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大鼠Shh-N融合蛋白的表达、纯化及功能研究
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作者 孙朝晖 赖燕来 +3 位作者 曾文文 郭雅南 左焕琮 谢佐平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期969-973,共5页
为了获得重组SonichedgehogN端蛋白 (Shh N)并研究其功能 ,应用PCR技术扩增Shh NcDNA ,然后克隆至原核表达质粒中 ,转化E .coli后获得表达菌株 ,经 1mmol/LIPTG诱导高效表达出带有His tag的融合蛋白 ,其中大部分为可溶性蛋白 ,少量为包... 为了获得重组SonichedgehogN端蛋白 (Shh N)并研究其功能 ,应用PCR技术扩增Shh NcDNA ,然后克隆至原核表达质粒中 ,转化E .coli后获得表达菌株 ,经 1mmol/LIPTG诱导高效表达出带有His tag的融合蛋白 ,其中大部分为可溶性蛋白 ,少量为包涵体 .用His tag特异性结合树脂纯化可溶性融合蛋白 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一区带 ,凝胶自动扫描分析表明 ,Shh N的纯度达 85%以上 .纯化后的Shh N在成纤维生长因子 8(FGF8)的协同作用下 ,能诱导神经前体细胞 (NPC)向酪氨酸羟化酶阳性神经元 (TH+ )发育 .在此基础上可以诱导不同类型的人类干细胞定向分化为多巴胺 (DA)神经元 ,从而为临床治疗帕金森病 (PD) 展开更多
关键词 重组融合蛋白 蛋白质纯化 神经前体细胞 th免疫阳性神经元
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Morphology and Chemical Phenotype of the Ovarian Intrinsic Neurons in Neonate and Sexually Mature Reproductive Guinea Pig
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作者 Félix Luna Ericka Barrientos +3 位作者 Victorino Alatriste Isabel Martínez Ilhicamina D. Limón Oscar González-Flores 《Advances in Reproductive Sciences》 2015年第1期13-26,共14页
Introduction: The existence of ovarian intrinsic neurons is well established. However, the morphology and chemical phenotype are not completely characterized and are even unknown for some species used in medical resea... Introduction: The existence of ovarian intrinsic neurons is well established. However, the morphology and chemical phenotype are not completely characterized and are even unknown for some species used in medical research. The purpose of this work was to determine the morphology and chemical phenotype of intrinsic neurons of the guinea pig ovary at two ages: neonates (0 days old) and sexually mature reproductive animals (90 days old). Materials and Methods: For the morphological analysis, we employed the modified Golgi-Cox impregnation technique. For the chemical phenotype, we used immunohistochemistry and the following antibodies;tyrosine hydroxylase (TH), calcitonin gene-related peptide (CGRP), transient receptor potential type 1 (TRPV1), neuron-specific nuclear protein (NeuN) and proto-oncogene product of the cFos gene (cFos). We also used enzyme histochemistry for NADPH-diaphorase detection. Results: The number of intrinsic neurons in the neonate ovary was low in comparison to the adult guinea pig ovary. The intrinsic neurons were located in the cortex and the ovarian medulla;some were isolated or clustered, forming ganglia, and others were interconnected and formed networks. The neurons were small, medium or large. In the cortex of neonate vs adult ovaries, the small and medium neurons comprised 23% vs 36% and 5.2% vs 11.6%, respectively. In the medulla, the percent of the same neurons was 10.1% vs 10.1% and 1.1% vs 2.2% in the neonate and adult, respectively. In both cortex and medulla < 1% were large neurons at two ages. Also, the neurons were rounded, fusiform or multipolar. In the cortex, they were 12.7% vs 20.9%, 14.9% vs 24.2% and 1.1% vs 3.0%, respectively. In the medulla, the percent of small vs medium neurons was 6% vs 7.1% and 4.1% vs 4.8% in the neonate and adult ovary, respectively, and <1% were large neurons at both ages. The chemical phenotypes were in the neonate and adult: TH/NeuN-positive neurons, 16.3% vs 26.5%;CGRP/NeuN, 13.5% vs 35.8%;TRPV1/NeuN, 10.2% vs 38.6%;and cFos/NeuN, 4.6% vs 5.4%, 展开更多
关键词 CGRP- TRPV1- th- NeuN- cFos- NADPHd-Positive Cells INTRINSIC neurons GUINEA Pig OVARY
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红藻氨酸诱发大鼠复杂部分性癫痫发作后延髓内脏带内FOS蛋白、GFAP与TH的共同表达
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作者 田国红 段丽 +2 位作者 饶志仁 黄远桂 徐燕 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期240-244,共5页
目的:观察大鼠癫痫发作后延髓内脏带内神经元和星形胶质细胞活性变化的时空效应及与儿茶酚胺类递质的关系。方法:以红藻氨酸诱导大鼠复杂部分性发作为癫痫模型,利用免疫组织化学三重染色技术,显示癫痫发作后30min至6h不同时点延髓内脏... 目的:观察大鼠癫痫发作后延髓内脏带内神经元和星形胶质细胞活性变化的时空效应及与儿茶酚胺类递质的关系。方法:以红藻氨酸诱导大鼠复杂部分性发作为癫痫模型,利用免疫组织化学三重染色技术,显示癫痫发作后30min至6h不同时点延髓内脏带区域同一部位FOS蛋白与胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)及酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化与相互关系及分布规律。结果:癫痫发作后延髓内脏带内c-fos表达与GFAP阳性细胞分布基本一致,且癫痫诱发后30min GFAP开始增多,1h达高峰;FOS阳性产物1h开始增多,3h达高峰;部分FOS阳性神经元为TH阳性,周围有GFAP免疫反应产物包绕。结论,在癫痫病理状态下,延髓区域星形胶质细胞的反应略早于神经元,二者不但分布上具有一一对应的关系,它们之间可能存在着复杂的信息通讯,形成神经元-胶质细胞复合体,共同对各种刺激做出反应。 展开更多
关键词 红藻氨酸 大鼠 复杂部分性癫痫 发作后 延髓内脏带 FOS蛋白 GFAP th 癫痫
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电针帕金森模型大鼠对黑质TH含量的影响 被引量:14
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作者 马骏 王华 《针刺研究》 CAS CSCD 2001年第4期288-291,共4页
目的 :观察电针对帕金森病大鼠黑质TH含量的影响。方法 :将 6 OHDA注入黑质造成单侧黑质损毁的帕金森病大鼠模型 ,并用免疫组织化学法检测正常组、假手术组、模型组、电针组黑质TH阳性神经元数目。结果 :帕金森病大鼠损毁侧SNC、SNL的T... 目的 :观察电针对帕金森病大鼠黑质TH含量的影响。方法 :将 6 OHDA注入黑质造成单侧黑质损毁的帕金森病大鼠模型 ,并用免疫组织化学法检测正常组、假手术组、模型组、电针组黑质TH阳性神经元数目。结果 :帕金森病大鼠损毁侧SNC、SNL的TH阳性神经元数目显著低于正常组 (P <0 .0 1 )及未损毁侧 (P <0 .0 1 ) ,电针可有效地增高帕金森大鼠损毁侧SNC、SNL的TH阳性神经元数目 (P <0 .0 1 ,P <0 .0 5)。结论 :帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元合成多巴胺的功能低下 。 展开更多
关键词 电针 黑质 帕金森病 th阳性神经元
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人参再造丸联合美多巴对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响 被引量:7
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作者 黄怀宇 赵晓晖 +2 位作者 黄志东 顾承志 周永 《中西医结合心脑血管病杂志》 2004年第1期35-37,共3页
目的 :观察人参再造丸联合美多巴对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响。方法 :PD鼠 80只 ,随机分为 4组 :对照组、美多巴组、人参再造丸组、人参再造丸联合美多巴组。于喂养 4个月后取黑质纹状体组织免疫组化染色 ,检测TH... 目的 :观察人参再造丸联合美多巴对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响。方法 :PD鼠 80只 ,随机分为 4组 :对照组、美多巴组、人参再造丸组、人参再造丸联合美多巴组。于喂养 4个月后取黑质纹状体组织免疫组化染色 ,检测TH阳性神经元的分布、密度。结果 :美多巴组黑质TH阳性神经细胞及纹状体TH阳性终末较生理盐水组明显减少 ,而人参再造丸组略有增多达5 %~ 8% ,联合组增多较显著达 2 0 %~ 2 5 %。结论 :人参再造丸对PD大鼠黑质纹状体毒性作用较轻 ,人参再造丸联合美多巴可改善TH阳性神经元的病理改变。 展开更多
关键词 帕金森病 中西医结合治疗 人参再造丸 美多巴 黑质纹状体 th阳性神经元
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BMP2在SVZa神经干细胞向TH^+神经元分化中的作用 被引量:2
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作者 辛志成 周政 +3 位作者 刘俊 何家全 宋业纯 严稽文 《四川医学》 CAS 2007年第11期1197-1199,共3页
目的研究BMP2对室管膜前下区(anterior subventricular zone,SVZa)神经干细胞分化为TH+(酷氨酸羟化酶)神经元的作用。方法体外培养SVZa神经干细胞,以0、0.1、1、10、20、100(ng/ml)浓度的BMP2分别诱导SVZa神经干细胞分化,通过免疫组化... 目的研究BMP2对室管膜前下区(anterior subventricular zone,SVZa)神经干细胞分化为TH+(酷氨酸羟化酶)神经元的作用。方法体外培养SVZa神经干细胞,以0、0.1、1、10、20、100(ng/ml)浓度的BMP2分别诱导SVZa神经干细胞分化,通过免疫组化和流式细胞仪技术检测不同浓度下SVZa神经干细胞分化为TH+神经元的比例。结果0.1~100(ng/ml)组的TH+细胞比例均明显高于0ng/ml组,10ng/ml组达最高峰,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BMP2可以促进SVZa神经干细胞向TH+神经元分化,可以明显提高分化比例。 展开更多
关键词 神经干细胞 BMP2 细胞分化 th^+神经元
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大鼠腹侧中脑多巴胺能神经元的形态学发育与分布特征 被引量:3
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作者 姜宇 曾水林 +3 位作者 徐春华 李凤飞 杨鎏 韩银华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期276-280,共5页
目的:探讨大鼠腹侧中脑多巴胺能(mDA)神经元的形态学发育和分布特征。方法:取胚胎晚期至成年大鼠不同时期的腹侧中脑连续冠状切片,以酪氨酸羟化酶(TH)免疫荧光染色方法观察mDA神经元。结果:(1)在胚胎期,TH阳性细胞多为圆形或椭圆形,随... 目的:探讨大鼠腹侧中脑多巴胺能(mDA)神经元的形态学发育和分布特征。方法:取胚胎晚期至成年大鼠不同时期的腹侧中脑连续冠状切片,以酪氨酸羟化酶(TH)免疫荧光染色方法观察mDA神经元。结果:(1)在胚胎期,TH阳性细胞多为圆形或椭圆形,随着发育进程,其突起逐渐伸长,分支也逐渐增多;出生后28 d,TH阳性细胞表现为成熟mDA神经元的形态特征。(2)Map-2/TH免疫荧光检测显示,新生期大鼠腹侧中脑TH阳性神经元定位分布与成年期的mDA神经元分布趋向一致。(3)E16.5 d时腹侧中脑TH阳性细胞的数量和密度最大,此后逐渐下降。结论:大鼠mDA神经元的发育在出生前后,呈现先大量形成后又逐渐减少的过程,与此同时其形态趋向成熟;至P0 d时mDA神经元分布定位基本完成,至出生后28 d形态学发育成熟。 展开更多
关键词 酪氨酸羟化酶 多巴胺能神经元 免疫荧光 中脑 发育 大鼠
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谷氨酸在体外对新生大鼠中脑腹侧神经元的神经毒性作用 被引量:3
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作者 林玲 郑志 《福建医科大学学报》 1998年第3期225-228,共4页
目的探讨谷氨酸(glutamate)在体外对中脑腹侧神经元的神经毒性作用。方法用培养的新生大鼠中脑腹侧神经元,暴露于谷氨酸后,经抗酪氨酸羟化酶(TH)和抗γ-氨基丁酸(GABA)双重免疫细胞染色,观察谷氨酸对神经元的... 目的探讨谷氨酸(glutamate)在体外对中脑腹侧神经元的神经毒性作用。方法用培养的新生大鼠中脑腹侧神经元,暴露于谷氨酸后,经抗酪氨酸羟化酶(TH)和抗γ-氨基丁酸(GABA)双重免疫细胞染色,观察谷氨酸对神经元的毒性作用以及与其受体的关系。结果新生大鼠中脑腹侧主要含有多巴胺(DA)及GABA神经元。谷氨酸对体外培养1周的DA神经元的半数致死量为60μmol/L,而对GABA神经元的半数致死量则为160μmol/L。非NMDA受体拮抗剂CNQX对DA神经元的保护作用较强,联合使用CNQX和NMDA受体拮抗剂d-APV可完全阻断谷氨酸的毒性作用。结论DA神经元对谷氨酸的兴奋性毒性具有较高的敏感性。 展开更多
关键词 谷氨酸 中脑腹侧神经元 th 神经病 神经毒性
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神经干细胞定向诱导分化条件研究 被引量:2
9
作者 赵慧英 张涌 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期298-300,共3页
通过模拟体内分化诱导条件,在体外对神经干细胞(NSCs)进行定向诱导。结果表明,由添加2%B27+100pg.mL-1IL-1+0.05g.L-1Vc+5u.mL-1EPO的DMEM/F12的诱导液A和1份含2%B27的DMEM/F12+1份纹状体提取液混合组成的诱导液B均可以将中脑和大脑皮质... 通过模拟体内分化诱导条件,在体外对神经干细胞(NSCs)进行定向诱导。结果表明,由添加2%B27+100pg.mL-1IL-1+0.05g.L-1Vc+5u.mL-1EPO的DMEM/F12的诱导液A和1份含2%B27的DMEM/F12+1份纹状体提取液混合组成的诱导液B均可以将中脑和大脑皮质的NSCs诱导分化为多巴胺能神经元,TH阳性细胞表达率随诱导时间的增加而提高,中脑来源的NSCs的TH阳性细胞诱导率极显著地高于大脑皮质来源的NSCs,诱导液A的诱导效果优于诱导液B。 展开更多
关键词 神经干细胞 th阳性神经元 定向诱导 诱导液
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帕金森病患者外周血中Th17细胞及其细胞因子IL-17的表达和临床意义 被引量:2
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作者 陈彩霞 张筱媛 《国际医药卫生导报》 2019年第24期4061-4063,共3页
目的分析帕金森病(PD)患者外周血中Th17细胞及其细胞因子白介素-17(IL-17)的表达变化及其与抗氧化酶、周围神经损伤的关系,为PD的临床治疗提供参考。方法收集2016年9月至2018年9月期间在本院确诊并治疗的PD患者60例纳入病例组,同时选择... 目的分析帕金森病(PD)患者外周血中Th17细胞及其细胞因子白介素-17(IL-17)的表达变化及其与抗氧化酶、周围神经损伤的关系,为PD的临床治疗提供参考。方法收集2016年9月至2018年9月期间在本院确诊并治疗的PD患者60例纳入病例组,同时选择同期在本院门诊体检的健康成人50例作为对照组。对比两组外周血Th17细胞及IL-17、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和腓总神经运动传导速度(MCV)、潜伏期(LP)、波幅(Amp)差异;同时分析患者外周血Th17细胞占比、IL-17浓度与SOD、GSH-Px、CAT、MCV、LP、Amp的关系。结果病例组外周血Th17细胞占比及IL-17浓度均明显高于对照组(均P<0.05),SOD、GSH-Px、CAT浓度均明显低于对照组(均P<0.05),腓总神经MCV、Amp均明显低于对照组(均P<0.05),LP长于对照组(P<0.05),Th17细胞占比、IL-17浓度分别与SOD、GSH-Px、CAT、MCV、AMP呈负相关(P<0.05),与LP呈正相关(P<0.05)。结论PD患者外周血Th17细胞、IL-17表达升高,其抗氧化酶活性降低,这可能是导致患者周围神经损伤的重要因素,故有可能通过干预降低Th17细胞、IL-17表达,增强抗氧化酶活性有利于减轻PD患者的周围神经损伤,这对PD的临床治疗具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 帕金森病 th17细胞 白介素-17(IL-17) 神经元
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重组人Neurturin对体外培养的胚胎大鼠多巴胺能神经元的保护作用 被引量:2
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作者 李鸿钧 苏婷 +3 位作者 马雁冰 段开文 戴长柏 孙茂盛 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2004年第4期196-198,共3页
目的建立大鼠胚胎多巴胺能神经元原代培养方法 ,研究重组人Neurturin(rhNTN)体外对黑质多巴胺能神经元的营养和保护作用。方法孕 14dWister大鼠 ,取出胎鼠中脑腹侧区组织 ,经胰酶消化、分散 ,接种至涂有多聚左旋赖氨酸基质的 6孔板中 ,3... 目的建立大鼠胚胎多巴胺能神经元原代培养方法 ,研究重组人Neurturin(rhNTN)体外对黑质多巴胺能神经元的营养和保护作用。方法孕 14dWister大鼠 ,取出胎鼠中脑腹侧区组织 ,经胰酶消化、分散 ,接种至涂有多聚左旋赖氨酸基质的 6孔板中 ,37℃培养 2 4h后将培养液更换为B2 7无血清培养基 ,实验组同时加入纯化的rhNTN。继续培养 ,于培养第 7、14、2 1天直接观察及TH免疫细胞化学染色观察结果。结果培养 14、2 1d ,对照组中多数神经元已经萎缩、死亡 ,少量存活的多巴胺能神经元胞体小 ,突起细短 ;实验组中存活的多巴胺能神经元数目较多 ,神经元胞体粗壮 ,突起长 ,生长状况良好。结论rhNTN能促进中脑黑质多巴胺能神经元的存活及突起生长 ,对多巴胺能神经元具营养和保护作用。 展开更多
关键词 多巴胺能神经元 原代培养 th免疫细胞化学染色 重组人Neurturin 保护作用
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Th17及其细胞因子IL-17参与脑缺血损伤机制的研究 被引量:2
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作者 王丹丹 张喆 +4 位作者 孔庆飞 王菁华 王广友 刘玉梅 李呼伦 《国际免疫学杂志》 CAS 2012年第2期146-150,共5页
目的检测Th17细胞在缺血脑组织中的表达及其细胞因子IL-17在厌氧条件下对神经元损伤机制的研究。方法线栓法建立小鼠持续性大脑中动脉栓塞模型(pMCAO),免疫荧光技术检测pMCAO小鼠缺血侧脑组织中Th17细胞的表达;体外原代培养新生小... 目的检测Th17细胞在缺血脑组织中的表达及其细胞因子IL-17在厌氧条件下对神经元损伤机制的研究。方法线栓法建立小鼠持续性大脑中动脉栓塞模型(pMCAO),免疫荧光技术检测pMCAO小鼠缺血侧脑组织中Th17细胞的表达;体外原代培养新生小鼠海马神经元,建立体外氧糖剥夺模型(OGD)模拟体内脑缺血缺氧微环境,观察不同厌氧时间对神经元的损伤作用,同时进行不同浓度的IL-17干预以及IL-17受体(IL-17R)封闭实验,探讨IL-17在厌氧条件下对神经元损伤过程中的作用。结果成功建立小鼠右侧大脑中动脉栓塞模型,HE染色可见患鼠缺血侧脑组织空洞坏死样改变并有大量淋巴细胞浸润,TTC染色呈现白色缺血灶。免疫荧光染色可见缺血灶周边大量Th17细胞(CD4+IL-17+)。体外实验中,外源性IL-17的干预加剧了OGD条件对海马神经元的损伤作用,并且这种作用能够被IL-17R封闭剂所抑制。结论小鼠缺血脑组织中存在Th17细胞的浸润,Th17细胞分泌的IL-17与厌氧条件下神经元的损伤有关。 展开更多
关键词 脑缺血 th17细胞 IL-17 氧糖剥夺 海马神经元
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“抗帕颗粒”对帕金森病模型鼠的神经保护作用 被引量:1
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作者 赵晓晖 朱玉萍 +2 位作者 杨娟 刘慧琴 沈建 《脑与神经疾病杂志》 2016年第5期265-269,共5页
目的探讨"抗帕颗粒"对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病(PD)模型小鼠黑质纹状体区TH阳性神经元及多巴胺(DA)的影响。方法 90只健康雄性C57BL/6小鼠,鼠龄8~12w,随机分为3组:正常对照组30只、PD模型对照组30只、P... 目的探讨"抗帕颗粒"对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病(PD)模型小鼠黑质纹状体区TH阳性神经元及多巴胺(DA)的影响。方法 90只健康雄性C57BL/6小鼠,鼠龄8~12w,随机分为3组:正常对照组30只、PD模型对照组30只、PD模型干预组30只;MPTP腹腔注射(40mg·kg^(-1)·d^(-1)×7)制备小鼠PD模型;正常对照组及PD模型对照组予生理盐水1m L·d^(-1)灌胃,PD模型干预组给予"抗帕颗粒"40mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,连续喂养4个月。比较分析各组4月时黑质纹状体区TH阳性神经元及DA情况。结果 1正常对照组30只(30/30只)最终均存活,PD模型对照组4个月时存活27只(27/30只),PD模型干预组4个月时存活28只(28/30只);2PD模型对照组、PD模型干预组小鼠每次注射MPTP后,先有短暂兴奋(持续7.61±2.17min),表现为四处窜跳;随即出现全身中重度震颤,皮毛及尾巴时有竖立,活动减少,持续24.23±3.89min后震颤消失;随后出现活动减少;3经Imagepro^Plus 5.1系统分析,正常对照组TH阳性细胞面积为64145μm^2,高倍镜下可见大量胞质为褐色颗粒的TH阳性细胞;PD模型对照组TH阳性细胞染色面积为40012μm^2,高倍镜下见TH细胞数量明显减少;PD模型干预组TH阳性细胞染色面积为60952μm^2,高倍镜下见TH阳性细胞数量较PD模型对照组增加;4正常对照组DA含量为2.18±0.31μg·m L^(-1),与PD模型对照组1.57±0.22μg·m L^(-1)比较,P<0.01;正常对照组与PD模型干预组2.04±0.18μg·m L^(-1)比较。P<0.05;PD模型对照组与PD模型干预组比较,P<0.01。结论 "抗帕颗粒"可使PD小鼠黑质纹状体中多巴胺能神经元一定程度地减少丢失,并改善DA含量的下降,对多巴胺能神经元的数量、形态及功能具有一定的保护作用,有望改善PD治疗现状并在临床进一步推广应用。 展开更多
关键词 帕金森病 MPTP 小鼠模型 “抗帕颗粒” th阳性神经元 多巴胺
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中枢注射U-50,488H对肾水钠钾的排出及PVH内TH-IR神经元活性的影啊 被引量:1
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作者 狄安稞 黄龙 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期187-194,共8页
本工作用12%乙醇麻醉的大鼠,观察了下丘脑室旁核(PVH)微量注射K型阿片受体激动剂U-50,488H对大鼠肾水钠钾排出的影响,以及第三脑室注射U-50,488H对PVH中多巴胺神经元活性的影响。结果如下:(1)PV... 本工作用12%乙醇麻醉的大鼠,观察了下丘脑室旁核(PVH)微量注射K型阿片受体激动剂U-50,488H对大鼠肾水钠钾排出的影响,以及第三脑室注射U-50,488H对PVH中多巴胺神经元活性的影响。结果如下:(1)PVH微量注射U-50,488H(5μn/ul)后20min内大鼠尿量开始增加(P<0.01),持续约100min,41—60min尿量增加达峰值(P<0.001)。(2)PVH预先(10min)注射K型阿片受体阻断剂NBT(Nor-BinaltorphimineTetrahydrate)(5μg/pl)可以阻断U-50,488H所产生的利尿效应(P<0.01)。(3)第三脑室注射U-50,488H(10μg/10ul)20min后,PVH中酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(Tyrosinehydroxylase-immunoreactivity,TH-IR)神经元数量减少,染色强度减弱,于注药后50min变化最为显著,100min时已恢复正常。上述结果表明:PVH微量注射U-50,488H可作用于K型阿片受体引起利尿效应;第三脑室微量注射U-50,488H可抑制PVH中TH-IR神经元的免疫活性。 展开更多
关键词 U-50 488H PVH 尿钠 尿钾 th-IR神经元
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原代培养大鼠脊髓神经元损伤前后Fos、TH及PNMT表达变化的研究 被引量:1
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作者 阙海萍 唐宁 刘少君 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期191-195,共5页
为了探讨多巴胺及肾上腺素在神经元损伤和修复过程中的作用,我们通过锐器切割原代培养的纯化大鼠胚胎脊髓神经元,模拟脊髓全横断后脊髓神经元损伤状态,观察了损伤前后Fos蛋白与儿茶酚胺类神经递质合成酶的表达变化。分离、培养、纯化孕... 为了探讨多巴胺及肾上腺素在神经元损伤和修复过程中的作用,我们通过锐器切割原代培养的纯化大鼠胚胎脊髓神经元,模拟脊髓全横断后脊髓神经元损伤状态,观察了损伤前后Fos蛋白与儿茶酚胺类神经递质合成酶的表达变化。分离、培养、纯化孕14d的Wistar大鼠脊髓神经元,10d后在直视下进行脊髓神经元的锐器切割损伤。用免疫组化及Western blot技术研究损伤前后神经元内Fos蛋白与酪氨酸羟化酶(TH)、苯乙醇胺氮位甲基移位酶(PNMT)的共定位情况及表达水平变化。结果发现:脊髓神经元损伤10min后Fos蛋白开始表达,2h后Fos阳性达到最高并同时表达TH及PNMT;Western blot结果也证实损伤后Fos、TH和PNMT表达均较损伤前上调。上述结果提示,神经元经损伤后激活的即刻早期基因c-fos,可作为信号分子活化受损神经元内儿茶酚胺类神经递质(TH和PNMT),多个分子共同作用可能参与了神经元的损伤和修复过程,其生物学意义有待进一步探讨。 展开更多
关键词 脊髓神经元 损伤和修复 FOS th PNMT 大鼠
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大鼠蓝斑酪氨酸羟化酶免疫反应性神经元的老年性变化
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作者 王国明 张可仁 +1 位作者 张樟进 马菊芬 《西安医科大学学报》 CSCD 1990年第4期304-307,共4页
本实验用免疫金银染色法结合图像定量分析,观察了幼年(3个月)、中年(12个月)和老年(20个月)Wistar雄性大鼠蓝斑内酪氨酸羟化酶(TH)免疫反应性神经元的老年性变化,结果:蓝斑内TH免疫反应性神经元数量在中年呈显著性的减少(P<0.01),至... 本实验用免疫金银染色法结合图像定量分析,观察了幼年(3个月)、中年(12个月)和老年(20个月)Wistar雄性大鼠蓝斑内酪氨酸羟化酶(TH)免疫反应性神经元的老年性变化,结果:蓝斑内TH免疫反应性神经元数量在中年呈显著性的减少(P<0.01),至老年,进一步减少,与幼年组比较,神经元丧失70%;TH免疲反应性神经元的胞体平均截面积随年龄增长呈增大趋势,各年龄组间有显著性差异(P<0.05);TH免疫反应性神经元的灰度值随增龄而递减,老年组与幼年组相比,下降了39%。表明蓝斑内儿茶酚胺能神经元所含TH的量和活性在衰老过程中是逐渐降低的,提示儿茶酚胺能神经递质合成能力减弱。 展开更多
关键词 蓝斑 免疫细胞化学 th
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抗帕颗粒对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响
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作者 黄怀宇 赵晓晖 +2 位作者 黄志东 顾承志 周永 《中西医结合心脑血管病杂志》 2003年第12期709-711,共3页
目的 :观察抗帕颗粒对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响。方法 :帕金森病(PD)大鼠 80只 ,随机分为 4组 :对照组、美多巴组、抗帕颗粒组、抗帕颗粒联合美多巴组。于喂养 4个月后取黑质纹状体组织免疫组化染色 ,检测TH阳性... 目的 :观察抗帕颗粒对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的影响。方法 :帕金森病(PD)大鼠 80只 ,随机分为 4组 :对照组、美多巴组、抗帕颗粒组、抗帕颗粒联合美多巴组。于喂养 4个月后取黑质纹状体组织免疫组化染色 ,检测TH阳性神经元的分布、密度。结果 :美多巴组黑质TH阳性神经细胞及纹状体TH阳性终末较生理盐水组明显减少 ,而抗帕颗粒组增多 2 0 %~ 3 0 % ,联合组增多最显著达 40 %~5 0 %。结论 :抗帕颗粒可改善PD大鼠黑质纹状体TH阳性神经元的病理改变 ,抗帕颗粒联合美多巴治疗效果明显。 展开更多
关键词 抗帕颗粒 帕金森病 动物模型 大鼠 黑质纹状体 th阳性神经元
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新生大鼠中脑黑质神经细胞的原代培养
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作者 邓维意 何旦莎 夏学锋 《广州医学院学报》 1997年第1期35-37,44,共4页
对新生1天大鼠中脑黑质神经细胞进行原代培养,以建立稳定的神经细胞培养模型。通过光镜对培养各阶段的神经细胞系统地观察,描写了它们的生长发育过程和形态特征,同时用特异性诱发荧光技术和酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学方法,进... 对新生1天大鼠中脑黑质神经细胞进行原代培养,以建立稳定的神经细胞培养模型。通过光镜对培养各阶段的神经细胞系统地观察,描写了它们的生长发育过程和形态特征,同时用特异性诱发荧光技术和酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学方法,进一步确定培养的黑质神经细胞的化学性质。本方法与通常从胚胎鼠取材比较,具有难度小,取材范围大的优点。 展开更多
关键词 中脑黑质细胞 原代培养 新生大鼠 酪氨酸羟化酶(th) 免疫组化
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神经前体细胞的增殖和分化及其对Parkinson病的治疗作用
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作者 孙朝晖 赖燕来 +3 位作者 李鹏 张丽丽 左焕琮 谢佐平 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期359-364,共6页
本实验分离 1 1~ 1 5 d胎鼠的大脑皮层 ( CP)和中脑的神经前体细胞 ( MP) ,观察它们在体外的增殖和分化及其对帕金森病 ( PD)的治疗作用。结果发现 ,CP较 MP生长迅速 ,容易形成神经球 ,加入 N2 / B2 7有助于神经球的形成 ;有 /无血清... 本实验分离 1 1~ 1 5 d胎鼠的大脑皮层 ( CP)和中脑的神经前体细胞 ( MP) ,观察它们在体外的增殖和分化及其对帕金森病 ( PD)的治疗作用。结果发现 ,CP较 MP生长迅速 ,容易形成神经球 ,加入 N2 / B2 7有助于神经球的形成 ;有 /无血清分化后 ,CP和 MP都能发育成微管相关蛋白 -2 ( MAP-2 )阳性细胞 ,其中 MP倾向于发育成酪氨酸羟化酶 ( TH)阳性细胞。将 MP或 CP植入6 -OHDA损伤的大鼠纹状体后 ,MP发育成的 TH+神经元数量明显地较 CP移植组和对照组者多 ( P<0 .0 5 )且 MP移植后 4~ 8周旋转行为发生明显改善 ,与 CP移植组和对照组相比有显著性差异 ( P<0 .0 5 )。上述结果提示 ,虽然 CP在体外的增殖能力较MP强 ,但 MP更易于分化成 TH阳性神经元并改善 PD大鼠的旋转行为 ,此点对于神经前体细胞治疗 PD的应用极其重要。 展开更多
关键词 神经前体细胞 增殖 分化 PARKINSON病 治疗作用 帕金森病
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