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TGF-β1 shRNA对涎腺人黏液表皮样癌裸鼠颌下腺移植瘤的抑瘤作用及Ki-67、VEGF蛋白表达的影响
被引量：
1
1
作者
王静
陈健
+2 位作者
马铭
赵媛
吴军正
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期735-738,共4页
目的研究TGF-β1 shRNA对人涎腺黏液表皮样癌(Ms)细胞裸鼠颌下腺原位移植瘤成瘤能力以及对Ki-67和VEGF蛋白表达的影响。方法将Ms细胞、稳定转染空载体的Ms细胞、稳定转染TGF-β1 shRNA的Ms细胞分别接种至裸鼠颌下腺,观察各组细胞在裸鼠...
目的研究TGF-β1 shRNA对人涎腺黏液表皮样癌(Ms)细胞裸鼠颌下腺原位移植瘤成瘤能力以及对Ki-67和VEGF蛋白表达的影响。方法将Ms细胞、稳定转染空载体的Ms细胞、稳定转染TGF-β1 shRNA的Ms细胞分别接种至裸鼠颌下腺,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤率,测量肿瘤体积、瘤质量并绘制肿瘤生长曲线;免疫荧光法和免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和VEGF蛋白的表达。结果与未转染组、转染空载体组相比,转染TGF-β1 shRNA组裸鼠颌下腺原位移植瘤生长缓慢,瘤体体积和瘤质量显著降低(P<0.01),瘤细胞中Ki-67和VEGF蛋白表达明显降低。结论 TGF-β1 shRNA能显著抑制Ms细胞在体内的生长能力,其机制可能与下调细胞内Ki-67和VEGF水平有关。
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关键词
tgf
-
β
1
shrna
黏液表皮样癌
KI-67
VEGF
下载PDF
职称材料
绿色荧光蛋白标记的TGF-β1shRNA真核表达载体的构建及鉴定
2
作者
韩雅玲
李娜
+3 位作者
康建
齐岩梅
郭亮
闫承慧
《中国应用生理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期244-249,共6页
目的:构建小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,探讨TGF-β1在血管发育中的调控作用。方法:根据GenBank小鼠TGF-β1mRNA序列,设计合成三对短链寡核苷酸,退火后形成双链DNA并克隆至入门载体pEN-mH1c。将插入目的...
目的:构建小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,探讨TGF-β1在血管发育中的调控作用。方法:根据GenBank小鼠TGF-β1mRNA序列,设计合成三对短链寡核苷酸,退火后形成双链DNA并克隆至入门载体pEN-mH1c。将插入目的基因片段的入门载体与带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的shRNA真核表达载体pDS-hpEy进行LR重组反应,完成三个TGF-β1shRNA表达载体的构建,分别命名为pDS-Ta,pDS-Tb和pDS-Tc。经测序确认后,转染小鼠成纤维细胞(NIH/3T3),筛选稳定表达的细胞克隆,以RT-PCR及Western blot方法检测转染后TGF-β1 mRNA和蛋白表达。结果:RT-PCR和Western blot显示pDS-Tc可明显下调NIH/3T3细胞TGF-β1的mRNA和蛋白表达,mRNA下调约为70%,蛋白表达减少约65%。结论:GFP标签TGF-β1shRNA表达载体能够阻断TGF-β1基因表达,可作为研究TGF-β1调控血管发育机制的一个工具,为阐明TGF-β1信号传导通路奠定基础。
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关键词
LR重组
tgf
-
β
1
shrna
载体构建
沉默效率鉴定
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职称材料
题名
TGF-β1 shRNA对涎腺人黏液表皮样癌裸鼠颌下腺移植瘤的抑瘤作用及Ki-67、VEGF蛋白表达的影响
被引量：
1
1
作者
王静
陈健
马铭
赵媛
吴军正
机构
兰州大学口腔医学院
兰州大学第一医院
第四军医大学口腔医院
出处
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期735-738,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30371551)
兰州大学医学基金资助项目(LZUYX200707)
兰州大学中央高校基本科研费自由探索资助项目(面上项目)(lzujbky-2009-96)
文摘
目的研究TGF-β1 shRNA对人涎腺黏液表皮样癌(Ms)细胞裸鼠颌下腺原位移植瘤成瘤能力以及对Ki-67和VEGF蛋白表达的影响。方法将Ms细胞、稳定转染空载体的Ms细胞、稳定转染TGF-β1 shRNA的Ms细胞分别接种至裸鼠颌下腺,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤率,测量肿瘤体积、瘤质量并绘制肿瘤生长曲线;免疫荧光法和免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和VEGF蛋白的表达。结果与未转染组、转染空载体组相比,转染TGF-β1 shRNA组裸鼠颌下腺原位移植瘤生长缓慢,瘤体体积和瘤质量显著降低(P<0.01),瘤细胞中Ki-67和VEGF蛋白表达明显降低。结论 TGF-β1 shRNA能显著抑制Ms细胞在体内的生长能力,其机制可能与下调细胞内Ki-67和VEGF水平有关。
关键词
tgf
-
β
1
shrna
黏液表皮样癌
KI-67
VEGF
Keywords
tgf
-
β
1
shrna
Mucoepidermoid carcinoma
Ki-67
VEGF
分类号
R782.4 [医药卫生—口腔医学]
R739.8 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
绿色荧光蛋白标记的TGF-β1shRNA真核表达载体的构建及鉴定
2
作者
韩雅玲
李娜
康建
齐岩梅
郭亮
闫承慧
机构
沈阳军区总医院心血管病研究所
出处
《中国应用生理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期244-249,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(30370526)
文摘
目的:构建小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,探讨TGF-β1在血管发育中的调控作用。方法:根据GenBank小鼠TGF-β1mRNA序列,设计合成三对短链寡核苷酸,退火后形成双链DNA并克隆至入门载体pEN-mH1c。将插入目的基因片段的入门载体与带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的shRNA真核表达载体pDS-hpEy进行LR重组反应,完成三个TGF-β1shRNA表达载体的构建,分别命名为pDS-Ta,pDS-Tb和pDS-Tc。经测序确认后,转染小鼠成纤维细胞(NIH/3T3),筛选稳定表达的细胞克隆,以RT-PCR及Western blot方法检测转染后TGF-β1 mRNA和蛋白表达。结果:RT-PCR和Western blot显示pDS-Tc可明显下调NIH/3T3细胞TGF-β1的mRNA和蛋白表达,mRNA下调约为70%,蛋白表达减少约65%。结论:GFP标签TGF-β1shRNA表达载体能够阻断TGF-β1基因表达,可作为研究TGF-β1调控血管发育机制的一个工具,为阐明TGF-β1信号传导通路奠定基础。
关键词
LR重组
tgf
-
β
1
shrna
载体构建
沉默效率鉴定
Keywords
LR recombination
tgf
-
β
1
shrna
vectors construction
assessment of silencing efficiency
分类号
Q593.2 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TGF-β1 shRNA对涎腺人黏液表皮样癌裸鼠颌下腺移植瘤的抑瘤作用及Ki-67、VEGF蛋白表达的影响
王静
陈健
马铭
赵媛
吴军正
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
下载PDF
职称材料
2
绿色荧光蛋白标记的TGF-β1shRNA真核表达载体的构建及鉴定
韩雅玲
李娜
康建
齐岩梅
郭亮
闫承慧
《中国应用生理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
下载PDF
职称材料
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