目的探讨独活寄生汤含药血清对膝关节骨关节炎(OA)大鼠滑膜细胞炎症因子表达的影响及其可能机制。方法采用Hulth法建立OA大鼠模型,分离膝关节滑膜细胞,采用酶原消化法进行培养,并将其分为模型组及低、中、高剂量组,以正常大鼠膝关节滑...目的探讨独活寄生汤含药血清对膝关节骨关节炎(OA)大鼠滑膜细胞炎症因子表达的影响及其可能机制。方法采用Hulth法建立OA大鼠模型,分离膝关节滑膜细胞,采用酶原消化法进行培养,并将其分为模型组及低、中、高剂量组,以正常大鼠膝关节滑膜细胞为对照组。低、中、高剂量组分别加入经独活寄生汤中药0.85、1.7、3.4 m L/kg灌胃大鼠的含药血清,对照组与模型组加入等量20%FBS,培养48 h。采用ELISA法检测各组细胞TNF-α、IL-6、IL-8及IL-10表达,超高效液相色谱-高分辨质谱法检测各组细胞脂氧素A4表达,Western blotting法检测各组细胞抗c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、激活子蛋白1(AP-1)及磷酸化AP-1(p-AP-1)表达。结果对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组细胞TNF-α、IL-6、IL-8表达均依次升高,IL-10、脂氧素A4表达依次降低,组间两两比较P均<0.05。与对照组比较,模型组细胞AP-1、p-AP-1、JNK及p-JNK表达均升高(P均<0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组细胞AP-1、p-AP-1、JNK及p-JNK表达均降低,且高剂量组降低更明显(P均<0.05)。结论独活寄生汤含药血清可降低膝关节OA大鼠滑膜细胞TNA-α、IL-6、IL-8、IL-10表达,并呈剂量依赖性;提高滑膜细胞脂氧素A4表达、抑制JNK、AP-1及其磷酸化通路可能是其作用机制。展开更多
文摘目的探讨独活寄生汤含药血清对膝关节骨关节炎(OA)大鼠滑膜细胞炎症因子表达的影响及其可能机制。方法采用Hulth法建立OA大鼠模型,分离膝关节滑膜细胞,采用酶原消化法进行培养,并将其分为模型组及低、中、高剂量组,以正常大鼠膝关节滑膜细胞为对照组。低、中、高剂量组分别加入经独活寄生汤中药0.85、1.7、3.4 m L/kg灌胃大鼠的含药血清,对照组与模型组加入等量20%FBS,培养48 h。采用ELISA法检测各组细胞TNF-α、IL-6、IL-8及IL-10表达,超高效液相色谱-高分辨质谱法检测各组细胞脂氧素A4表达,Western blotting法检测各组细胞抗c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、激活子蛋白1(AP-1)及磷酸化AP-1(p-AP-1)表达。结果对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组细胞TNF-α、IL-6、IL-8表达均依次升高,IL-10、脂氧素A4表达依次降低,组间两两比较P均<0.05。与对照组比较,模型组细胞AP-1、p-AP-1、JNK及p-JNK表达均升高(P均<0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组细胞AP-1、p-AP-1、JNK及p-JNK表达均降低,且高剂量组降低更明显(P均<0.05)。结论独活寄生汤含药血清可降低膝关节OA大鼠滑膜细胞TNA-α、IL-6、IL-8、IL-10表达,并呈剂量依赖性;提高滑膜细胞脂氧素A4表达、抑制JNK、AP-1及其磷酸化通路可能是其作用机制。
