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短发夹RNA介导RNA干扰的时间和剂量效应研究 被引量:13
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作者 何国平 张思仲 +7 位作者 王英成 肖翠英 马用信 许文明 丁兰 陶大昌 孙岩 陈玉娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期258-267,共10页
用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术抑制哺乳动物细胞中外源报告基因的表达,以探讨该过程中RNAi作用的剂量和时间效应.应用Lipofectamine 2000将外源报告基因的表达载体与编码短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)的质粒共转染HEK293H细... 用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术抑制哺乳动物细胞中外源报告基因的表达,以探讨该过程中RNAi作用的剂量和时间效应.应用Lipofectamine 2000将外源报告基因的表达载体与编码短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)的质粒共转染HEK293H细胞,观察shRNA载体对报告基因的抑制效应.转染后,shRNAs的瞬时表达可特异地抑制细胞内报告基因的表达.在共转染后12,24,48,60,72,96 h时检测EGFP(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因mRNA及蛋白质表达水平,结果显示,EGFPmRNA及蛋白质表达在12 h时略有降低,24~48 h时表达逐渐降低,48~72 h时降低最明显,其后EGFP表达水平逐渐恢复.提示该过程中RNAi效应呈现由弱到强、又由强到弱的逐渐消逝趋势.共转染一系列剂量比例的EGFP干扰载体与靶载体的结果表明,在一定剂量范围内,RNA干扰载体所介导的抑制效应与干扰载体剂量大小有关,当其剂量进一步加大足以抑制外源基因表达时,抑制效应则维持在一'平台期'.此外,通过RNAi抑制HeLa细胞、HEK293细胞中荧光素酶基因的表达,荧光素酶活性变化也表现出上述类似的效应.这些结果表明,在体外哺乳动物细胞中,基于表达载体的RNAi作用呈现剂量和时间依赖性效应.这为基于载体表达的RNAi技术应用研究提供了一定的理论参考及依据. 展开更多
关键词 RNA干扰 短发夹RNA 报告基因 共转染 时间和剂量效应
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γ射线诱发细胞程序性死亡的时间及剂量效应研究 被引量:7
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作者 童新 董燕 +1 位作者 张双喜 孙志贤 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期111-115,共5页
通过对辐射所致程序性细胞死亡(PCD)的研究,揭示了射线诱发小鼠胸腺细胞PCD生成的时间及剂量效应规律,采用不同的检测PCD方法(DNA片段分析法及流式细胞术),比较了不同组织的辐射敏感性差异。结果表明:照射后4~6... 通过对辐射所致程序性细胞死亡(PCD)的研究,揭示了射线诱发小鼠胸腺细胞PCD生成的时间及剂量效应规律,采用不同的检测PCD方法(DNA片段分析法及流式细胞术),比较了不同组织的辐射敏感性差异。结果表明:照射后4~6h诱发胸腺细胞PCD生成最多。不同剂量照射,照后6h取胸腺,发现20Gy时胸腺细胞PCD生成最多。脾、胸腺对辐射敏感,小剂量(1Gy)即可检测到PCD形成;而心脏、大脑、肾对射线不敏感,照射10Gy以上时,才能检测到PCD。 展开更多
关键词 程序性细胞死亡 辐射 剂量 辐射损伤 Γ射线
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食管癌放射治疗时间-剂量效应的临床研究 被引量:1
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作者 陆进成 刘菊英 朱向帜 《河南肿瘤学杂志》 2004年第1期41-43,共3页
目的 探讨食管癌单纯放射治疗的时间 -剂量效应。方法 回顾分析 10 9例胸中段食管鳞癌单纯放射治疗时间 -剂量对局控率和生存率的影响。Kaplan -Meier法统计生存率 ,Logrank检验生存率差异 ,Cox回归模型做多因素分析。结果 全组中位... 目的 探讨食管癌单纯放射治疗的时间 -剂量效应。方法 回顾分析 10 9例胸中段食管鳞癌单纯放射治疗时间 -剂量对局控率和生存率的影响。Kaplan -Meier法统计生存率 ,Logrank检验生存率差异 ,Cox回归模型做多因素分析。结果 全组中位生存及局控时间均为 19( 3~ 84)个月 ,中位无瘤生存时间 15 ( 3~ 84)个月 ;1、3、5年局控率、生存率和无瘤生存率分别为 :78 0 %、46 4%、43 3 % ,71 6%、3 1 7%、16 8%和 68 6%、3 1 5 %、17 1%。性别、年龄、病变长度、时间、照射剂量对局控率和生存率的单因素分析中 ,年龄 (P值分别为 :0 0 12 ,0 0 0 4)、时间 (P值分别为 :0 0 16,0 0 0 1)和照射剂量 (P值分别为 :0 0 0 0 ,0 0 0 2 )是有意义的预后因子 ;多因素分析中仅照射剂量是唯一的独立预后因子 (P值分别为 :0 0 45 ,0 0 48)。结论 胸中段食管癌单纯放射治疗随剂量增加局控率和生存率均有所提高。 展开更多
关键词 食管癌 放射治疗 时间-剂量效应 生存率 局部控制率
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小鼠腹腔注射阿霉素诱导骨髓细胞微核率的最佳时间—剂量效应分析 被引量:1
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作者 常征 《文山学院学报》 2010年第2期108-112,共5页
目的:寻找一次染毒条件下,腹腔注射阿霉素诱导小鼠骨髓细胞微核率出现峰值的时间-剂量条件。方法:将150只小鼠随机分为5组,每组30只,雌雄各半。腹腔注射,1次给药,对照组给生理盐水,处理组的阿霉素剂量分别是2.5 mg/kg、5 mg/kg、10 mg... 目的:寻找一次染毒条件下,腹腔注射阿霉素诱导小鼠骨髓细胞微核率出现峰值的时间-剂量条件。方法:将150只小鼠随机分为5组,每组30只,雌雄各半。腹腔注射,1次给药,对照组给生理盐水,处理组的阿霉素剂量分别是2.5 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg。染毒18 h、24 h、30 h、48 h和72 h后取小鼠骨髓进行微核分析,评价阿霉素对小鼠的遗传毒性作用。结果:理想的腹腔注射诱导的小鼠骨髓细胞微核率峰值的条件就是:一次染毒,阿霉素剂量在10%LD50即2.5 mg/kg至80%LD50即20 mg/kg的范围内剂量越大微核率越高,取样时间在30~48 h间微核率最高。 展开更多
关键词 阿霉素 小白鼠 腹腔注射 微核率 时间-剂量效应
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茵陈素对接受一次性全身γ线照射大鼠的预防作用的研究 被引量:3
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作者 万尧德 刘家治 徐嘉红 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期121-126,共6页
本文报道了照射前7—15min一次ip茵陈素40—60mg/kg,可提高^(60)Coγ线6—11Gy照射引起的造血型放射病大鼠30天的存活率为28.5%,其平均保护系数为1.940±0.8,对照射非亲系大鼠的剂量减低系数DRF值为1.149,且能提高照射鼠的体重变... 本文报道了照射前7—15min一次ip茵陈素40—60mg/kg,可提高^(60)Coγ线6—11Gy照射引起的造血型放射病大鼠30天的存活率为28.5%,其平均保护系数为1.940±0.8,对照射非亲系大鼠的剂量减低系数DRF值为1.149,且能提高照射鼠的体重变化百分率,增加照射大鼠的脾脏及胸腺重量;ip、po的给药时间分别以照前1/4、1h的抗放效果较好。ip 10—60mg/kg的范围内给药剂量对抗放效果影响不显著。本品对胃肠型急性放射病大鼠的预防效果欠佳。 展开更多
关键词 茵陈素 电离辐射 放射病 预防作用
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双辛鼻鼽散治疗过敏性鼻炎的药效学研究 被引量:9
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作者 宋兴兴 赛佳洋 +4 位作者 屈会化 孔慧 王雪茜 王庆国 赵琰 《北京中医药》 2018年第1期49-53,F0003,共6页
目的研究双辛鼻鼽散(SXBQS)治疗过敏性鼻炎(AR)的药效。方法采用腹腔注射致敏和鼻内滴注激发的方法建立卵清蛋白(OVA)诱导的BN大鼠AR模型,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、盐酸西替利嗪组及SXBQS高、中、低剂量组。药物干预3周,基... 目的研究双辛鼻鼽散(SXBQS)治疗过敏性鼻炎(AR)的药效。方法采用腹腔注射致敏和鼻内滴注激发的方法建立卵清蛋白(OVA)诱导的BN大鼠AR模型,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、盐酸西替利嗪组及SXBQS高、中、低剂量组。药物干预3周,基于行为学评价初步探讨SXBQS治疗AR大鼠的时效量效关系,通过检测血清Ig E、组胺含量,镜下观察大鼠鼻黏膜病理学变化,研究SXBQS药效。结果 SXBQS灌服后1 h即可明显缓解BN大鼠鼻部过敏症状,起效时间长于12 h。SXBQS高、中剂量组可明显抑制鼻黏膜组织炎性细胞浸润,减轻黏膜水肿。SXBQS各剂量组及盐酸西替利嗪组大鼠血清Ig E均较模型对照组下降,其中SXBQS高、中剂量组与模型对照组差异有统计学意义(P<0.05);SXBQS各剂量组及西替利嗪组血清组胺含量均较模型对照组降低,SXBQS高剂量组及盐酸西替利嗪组与模型对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SXBQS通过抑制炎性水肿,下调血清组胺、Ig E水平,发挥治疗AR的作用。 展开更多
关键词 过敏性鼻炎 双辛鼻鼽散 中医药 抗过敏 时效量效
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重组人促红细胞生成素对肝癌生长的影响研究
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作者 杨阳 罗萍 《中国现代医药杂志》 2016年第3期21-25,共5页
目的探讨重组人促红细胞生成素(rh EPO)对人肝癌细胞株(human hepatoma cell line,Hep G2)裸鼠皮下移植瘤的生长影响,及其与促红细胞生成素(EPO)、促红细胞生成素受体(EPOR)、内皮生长因子(VEGF)、Bcl-2(B淋巴细胞/白血病-2基因)表达的... 目的探讨重组人促红细胞生成素(rh EPO)对人肝癌细胞株(human hepatoma cell line,Hep G2)裸鼠皮下移植瘤的生长影响,及其与促红细胞生成素(EPO)、促红细胞生成素受体(EPOR)、内皮生长因子(VEGF)、Bcl-2(B淋巴细胞/白血病-2基因)表达的时效和量效关系。方法在BALB/C裸鼠皮下接种人肝癌细胞(Hep G2)建立模型,成瘤后随机将其分为rh EPO低剂量组、高剂量组,阴性对照组(PBS组),分组给药,分别于第2周和第4周观察各组肿瘤生长情况,采用HE染色观察肿瘤组织病理情况,应用real-time PCR技术检测肿瘤组织中EPO、EPOR、VEGF、Bcl-2的m RNA水平。结果对照组的肿瘤体积增长幅度均高于实验组肿瘤体积增长幅度;real-time PCR的结果显示:1与对照组比较,第2周高剂量组和低剂量组EPO m RNA表达降低,差异无统计学意义(P>0.05);EPOR m RNA表达降低(P<0.05);VEGF、Bcl-2 m RNA表达均略升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。第4周高剂量组和低剂量组EPO、EPOR m RNA较对照组表达降低(P<0.05);EPO高剂量组的VEGF、Bcl-2 m RNA较对照组表达降低(P<0.05),EPO低剂量组的VEGF、Bcl-2 m RNA较对照组表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。2第2周高剂量组4个基因表达均较低剂量组降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。第4周高剂量组EPO、EPOR m RNA表达较低剂量组略有升高,但差异无统计学意义(P>0.05);高剂量组VEGF、Bcl-2 m RNA表达较低剂量组降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。3EPO高剂量组第4周与第2周比较4个基因的表达均有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05);EPO低剂量组第4周与第2周比较EPO m RNA表达下降(P<0.05),EPOR、VEGF、Bcl-2m RNA表达有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同剂量的rh EPO及rh EPO作用时间的不同对Hep G2肿瘤组织的VEGF、Bcl-2 m RNA表达均无明显影响,无直接证据显示rh EPO可引发Hep G2皮下移植瘤的生长。 展开更多
关键词 重组人促红细胞生成素 人肝癌细胞株 时效和量效关系 基因表达
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