦参碱0.12 mg/kg组(B组),苦参碱0.24 mg/kg组(C组),苦参碱0.48 mg/kg组(D组)。苦参碱作用24 h后,TUNEL法检测rHSC-99凋亡,半定量RT-PCR方法及免疫细胞化学方法检测rHSC-99中神经生长因子(NGF),p75及Caspase-3的表达情况。结果不同浓度的苦参碱干预rHSC-99 24 h后,rHSC-99凋亡率随苦参碱的浓度增大而增高,D组凋亡率最高(P<0.01);NGF,p75,Caspase-3mRNA及其蛋白表达随苦参碱的浓度加大而表达升高,C组表达最高(P<0.01)。结论苦参碱可诱导HSCs凋亡。激活NGF/p75通路、上调Caspase-3蛋白表达可能是苦参碱诱导肝星状细胞凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 苦参碱 星形细胞 肝硬化 细胞凋亡 神经生长因子类 神经组织蛋白质类 基因表达
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舞蹈病家系临床、影像学特征及基因突变分析 被引量：7
14
作者 张宝荣 殷鑫浈 +5 位作者 夏昆 包颖颖 胡正茂 田均 刘志蓉 夏家辉 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期686-689,共4页
目的明确一个无明显痴呆的舞蹈病家系的临床、影像学特征及IT15、DRPLA、JPH3、TBP基因突变情况。方法对5例已发病患者的临床及脑影像学特征进行分析;用聚合酶链反应技术、8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及直接测序等方法,对18名家系成员的I... 目的明确一个无明显痴呆的舞蹈病家系的临床、影像学特征及IT15、DRPLA、JPH3、TBP基因突变情况。方法对5例已发病患者的临床及脑影像学特征进行分析;用聚合酶链反应技术、8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及直接测序等方法,对18名家系成员的IT15、DRPLA、JPH3、TBP基因的三核苷酸(CAG/CTG)重复序列进行分析。结果5例患者主要表现为舞蹈样不自主运动;3例患者头颅磁共振成像无明显尾状核萎缩,其中1例头颅单光子发射计算机断层显像(SPECT)提示双侧基底节血流受损,比健康人血流灌注减少;检测到9例(5例患者,4例症状前患者)分别有一(CAG)n重复拷贝数大于40次的IT15基因,无DRPLA、JPH3、TBP基因的突变。结论根据临床和影像学特征该家系在临床上不能确诊为亨廷顿舞蹈病,但经基因突变分析确定了IT15基因中(CAG)n重复拷贝数的异常扩展导致该家系发生了亨廷顿舞蹈病。 展开更多
关键词 舞蹈病 神经组织蛋白质类 核蛋白质类 重复序列 核酸 突变
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神经丝蛋白AD7c-NTP在阿尔茨海默病临床诊断中的应用 被引量：8
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作者 方伟 张晓晨 +3 位作者 刘遵建 朱莉莉 路伟 林萍 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第22期2712-2713,共2页
目的探讨阿尔茨海默病(AD)相关性神经丝蛋白(AD7c-NTP)在AD早期诊断中的临床应用价值。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法对AD患者、血管性痴呆(VD)患者及健康者(对照组)进行尿AD7c-NTP水平检测。结果 AD组、VD组与对照组尿AD7c-NTP水... 目的探讨阿尔茨海默病(AD)相关性神经丝蛋白(AD7c-NTP)在AD早期诊断中的临床应用价值。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法对AD患者、血管性痴呆(VD)患者及健康者(对照组)进行尿AD7c-NTP水平检测。结果 AD组、VD组与对照组尿AD7c-NTP水平分别为(1.504±1.766)、(1.463±1.422)、(0.479±0.285)ng/mL,AD组、VD组均高于对照组(P<0.05)。当尿AD7c-NTP水平为0.585ng/mL时,对AD的诊断灵敏度为65.0%,特异度为77.6%。结论尿AD7c-NTP定量检测在AD早期诊断和病情评估中有一定的临床参考价值。 展开更多
关键词 神经组织蛋白质类 阿尔茨海默病 尿 酶联免疫吸附测定
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小鼠巨细胞病毒抑制神经干细胞分化及其机制研究 被引量：5
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作者 周玉峰 方峰 +4 位作者 董永绥 周华 甄宏 刘瑾 李革 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期505-508,共4页
目的探讨小鼠巨细胞病毒(MCMV)对体外培养的神经干细胞(NSCs)分化的影响及其机制。方法体外分离、培养BABL／c胎鼠NSCs,利用NSCs向神经细胞分化模型,用感染复数(MOI)为1的含Lacz报告基因的重组MCMV毒株RM461进行感染,通过免疫组化、流... 目的探讨小鼠巨细胞病毒(MCMV)对体外培养的神经干细胞(NSCs)分化的影响及其机制。方法体外分离、培养BABL／c胎鼠NSCs,利用NSCs向神经细胞分化模型,用感染复数(MOI)为1的含Lacz报告基因的重组MCMV毒株RM461进行感染,通过免疫组化、流式细胞术和RT-PCR检测MCMV感染后Nestin、GFAP和NSE阳性细胞比率及对神经干细胞分化相关信号分子Wnt-1和neurogenin 1(Ngn1)基因表达的影响。结果体外分离培养的NSCs,神经干细胞特异性标志Nestin表达强阳性,并可进一步分化为GFAP阳性的星形胶质细胞和NF-200、NSE阳性的神经元。当NSCs分化培养2 d,感染组和未感染组Nestin阳性细胞分别为(62．2±1．8)％和(37．2±2．4)％(t= 4．62,P<0．01),差异有统计学意义;而GFAP阳性细胞的比例分别为(37．4±1．6)％和(50．3±1．8)％(t=9．89,P<0．01),NSE阳性细胞的比例分别为(8．9±0．8)％和(23．4±1．3)％(t=5．09, P<0．01),差异均有统计学意义。感染组和未感染组Wnt-1基因的相对表达量分别为0．14±0．03和0．32±0．04(t=7．21,P<0．01),Ngn1基因的相对表达量分别为0．09±0．01和0．21±0．02(t= 10．73,P<0．01),差异均有统计学意义。结论(1)CMV可抑制NSCs分化,这可能是CMV致脑发育异常的重要机制;(2)CMV感染可抑制Wnt-1和Ngn-1的基因表达而影响NSCs分化,人为调控这两条通路可能为探寻防治CMV感染致脑发育异常的方法提供新策略。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 干细胞 细胞分化 胞间信号肽类和蛋白质类 神经组织蛋白质类 转录因子
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重组人神经营养因子-4/5蛋白抗三氧化二砷神经毒作用 被引量：5
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作者 楼屹 王国荃 +6 位作者 黄燕 殷明 戴建凉 应康 顾少华 刘建平 谢毅 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期295-297,共3页
目的初步观察重组人神经营养因子-4／5（hNT－4／5）蛋白对三氧化二砷毒性的抑制作用。方法利用hNT－4／5蛋白具有抗神经毒性的特点，采用本实验室克隆表达及部分纯化的具有天然hNT－4／5蛋白生物学活性的重组hNT-4／5蛋白，以不同水平... 目的初步观察重组人神经营养因子-4／5（hNT－4／5）蛋白对三氧化二砷毒性的抑制作用。方法利用hNT－4／5蛋白具有抗神经毒性的特点，采用本实验室克隆表达及部分纯化的具有天然hNT－4／5蛋白生物学活性的重组hNT-4／5蛋白，以不同水平的重组hNT4／5蛋白（0－100μl）与不同浓度的As2O3（0－160μmol／L）同时加入各组鸡胚前脑神经细胞和PC12细胞培养液中共同孵育24－48小时，观察其对染毒鸡胚前脑神经细胞存活和PC12细胞突起生长的影响作用。结果在鸡胚前脑神经细胞和PC12细胞中与As2O3共同培养48小时后，对照组与实验组的细胞存活率差异有显著性，而且细胞存活率和突起数目随hNT－4／5浓度增高而提高和增加。结论初步观察到重组hNT4／5蛋白具有抑制As2O3的毒性作用，为从基因工程途径寻找抗环境毒物因子提供了依据。 展开更多
关键词 神经营养因子 hNT-4/5蛋白 三氧化二砷 神经毒
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复健片对脑梗死大鼠运动功能和脑组织勿动蛋白-A表达的影响 被引量：7
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作者 周永红 王新陆 +1 位作者 张玉杰 胡怀强 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第6期484-486,共3页
目的观察中药复健片对脑梗死大鼠运动功能和脑组织勿动蛋白-A(Nogo-A)表达的影响,探讨其促进神经发生的作用机制。方法60只Wistar大鼠随机分为药物组、模型组、假手术组,每组20只。用电凝法制备大脑中动脉闭塞大鼠模型,于造模成功后6h... 目的观察中药复健片对脑梗死大鼠运动功能和脑组织勿动蛋白-A(Nogo-A)表达的影响,探讨其促进神经发生的作用机制。方法60只Wistar大鼠随机分为药物组、模型组、假手术组,每组20只。用电凝法制备大脑中动脉闭塞大鼠模型,于造模成功后6h药物组灌胃给予复健片水溶液9g/kg,余2组分别灌胃给予同等量0.9%氯化钠溶液,1次/d,共2周。用横木行走实验评定运动功能;用原位杂交法观察模型大鼠梗死周边区脑组织Nogo-A的表达,并对切片进行图像分析,测定染色平均灰度。结果给药2周后3组大鼠神经功能评分两两比较,差异有统计学意义(P<0.01);药物组大鼠脑组织Nogo-A表达与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论复健片可抑制Nogo-A的表达,从而促进神经发生,改善脑梗死大鼠运动功能。 展开更多
关键词 中枢神经系统药(中药) 脑梗死 神经组织蛋白类
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人脐带间充质干细胞和大鼠激活态雪旺细胞联合培养的实验研究 被引量：7
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作者 朱玉海 冯世庆 《天津医药》 CAS 北大核心 2012年第3期251-253,I0005,共4页
目的:探讨体外分层共培养条件下大鼠激活态雪旺细胞对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)生长及分化的影响。方法:分离、培养人脐带间充质干细胞和大鼠激活态雪旺细胞,通过Millicell小室实现两者体外共培养,根据共培养与否分为共培养组与对照... 目的:探讨体外分层共培养条件下大鼠激活态雪旺细胞对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)生长及分化的影响。方法:分离、培养人脐带间充质干细胞和大鼠激活态雪旺细胞,通过Millicell小室实现两者体外共培养,根据共培养与否分为共培养组与对照组,通过巢蛋白(Nestin)、神经丝蛋白200(NF200)免疫荧光染色分析干细胞分化情况。结果:共培养组两种细胞在Millicell小室分层共培养条件下,hUCMSCs逐渐出现类似神经细胞的形态,对照组形态无明显变化。共培养组中hUCMSCs表达神经干细胞标志物Nestin,共培养1d后逐渐降低,而对照组仅低表达Nestin,共培养8h^7d,两组间差异有统计学意义(P<0.01);共培养组细胞共培养1d后hUCMSCs表达神经元标志物NF200,而对照组始终不表达NF200。结论:人脐带间充质干细胞有向神经细胞分化的能力,分层培养条件下大鼠激活态雪旺细胞可促进其神经方向分化。 展开更多
关键词 间质干细胞 细胞 培养的 共同培养技术 细胞培养技术 许旺细胞 细胞分化 神经组织蛋白质类 中间丝蛋白质类
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帕金森病患者脑标本黑质、纹状体内多巴胺转运体蛋白的表达 被引量：5
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作者 石葛明 李双成 +2 位作者 王志红 王伟 崔慧先 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期495-497,共3页
目的观察帕金森病(PD)患者脑标本黑质、纹状体多巴胺转运体(DAT)的表达。方法以免疫放射自显影显示DAT在黑质、纹状体的分布。结果正常人脑标本DAT强标记信号分布于黑质、壳核和尾状核。在PD患者脑标本,正常分布于壳核的DAT几乎均消失;... 目的观察帕金森病(PD)患者脑标本黑质、纹状体多巴胺转运体(DAT)的表达。方法以免疫放射自显影显示DAT在黑质、纹状体的分布。结果正常人脑标本DAT强标记信号分布于黑质、壳核和尾状核。在PD患者脑标本,正常分布于壳核的DAT几乎均消失;尾状核DAT降低以背外侧部为主;黑质DAT标记减少程度轻于壳核、尾状核,以黑质腹侧区和外侧区为主。定量分析发现DAT强度在壳核比对照组降低90.9%(P<0.01),在尾状核背外侧降低66.7%(P<0.01);所分析黑质5个亚区的腹侧区和外侧区DAT表达降低明显,标记强度比对照组分别下降50.0%和35.9%(P<0.05,P<0.01);另3个亚区有降低趋势,差异无统计学意义。结论DAT在PD患者脑标本壳核及尾状核表达显著降低,为临床应用DAT配基显像技术诊断PD提供了直接的形态学依据。 展开更多
关键词 帕金森病 膜转运蛋白质类 神经组织蛋白质类 纹状体 黑质 多巴胺转运体 脑标本 转运体蛋白 患者 体内
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