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SUMF1及SUMF2对硫酸酯酶功能的影响
被引量：
1
1
作者
刘蕾
梁红艳
姜晓峰
《医学综述》
2015年第14期2522-2524,共3页
硫酸酯酶作为硫酸酯类分解代谢酶在人体内起着重要的作用,若其活性出现异常会导致多种疾病。硫酸酯酶的活性需要一个独立的翻译后调节,这个调节由硫酸酯酶的一种调控因子硫酸酯酶调控因子1(SUMF1)来完成。研究发现,硫酸酯酶具有另一种...
硫酸酯酶作为硫酸酯类分解代谢酶在人体内起着重要的作用,若其活性出现异常会导致多种疾病。硫酸酯酶的活性需要一个独立的翻译后调节,这个调节由硫酸酯酶的一种调控因子硫酸酯酶调控因子1(SUMF1)来完成。研究发现,硫酸酯酶具有另一种调控因子SUMF2。其中SUMF1既存在于原核生物中又存在于真核生物中,SUMF2只存在于脊椎动物体内,两者对硫酸酯酶的活性调节对生物体内硫酸酯类代谢有着深远的影响。该文对硫酸酯酶、SUMF1和SUMF2的结构、功能及它们之间的相互作用进行综述。
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关键词
硫酸酯酶
硫酸酯酶调控因子1
硫酸酯酶调控因子
2
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职称材料
pEGFP-C3/SUMF2重组真核表达载体的构建及在人支气管上皮细胞中的表达
被引量：
3
2
作者
杨春
张婉莹
+1 位作者
梁红艳
姜晓峰
《中华临床免疫和变态反应杂志》
2012年第3期168-172,共5页
目的构建与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合的人硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)真核表达载体。方法用RT-PCR技术从人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBEC)获得SUMF2的cDNA模板,PCR方法...
目的构建与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合的人硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)真核表达载体。方法用RT-PCR技术从人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBEC)获得SUMF2的cDNA模板,PCR方法扩增人SUMF2基因。用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切扩增人SUMF2基因及质粒pEGFP-C3;将2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10;挑取菌落培养,提取质粒,酶切鉴定,测序;将测序正确的重组载体用脂质体法转染HBEC,荧光倒置显微镜观察。提取转染细胞的总蛋白进行Western blot检测。结果扩增出1条约857bp的片段,与预期的SUMF2大小相符。酶切结果显示重组质粒pEGFP-C3/SUMF2被切成2条片段,其中1条为pEGFP-C3载体,另1条为目的片段。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_015411.2)中的序列高度同源。荧光倒置显微镜观察显示,人SUMF2基因主要在内质网表达。Western blot结果显示在相对分子质量为37×103处有一蛋白条带,与预期大小相符。结论成功构建重组表达载体pEGFP-C3/SUMF2,为进一步研究SUMF2对IL-13的作用奠定了实验基础。
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关键词
硫酸酯酶修饰因子
2
真核表达载体
人支气管上皮细胞
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职称材料
SUMF2基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定
3
作者
那春鑫
薛丽
+1 位作者
梁红艳
姜晓峰
《医学研究杂志》
2015年第11期43-46,共4页
目的构建硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)基因过表达慢病毒载体,以便进一步研究SUMF2功能。方法针对人SUMF2 DNA序列设计带酶切位点的引物,PCR法获得目的基因片段;用AgeⅠ和NheⅠ酶双酶切SUMF2基因片段及PLJM1-EGFP载体。用T4连接酶对两种酶...
目的构建硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)基因过表达慢病毒载体,以便进一步研究SUMF2功能。方法针对人SUMF2 DNA序列设计带酶切位点的引物,PCR法获得目的基因片段;用AgeⅠ和NheⅠ酶双酶切SUMF2基因片段及PLJM1-EGFP载体。用T4连接酶对两种酶切产物进行连接、PCR鉴定、测序。将阳性克隆质粒与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染293T细胞,并荧光显微镜观察EGFP的表达。结果 PCR和测序证实成功构建了SUMF2的慢病毒表达载体,病毒效价为1×108TU/ml。结论成功构建SUMF2-PLJM1-EGFP慢病毒载体,并在293T细胞中得到表达。
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关键词
硫酸酯酶修饰因子
2
慢病毒
过表达
载体构建
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职称材料
题名
SUMF1及SUMF2对硫酸酯酶功能的影响
被引量：
1
1
作者
刘蕾
梁红艳
姜晓峰
机构
哈尔滨医科大学附属第四医院检验科
出处
《医学综述》
2015年第14期2522-2524,共3页
基金
国家自然科学基金(81171657)
文摘
硫酸酯酶作为硫酸酯类分解代谢酶在人体内起着重要的作用,若其活性出现异常会导致多种疾病。硫酸酯酶的活性需要一个独立的翻译后调节,这个调节由硫酸酯酶的一种调控因子硫酸酯酶调控因子1(SUMF1)来完成。研究发现,硫酸酯酶具有另一种调控因子SUMF2。其中SUMF1既存在于原核生物中又存在于真核生物中,SUMF2只存在于脊椎动物体内,两者对硫酸酯酶的活性调节对生物体内硫酸酯类代谢有着深远的影响。该文对硫酸酯酶、SUMF1和SUMF2的结构、功能及它们之间的相互作用进行综述。
关键词
硫酸酯酶
硫酸酯酶调控因子1
硫酸酯酶调控因子
2
Keywords
sulfatase
sulfatase
modifying
factor
1
sulfatase
modifying
factor
2
分类号
R446 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
pEGFP-C3/SUMF2重组真核表达载体的构建及在人支气管上皮细胞中的表达
被引量：
3
2
作者
杨春
张婉莹
梁红艳
姜晓峰
机构
哈尔滨医科大学附属第四临床医院检验科
出处
《中华临床免疫和变态反应杂志》
2012年第3期168-172,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81171657)
文摘
目的构建与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合的人硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)真核表达载体。方法用RT-PCR技术从人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBEC)获得SUMF2的cDNA模板,PCR方法扩增人SUMF2基因。用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切扩增人SUMF2基因及质粒pEGFP-C3;将2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10;挑取菌落培养,提取质粒,酶切鉴定,测序;将测序正确的重组载体用脂质体法转染HBEC,荧光倒置显微镜观察。提取转染细胞的总蛋白进行Western blot检测。结果扩增出1条约857bp的片段,与预期的SUMF2大小相符。酶切结果显示重组质粒pEGFP-C3/SUMF2被切成2条片段,其中1条为pEGFP-C3载体,另1条为目的片段。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_015411.2)中的序列高度同源。荧光倒置显微镜观察显示,人SUMF2基因主要在内质网表达。Western blot结果显示在相对分子质量为37×103处有一蛋白条带,与预期大小相符。结论成功构建重组表达载体pEGFP-C3/SUMF2,为进一步研究SUMF2对IL-13的作用奠定了实验基础。
关键词
硫酸酯酶修饰因子
2
真核表达载体
人支气管上皮细胞
Keywords
sulfatase
modifying
factor
2
eukaryotic
expressing
vector
human
bronchial
epithelial
cells
分类号
R562.25 [医药卫生—呼吸系统]
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职称材料
题名
SUMF2基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定
3
作者
那春鑫
薛丽
梁红艳
姜晓峰
机构
哈尔滨医科大学附属第四临床医学院检验科
出处
《医学研究杂志》
2015年第11期43-46,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(81171657)
文摘
目的构建硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)基因过表达慢病毒载体,以便进一步研究SUMF2功能。方法针对人SUMF2 DNA序列设计带酶切位点的引物,PCR法获得目的基因片段;用AgeⅠ和NheⅠ酶双酶切SUMF2基因片段及PLJM1-EGFP载体。用T4连接酶对两种酶切产物进行连接、PCR鉴定、测序。将阳性克隆质粒与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染293T细胞,并荧光显微镜观察EGFP的表达。结果 PCR和测序证实成功构建了SUMF2的慢病毒表达载体,病毒效价为1×108TU/ml。结论成功构建SUMF2-PLJM1-EGFP慢病毒载体,并在293T细胞中得到表达。
关键词
硫酸酯酶修饰因子
2
慢病毒
过表达
载体构建
Keywords
sulfatase
-
modifying
factor
2
Lentiviral
vector
construction
分类号
R3 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SUMF1及SUMF2对硫酸酯酶功能的影响
刘蕾
梁红艳
姜晓峰
《医学综述》
2015
1
下载PDF
职称材料
2
pEGFP-C3/SUMF2重组真核表达载体的构建及在人支气管上皮细胞中的表达
杨春
张婉莹
梁红艳
姜晓峰
《中华临床免疫和变态反应杂志》
2012
3
下载PDF
职称材料
3
SUMF2基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定
那春鑫
薛丽
梁红艳
姜晓峰
《医学研究杂志》
2015
0
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职称材料
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