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TRPV1:一种同时参与慢性痛外周敏化和疼痛中枢调制的重要分子
被引量：
20
1
作者
张瑛
王韵
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期677-684,共8页
慢性痛是困扰临床的一大顽疾,关于慢性痛机制的研究和新型镇痛药物的研发具有重要意义。十多年来,本研究组围绕慢性痛外周敏化形成的关键分子——瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid type 1,TRPV1),对其...
慢性痛是困扰临床的一大顽疾,关于慢性痛机制的研究和新型镇痛药物的研发具有重要意义。十多年来,本研究组围绕慢性痛外周敏化形成的关键分子——瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid type 1,TRPV1),对其敏化和膜定位机制进行了系列研究,揭示了蛋白激酶PKD1(protein kinase D1)、Cdk5(cyclin-dependent kinase 5)和LIMK(LIM-motif containing kinase)在炎症诱发热痛敏中的作用及其对TRPV1的功能调控,并据此开发出了一系列具有镇痛作用的Tat穿膜肽。本综述还围绕研究组近期工作所揭示的参与痛感觉和痛情绪相互作用的关键脑区——前额叶皮质的前边缘皮质亚区,对TRPV1在其中的可能作用进行了探讨。此外本综述也对研究组在改进TRPV1靶向药物,提高其镇痛疗效,降低副作用方面的工作进行了简要总结和回顾。
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关键词
疼痛
TRPV1
磷酸化
tat
穿膜肽
镇痛
原文传递
TAT介导多肽药物过表达纯化和穿膜活性检测
被引量：
1
2
作者
王中山
张梦
+5 位作者
张美娴
陈淑漫
朱焘
方佳炜
杨静
戴毅
《生物技术通讯》
CAS
2018年第3期340-344,共5页
目的:获得NR2B羧基端多肽(NR2Pep),探讨TAT-NR2Pep在细胞中的跨膜特性。方法:利用酶切连接方法构建p Waldo-TAT-pep质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,检测不同浓度诱导剂和不同温度对蛋白质表达的影响;利用镍柱亲和层析及分子筛方...
目的:获得NR2B羧基端多肽(NR2Pep),探讨TAT-NR2Pep在细胞中的跨膜特性。方法:利用酶切连接方法构建p Waldo-TAT-pep质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,检测不同浓度诱导剂和不同温度对蛋白质表达的影响;利用镍柱亲和层析及分子筛方法纯化TAT-NR2Pep-GFP融合蛋白,利用GFP发荧光的特性采用In-gel检测蛋白质的表达情况;以融合蛋白C端His标签特异性抗体,通过Western印迹确定融合蛋白的表达;荧光显微镜下观察TAT-NR2Pep-GFP融合蛋白在CHO和C2C12等细胞中的跨膜活性。结果:构建了TAT-NR2Pep-GFP表达载体,重组菌经0.1 mmol/L IPTG于22℃诱导20 h能够表达较多高质量的目标蛋白;In-gel荧光检测证实融合蛋白TATNR2Pep-GFP拥有正确构象,GFP能够发出绿色荧光;Western印迹分析表明融合蛋白相对分子质量符合预期;细胞穿膜实验证实TAT能够介导多肽穿过细胞膜。结论:原核表达并纯化得到TAT-NR2Pep-GFP融合蛋白,该蛋白散发绿色荧光,能够穿过细胞膜。
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关键词
NR2B羧基端多肽(NR2Pep)
tat
穿膜肽
原核表达
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职称材料
题名
TRPV1:一种同时参与慢性痛外周敏化和疼痛中枢调制的重要分子
被引量：
20
1
作者
张瑛
王韵
机构
北京大学医学部基础医学院神经科学研究所神经生物学系教育部和卫生与计划生育委员会神经科学重点实验室
北京大学麦戈文脑科学研究所
出处
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期677-684,共8页
基金
supported by grants from the National Natural Science Foundation of China(No. 3153002
30925015
+3 种基金
30830044
31771295
and 31371143)
the National Basic Research Development Program of China (No. 2014CB542204)
文摘
慢性痛是困扰临床的一大顽疾,关于慢性痛机制的研究和新型镇痛药物的研发具有重要意义。十多年来,本研究组围绕慢性痛外周敏化形成的关键分子——瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid type 1,TRPV1),对其敏化和膜定位机制进行了系列研究,揭示了蛋白激酶PKD1(protein kinase D1)、Cdk5(cyclin-dependent kinase 5)和LIMK(LIM-motif containing kinase)在炎症诱发热痛敏中的作用及其对TRPV1的功能调控,并据此开发出了一系列具有镇痛作用的Tat穿膜肽。本综述还围绕研究组近期工作所揭示的参与痛感觉和痛情绪相互作用的关键脑区——前额叶皮质的前边缘皮质亚区,对TRPV1在其中的可能作用进行了探讨。此外本综述也对研究组在改进TRPV1靶向药物,提高其镇痛疗效,降低副作用方面的工作进行了简要总结和回顾。
关键词
疼痛
TRPV1
磷酸化
tat
穿膜肽
镇痛
Keywords
pain
TRPV1
phosphorylation
tat
-
transmembrane
peptide
analgesia
分类号
R402 [医药卫生—临床医学]
原文传递
题名
TAT介导多肽药物过表达纯化和穿膜活性检测
被引量：
1
2
作者
王中山
张梦
张美娴
陈淑漫
朱焘
方佳炜
杨静
戴毅
机构
徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室
徐州市中心医院东南大学附属医院妇产科
徐州医科大学麻醉学院
徐州医科大学临床学院
出处
《生物技术通讯》
CAS
2018年第3期340-344,共5页
基金
国家自然科学基金(81600969)
江苏省大学生创新创业训练计划(201710313031Y)
文摘
目的:获得NR2B羧基端多肽(NR2Pep),探讨TAT-NR2Pep在细胞中的跨膜特性。方法:利用酶切连接方法构建p Waldo-TAT-pep质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,检测不同浓度诱导剂和不同温度对蛋白质表达的影响;利用镍柱亲和层析及分子筛方法纯化TAT-NR2Pep-GFP融合蛋白,利用GFP发荧光的特性采用In-gel检测蛋白质的表达情况;以融合蛋白C端His标签特异性抗体,通过Western印迹确定融合蛋白的表达;荧光显微镜下观察TAT-NR2Pep-GFP融合蛋白在CHO和C2C12等细胞中的跨膜活性。结果:构建了TAT-NR2Pep-GFP表达载体,重组菌经0.1 mmol/L IPTG于22℃诱导20 h能够表达较多高质量的目标蛋白;In-gel荧光检测证实融合蛋白TATNR2Pep-GFP拥有正确构象,GFP能够发出绿色荧光;Western印迹分析表明融合蛋白相对分子质量符合预期;细胞穿膜实验证实TAT能够介导多肽穿过细胞膜。结论:原核表达并纯化得到TAT-NR2Pep-GFP融合蛋白,该蛋白散发绿色荧光,能够穿过细胞膜。
关键词
NR2B羧基端多肽(NR2Pep)
tat
穿膜肽
原核表达
Keywords
NR2Pep
tat
transmembrane
peptide
prokaiTotic
expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TRPV1:一种同时参与慢性痛外周敏化和疼痛中枢调制的重要分子
张瑛
王韵
《生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
20
原文传递
2
TAT介导多肽药物过表达纯化和穿膜活性检测
王中山
张梦
张美娴
陈淑漫
朱焘
方佳炜
杨静
戴毅
《生物技术通讯》
CAS
2018
1
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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