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高粱幼叶细胞悬浮系的建立 被引量:7
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作者 郝艳芳 王良群 +4 位作者 刘勇 张微 杨伟 白鸿雁 武擘 《作物杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期35-40,F0002,共7页
以高粱无菌苗幼叶为试验材料,对颗粒状胚性愈伤组织的获得、细胞悬浮系的建立及影响悬浮细胞生长的主要因素进行了研究。结果表明:幼叶在MS(Murashige and Skoog)+2mg/L 2,4-D培养基上诱导出的愈伤组织,经2~3次继代筛选后获得了浅黄色... 以高粱无菌苗幼叶为试验材料,对颗粒状胚性愈伤组织的获得、细胞悬浮系的建立及影响悬浮细胞生长的主要因素进行了研究。结果表明:幼叶在MS(Murashige and Skoog)+2mg/L 2,4-D培养基上诱导出的愈伤组织,经2~3次继代筛选后获得了浅黄色、颗粒状胚性愈伤组织;胚性愈伤组织接种于液体培养基中,于25±1℃、黑暗条件下,经45~60d的悬浮震荡培养建立了高质量的细胞悬浮系,细胞生长曲线呈"S"型,细胞密度可达6.45×10~5~5.08×10~6个/mL以上,活细胞率可达72.76%,近圆细胞率可达87.50%;培养基的基本成分、激素种类和水平对悬浮细胞生长状态有很大的影响,相比1/2MS培养基,MS培养基为适宜的培养基,2,4-D对保持细胞系的稳定增殖至关重要,适宜的浓度为1mg/L;培养液中加入0.5mg/L KT或6-BA会造成悬浮液褐化,影响悬浮细胞的生长;最适宜的细胞悬浮培养基为L2培养基(MS+1mg/L 2,4-D,30g/L蔗糖,pH5.8),震荡培养转速为110~120r/min,继代周期为7d,新旧培养基的接种比例为2∶1。 展开更多
关键词 高粱 细胞悬浮系 活细胞率 近圆细胞率 细胞密度
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生产禽流感病毒的悬浮MDCK细胞稳定性的研究 被引量:4
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作者 白春丽 叶倩 +6 位作者 姬阿美 刘旭平 张旭 刘志亮 朱明龙 赵亮 谭文松 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期72-79,共8页
旨为研究悬浮MDCK细胞在长期传代过程中细胞生长稳定性与病毒生产稳定性。以悬浮MDCK细胞为研究对象,通过对该细胞进行了长达200多天的传代培养,考察了传代过程中各代次细胞的生长情况以及对H9N2禽流感病毒的生产能力差异;探究了不同培... 旨为研究悬浮MDCK细胞在长期传代过程中细胞生长稳定性与病毒生产稳定性。以悬浮MDCK细胞为研究对象,通过对该细胞进行了长达200多天的传代培养,考察了传代过程中各代次细胞的生长情况以及对H9N2禽流感病毒的生产能力差异;探究了不同培养基稀释比例和MOI等工艺参数条件对长期传代的悬浮MDCK细胞生产H9N2禽流感病毒过程的影响关系;另外,从ROS水平和细胞周期两方面,研究了高低代次细胞的病毒生产能力差异的内在原因。结果显示,各代次悬浮MDCK细胞形态相似,细胞生长能力无显著性差异,表明该细胞在长期传代过程中细胞生长稳定性良好。但HA滴度随细胞代次的增加而增加,最高代次细胞(P111)的病毒滴度较最低代次细胞(P1)约高0.5 Log2HAU/100μL;P111细胞在不同工艺下病毒产量均高于P1细胞,表明了该细胞长期传代后病毒生产能力略有提高。最后,研究发现,与P1相比,P111胞内ROS水平较低并且G0/G1期细胞的比例较高,此现象可能是高代次细胞产量提高的原因。 展开更多
关键词 悬浮MDCK细胞 禽流感病毒 细胞株稳定性 ROS 细胞周期
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枸杞髓部细胞悬浮培养获得单细胞植株的研究 被引量:1
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作者 曹有龙 罗青 +2 位作者 陈晓斌 贾勇炯 陈放 《宁夏农林科技》 1996年第4期19-21,共3页
为了提高枸杞的抗病力,培育高产优质拘杞品种,进行了用枸杞髓组织组培,分离单细胞,进行悬浮培养以获得单细胞株植的研究。结果在含不同激素的4种 MS 培养基上都诱导出了愈伤组织,诱导频率56.7%~95.7%,其中以 MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L... 为了提高枸杞的抗病力,培育高产优质拘杞品种,进行了用枸杞髓组织组培,分离单细胞,进行悬浮培养以获得单细胞株植的研究。结果在含不同激素的4种 MS 培养基上都诱导出了愈伤组织,诱导频率56.7%~95.7%,其中以 MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30%诱导出的愈伤组织颗粒小、分散性能好。此愈伤组织在经2~3次继代培养后,在液体培养基中,进行振荡悬浮培养,24h 后获得大量单细胞,经过多次继代培养(16h 增殖1倍),建立起了稳定的单细胞悬浮培养系。收集单细胞转入 MS+6-BA0.5mg/L 的液体分化培养基中,8~10d 后,获得大量的胚状体;胚状体转入固体培养基中,获得绿色小芽;小芽转入生根培养基中,20d 后得到完整植株。 展开更多
关键词 枸杞 髓组织 悬浮培养 细胞系 单细胞植株
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