目的:研究知母皂苷B-Ⅱ(TB-Ⅱ)抑制人肺癌A549细胞增殖和迁移的机制。方法:使用0(空白对照)、1、10、100μg/ml的TB-Ⅱ处理A549细胞48 h后,分别提取细胞总RNA及总蛋白,采用实时定量荧光-聚合酶链反应和Western blot法分别检测细胞内白...目的:研究知母皂苷B-Ⅱ(TB-Ⅱ)抑制人肺癌A549细胞增殖和迁移的机制。方法:使用0(空白对照)、1、10、100μg/ml的TB-Ⅱ处理A549细胞48 h后,分别提取细胞总RNA及总蛋白,采用实时定量荧光-聚合酶链反应和Western blot法分别检测细胞内白细胞介素18(IL-18)m RNA及蛋白表达;通过转染沉默A549细胞内IL-18基因,比较未转染组、阴性对照组和转染组细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达,然后用10μg/ml的TB-Ⅱ处理转染后的细胞24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,划线法观察细胞迁移能力变化。结果:与空白对照比较,TB-Ⅱ处理后A549细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达均增加(P<0.05或P<0.01),且与浓度呈正相关。与未转染组比较,转染组细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达均降低(P<0.01);与TB-Ⅱ处理的未转染细胞比较,TB-Ⅱ处理72 h后的转染细胞增殖活性和迁移能力均增强(P<0.01)。结论:TB-Ⅱ可通过上调IL-18基因的表达来抑制A549细胞的增殖和迁移。展开更多
文摘目的:研究知母皂苷B-Ⅱ(TB-Ⅱ)抑制人肺癌A549细胞增殖和迁移的机制。方法:使用0(空白对照)、1、10、100μg/ml的TB-Ⅱ处理A549细胞48 h后,分别提取细胞总RNA及总蛋白,采用实时定量荧光-聚合酶链反应和Western blot法分别检测细胞内白细胞介素18(IL-18)m RNA及蛋白表达;通过转染沉默A549细胞内IL-18基因,比较未转染组、阴性对照组和转染组细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达,然后用10μg/ml的TB-Ⅱ处理转染后的细胞24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,划线法观察细胞迁移能力变化。结果:与空白对照比较,TB-Ⅱ处理后A549细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达均增加(P<0.05或P<0.01),且与浓度呈正相关。与未转染组比较,转染组细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达均降低(P<0.01);与TB-Ⅱ处理的未转染细胞比较,TB-Ⅱ处理72 h后的转染细胞增殖活性和迁移能力均增强(P<0.01)。结论:TB-Ⅱ可通过上调IL-18基因的表达来抑制A549细胞的增殖和迁移。