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新型溶瘤病毒oHSV2^hGM-CSF的构建及其抗肿瘤作用 被引量：11
1
作者 施桂兰 庄秀芬 +4 位作者 韩香萍 李洁 张郁 张叔人 刘滨磊 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期89-95,共7页
目的构建表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（hGM-CSF）的2型溶瘤单纯疱疹病毒（oHSV2^hGM-CSF），初步验证其体外溶瘤效果及其对小鼠B16R黑色素瘤模型的体内疗效。方法采用PCR、分子克隆及同源重组技术，从HG52野生病毒株的基因组中剔... 目的构建表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（hGM-CSF）的2型溶瘤单纯疱疹病毒（oHSV2^hGM-CSF），初步验证其体外溶瘤效果及其对小鼠B16R黑色素瘤模型的体内疗效。方法采用PCR、分子克隆及同源重组技术，从HG52野生病毒株的基因组中剔除ICP34．5和ICP47基因，并插入hGM．CSF表达序列，构建oHSV2^hGM-CSF。将HeLa、Eca．109和PG等16种肿瘤细胞分别接种到24孔板，用1型溶瘤单纯疱疹病毒（oHSV2^hGM-CSF）或oHSV2^hGM-CSF”（感染复数=1）感染24、48h后，显微镜下观察细胞病变。以表达HSV感染受体的C57BL／6小鼠黑色素瘤细胞B16R为动物模型，当肿瘤生长至7-8mm’时，瘤内分别注射2．3×10^6PFU的oHSV2^hGM-CSF和oHSV2^hGM-CSF，共3次，每次间隔3d，同时测量肿瘤大小，并观察生存期。结果PCR检测和DNA序列分析结果证实，各目的基因已被剔除，hGM-CSF表达盒插入到ICP34．5的基因位点。oHSV2^hGM-CSF和oHSV2^hGM-CSF感染肿瘤细胞24h后，即能观察到细胞病变，且溶瘤谱较广，oHSV2^hGM-CSF感染的肿瘤细胞合胞体现象多于oHSV2^hGM-CSF感染者；感染48h后，oHSV2^hGM-CSF对HeLa、HepG2、SK-Mel-28、B16R、U87-MG细胞的溶瘤效果优于oHSV2^hGM-CSF。动物实验显示，肿瘤接种后第15天，PBS组、oHSV2^hGM-CSF’治疗组和oHSV2^hGM-CSF。”治疗组小鼠的肿瘤体积分别为（374．74-128．24）mm’、（128．23±45．32）mm。和（10．06±5．10）mm3，oHSV2^hGM-CSF明显延缓了荷瘤小鼠肿瘤的生长。PBS组小鼠在接种B16R细胞22d后全部死亡；oHSV2^hGM-CSF治疗组和oHSV2^hGM-CSF治疗组小鼠在接种B16R细胞110d时，存活率分别为60％和80％（P〉0．05）。与PBS组相比，oHSV2^hGM-CSF治疗组和oHSV2^hGM-CSF治疗组小鼠的生存期明显延长（P〈0．01）。结论oHSV2^hGM-CSF对人肿瘤细胞溶瘤谱较广，对荷B16R黑色素瘤瘤内注射有较好的抗肿瘤神府目．右掂砰的开学前景． 展开更多
关键词 溶瘤病毒 疱疹病毒2型 人 人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子 肿瘤生物治 疗 合胞体
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