TF-1细胞增殖法测定神经生长因子生物学活性的建立与应用 被引量：8

1

作者 于婷 宋小红 +1 位作者 付玲 侯利华 《生物技术通讯》 CAS 2012年第6期840-845,共6页

目的:建立并优化用于检测神经生长因子(NGF)生物学活性的TF-1细胞增殖法,并应用于重组人NGF和鼠NGF制品的活性检测。方法:将梯度稀释的人NGF国际参考品与TF-1细胞相作用,通过MTT法测定细胞增殖情况,建立测定NGF活性的TF-1细胞增殖法;从... 目的:建立并优化用于检测神经生长因子(NGF)生物学活性的TF-1细胞增殖法,并应用于重组人NGF和鼠NGF制品的活性检测。方法:将梯度稀释的人NGF国际参考品与TF-1细胞相作用,通过MTT法测定细胞增殖情况,建立测定NGF活性的TF-1细胞增殖法;从粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)残留、NGF加样稀释率、TF-1细胞接种浓度、培养时间等多个环节对实验条件进行优化;将建立的TF-1细胞增殖法应用于重组人NGF和鼠NGF的活性检测。结果:建立了用于NGF活性检测的TF-1细胞增殖法;实验条件优化结果表明,在无GM-CSF残留的情况下,将稀释至1/4的NGF样品与4×105/mL的细胞相互作用,培养48 h,可以得到更为典型的的四参数曲线;利用条件优化后建立的检测方法对重组人NGF和鼠NGF各2批样品分别进行4次测定,结果平均值分别为10.01×105、10.81×105和3.55×105、3.30×105U/mg,变异系数分别为7.5%、7.2%和7.2%、9.1%,检测结果稳定均一,表明检测方法具有很好的重复性。结论:建立并优化了用于NGF活性检测的TF-1细胞增殖法,该方法操作简便、定量准确、重复性好、稳定可靠,可有效应用于人NGF和鼠NGF制品的活性检测。 展开更多

关键词 tf-1细胞 神经生长因子 生物学活性

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苦参碱对人急性红白血病细胞株TF-1SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的影响 被引量：7

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作者 周陈姣 史丽君 +4 位作者 傅雷华 王兰 喻依川 胡成琳 陈林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第10期1449-1453,共5页

目的探讨苦参碱对人急性红白血病细胞株TF-1 SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的影响。方法用不同浓度的苦参碱(0.5、1.0、2.0 g/L)处理TF-1细胞,另设对照组(不加苦参碱)。苦参碱作用48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测... 目的探讨苦参碱对人急性红白血病细胞株TF-1 SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的影响。方法用不同浓度的苦参碱(0.5、1.0、2.0 g/L)处理TF-1细胞,另设对照组(不加苦参碱)。苦参碱作用48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测各组TF-1细胞中SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因β-catenin、C-myc、Cyclin DI的表达水平,并分析SALL4基因与β-catenin、C-myc及Cyclin DI表达的相关性;Western blot法检测各组TF-1细胞中SALL4蛋白的表达水平。结果经不同浓度苦参碱处理48 h后,TF-1细胞中SALL4、β-catenin、C-myc、Cyclin DI基因的表达水平及SALL4蛋白的表达水平与对照组相比,均明显下降,且呈浓度依赖性(P<0.05);SALL4基因与β-catenin、C-myc、Cyclin DI基因的表达明显相关(r s值分别为0.912、0.818和0.832,P均<0.01)。结论苦参碱对TF-1细胞中SALL4基因和蛋白表达及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因β-catenin、C-myc、Cyclin DI的抑制可能在抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡过程中起重要作用。 展开更多

关键词 苦参碱 红白血病 tf-1细胞 SALL4基因 WNT Β-CATENIN信号通路

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苯线磷和甲胺磷对TF-1细胞乙酰胆碱酯酶影响的差异

3

作者 陈旸升 马永超 +3 位作者 彭颖蓓 徐丽 谢群慧 赵斌 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期231-240,共10页

有机磷农药(organophosphorus pesticides,OPs)具有较强的神经毒性,主要是通过抑制胆碱能神经传导中的关键酶,乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)的活性来实现的。苯线磷和甲胺磷是广泛用于农业生产的OPs,但对它们抑制... 有机磷农药(organophosphorus pesticides,OPs)具有较强的神经毒性,主要是通过抑制胆碱能神经传导中的关键酶,乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)的活性来实现的。苯线磷和甲胺磷是广泛用于农业生产的OPs,但对它们抑制人AChE活性的机制研究十分有限。本研究应用2种不同的给药方式,包括对培养的细胞和细胞裂解液进行药物处理,明确苯线磷和甲胺磷对人血液白血病细胞系TF-1中AChE酶活性的直接作用和对AChE基因转录表达的影响,从而揭示苯线磷和甲胺磷抑制AChE酶活性的机制与两者的差别。结果表明,高浓度苯线磷(10^(-3) mol·L^(-1))处理后,TF-1细胞活力降低,同时诱导细胞凋亡和坏死;而所有被试浓度的甲胺磷对细胞活力均没有明显影响。此外,对于TF-1细胞裂解液中的AChE,苯线磷和甲胺磷短期处理(1 h和5 h)均可产生直接抑制作用,其中苯线磷的抑制作用略强于甲胺磷(孵育1 h,IC_(50)值分别为1.181×10^(-6) mol·L^(-1)和2.837×10^(-6) mol·L^(-1))。对培养细胞的药物处理实验结果显示,苯线磷和甲胺磷(10^(-6) mol·L^(-1)和10-5 mol·L^(-1))处理24 h后,均显著降低了TF-1细胞的AChE酶活性,苯线磷的抑制率略高于甲胺磷。而与对酶活性的抑制作用相反,苯线磷和甲胺磷对TF-1中AChE H转录本表达有轻微的上调作用,以甲胺磷更为明显,提示存在反馈调节机制。总结上述结果,我们发现苯线磷对TF-1细胞中AChE的抑制作用总体略强于甲胺磷,而甲胺磷对AChE基因表达的反馈上调作用更明显。从而首次从对AChE酶的直接抑制作用和生物合成影响的不同角度阐述了2个OPs对AChE影响的差异,为进一步的分子机制研究提供了实验数据。 展开更多

关键词 苯线磷 甲胺磷 乙酰胆碱酯酶(AChE) 人血液白血病细胞tf-1

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依赖IL-5增殖的细胞株TF-1-9E3的驯化及验证

4

作者 李诗洁 代维燕 +5 位作者 王雪莲 柯文锋 韩飞 陈永奇 刘畅 白仲虎 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期109-114,共6页

在IL-5靶点药物的发现阶段,为评价候选药物的阻断活性,需建立依赖IL-5增殖且信噪比高、重现性好的检测用细胞株。TF-1是人白血病细胞,其生长完全依赖IL-3或GM-CSF,而IL-5与IL-3和GM-CSF共用β(βc)受体,因此,研究以GM-CSF依赖的TF-1细... 在IL-5靶点药物的发现阶段,为评价候选药物的阻断活性,需建立依赖IL-5增殖且信噪比高、重现性好的检测用细胞株。TF-1是人白血病细胞,其生长完全依赖IL-3或GM-CSF,而IL-5与IL-3和GM-CSF共用β(βc)受体,因此,研究以GM-CSF依赖的TF-1细胞株为来源,用IL-5替换TF-1细胞生长必需的生长因子GM-CSF,降低血清含量进行细胞驯化培养传代。通过35 d的细胞驯化及3~5次降血清传代培养,采用有限稀释法分离单克隆,一共得到14个单克隆细胞株。对14株细胞进行FACS检测,其中,有9个细胞株IL-5Rα表达量升高。对IL-5Rα过表达的细胞株进行IL-5增殖检测,结果表明,相比8%FBS得到的单克隆,6%FBS得到的单克隆对IL-5刺激更敏感。通过单因素优化实验,细胞增殖检测最优的细胞接种量为2×10^(4)个/孔,FBS含量为3%,血清品牌为Gibco。驯化后的细胞TF-1-9E3对IL-5的剂量-效应曲线的信噪比为3.19,Emax区间为2.15,可用于IL-5的生物学活性检测及IL-5与IL-5Rα的抗体阻断活性检测。 展开更多

关键词 IL-5 tf-1细胞 增殖 阻断活性 细胞驯化

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神经生长因子依赖的TF-1亚克隆细胞株的筛选及应用

5

作者 霍立红 乐伟 +3 位作者 史权威 李曼 何景昌 刘荷中 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第2期235-240,244,共7页

目的筛选神经生长因子(nerve growth factor,NGF)依赖的TF-1亚克隆细胞株,用于重组人NGF(rhNGF)生物学活性的测定。方法逐步将含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte macrophagecolony stimulating factor,... 目的筛选神经生长因子(nerve growth factor,NGF)依赖的TF-1亚克隆细胞株,用于重组人NGF(rhNGF)生物学活性的测定。方法逐步将含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte macrophagecolony stimulating factor,rhGM-CSF)的培养基替换为含鼠神经生长因子(mouse nerve growth factor,mNGF)的培养基,将rhGM-CSF依赖的TF-1细胞驯化为mNGF依赖的TF-1细胞;绘制mNGF依赖的TF-1细胞的剂量-效应反应曲线,计算信噪比(S/N)和细胞最大效应(maximal effect,Emax)区间;用甲基纤维素半固体培养基对mNGF依赖的TF-1细胞进行克隆化,镜下挑选单克隆细胞,扩大培养,绘制各单克隆细胞株对NGF的剂量-效应反应曲线,并对其中反应性最好的单克隆细胞株进行STR图谱鉴定;对细胞接种密度和培养时间进行优化;用筛选出的细胞检测rhNGF的生物学活性。结果经驯化,rhGM-CSF依赖的TF-1细胞可在只含mNGF的培养基中正常生长,并对NGF的刺激呈良好的剂量-效应反应关系;驯化后的mNGF依赖的TF-1细胞对mNGF的剂量-效应曲线的信噪比为2.0,Emax为0.43;共筛选出15株细胞形态良好、倍增时间稳定的单克隆细胞株,其中A2亚克隆细胞株(TF-1-A2)反应性最好;该细胞中未发现人类细胞交叉污染现象,仅在CSF1PO位点与ATCC TF-1细胞数据有差异,可判定为TF-1细胞;细胞接种密度为5×104个/ml、培养时间为72 h时对rhNGF有良好的反应性,可用于rhNGF生物学活性的检测。结论成功筛选出1株对NGF具有良好反应性的TF-1-A2亚克隆细胞株,可用于定量检测NGF的生物学活性。 展开更多

关键词 神经生长因子 tf-1细胞 生物学活性

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重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子生物学活性测定TF-1细胞/MTT比色法的优化及其验证 被引量：1

6

作者 许国杰 周丽红 +5 位作者 李丹 田云蕾 于丽娟 刘英华 严永男 李利 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第12期1311-1315,共5页

目的对检测重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte macrophage colony stimulating factor,rh GM-CSF）生物学活性的TF-1细胞/MTT比色法进行优化及验证。方法以rh GM-CSF依赖细胞株TF-1为靶细胞,采用MTT比... 目的对检测重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte macrophage colony stimulating factor,rh GM-CSF）生物学活性的TF-1细胞/MTT比色法进行优化及验证。方法以rh GM-CSF依赖细胞株TF-1为靶细胞,采用MTT比色法测定rh GM-CSF生物学活性,对比色法中裂解液种类、裂解时间、细胞浓度、MTT作用时间等进行优化,并对优化后的方法进行准确度和精密度验证。结果优化后的TF-1细胞/MTT比色法：将供试品及标准品稀释至18 IU/ml,做2倍系列稀释,共8个稀释度,50μl/孔;加入6×10^5个/ml TF-1细胞悬液,50μl/孔,37℃培养48-52 h;加入MTT溶液,20μl/孔,37℃培养5 h;加入15%SDS裂解液,150μl/孔,裂解过夜,检测A570值。3种不同浓度的rh GM-CSF标准品活性测定结果回收率为104%;rh GM-CSF标准品6次检测活性平均值为18.6 IU/ml,变异系数为5.37%;rh GM-CSF标准品3 d活性检测结果的平均变异系数为5.18%。结论采用优化后MTT比色法检测rh GM-CSF生物学活性,准确度和精密度均较高,可应用于rh GM-CSF活性的检测。 展开更多

关键词 tf-1细胞/MTT比色法 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 生物学活性 优化 验证

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凋亡相关蛋白TFAR19在TF-1细胞凋亡中出现细胞核转位 被引量：25

7

作者 陈英玉 孙荣华 +4 位作者 韩文玲 张颖妹 宋泉声 狄春辉 马大龙 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期97-100,共4页

目的 :探讨凋亡相关分子TFAR19在TF 1细胞凋亡过程中的表达及定位。方法 :以TFAR19的单克隆抗体为工具 ,采用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等研究手段 ,观察细胞凋亡过程中TFAR19分子的表达水平和细胞内定位 ,分析其与... 目的 :探讨凋亡相关分子TFAR19在TF 1细胞凋亡过程中的表达及定位。方法 :以TFAR19的单克隆抗体为工具 ,采用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等研究手段 ,观察细胞凋亡过程中TFAR19分子的表达水平和细胞内定位 ,分析其与细胞膜磷脂酰丝氨酸 (phosphatidylserine,PS)以及细胞核DNA片段化的关系。结果 :TFAR19蛋白在撤除GM CSF的TF 1细胞中表达水平显著增高 ,伴有明显的核转位现象 ,且早于PS外翻和细胞DNA片段化。结论 :TFAR19蛋白的核转位是细胞凋亡更早期发生的事件之一 ,这一新发现为进一步探讨TFAR19蛋白的生物学效应 。 展开更多

关键词 tfAR19 tf-1细胞 细胞凋亡 细胞核转位

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GM-CSF/IL-3融合蛋白质量标准的研究和建立 被引量：2

8

作者 袁力勇 饶春明 +4 位作者 李响 韩春梅 郭莹 丁有学 王军志 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1605-1608,共4页

目的:建立重组 GM-CSF/IL-3融合蛋白的质控标准和检测方法,以用于该产品的常规质量控制。方法:用 TF-1/MTT 细胞增殖试验定量测定 GM-CSF/IL-3融合蛋白体外生物学活性;用抗 GM-CSF 和 IL-3的抗体分别进行 WesternBlot 进行鉴别试验;用 C... 目的:建立重组 GM-CSF/IL-3融合蛋白的质控标准和检测方法,以用于该产品的常规质量控制。方法:用 TF-1/MTT 细胞增殖试验定量测定 GM-CSF/IL-3融合蛋白体外生物学活性;用抗 GM-CSF 和 IL-3的抗体分别进行 WesternBlot 进行鉴别试验;用 C_8-HPLC 和 SDS～PAGE 测定蛋白纯度;用胰蛋白酶消化/C_(18)-HPLC 进行肽图分析;用顶空进样气相色谱法检测甲醇残留量;还原型 SDS-PAGE 测定融合蛋白相对分子质量;其他原液和成品检测项目参照2005年版中国药典三部的方法进行。结果:GM-CSF/IL-3融合蛋白的原液及成品与 TF-1细胞的反应呈典型的 S 型曲线,符合四参数方程 y=(A-D)/[1+(x/C)(?)B)]+D,相关系数大于0.99,成品和原液的回收率均大于94%,RSD 均小于20%;与 GM-CSF 和 IL-3抗体进行的 Western Blot 均为阳性;原液纯度大于95.0%;甲醇残留量小于0.005%,其他项目均符合2005年版中国药典三部要求。结论:建立的重组 GM-CSF/IL-3融合蛋白质控标准和检测方法可以有效控制该制品的质量,并确保制品的安全与有效,已用于该制品的常规检定。 展开更多

关键词 GM—CSF/IL-3 tf-1细胞 WESTERN BLOT 甲醇

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重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子效价测定中最佳细胞密度的探讨

9

作者 遇畅 王海蓉 周艳玲 《黑龙江医药》 CAS 2001年第6期439-440,共2页

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rh GM—CSF)效价的测定是采用 TF—1 rh GM—CSF 依赖株细胞,该细胞的增殖与 rh GM—CSF 浓度成正比,用 MTT 法测定细胞增殖程度,反映 rh GM—CSF 的活性。在测定 rh GM—CSF 的效价过程中 TF—1细胞... 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rh GM—CSF)效价的测定是采用 TF—1 rh GM—CSF 依赖株细胞,该细胞的增殖与 rh GM—CSF 浓度成正比,用 MTT 法测定细胞增殖程度,反映 rh GM—CSF 的活性。在测定 rh GM—CSF 的效价过程中 TF—1细胞的密度对实验结果有直接影响。 展开更多

关键词 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 tf-1细胞 密度 效价测定

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肾透明细胞癌PDCD5表达及与预后的关系 被引量：24

10

作者 谭万龙 熊林 +4 位作者 郑少斌 郁兆存 齐桓 杜跃军 吴芃 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1316-1318,共3页

目的探讨PDCD5在肾透明细胞癌发生、发展中的作用及与预后关系。方法采用免疫组织化学方法,对46例肾透明细胞癌组织中PDCD5表达进行研究,对患者存活率进行回顾性随访。结果癌旁肾组织中PDCD5阳性表达率显著高于肾癌组织。PDCD5阳性表达... 目的探讨PDCD5在肾透明细胞癌发生、发展中的作用及与预后关系。方法采用免疫组织化学方法,对46例肾透明细胞癌组织中PDCD5表达进行研究,对患者存活率进行回顾性随访。结果癌旁肾组织中PDCD5阳性表达率显著高于肾癌组织。PDCD5阳性表达率随肾透明细胞癌病理分级和临床分期的上升而下降,染色强度也减弱。PDCD5阳性表达组3年及5年存活率高于阴性表达组。结论PDCD5为肾透明细胞癌的负性调节因子,对抑制肾透明细胞癌的恶性转化和进展可能有重要的意义。 展开更多

关键词 肾透明细胞癌 PDCD5 tfAR19

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TF-1细胞凋亡相关基因19在系统性红斑狼疮发病中的作用 被引量：5

11

作者 宋清华 王晶 +4 位作者 陈英玉 狄春晖 孙荣华 陈学荣 李世荫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期189-193,T004,共6页

目的 :探讨TF - 1细胞凋亡相关基因 1 9(TFAR1 9)在系统性红斑狼疮 (SLE)发病诱因中的作用及其与SLE病情的关系。方法 :应用倒置相差显微镜、Ladder方法、Westernblotting方法、荧光免疫显微镜、ELISA方法检测中波紫外线 (UVB)诱导HaCa... 目的 :探讨TF - 1细胞凋亡相关基因 1 9(TFAR1 9)在系统性红斑狼疮 (SLE)发病诱因中的作用及其与SLE病情的关系。方法 :应用倒置相差显微镜、Ladder方法、Westernblotting方法、荧光免疫显微镜、ELISA方法检测中波紫外线 (UVB)诱导HaCaT细胞凋亡时TFAR1 9的表达及其与SLE患者病情的关系。结果 :在剂量为 30mJ/cm2的UVB照射 2 4h后 ,HaCaT细胞开始凋亡 ,TFAR1 9在此过程中有表达 ,发现活动期SLE患者血清中TFAR1 9的抗体值高于稳定期和正常对照组的值 (P≤ 0 .0 5)。结论 :在UVB诱导角质形成细胞HaCaT凋亡的过程中 ,有TFAR1 9的参与并发挥了作用 ,提示TFAR1 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 细胞凋亡 紫外线B tf-1细胞凋亡相关基因19

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TF-1细胞凋亡相关基因的研究 被引量：18

12

作者 刘红涛 王玉刚 +4 位作者 张颖妹 宋泉声 敬保迁 袁勇 马大龙 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第1期38-43,共6页

利用近年来发展起来的代表差异分析（ｃＤＮＡｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓａｎａｌｙｓｉｓ，ｃＤＮＡＲＤＡ）技术研究了在人红白血病细胞株ＴＦ１细胞撤除细胞因子后进入凋亡时诱导表达的基因．发现了... 利用近年来发展起来的代表差异分析（ｃＤＮＡｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓａｎａｌｙｓｉｓ，ｃＤＮＡＲＤＡ）技术研究了在人红白血病细胞株ＴＦ１细胞撤除细胞因子后进入凋亡时诱导表达的基因．发现了６个新基因片段．其中有三个经与ＧｅｎＢａｎｋｎｒ和ｄｂＥＳＴ查询均没有发现同源性，已经向ＧｅｎＢａｎｋ进行登记，登记号分别为Ｕ８３２０８，Ｕ８３２７９，Ｕ８３３９７．此外还发现一批已知基因的表达与凋亡相关，其中包括Ｈｏｕ和人硫氧还原蛋白等，提示它们在凋亡中可能起作用．这项工作为进一步研究凋亡相关基因打下了良好基础．通过ＲＤＡ的研究结果，有可能发现人白血病细胞凋亡的特异标记蛋白或发挥作用的重要蛋白，以期为白血病治疗提供理论基础． 展开更多

关键词 tf-1细胞株 代表差异分析 细胞凋亡

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果蝇程序化死亡基因5(PDCD5)同源cDNA的克隆和序列分析 被引量：7

13

作者 王应 张颖妹 +3 位作者 杨田 周周 狄春辉 马大龙 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期143-147,共5页

为了解人类白血病细胞凋亡相关新基因 TFAR1 9(PDCD5,programmed cell death5)在不同种属间的序列同源性 ,利用 EST(expression sequence tag)拼接、RT- PCR、DNA序列测定技术及计算机分析技术 ,首次成功地进行了果蝇 PDCD5同源 c DNA... 为了解人类白血病细胞凋亡相关新基因 TFAR1 9(PDCD5,programmed cell death5)在不同种属间的序列同源性 ,利用 EST(expression sequence tag)拼接、RT- PCR、DNA序列测定技术及计算机分析技术 ,首次成功地进行了果蝇 PDCD5同源 c DNA编码区基因克隆和序列分析 .发现果蝇与小鼠及果蝇与人 PDCD5在核苷酸水平上分别有 57.5%和 57.1 %的同源性 ,在氨基酸水平上分别有 46.8%和 46.4%的同源性 .功能区分析发现 ,果蝇 PDCD5c DNA编码 1 33个氨基酸 ,计算机预测可能是一种核蛋白 ,含 5个可能的酪蛋白激酶 (casein kinase )磷酸化位点 ,2个可能的 PKC磷酸化位点 ,与人 PDCD5的功能区类似 .因而果蝇 PDCD5是与人 PDCD5同源的新基因 ,可能都与细胞程序化死亡相关 . 展开更多

关键词 果蝇 PDCD5 tfAR19 序列分析 细胞凋亡基因 基因克隆

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