鼠骨髓间充质干细胞对缺氧/复氧心肌细胞的影响 被引量：5

1

作者 章培军 张丽红 郭敏芳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第1期27-29,共3页

目的:观察在体外培养条件下骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对缺氧/复氧新生大鼠心肌细胞的保护作用。方法:无菌条件下分离、培养、传代Wistar大鼠MSC,细胞融合达90%时更换培养基培养24h,收集细胞培养液作为MSC条件培养基... 目的:观察在体外培养条件下骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对缺氧/复氧新生大鼠心肌细胞的保护作用。方法:无菌条件下分离、培养、传代Wistar大鼠MSC,细胞融合达90%时更换培养基培养24h,收集细胞培养液作为MSC条件培养基;原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,先用5%CO2、10%H2、85%N2混合气造成细胞缺氧24h,再给予95%O2和5%CO2混合气复氧2h,建立缺氧/复氧模型。MSC处理组于复氧时加入MSC条件培养基,正常细胞作为对照组,分别于复氧后用MTT法、乳酸脱氢酶(lactated dehydrogenase)法测定各组心肌细胞活性的改变;RT-PCR观察细胞凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:与对照组比较,缺氧/复氧组细胞活力显著降低(P<0.01)。与缺氧/复氧组比较,MSC处理组细胞活力明显增加(P<0.01)。缺氧/复氧组抗凋亡基因Bcl-2的表达明显降低,促凋亡基因Bax的表达明显增加,而MSC条件培养基可以减少Bax基因的表达,提高Bcl-2/Bax值,与缺氧/复氧组比较差异具有显著性(P<0.01)。结论:MSC对体外缺氧-复氧诱导的心肌细胞的凋亡有保护作用。 展开更多

关键词 肌细胞 心脏 干细胞 细胞凋亡 缺氧

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转染转化生长因子-β3对前软骨干细胞增殖及向成软骨方向分化的影响 被引量：2

2

作者 刘铁 李锋 +1 位作者 游洪波 陈安民 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期356-360,共5页

目的探讨稳定表达重组转化生长因子-β3（hTGF-β3）对前软骨干细胞（precartilaginous stem cells，PSCs）增殖及向成软骨方向定向分化的诱导作用。方法免疫磁珠法分离纯化得到新生大鼠PSCs后，用线性化的聚乙烯亚胺转染pcDNA3．1（＋... 目的探讨稳定表达重组转化生长因子-β3（hTGF-β3）对前软骨干细胞（precartilaginous stem cells，PSCs）增殖及向成软骨方向定向分化的诱导作用。方法免疫磁珠法分离纯化得到新生大鼠PSCs后，用线性化的聚乙烯亚胺转染pcDNA3．1（＋）-hTGF-β3到体外单层培养的PSCs中，抗生素筛选使其稳定表达。采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）、流式细胞术（FCM）测定转染对PSCs增殖和DNA合成的影响，实时定量RT-PCR、免疫组化及Western blot方法比较转染后目的基因和软骨特异性标志物表达的情况。结果hTGF-β3在分离纯化的PSCs中稳定表达。与未转染组细胞相比，转染后细胞DNA合成增多，增殖速度加快。PCR和免疫组化学结果表明，转染后软骨标志物基因上调明显，分泌软骨多糖基质及Ⅱ型胶原蛋白也明显增加。结论通过hTGF-β3基因强化的PSCs可以稳定表达高效的hTGF-β3蛋白，从而促进PSCs的增殖并向成软骨方向分化，为软骨缺损的高效修复提供了新的思路。 展开更多

关键词 转化生长因子Β 干细胞 转染 细胞分化

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重组人白细胞介素-6对照射小鼠早期造血功能恢复的影响 被引量：5

3

作者 邱丽玲 柳晓兰 +4 位作者 赵振虎 谈震宇 张卿西 王嘉玺 凌世淦 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期225-228,共4页

作者报道了国内重组人白介素－６（ｒｈＩＬ－６）对６．５Ｇｙ照射Ｃｓ７ＢＬ／６Ｊ小鼠后１０天造血功能（主要是造血干细胞、粒系和红系祖细胞）恢复的影响．结果表明；ｒｈＩＬ－６对照后早期造血的影响与白细胞介素－６（ＩＬ－６... 作者报道了国内重组人白介素－６（ｒｈＩＬ－６）对６．５Ｇｙ照射Ｃｓ７ＢＬ／６Ｊ小鼠后１０天造血功能（主要是造血干细胞、粒系和红系祖细胞）恢复的影响．结果表明；ｒｈＩＬ－６对照后早期造血的影响与白细胞介素－６（ＩＬ－６）剂量有关，且作用是双向的．当ＩＬ－６剂量在２００～１０００μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１时，脾重和内源性肿结节（ＣＦＵ－Ｓ）数随ＩＬ－６剂量增大而逐渐增加，与对照组相比，ＣＦＵ－Ｓ数的增加统计学意义更明显．与此同时骨髓有核细胞数和ＣＦＵ－ＧＭ产率以及ＣＦＵ－ＧＭ／股骨也明显增加，但１０００μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１组的效果反而下降，因此，ｒｈＩＬ－６促进照后早期造血恢复的最佳剂量可能在５００μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１左右．当ＩＬ－６剂量为１０μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１时，对照射小鼠造血恢复起抑制作用。这些发现对ｒｈＩＬ－６的应用是很有实际意义的． 展开更多

关键词 白细胞介素6 RHIL-6 照射 早期

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一种大量快速分离脐带间充质干细胞的新方法 被引量：5

4

作者 祝加学 沈尊理 +4 位作者 秦金保 张涛 孙恒赟 金羽青 周广东 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第6期1164-1169,共6页

目的：探讨体外快速大量分离脐带间充质千细胞的新方法。方法：采用复合胶原NB4、dispasell、透明质酸酶三种酶消化3h，加入PBSA溶液稀释，离心获得脐带间充质干细胞，培养；用流式细胞仪对P3代细胞进行表面标记的鉴定，用化学诱导的方... 目的：探讨体外快速大量分离脐带间充质千细胞的新方法。方法：采用复合胶原NB4、dispasell、透明质酸酶三种酶消化3h，加入PBSA溶液稀释，离心获得脐带间充质干细胞，培养；用流式细胞仪对P3代细胞进行表面标记的鉴定，用化学诱导的方法使第3代细胞向脂肪、骨、软骨细胞分化，2～4周后，分别行oil red、Safranin’O和茜素红染色，倒置显微镜下观察诱导结果。结果：经3种酶消化和PBSA稀释，短时间内从脐带中获得了大量间充质干细胞；伴随着细胞的传代，形态逐渐均一，传至第3代，细胞的形态已基本相似；流式细胞仪鉴定，细胞强表达间充质细胞的特异性标记CD90，CD73，CD105，而不表达造血系或内皮系细胞的标记CD45、CD14、CD11、CD34、CD19，也不表达主要组织相容性抗原HLA—DR；向脂肪细胞诱导后第4周，oilred染色见细胞内大量红染的脂滴；向软骨细胞诱导后第4周，Safranin’O染色见多数切片呈阳性，细胞团块中存在大量软骨特异性的陷窝样结构；向骨细胞诱导后第4周，茜素红染色发现肉眼可见的广泛散在的红色阳性钙结节．结论：本研究所采用的3种酶消化结合PBSA稀释的方法可以快速获得脐带间充质干细胞： 展开更多

关键词 脐带间充质干细胞 三种酶消化法 多向分化

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Toll样受体4表达对创伤性颅脑损伤后小鼠海马区神经干细胞增殖的影响 被引量：4

5

作者 张欣 贺晓生 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2016年第11期1156-1161,共6页

目的探讨Toll样受体4表达变化对创伤性颅脑损伤后小鼠海马区髓样分化因子88（MYD88）的影响及其与神经干细胞的关系。方法采用随机数表法将C57BL／6小鼠分为3组，即为CLI-095组、溶剂组、假手术组，使用PCI-3000打击装置建立小鼠颅脑损... 目的探讨Toll样受体4表达变化对创伤性颅脑损伤后小鼠海马区髓样分化因子88（MYD88）的影响及其与神经干细胞的关系。方法采用随机数表法将C57BL／6小鼠分为3组，即为CLI-095组、溶剂组、假手术组，使用PCI-3000打击装置建立小鼠颅脑损伤模型，CLI-095组腹腔注射TLR4抑制剂CLI-095，溶剂组和假手术组腹腔注射溶剂，5-溴脱氧尿嘧啶核苷腹腔注射标记神经干细胞，采用免疫荧光染色、Western blot检测海马区MYD88表达变化情况以及神经干细胞变化的特征。结果Western Blotting检测及免疫荧光结果显示：假手术组MYD88表达未见明显变化，溶剂组MYD88表达升高（P〈0．05），CLI-095组MYD88蛋白水平较溶剂组下降（P〈0．05），但仍高于假手术组。免疫荧光结果显示：海马区CLI-095组5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性细胞表达数量较假手术组增多（P〈0．05），溶剂组5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性细胞表达数量相比CLI-095组减少，但仍高于假手术组（P〈0．05）。结论海马区MYD88的表达与神经干细胞变化相反，并证实抑制TLR4可能激活并引起神经干细胞的增殖，从而促进受损神经细胞的修复。 展开更多

关键词 颅脑损伤 TOLL样受体4 神经干细胞 小鼠

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骨髓间充质干细胞构建组织工程化小口径血管 被引量：3

6

作者 杜振宗 任华 +3 位作者 刘洪生 宋剑非 郑民 王玮 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2008年第3期166-170,共5页

目的采用在动物体外构建初级组织工程化血管、体内强化的方法，探讨构建小口径组织工程化血管的可能性。方法体外培养骨髓间充质干细胞（BMSC），用含全反式维甲酸（AT-RA）、双丁酰环磷酸腺苷（db-cAMP）的DMEM-LG培养液和含血管内皮... 目的采用在动物体外构建初级组织工程化血管、体内强化的方法，探讨构建小口径组织工程化血管的可能性。方法体外培养骨髓间充质干细胞（BMSC），用含全反式维甲酸（AT-RA）、双丁酰环磷酸腺苷（db-cAMP）的DMEM-LG培养液和含血管内皮细胞生长因子（VEGF）的培养液诱导BMSC分别向血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞分化。免疫荧光观察平滑肌样细胞B肌动蛋白的表达和内皮样细胞vWF的表达。电镜观察超微结构的改变。诱导的血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞，分层种植于胶原包埋聚乙醇酸（PGA）的复合支架表面，将细胞和支架复合体种植于动物皮下，于植入后第4、8周再次麻醉动物，取出植入皮下的组织工程化血管，行组织学检查、压力实验及免疫荧光检查。结果诱导14d后，BMSC能够分化为血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞：B肌动蛋白和vWF呈阳性表达，电镜证实细胞出现了相应的形态学改变。人工血管组织学观察见管壁结构清晰。单纯支架组可承受100～150mmHg（1mmHg=0．133kPa）的血管腔内压力，实验组则均可承受200mmHg的血管腔内压力不破裂。实验组皮下培养8周Brdu标记细胞的免疫荧光结果显示部分细胞核呈现明亮的黄绿色荧光。结论以动物皮下为生物反应器可构建出组织工程化血管，其大体结构和天然血管相似。 展开更多

关键词 骨髓 间质干细胞 生物反应器 组织工程 血管 种子细胞

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上皮间质转化参与CSC生成及其调控 被引量：3

7

作者 王思念 李峰生 +1 位作者 袁静 江其生 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第10期1600-1603,共4页

肿瘤组织中存在一小部分具有无限增殖、自我更新、分化潜能、放化疗耐受以及高致瘤能力等干细胞特性的肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC),它们是肿瘤无法治愈并不断进展的重要原因。许多与诱导肿瘤细胞上皮间质转化(epithelial-to-mese... 肿瘤组织中存在一小部分具有无限增殖、自我更新、分化潜能、放化疗耐受以及高致瘤能力等干细胞特性的肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC),它们是肿瘤无法治愈并不断进展的重要原因。许多与诱导肿瘤细胞上皮间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关的信号通路与CSC的生成及调控相关。本综述简要阐述了EMT与CSC生成及调控相关的研究进展。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 上皮间质转化 信号调控

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人细胞外基质支架联合脂肪干细胞构建脂肪组织 被引量：3

8

作者 察鹏飞 高建华 +1 位作者 陈阳 鲁峰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1085-1088,F0004,共5页

目的探讨人脂肪组织细胞外基质（ECM）支架联合人脂肪来源干细胞（ADSCs）构建工程化脂肪组织的可行性。方法以酶消化法从人抽脂术抽吸物脂质部分获取人ADSCs，体外进行多向分化诱导鉴定，并行DiI荧光标记。从抽脂术的脂质部分分离提取... 目的探讨人脂肪组织细胞外基质（ECM）支架联合人脂肪来源干细胞（ADSCs）构建工程化脂肪组织的可行性。方法以酶消化法从人抽脂术抽吸物脂质部分获取人ADSCs，体外进行多向分化诱导鉴定，并行DiI荧光标记。从抽脂术的脂质部分分离提取人脂肪组织细胞外基质，经过低温冻干、粉碎、灭菌等处理，制备成粉末状，电镜扫描观察表面特征并将其与ADSCs进行黏附实验，探讨其作为支架材料的可行性。收集人ADSCs，以2×10^9／L的细胞密度与提取的细胞外基质支架复合后移植于裸鼠背部皮下，同鼠对侧背部皮下移植ECM支架和细胞培养液作为对照，每侧移植0．5ml，共6只实验鼠。8周后取材，称量标本湿重。取出的标本行苏木素-伊红（HE）染色和油红O染色进行定性判断，分析人脂肪组织ECM支架联合人ADSCs构建工程化脂肪组织的能力。结果从脂肪组织中分离得到人ADSCs和ECM支架。ADSCs在相应的诱导环境下能够分化成为脂肪细胞、骨细胞和软骨细胞。ECM支架电镜扫描和大体观察具有疏松、多孔的结构特征，适合ADSCs的黏附生长。ADSCs与支架相容性良好，黏附率达（89．87±2．59）％，细胞在支架表面可充分伸展生长。体内移植8周后，实验组和对照组都能够形成新生物，湿重比较实验组较对照组重（P〈0．05）。经HE切片及油红O染色均证实实验组形成成熟的脂肪组织，对照组不能形成脂肪组织。结论人脂肪组织ECM支架联合人ADSCs在体内能够成功构建成熟的脂肪组织，8周后支架并无明显吸收。 展开更多

关键词 脂肪来源干细胞 细胞外基质 支架 组织工程

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脐带源间充质干细胞治疗脑出血后遗症的临床观察 被引量：3

9

作者 李志刚 毕薇薇 杨贤瑞 《中国现代医生》 2011年第4期97-98,共2页

目的观察脐带源间充质干细胞移植对脑出血后遗症的治疗效果。方法对脑出血患者在术中血肿腔内预留置硅胶导管,1个月后自此将干细胞移植到出血部位;对于丘脑出血破入脑室的患者则脑室直接穿刺的方法做干细胞脑室内移植。观察语言、肌力... 目的观察脐带源间充质干细胞移植对脑出血后遗症的治疗效果。方法对脑出血患者在术中血肿腔内预留置硅胶导管,1个月后自此将干细胞移植到出血部位;对于丘脑出血破入脑室的患者则脑室直接穿刺的方法做干细胞脑室内移植。观察语言、肌力、肌张力、意识的改善程度。结果经干细胞移植术后,患者肌张力均有所下降,肌力提高1～2级,语言功能有所改善。结论脐带源间充质干细胞移植对脑出血后遗症有治疗效果。 展开更多

关键词 脐带源间充质干细胞 脑出血后遗症 移植

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胚胎干细胞、成体干细胞向雄性生殖细胞分化的研究进展 被引量：1

10

作者 吴小英 马廉 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期628-630,共3页

胚胎干细胞是一种具有发育全能性的细胞系,理论上可分化成机体的各种组织细胞,包括生殖细胞。成体干细胞是一种多能干细胞,具有自我更新及多向分化潜能,甚至能打破胚层的界限,横向分化为其他胚层的特化组织细胞,理论上成体干细胞在一定... 胚胎干细胞是一种具有发育全能性的细胞系,理论上可分化成机体的各种组织细胞,包括生殖细胞。成体干细胞是一种多能干细胞,具有自我更新及多向分化潜能,甚至能打破胚层的界限,横向分化为其他胚层的特化组织细胞,理论上成体干细胞在一定条件下也可分化为生殖细胞。人类胚胎干细胞的研究虽然取得了突破性进展,由于诱导分化技术不成熟,存在免疫排斥、致瘤性和伦理问题等,近期难以用来治疗疾病。与胚胎干细胞相比,成体干细胞则可克服这些缺点,其应用前景日益被看好。由于生殖细胞是遗传物质的传递者,生殖细胞分化的研究具有深刻的科学意义。如果成体干细胞可向雄性生殖细胞分化,应用于临床,那将为治疗男性不育提供了一条新的治疗途径,潜能难以估量。现就胚胎干细胞及成体干细胞向雄性生殖细胞分化方面的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 成体干细胞 男性不育 生殖细胞

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小鼠骨髓间充质干细胞外泌体的分离与鉴定 被引量：2

11

作者 王如岭 卫小凤 +4 位作者 齐阔 王黎明 李莹 白仲添 严祥 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第5期649-653,共5页

目的探讨骨髓间充质干细胞的外泌体的分离与鉴定方法。方法通过全骨髓贴壁法培养间充质干细胞;用新兴试剂法收集外泌体,采用电镜、粒径检测、流式细胞仪和Western blot鉴定外泌体。结果第三代骨髓间充质干细胞表面CD45呈阴性表达,CD73和... 目的探讨骨髓间充质干细胞的外泌体的分离与鉴定方法。方法通过全骨髓贴壁法培养间充质干细胞;用新兴试剂法收集外泌体,采用电镜、粒径检测、流式细胞仪和Western blot鉴定外泌体。结果第三代骨髓间充质干细胞表面CD45呈阴性表达,CD73和CD105呈阳性表达;骨髓间充质干细胞外泌体呈圆形或椭圆形,大小不均匀,直径30~100 nm,有完整的膜结构;粒径检测显示颗粒直径主峰为61.25 nm,直径为20~200 nm的颗粒占72.4%;外泌体CD63和CD81呈阳性表达;细胞培养上清液中可检测到外泌体CD9和CD63的蛋白表达。结论在培养间充质干细胞的培养基中可以收集到外泌体,可以通过透射电镜、粒径检测、流式细胞仪和Western blot对骨髓间充质干细胞的外泌体进行鉴定。 展开更多

关键词 间充质干细胞 外泌体 细胞分离 鉴定

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人类间充质干细胞来源的外泌体对猪胰岛抗缺氧能力的影响 被引量：2

12

作者 聂唯 马小倩 +3 位作者 陈则夷 杨策军 容鹏飞 王维 《实用器官移植电子杂志》 2018年第5期368-374,共7页

目的探讨来自人类脐带源间充质干细胞条件培养基(human umbilical cord-derived MSCconditioned medium,Hu-MSC-CM)中的外泌体能否增加新生猪胰岛细胞(neonatal porcine islet cell clusters,NICCs)在缺氧环境下的生存和功能。方法 NICC... 目的探讨来自人类脐带源间充质干细胞条件培养基(human umbilical cord-derived MSCconditioned medium,Hu-MSC-CM)中的外泌体能否增加新生猪胰岛细胞(neonatal porcine islet cell clusters,NICCs)在缺氧环境下的生存和功能。方法 NICCs在低氧条件下(1%O_2)分别用含外泌体的条件培养基、去除外泌体的条件培养基和常规培养基进行培养。荧光激活细胞分选仪和细胞外通量测定法分别检测外泌体对细胞活性和功能的影响,实时定量PCR检测NICCs中缺氧耐受相关基因HIF-1α、PDH2及VEGF的表达。结果与常规培养基组和去除外泌体的条件培养基组相比,含外泌体的条件培养基组培养的NICCs其存活率、活性和功能均有所提高[IEQ:7 800±210比5 894±188、4 740±273,P <0.001;β细胞存活率(%):77.2±7.0比68.8±1.8、61.5±5.1,P <0.05]。含外泌体的条件培养基组孵育的NICCs细胞中HIF-1α、PDH2及VEGF基因表达均显著高于另外两组。结论人类脐带源MSC-条件培养基可以减轻NICCs在缺氧过程中导致的功能障碍,外泌体在诱导低氧抵抗方面发挥重要作用。 展开更多

关键词 间充质干细胞 新生猪胰岛细胞 低氧 功能 活性

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间充质干细胞对小鼠前列腺癌生长和血管生成促进作用的研究 被引量：1

13

作者 唐礼功 谢森 +2 位作者 潘铁军 李志雄 陈欢欢 《临床泌尿外科杂志》 2012年第9期703-706,共4页

目的:探讨间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)对RM-1小鼠前列腺癌细胞生长的影响及其可能机制。方法:从小鼠骨髓中无菌分离培养扩增MSCs。将MSCs与RM-1细胞混合后接种于Balb/c小鼠皮下,观察肿瘤生长情况;采用免疫组化法... 目的:探讨间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)对RM-1小鼠前列腺癌细胞生长的影响及其可能机制。方法:从小鼠骨髓中无菌分离培养扩增MSCs。将MSCs与RM-1细胞混合后接种于Balb/c小鼠皮下,观察肿瘤生长情况;采用免疫组化法检测肿瘤组织血管生成情况(CD34染色);采用RealtimePCR法和ELISA法检测MSCs促进血管生成相关分子的表达情况。结果:MSCs与RM-1小鼠前列腺癌细胞混合后接种于Balb/c小鼠皮下,与对照组相比,MSCs可明显促进肿瘤生长(P<0.05);前列腺癌组织中CD34免疫组化染色结果证实MSCs组较对照组微血管密度显著升高(P<0.05);Realtime PCR及ELISA结果显示MSCs条件培养上清中VEGF表达显著升高。结论:MSCs可能通过表达VEGF促进前列腺癌血管形成,从而达到促进肿瘤生长的目的。 展开更多

关键词 前列腺癌 间充质干细胞 血管生成 血管内皮生长因子

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恒河猴骨髓源性神经样细胞分化分子机制的基础研究

14

作者 宋革 张阳 +3 位作者 郑炜炜 江儒章 刘炳乾 孙雪融 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2011年第6期472-475,I0006,共5页

目的探讨神经发育音猬因子（SHH）诱导恒河猴骨髓间质细胞（BMSCs）向神经样细胞分化的丝裂原活化蛋白激酶信号分子变化。方法密度梯度离心法分离培养恒河猴骨髓干细胞，应用Western—blot方法检测SHH诱导细胞内信号蛋白变化，免疫组化... 目的探讨神经发育音猬因子（SHH）诱导恒河猴骨髓间质细胞（BMSCs）向神经样细胞分化的丝裂原活化蛋白激酶信号分子变化。方法密度梯度离心法分离培养恒河猴骨髓干细胞，应用Western—blot方法检测SHH诱导细胞内信号蛋白变化，免疫组化方法观察丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）特异性抑制剂对细胞诱导过程的影响。结果SHH诱导恒河猴BMSCs分化为神经样细胞分化过程，细胞内激酶p38在加入诱导液5min后即被激活，随着时间的延长持续升高，1h达到最高峰，诱导前、后p38的总量未见变化；而磷酸化的ERKI／2被抑制，5min时即开始减少，在2h内逐渐降低，诱导前、后ERKI／2的总量未见变化。结论MAPK激酶系统参与SHH诱导恒河猴MSCs分化为神经样细胞分化过程，p38被激活，而ERK被抑制。 展开更多

关键词 音猬因子 丝裂原活化蛋白激酶 恒河猴 骨髓间充质细胞 神经干细胞

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miRNA在间充质干细胞成骨分化过程中的作用

15

作者 陈军宝 肖苒 曹谊林 《组织工程与重建外科杂志》 2016年第6期375-377,共3页

间充质干细胞作为种子细胞在组织工程和再生医学领域有极大的应用前景,尤其是在骨组织工程中的应用受到了广泛关注。间充质干细胞的成骨分化机制复杂,受到多方面因素的影响,不同种类的mi RNA可分别参与抑制或促进间充质干细胞的成骨分化... 间充质干细胞作为种子细胞在组织工程和再生医学领域有极大的应用前景,尤其是在骨组织工程中的应用受到了广泛关注。间充质干细胞的成骨分化机制复杂,受到多方面因素的影响,不同种类的mi RNA可分别参与抑制或促进间充质干细胞的成骨分化,在其分化过程中具有核心作用。本文对不同作用的mi RNA进行归类和总结,期待为未来的研究提供思路。 展开更多

关键词 间充质干细胞 微小核糖核酸 成骨分化 信号通路

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体外诱导可分解草酸成人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的研究

16

作者 朱玮 袁坚 +2 位作者 雷鸣 李舒珏 刘向崇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1203-1206,共4页

目的体外培养并转染了产甲酸草酸杆菌（Ox-F）草酸分解基因h℃和oxe的成人骨髓间充质干细胞（hMSCs—fre—oxe），并诱导其向肝细胞分化。方法体外培养转染了草酸分解基因的P4代hMSCs，并通过含40μg/L肝细胞生长因子（HGF）＋10μg／L... 目的体外培养并转染了产甲酸草酸杆菌（Ox-F）草酸分解基因h℃和oxe的成人骨髓间充质干细胞（hMSCs—fre—oxe），并诱导其向肝细胞分化。方法体外培养转染了草酸分解基因的P4代hMSCs，并通过含40μg/L肝细胞生长因子（HGF）＋10μg／L胰岛素样生长因子（FGF）-4所组成的培养液诱导其向肝细胞分化。在分化过程中通过显微镜观察分化细胞形态变化。以实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）、Westernblot技术和免疫细胞化学技术检测细胞内肝细胞特异标志物甲胎蛋白（AFP）、白蛋白（ALB）、细胞角蛋白-18（CK-18）和目的基因frc、OXC及其产物融合蛋白mye—FCOAT、flag—OCOAD的表达。成熟肝细胞L-02和转染了空病毒载体的hMSCs（hMSCs．vector）分别作为阳性对照组和阴性对照组。结果可分解草酸的hMSCs—frc—OXC在体外可成功培养，细胞经上述培养液诱导后，细胞形态逐渐变短，变成多角形。Real—timePCR可检测在诱导组细胞中AFP、ALB、CK—18和草酸分解基因frc、OXe表达，而未经诱导细胞组AFP、ALB、CK-18则未表达，未转染目的基因的细胞组fre、oxe未见表达。免疫细胞化学检测诱导28d后细胞可表达ALB，未经诱导细胞组ALB表达呈阴性。Westernblot技术检测诱导第14、28天细胞中AFP、CK-18表达较未诱导组明显增加（P〈0．05），与成熟肝细胞相似，并表达myc-FCOAT、flag—OCOAD，而未转染目的基因细胞组表达呈阴性。结论含有草酸分解基因的hMSCs—frc—OXC体外通过一定条件诱导可以向肝细胞方向分化，经诱导分化后细胞仍可成功表达frc和oxe基因及其产物。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 细胞分化 肝细胞 frc基因 oxc基因

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NOD鼠来源诱导性多能干细胞系的建立及其鉴定

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作者 刘海明 张振 +10 位作者 杨力 杨锐 杨晓燕 陈客平 孙嘉 吴礼凤 吴焜 陈宏 黄震 蔡德鸿 张桦 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期472-474,共3页

利用逆转录病毒将Oct4、Sox2、Klf4三个干细胞基因导入NOD鼠尾成纤维细胞，将其诱导为多能干细胞．通过形态观察、干细胞标志检测及多能性分析等方面对其进行鉴定，结果表明该NOD鼠来源诱导性多能十细胞具有类似胚胎干细胞（embryonic s... 利用逆转录病毒将Oct4、Sox2、Klf4三个干细胞基因导入NOD鼠尾成纤维细胞，将其诱导为多能干细胞．通过形态观察、干细胞标志检测及多能性分析等方面对其进行鉴定，结果表明该NOD鼠来源诱导性多能十细胞具有类似胚胎干细胞（embryonic stein cells，ES）的特性，表达Es相关基因及蛋h，具有多向分化潜能。来源于NOD鼠体细胞的诱导性多能干细胞有助于构建研究1型糖尿病的体外疾病模型。 展开更多

关键词 诱导性多能干细胞 NOD小鼠 糖尿病 实验性 疾病模型

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二膦酸盐对糖皮质激素诱导的骨质疏松过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

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作者 秦玉幸 张晓 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期743-745,共3页

目的 探讨二膦酸盐对糖皮质激素诱导的骨质疏松过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达的影响.方法 ①22例系统性红斑狼疮（SLE）患者,治疗组9例（标准剂量激素＋阿仑膦酸钠）,对照组13例（标准剂量激素）,24周后行骨髓穿刺术,检... 目的 探讨二膦酸盐对糖皮质激素诱导的骨质疏松过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达的影响.方法 ①22例系统性红斑狼疮（SLE）患者,治疗组9例（标准剂量激素＋阿仑膦酸钠）,对照组13例（标准剂量激素）,24周后行骨髓穿刺术,检测免疫组织化学PPARγ平均积分吸光度.②采用原代人骨髓基质干细胞（hMSCs）培养,模拟髓内骨髓基质干细胞分化为脂肪细胞的过程,在相同条件下,分为成脂诱导组、成脂诱导＋10-5mol/L二膦酸盐组（高剂量组）、成脂诱导＋10-7mol/L二膦酸盐组（中剂量组）、成脂诱导＋10-9mol/L二膦酸盐组（低剂量组）干预诱导成脂过程,6～9 d后进行油红0染色、异丙醇萃取油红染料,515 nm测定各组吸光度（A）来反映成脂程度,定量聚合酶链反应（PCR）测定各组PPARγmRNA的表达水平.采用t检验和单因素方差分析法进行数据分析.结果 二膦酸盐治疗组免疫组织化学PPARγ平均积分吸光度较对照组减少（P＜0.05）;在诱导培养7 d后,成脂诱导组的A与低剂量组差异无统计学意义（P值0.167）,高剂量组、中剂量组A与成脂诱导组之间差异有统计学意义（P值分别为0、0.041）.定量PCR结果显示：高剂量组、中剂量组PPARγ mRNA的表达低于成脂诱导组（P值分别为0、0.01）,低剂量组与成脂诱导组之间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 有效浓度的二膦酸盐可以抑制PPARγ的表达,从而抑制hMSCs向脂肪细胞分化,抑制糖皮质激素诱导的骨质疏松症. 展开更多

关键词 免疫组织化学 人骨髓基质干细胞 二膦酸盐类 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ

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干细胞治疗影像监测方法的研究进展

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作者 伍军 安锐 《国际放射医学核医学杂志》 2006年第2期84-87,共4页

干细胞治疗在糖尿病、心血管病、恶性肿瘤、组织损伤等疾病中展现了潜在的应用价值。高效非创伤性监测干细胞移植方法将加速干细胞治疗技术的发展。概述了核磁共振成像和放射性核素显像监测干细胞治疗的研究进展。

关键词 干细胞 放射性核素显像 核磁共振成像

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不同疗程电针对X线照射小鼠行为学影响实验研究 被引量：10

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作者 武鑫 郑婉君 +1 位作者 李琳 高剑峰 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第6期634-638,共5页

目的 探讨不同疗程电针干预百会、风府和双侧肾俞穴位对X线照射模型小鼠行为学的影响。方法 将30日龄C57BL/6J小鼠随机分成对照组、X线照射模型组（8 Gy）（简称模型组）、电针1组（1周疗程）、电针2组（2周疗程）、电针3组（3周疗程）... 目的 探讨不同疗程电针干预百会、风府和双侧肾俞穴位对X线照射模型小鼠行为学的影响。方法 将30日龄C57BL/6J小鼠随机分成对照组、X线照射模型组（8 Gy）（简称模型组）、电针1组（1周疗程）、电针2组（2周疗程）、电针3组（3周疗程）,每组10只。采用8 GyX线照射小鼠构建放射性脑损伤模型并进行电针治疗。旷场实验和Morris水迷宫实验测试小鼠认知和空间学习记忆能力。成组t检验差异。结果 旷场实验模型组小鼠比对照组的垂直运动、水平运动次数和修饰次数显著减少（P=0.032、0.029、0.028）;电针2组和电针3组小鼠比模型组的垂直运动和水平运动次数显著增加（P=0.001、0.017、0.000）。Morris水迷宫实验模型组小鼠比对照组的空间学习记忆能力显著下降,表现为潜伏期显著延长（P=0.023）,穿越目的象限次数和停留时间显著减少（P=0.046、0.017）;电针2组和电针3组小鼠比模型组的潜伏期明显缩短（P=0.001、0.001）,穿越目的象限及停留时间显著增加（P=0.049、0.007、0.031、0.009）。结论 不同疗程电针干预（百会、风府和双侧肾俞）能显著改善X线照射模型小鼠的认知及空间学习记忆能力,其中电针干预2周及3周的效果最明显。 展开更多

关键词 X线照射 学习及记忆 电针 神经干细胞

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