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微小RNA-223-3p靶向调控TGFBR3影响肺癌细胞上皮间质转化及Wnt/β-catenin通路 被引量:5
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作者 姚菲 石玮 +2 位作者 李春姗 蒋锐沅 林丽珠 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第15期2673-2679,共7页
目的:探讨微小RNA-223-3p(miR-223-3p)对转化生长因子Ⅲ型受体(TGFBR3)的靶向调控及对肺癌上皮间质转化(EMT)及Wnt/β-catenin通路相关指标的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测肺癌细胞(95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460)以及人... 目的:探讨微小RNA-223-3p(miR-223-3p)对转化生长因子Ⅲ型受体(TGFBR3)的靶向调控及对肺癌上皮间质转化(EMT)及Wnt/β-catenin通路相关指标的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测肺癌细胞(95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460)以及人肺上皮细胞BEAS-2B的miR-223-3p和TGFBR3水平,经双荧光素酶报告基因实验验证miR-223-3p和TGFBR3的靶向关系。将A549细胞分成3组:对照组、miR-223-3p NC组(转染miR-223-3p NC)、miR-223-3p mimic组(转染miR-223-3p mimic),MTT法、划痕实验及Transwell小室实验分别检测3组细胞的增殖及迁移能力。接着收集3组转染后的细胞,分别制备裸鼠移植瘤,处死裸鼠并剥离肿瘤组织,测量肿瘤体积及重量,免疫组化法对比各组镜下TGFBR3蛋白的表达情况,Western blotting实验检测EMT相关指标上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及Wnt/β-catenin通路相关因子(Wnt1和β-catenin)的表达。结果:与BEAS-2B细胞对比,肺癌细胞miR-223-3p及TGFBR3的表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);miR-223-3p能靶向调控TGFBR3的表达。miR-223-3p mimic组A549细胞的增殖活力、划痕愈合率及穿膜细胞数均较miR-223-3p NC组明显降低(P<0.05);此外,miR-223-3p mimic组裸鼠瘤体体积及重量均明显低于miR-223-3p NC组。免疫组化结果显示,miR-223-3p mimic组TGFBR3阳性表达率上升,与miR-223-3p NC组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blotting结果提示,与miR-223-3p NC组相比,miR-223-3p mimic组肿瘤组织中TGFBR3、E-Cadherin表达水平升高,而N-Cadherin、Vimentin、Wnt1和β-catenin表达水平均下降(P<0.05)。对照组与miR-223-3p NC组的增殖活力、划痕愈合能力以及EMT和Wnt/β-catenin通路相关因子水平的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miR-223-3p在肺癌中异常低表达,miR-223-3p通过靶向调控TGFBR3来抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移侵袭、EMT过程并阻断Wnt/β-catenin通路,在肺 展开更多
关键词 miR-223-3p tgfbr3 肺癌 侵袭迁移
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早发性卵巢功能不全与TGFBR3基因多态性的相关性 被引量:4
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作者 王松峰 玛依热 腊晓琳 《中国计划生育学杂志》 2020年第3期382-384,389,共4页
目的:探讨TGFBR3基因多态性与早发性卵巢功能不全关系。方法:采取病例对照方法收集本院就诊的57例早发性卵巢功能不全患者为病例组,以月经规律、基础内分泌6项正常的育龄期女性61例为正常对照组。采集两组外周血提取DNA,对TGFBR3基因第1... 目的:探讨TGFBR3基因多态性与早发性卵巢功能不全关系。方法:采取病例对照方法收集本院就诊的57例早发性卵巢功能不全患者为病例组,以月经规律、基础内分泌6项正常的育龄期女性61例为正常对照组。采集两组外周血提取DNA,对TGFBR3基因第18号外显子编码区区段设计特异性引物行多重PCR扩增,再以相应的Barcode引物区分,对扩增子行高通量测序,检测TGFBR3基因的多态性。结果:病例组染色体核型均正常为46,XX。两组体质指数、促卵泡生成素、促黄体生成素、抗苗勒氏管激素、抑制素B存在差异,TGFBR3基因18外显子1:92149139G/A与1:92149096G/A的基因频率、等位基因频率两组存在差异(P<0.05),结论:TGFBR3的基因突变率在早发性卵巢功能不全患者中较高,提示可能与早发性卵巢功能不全有关。 展开更多
关键词 早发性卵巢功能不全 tgfbr3 基因突变:基因多态性
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转化生长因子βⅢ型受体在人类肿瘤发生发展中作用的研究进展 被引量:4
3
作者 陈亚楠 张学彦 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第10期1907-1910,共4页
转化生长因子βⅢ型受体(TGFBR3,也称为betaglycan),作为肿瘤抑制和肿瘤促进基因,在肿瘤发生发展中起着调节细胞迁移、侵袭、增殖和血管生成的作用。近年来的研究结果证实TGFBR3与人类肿瘤的发生发展密切相关。TGFBR3在肿瘤中的作用多样... 转化生长因子βⅢ型受体(TGFBR3,也称为betaglycan),作为肿瘤抑制和肿瘤促进基因,在肿瘤发生发展中起着调节细胞迁移、侵袭、增殖和血管生成的作用。近年来的研究结果证实TGFBR3与人类肿瘤的发生发展密切相关。TGFBR3在肿瘤中的作用多样,在乳腺癌和胰腺癌等恶性肿瘤中可作为抑癌基因,抑制细胞的增殖和分化,但在结肠癌中则可促进肿瘤的侵袭和转移。本文中,我们回顾了目前已知的文献,作为TGF-β超家族中的一员,TGFBR3扮演着上皮表型守护者的角色,其表达能抑制人类肿瘤的发生发展。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 转化生长因子βⅢ型受体 人类肿瘤
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非小细胞肺癌细胞株TGFBR3基因缺陷表达及其分子机制研究 被引量:3
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作者 蒋谢芳 刘仍允 +3 位作者 雷哲 尤嘉琮 周清华 张洪涛 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第5期451-457,共7页
背景与目的国外有研究表明,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中转化生长因子受体III(TGFBR3)存在缺陷表达,但是分子机制尚未明确。本研究以正常支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cell,HBEpiC)为对照,分析NSCL... 背景与目的国外有研究表明,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中转化生长因子受体III(TGFBR3)存在缺陷表达,但是分子机制尚未明确。本研究以正常支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cell,HBEpiC)为对照,分析NSCLC细胞株中TGFBR3基因的表达情况,并探讨TGFBR3基因表达失活的分子机制。方法采用Western blot检测HBEpiC和NSCLC细胞株中TGFBR3的表达情况并做相对定量分析;采用DNA直接测序检测TGFBR3基因启动子基本转录元件区的突变情况;应用亚硫酸氢钠处理后测序法(bisulfite sequence-PCR,BSP)检测TGFBR3基因启动子区甲基化状态。结果NSCLC细胞株中TGFBR3表达水平明显低于HBEpiC;高转移细胞株95D明显低于非转移细胞株LTEP-α-2、A549、NCI-H460;HBEpiC与NSCLC细胞株中TGFBR3基因近端启动子区-165到-75区域无遗传突变,且未见甲基化,远端启动子区-314到-199区域均为高甲基化。结论TGFBR3基因在NSCLC细胞株中表达下调,在高转移细胞株95D中尤其明显,提示该基因的表达缺陷对NSCLC发生发展起重要作用,可能与NSCLC的侵袭和转移相关;然而,TGFBR3基因启动子区重要转录元件区域的甲基化状态并不是导致TGFBR3基因表达下调的主要原因。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌细胞株 tgfbr3 基因突变 DNA甲基化 转移
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用DHPLC技术进行特发性卵巢早衰易感基因TGFBR3的突变分析 被引量:3
5
作者 李桃 覃春容 +3 位作者 姚吉龙 任晓慧 唐雪莲 吴维青 《中国优生与遗传杂志》 2015年第11期32-34,共3页
目的应用DHPLC技术对TGFBR3基因12外显子多态进行准确、快速、高通量的检测。方法选择2009年2月至2012年12月在南方医科大学附属深圳市妇幼保健院妇产科确诊的卵巢早衰患者110例为卵巢早衰组,以月经规则、性激素检查在正常范围内的年龄... 目的应用DHPLC技术对TGFBR3基因12外显子多态进行准确、快速、高通量的检测。方法选择2009年2月至2012年12月在南方医科大学附属深圳市妇幼保健院妇产科确诊的卵巢早衰患者110例为卵巢早衰组,以月经规则、性激素检查在正常范围内的年龄匹配的妇女110例为对照组。针对TGFBR3基因12外显子的编码区及剪接位点设计变性高效液相色谱分析的引物,构建TGFBR3基因12外显子的变性高效液相色谱分析方法。结果建立的针对TGFBR3基因12外显子的变性高效液相色谱分析方法能够快速、准确地区分已知变异序列和野生型序列,并且灵敏性和稳定性都好。收集110例特发性卵巢早衰和110例正常人标本,对这些标本进行TGFBR3基因12外显子的变性高效液相色谱分析检测,检测到2个的单核苷酸多态性((SNP)。2022 T/C位点多态性:卵巢早衰组CC、TC、TT基因型频率分别为0.9%(1/110)、22.7%(25/110)、76.4%(84/110),C、T等位基因频率分别为12.3%(27/220)、87.7%(193/220);对照组CC、TC、TT基因型频率分别为0、9.0%(10/110)、90.9%(100/110),C、T等位基因频率分别为4.5%(10/220)、95.5%(210/220);两组间各基因型频率及等位基因频率分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。2161-75C/T多态性位点基因频率、等位基因频率卵巢早衰组和对照组比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论本课题研究中建立的针对TGFBR3基因12外显子的变性高效液相色谱分析检测方法能够快速、准确地将TGFBR3基因12外显子变异序列与野生型序列区分,并且实验的重复性和再现性好、稳定性高,体系可靠。本研究建立的基于PCR的变性高效液相色谱分析TGFBR3基因12外显子突变方法是一种高通量、高灵敏度、半自动化、快速、准确、经济的突变检测技术。 展开更多
关键词 卵巢早衰 tgfbr3 基因多态 变性高效液相色谱(DHPLC)
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卵巢早衰患者TGFBR3基因多态的临床研究 被引量:1
6
作者 覃春艳 彭艳辉 +3 位作者 黄燕红 谭锦屏 陈瑞琼 金河珠 《中国优生与遗传杂志》 2014年第8期20-22,共3页
目的探讨TGFBR3基因与卵巢早衰的相关性,寻找POF的致病基因,以期为POF的预防和治疗提供理论基础。方法收集110例POF患者及110例对照组的外周血样标本,利用盐析法提取外周血白细胞中的DNA,设计TGFBR3基因16外显子编码区及其侧翼的2对引物... 目的探讨TGFBR3基因与卵巢早衰的相关性,寻找POF的致病基因,以期为POF的预防和治疗提供理论基础。方法收集110例POF患者及110例对照组的外周血样标本,利用盐析法提取外周血白细胞中的DNA,设计TGFBR3基因16外显子编码区及其侧翼的2对引物,通过对PCR反应产物直接测序进行序列分析。结果 TGFBR3 16外显子有5个单核苷酸多态性。2502 A/G位点多态性:卵巢早衰组GG、GA基因型频率分别为75.0%(84/110)、25.0%(28/110),G、A等位基因频率分别为87.5%(196/220)、12.5%(28/220);对照组GG、GA基因型频率分别为88.2%(97/110)、11.8%(13/110),G、A等位基因频率分别为94.1%(207/220)、5.9%(13/220);两组间各基因型频率及等位基因频率分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。2568 G/A位点多态性:卵巢早衰组GG、GA基因型频率分别为74.1%(84/110)、25.9%(29/110),G、A等位基因频率分别为87.1%(195/220)、12.9%(29/220);对照组GG、GA基因型频率分别为85.5%(94/110)、14.5%(16/110),G、A等位基因频率分别为92.7%(204/220)、7.3%(16/220);两组间各基因型频率及等位基因频率分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。2430+204_2430+205 insTTGT、2431-7A>C、2467C/T多态性位点基因频率、等位基因频率卵巢早衰组和对照组比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 TGFBR3基因型分布显著改变,提示其在卵巢早衰的病因方面起着重要的作用。 展开更多
关键词 卵巢早衰 tgfbr3 基因多态
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转化生长因子-β Ⅲ型受体在膀胱癌中的表达及临床意义 被引量:2
7
作者 刘晓龙 单玉喜 +2 位作者 薛波新 阳东荣 岳明宗 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2095-2097,共3页
目的探讨膀胱尿路上皮癌中转化生长因子-β Ⅲ型受体(TGFBR3)表达及临床意义。方法收集32对膀胱尿路上皮癌及癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-timePCR)检测TGFBR3mRNA的表达,分析其与临床分期、病理分级等的相关性。... 目的探讨膀胱尿路上皮癌中转化生长因子-β Ⅲ型受体(TGFBR3)表达及临床意义。方法收集32对膀胱尿路上皮癌及癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-timePCR)检测TGFBR3mRNA的表达,分析其与临床分期、病理分级等的相关性。结果32对样本中均有TGFBR3mRNA表达,膀胱癌组织中表达量为2.25±0.65,明显低于癌旁组织6.42±1.53(P〈0.05)。非肌层浸润性膀胱癌(Tia-T1)中TGFBR3mRNA表达量为1.94±0.76,肌层浸润性膀胱癌(T2-T4)为2.46±0.97(P〉0.05)。TGFBR3mRNA在淋巴结转移的膀胱癌中为6.05±2.55,明显高于无淋巴结转移1.37±0.42(P〈0.05)。病理I、Ⅱ、Ⅲ级膀胱癌中TGFBR3mRNA表达量分别为:4.15±1.69、1.96±0.68、0.90±0.65(P〉0.05)。男性患者中TGFBR3mRNA表达量为2.25±0.72,女性为2.26±1.42(P〉0.05)。结论TGFBR3表达异常与膀胱癌关系密切,它对膀胱癌的发生、发展过程有一定的作用。 展开更多
关键词 膀胱癌 转化生长因子-Β Ⅲ型受体
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microRNA-223调控人胚胎干细胞向树突细胞分化
8
作者 朱明霞 万文丽 +6 位作者 胡凯 王艳芳 王晶 朱晓雯 闫新星 景红梅 克晓燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1275-1282,共8页
目的:建立人胚胎干细胞(ESC)向树突细胞诱导分化的新策略,探讨microRNA-223(miR-223)在人胚胎干细胞源树突细胞产生过程中的调控作用及其分子机制。方法:采用人胚胎干细胞在胞外基质Ⅳ型胶原蛋白上直接贴壁培养,加入造血生长因子分步向... 目的:建立人胚胎干细胞(ESC)向树突细胞诱导分化的新策略,探讨microRNA-223(miR-223)在人胚胎干细胞源树突细胞产生过程中的调控作用及其分子机制。方法:采用人胚胎干细胞在胞外基质Ⅳ型胶原蛋白上直接贴壁培养,加入造血生长因子分步向造血干/祖细胞、共同髓系祖细胞和树突细胞诱导的方案,通过形态学、流式细胞术和造血集落形成实验鉴定分化细胞;人胚胎干细胞经慢病毒转染过表达miR-223或抑制其表达后启动向树突细胞分化,比较不同miR-223表达水平下分化细胞中造血集落形成的数目和表面标记物的表达量;应用双荧光素酶报告基因检测验证TGFBR3是miR-223发挥作用的直接靶标。结果:人ES细胞成功诱导为树突细胞,分化细胞中表达CD83比例可达82%,在整个分化过程中miR-223表达呈上调趋势;添加miR-223模拟物组分化细胞表达CD34^+CD45^+、CD34^+CD45^+以及CD83^+的比例均显著高于添加miR-223抑制剂组和阴性对照组(P<0.05);添加miR-223抑制剂组分化细胞表达各阶段细胞标记物显著低于阴性对照组(P<0.05);添加miR-223模拟物组分化细胞出现大约759个CFU/105细胞数,显著高于其它各组(P<0.05);双荧光素酶报告基因结果显示,miR-223显著抑制TGFBR3-3'UTR结构的荧光素酶活性(下降了37%)(P<0.05),而且TGFBR3-3'UTR突变型的荧光素酶活性显著高于野生型(P<0.01);随着向树突细胞分化成熟,添加miR-223模拟物组分化细胞表达TGFBR3水平逐渐下降,而添加miR-223抑制剂组由于内源性miR-223受到抑制而明显上调TGFBR3的表达。结论:miR-223调控人胚胎干细胞向树突细胞分化,可能通过直接作用于靶标TGFBR3而促进胚胎干细胞源树突细胞的产生。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 树突细胞 microRNA-223 诱导分化 tgfbr3
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miR-196a-5p在食管鳞状细胞癌中表达及靶基因预测的生物信息学分析
9
作者 刘乔 田静 +7 位作者 李晓兰 张佳瑞 郭海华 姚丽 兰淼 张富琴 巩丽 张伟 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第3期385-391,共7页
目的:探讨hsa-miR-196a-5p在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发生发展过程中的作用,并对其生物学特征及表型功能进行预测分析,为最终研究miR-196a-5p的功能提供有利线索。方法:通过Quantitative Real-time PC... 目的:探讨hsa-miR-196a-5p在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发生发展过程中的作用,并对其生物学特征及表型功能进行预测分析,为最终研究miR-196a-5p的功能提供有利线索。方法:通过Quantitative Real-time PCR方法,检测食管鳞状细胞癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织中miR-196a-5p相对表达水平。使用Target Scan、MIRDB、miRand和Tarbase DIANA TOOLS 7.0四种在线软件预测miR-196a-5p的靶向调控基因集合,将4个预测集合利用在线软件VENNY2.1取交集,最终确定miR-196a-5p的靶基因集合范围。在线数据库string可以完成对所预测的靶基因编码蛋白质之间相互关系的预测。最后通过使用在线数据库metascape对hsa-miR-196a-5p预测的靶基因集合进行基于GO、KEGG数据库的功能注释分类分析和通路富集分析。结果:miR-196a-5p序列号为MIMAT0000226,定位于人12q13.13。与斑马鱼、七鳃鳗、鸭嘴兽、褐家鼠、家兔、野猪等物种的miR-196a-5p在UAGGUAGUUUCAUGU UGUUGGG区域高度保守。32对食管鳞状细胞癌肿瘤组织中miR-196a-5p的表达量显著高于对应的癌旁正常对照组织,与前期Agilent Human miRNA基因芯片结果保持一致。生物信息学方法预测的最终靶基因有48个,且其编码蛋白质之间关系网络集中在以HOXA7、HOXA5和HOXA9为核心的HOX家族和EXOC基因簇。miR-196a-5p靶基因功能集中在胚胎和器官形态发生、骨骼系统开发、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录调控、基因表达/转录的正调控,以及参与转录因子活性调节等方面。主要参与的信号通路有促性腺激素释放激素、Ras、FoxO信号通路、AGE-RAGE信号通路、胰岛素信号通路和肿瘤转录失调通路(P <0.01)等。miR-196a-5p在ESCC肿瘤组织中显著高表达,而TGFBR3基因与miR-196a-5p出现相反的表达方式,我们推测TGFBR3可能是ESCC中miR-196a-5p的一个靶基因。结论:miR-196a-5p在食管鳞状细胞癌中是高表达状态,提示miR-196a-5p 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 hsa-miR-196a-5p 生物信息学分析 tgfbr3
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TGFBR3错义突变与先天性心脏病遗传关联性研究
10
作者 吕昕 王红艳 张斌 《中国循证儿科杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期308-312,共5页
目的在先天性心脏病(CHD)人群中检测TGFBR3基因编码区的疾病特异性错义突变,并研究突变的生物学功能。方法①研究对象为中国山东地区的汉族人群。病例组为2008年8月至2011年1月连续就诊的404例散发CHD患儿;对照组为同时期收集的排除CHD... 目的在先天性心脏病(CHD)人群中检测TGFBR3基因编码区的疾病特异性错义突变,并研究突变的生物学功能。方法①研究对象为中国山东地区的汉族人群。病例组为2008年8月至2011年1月连续就诊的404例散发CHD患儿;对照组为同时期收集的排除CHD以及有心脏病家族史的213例体检健康儿童。②提取样本外周血基因组DNA,进行TGFBR3基因外显子靶向测序。测序获得的病例组特异的单核苷酸变异(SNV)与数据库db SNP(version137)和千人基因组比对,筛选出疾病特异性稀有或新发突变,行Sanger测序验证。③构建野生型和突变型TGFBR3表达载体,在HEK293T细胞中表达后用免疫印迹检测外源TGFBR3蛋白水平,并用荧光素酶报告基因检测突变对TGF-β信号通路的影响。结果分别于3个CHD患儿中筛选得到3个CHD特异性的TGFBR3新发/稀有杂合突变,其中TGFBR3^K685R为新发现的突变;TGFBR3^A791V和TGFBR3^A804S为稀有突变,并被SIFT和PolyPhen-2软件预测为有害突变。3个被突变的氨基酸都位于TGFBR3蛋白的高度保守区。功能分析实验显示,TGFBR3^K685R和TGFBR3^A804S突变导致TGFBR3蛋白表达水平显著降低,而且3个突变均导致TGFBR3蛋白对参与心脏发育重要信号通路TGF-β信号通路的抑制作用显著降低。结论突变TGFBR3^K685R、TGFBR3^A791V和TGFBR3^A804S可能通过降低TGFBR3对TGF-β信号通路的抑制作用,参与先天性心脏病的发生。 展开更多
关键词 先天性心脏病 tgfbr3 错义突变 TGF-Β信号通路
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额部黏液炎性纤维母细胞性肉瘤1例 被引量:1
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作者 王明月 张丽娜 曲利娟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期873-875,共3页
患者女性,91岁,2年前发现左侧额部有一黄豆大小包块,偶有瘙痒,未予治疗,肿块渐增大至乒乓球大小,局部皮肤反复破溃、溃疡(图1),无发热、头痛、视物模糊等。既往无特殊病史。头颅专科查体:头颅大小、形状正常,左侧额部头皮见一肿物突出... 患者女性,91岁,2年前发现左侧额部有一黄豆大小包块,偶有瘙痒,未予治疗,肿块渐增大至乒乓球大小,局部皮肤反复破溃、溃疡(图1),无发热、头痛、视物模糊等。既往无特殊病史。头颅专科查体:头颅大小、形状正常,左侧额部头皮见一肿物突出皮肤表面,大小3 cm×2.5 cm×2 cm,表面暗红色,质脆,触之易出血,边界尚清,基底部固定。口眼耳鼻无明显异常。CT示左侧额部头皮软组织内见一大小1.8 cm×2.8 cm×3.0 cm肿物,宽基底向外隆起,边界欠光整。向左侧蝶窦、蝶骨大翼、枕骨斜坡转移。予以手术切除。 展开更多
关键词 额部肿瘤 纤维母细胞肉瘤 tgfbr3 MGEA5 病例报道
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解毒复正汤通过干扰miR-223-3p并靶向调控TGFBR3影响肺癌侵袭转移的实验研究 被引量:2
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作者 姚菲 石玮 +3 位作者 吕梦玉 吴姗燕 王家晓 李春姗 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第4期1358-1366,共9页
目的探讨解毒复正汤(JieduFuzhengdecoction,JDFZ)通过影响微小核糖核酸-223-3p(Mircro ribonucleic acid-223-3p,miR-223-3p)靶向调控转化生长因子β受体3(Transforming growth factorβReceptor3,TGFBR3)的表达及其对肺癌细胞迁移的... 目的探讨解毒复正汤(JieduFuzhengdecoction,JDFZ)通过影响微小核糖核酸-223-3p(Mircro ribonucleic acid-223-3p,miR-223-3p)靶向调控转化生长因子β受体3(Transforming growth factorβReceptor3,TGFBR3)的表达及其对肺癌细胞迁移的影响。方法利用RT-qPCR技术检测肺腺癌患者癌组织及癌旁组织、肺腺癌患者及健康人外周血清中miR-223-3p表达水平的差异;并检测不同种类的NSCLC细胞系肺癌细胞(95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460)以及人肺上皮细胞BEAS-2B中miR-223-3p的本底表达量,从组织、血浆及细胞3个维度验证miR-223-3p的差异性。利用生物信息学网站重叠分析,初步预测到miR-223-3p与TGFBR33’UTR具有潜在的结合位点序列。接着运用双荧光素酶报告基因实验验证miR-223-3p与TGFBR3的靶向关系。体外培养肺癌A549细胞,采用脂质体法分别将miR-223-3p-过表达序列(miR-223-3p-mimics)及携带TGFBR3全基因的重组载体(Over-expression-TGFBR3,OE-TGFBR3)分别转染至肺癌细胞,以转入无关序列的模拟剂(Negative control-mimics,NC)作为对照组,收集各组稳转细胞,Transwell小室检测转染处理后及JDFZ作用后的细胞迁移能力;收集各组细胞蛋白,蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测细胞中EMT相关蛋白的表达。结果肺癌组织中miR-223-3p的表达量显著低于癌旁组织;肺癌患者血浆miR-223-3p表达水平明显低于健康正常人。不同种类的NSCLC细胞系肺癌细胞(95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460)中的miR-223-3p表达量亦低于正常人肺上皮细胞BEAS-2B。利用生物信息学网站及荧光素酶报告基因实验证实了miR-223-3p与TGFBR3的靶向调控关系。与miR-223-3p NC组对比,miR-223-3p mimics组和miR-223-3p mimics+OE-TGFBR3组的细胞迁移能力均下降(P<0.05),上调TGFBR3和加入解毒复正汤均能有效增强miR-223-3p对A549细胞迁移的负向调节作用;Westenblot结果发现,与miR-223-3p NC组对比,miR-223-3p mimics组和miR-223-3p mimics+OE-TGFBR3组E-Cadherin的� 展开更多
关键词 微小核糖核酸-223-3p(miR-223-3p) 人转化生长因子β受体3(tgfbr3) 解毒复正汤 侵袭转移 肺癌
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早发性卵巢功能不全与TGFBR3基因多态性的相关性
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作者 郭静 郭晓敏 +1 位作者 李明阳 李岩 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2021年第9期292-293,共2页
探究TGFBR3基因与人体早发性卵巢功能之间的关系,为临床治疗提供诊断依据。方法:为得到有效结果,本次截选收治的68名患者,所选患者检查时间在2018.9月~2020.5月中,将其作为观察组,另外选择68例正常女性,将其作为对照组,对比患者内分泌情... 探究TGFBR3基因与人体早发性卵巢功能之间的关系,为临床治疗提供诊断依据。方法:为得到有效结果,本次截选收治的68名患者,所选患者检查时间在2018.9月~2020.5月中,将其作为观察组,另外选择68例正常女性,将其作为对照组,对比患者内分泌情况,采集患者的外周血提取DNA,对两组人员的TGFBR3基因以及患者的18号外显子编码区区段设计特异性引物行多重PCR扩增,在完成Barcode引物区分后,对两组人员的TGFBR3基因进行检测。结果:对比两组人员的TGFBR3基因,观察组的染色体核型不存在异常,对两组人员的体质指数以及促卵泡生成素等数据进行对比,可以观察到明显的差异,且p<0.05,具有统计学对比意义。结论:在早发性卵巢功能不全患者中,患者一旦发生TGFBR3基因突变,就会导致患者发病,可以通过对患者的TGFBR3基因进行分析,判断患者病症。 展开更多
关键词 早发性卵巢功能不全 tgfbr3基因多态性 相关性
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