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利用PCR技术检测草莓镶脉病毒 被引量：25
1
作者 隋春 吴禄平 张志宏 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期82-84,共3页
采用特异引物的PCR扩增方法 ,对 30个草莓品种进行了草莓镶脉病毒的检测 ,同时用指示植物小叶嫁接法对被检植株进行了病毒检测 ,两种方法结果一致。回收、克隆PCR扩增出的特异DNA片段 ,获得了携有草莓镶脉病毒CP基因片段的载体。测序结... 采用特异引物的PCR扩增方法 ,对 30个草莓品种进行了草莓镶脉病毒的检测 ,同时用指示植物小叶嫁接法对被检植株进行了病毒检测 ,两种方法结果一致。回收、克隆PCR扩增出的特异DNA片段 ,获得了携有草莓镶脉病毒CP基因片段的载体。测序结果表明 ,得到的特异DNA片段同美国草莓镶脉病毒的株系ATCC 4 5 0 5 8CP基因片段相比 ,同源性为 90 .94 %。 展开更多
关键词 草莓 草莓镶脉病毒 检测 PCR技术 基因序列分析 同源性分析
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草莓镶脉病毒的PCR检测及特异片段的序列分析 被引量：16
2
作者 周厚成 李思源 +3 位作者 何水涛 郭蔼光 赵霞 郝淑红 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期286-288,共3页
用CTAB法从感病的草莓叶片中提取总DNA,以其为模板经PCR扩增获得与预期片段大小一致长约600bp的扩增产物,同时优化PCR反应程序,获得单一特异条带;通过总DNA浓度梯度稀释,进行PCR扩增,结果表明能检测到2.5μg叶组织中病毒的存在。回收PC... 用CTAB法从感病的草莓叶片中提取总DNA,以其为模板经PCR扩增获得与预期片段大小一致长约600bp的扩增产物,同时优化PCR反应程序,获得单一特异条带;通过总DNA浓度梯度稀释,进行PCR扩增,结果表明能检测到2.5μg叶组织中病毒的存在。回收PCR特异扩增产物,与pMD18-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定。扩增片段序列与已报道SVBVCP基因序列(序列号:Nc_001725)的核苷酸同源性为89.2%,氨基酸同源性为96.3%。该特异片段序列在GenBank中的登记号为AY862389。 展开更多
关键词 草莓镶脉病毒 检测 PCR 序列
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浙江省红颜草莓镶脉病毒(SVBV)的调查与茎尖脱毒技术研究 被引量：12
3
作者 杨肖芳 苗立祥 +2 位作者 张豫超 蒋桂华 胡美华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1694-1700,共7页
为了解浙江省草莓主要产区红颜草莓镶脉病毒的感染情况,建立适宜的草莓脱毒快繁技术体系,调查了浙江省主要草莓产区草莓镶脉病毒的分布情况。PCR检测结果表明,大部分红颜品种的植株感染了SVBV。序列分析表明,所感染的病毒与NCBI中报道... 为了解浙江省草莓主要产区红颜草莓镶脉病毒的感染情况,建立适宜的草莓脱毒快繁技术体系,调查了浙江省主要草莓产区草莓镶脉病毒的分布情况。PCR检测结果表明,大部分红颜品种的植株感染了SVBV。序列分析表明,所感染的病毒与NCBI中报道的病毒相似性达98%以上。以0.2 mm匍匐茎茎尖为外植体,用MS培养基+0.3 mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1GA+0.01 mg·L-1IBA+3%蔗糖(p H值5.8)进行脱毒培养。PCR检测结果显示,茎尖培养植株的脱毒率达到93%。采用以上方法可以培养根系发达、抗性强的植株。试验结果将为建立完善的草莓病毒脱毒技术体系提供一定的技术指导。 展开更多
关键词 草莓 茎尖 脱毒 草莓镶脉病毒(svbv)
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草莓镶脉病毒外壳蛋白的原核表达及多抗血清制备 被引量：3
4
作者 江彤 杨友志 +5 位作者 丁菲 蒋磊 李祥宇 邓竹根 谢朝阳 宋培培 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期30-34,共5页
PCR扩增得到了草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的外壳蛋白(coat protein,cp)基因,将SVBV cp基因克隆到原核表达载体pET-32a上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用终浓度为0.05 mmol·L-1的IPTG诱导表达。SDS-PAGE... PCR扩增得到了草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的外壳蛋白(coat protein,cp)基因,将SVBV cp基因克隆到原核表达载体pET-32a上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用终浓度为0.05 mmol·L-1的IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳及Western-blot分析表明,SVBV cp基因在大肠杆菌中得到了融合表达。利用Ni2+-NTA亲和树脂纯化重组融合蛋白,免疫家兔获得了重组蛋白的多抗血清。以此多抗血清建立了Dot-ELISA检测方法,结果表明,制备的特异性多抗血清可以快速检测出感病草莓样品中的SVBV。 展开更多
关键词 草莓镶脉病毒 外壳蛋白 原核表达 多抗血清
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