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题名CPA恒温扩增技术检测炭疽芽胞杆菌方法的建立
被引量:6
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作者
赵婷婷
孙文铮
杨宇
王旺
王静
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机构
中国检验检疫科学研究院卫生检疫研究所
中国人民解放军总医院
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出处
《中国国境卫生检疫杂志》
CAS
2014年第4期247-250,263,共5页
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基金
中国检验检疫科学研究院基本科研业务费专项(2012JK015)
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文摘
目的建立一种简便的新型交叉引物恒温核酸扩增结合层析试纸条方法,快速可视化检测炭疽芽胞杆菌核酸。方法通过序列比对挑选出炭疽芽胞杆菌质粒上的特异性基因pXO2,设计引物、探针并合成标记,建立核酸恒温扩增反应体系,用金标免疫层析试纸条快速检测扩增产物,并测试方法的灵敏度和特异性。结果建立的核酸恒温扩增结合金标条方法检测炭疽芽胞杆菌,采用阳性质粒DNA优化实验条件,灵敏度可达5.4pg/反应体系;建立的检测方法检测炭疽Sterne疫苗株的灵敏度为6×103CFU/ml;与枯草芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、矮小芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、蕈状芽胞杆菌等相似菌株无交叉反应。结论本研究建立的方法对炭疽芽胞杆菌检测具有很好的敏感性、特异性,为生物恐怖因子现场检测提供了新方法,在国境检疫及公共卫生安全领域有较好的应用前景。
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关键词
炭疽芽胞杆菌
交叉引物(CPA)
恒温扩增技术
核酸试纸条检测方法
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Keywords
Bacillus anthracis
Cross priming amplification
thermostatic expansion technique
Nucleic acid test strip
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分类号
R517.2
[医药卫生—内科学]
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