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SpltNPVp49基因的克隆和序列分析 被引量：7
1
作者 李镇 龙綮新 +2 位作者 张余光 王章 庞义 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期73-76,共4页
根据新发现的杆状病毒凋亡抑制基因p4 9基因的序列设计了一对引物 ,以SpltNPV基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增获得了预期大小的约 1 3kb的DNA片段 ,将此片段克隆到pGEM T载体上并直接测序 .序列分析表明 ,该片段为SpltNPV完整的p4 9基因... 根据新发现的杆状病毒凋亡抑制基因p4 9基因的序列设计了一对引物 ,以SpltNPV基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增获得了预期大小的约 1 3kb的DNA片段 ,将此片段克隆到pGEM T载体上并直接测序 .序列分析表明 ,该片段为SpltNPV完整的p4 9基因开放读码框 .与已知的杆状病毒p4 9基因的序列同源性为 87% ,与之对应的氨基酸序列的同源性高达 93% .它是首次从SpltNPV中克隆到的抑制细胞凋亡的基因 . 展开更多
关键词 spltnpv p49基因 克隆 序列分析 凋亡抑制基因
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保幼激素类似物对斜纹夜蛾核多角体病毒增殖的影响 被引量：10
2
作者 刘永平 王方海 +2 位作者 苏志坚 李广宏 庞义 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期866-870,共5页
分别用5×106,1×107,5×107,1×108PIBs/mL4种浓度的斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)感染斜纹夜蛾末龄幼虫(第6龄),并于同龄期以10μg/头的保幼激素类似物(JHA)methoprene分别对各感染组进行点滴处理,以研究JHA对SpltNP... 分别用5×106,1×107,5×107,1×108PIBs/mL4种浓度的斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)感染斜纹夜蛾末龄幼虫(第6龄),并于同龄期以10μg/头的保幼激素类似物(JHA)methoprene分别对各感染组进行点滴处理,以研究JHA对SpltNPV增殖的影响。研究表明,与对照组相比各不同浓度处理组病毒总产量分别提高227.06%、128.71%、52.62%、33.15%,平均单头病毒含量分别提高49.15%、48.40%、36.40%和31.11%,病毒感染死亡率分别提高119.21%、52.72%、12.64%和1.12%。其中以1×107PIBs/mL感染再经JHA处理的病毒总产量和平均单头病毒含量最高,分别为1701.8×108PIBs和60.1×108PIBs。各处理组的病毒总产量和平均单头病毒含量均显著高于其对照组。在此基础上,进一步研究了JHA对染毒与未染毒宿主消化生理的影响。结果表明,JHA处理不仅延长了6龄幼虫的寿命,增加了其取食量,而且还显著提高了幼虫的食物转化率和病毒产量。 展开更多
关键词 斜纹夜蛾 保幼激素类似物 METHOPRENE 斜纹夜蛾核多角体病毒 增殖 消化生理
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斜纹夜蛾核型多角体病毒p^(74)基因的克隆和序列分析 被引量：3
3
作者 杨洁 龙綮新 +1 位作者 吴文言 王珣章 《中国病毒学》 CSCD 2000年第1期45-51,共7页
用AcNPV p74基因 3′端的 1.4kb片段 ,通过Southernblotting将SpltNPV的 p74基因定位于XhoI(4 .9kb)、EcoRI(4 .4kb)、BamHI(3.0kb)片段上。进一步用ExoⅢ和构建亚克隆测序法 ,对长 2 545bp的 p74基因进行了序列分析 ,其中 1974bp的编... 用AcNPV p74基因 3′端的 1.4kb片段 ,通过Southernblotting将SpltNPV的 p74基因定位于XhoI(4 .9kb)、EcoRI(4 .4kb)、BamHI(3.0kb)片段上。进一步用ExoⅢ和构建亚克隆测序法 ,对长 2 545bp的 p74基因进行了序列分析 ,其中 1974bp的编码区编码 6 58个氨基酸 ,蛋白分子量约 75.87kD ,其编码蛋白与AcMNPV和CfMNPV p74蛋白的氨基酸序列同源性分别为 6 4 %和6 3%。 展开更多
关键词 斜纹夜蛾 核型多角体病毒 p74基因 克隆
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斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA诱导同源昆虫细胞的凋亡 被引量：1
4
作者 杜昌升 彭建新 洪华珠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期592-596,共5页
发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒 (Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus ,SpltNPV)DNA转染SL 1细胞能诱导细胞凋亡 .SpltNPV DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL 1细胞 6h后 ,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡 ,细胞碎裂成... 发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒 (Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus ,SpltNPV)DNA转染SL 1细胞能诱导细胞凋亡 .SpltNPV DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL 1细胞 6h后 ,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡 ,细胞碎裂成凋亡小体 ,18h后 ,细胞 10 0 %碎裂成凋亡小体 .DAPI荧光染色显示感染细胞核渐呈半月形 ,直至碎裂被凋亡小体包裹 .被转染的SL 1细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型梯形谱带 .野生型SpltNPV病毒粒子感染的SL 1细胞既无多角体的出现 ,也无凋亡现象的发生 . 展开更多
关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 DNA 诱导 同源昆虫细胞 斜纹夜蛾细胞系 细胞凋亡
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OB增效剂对斜纹夜蛾核多角体病毒的增效作用 被引量：7
5
作者 梁卿 李辉 +4 位作者 徐树兰 程中山 汤历 何道航 陈其津 《环境昆虫学报》 CSCD 2008年第4期331-335,共5页
本文以OB作为斜纹夜蛾核多角体病毒（Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus，SpltNPV）的增效剂，对斜纹夜蛾Spodoptera litura幼虫进行生物测定，结果表明，在0．25％-1．00％的浓度范围内，随着OB增效剂浓度的提高，其对斜纹夜蛾... 本文以OB作为斜纹夜蛾核多角体病毒（Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus，SpltNPV）的增效剂，对斜纹夜蛾Spodoptera litura幼虫进行生物测定，结果表明，在0．25％-1．00％的浓度范围内，随着OB增效剂浓度的提高，其对斜纹夜蛾核多角体病毒的增效作用也随着提高，最高增效倍数达85．1倍；在2～4龄幼虫范围内，随着虫龄的增大，OB增效剂对斜纹夜蛾核多角体病毒的增效作用也增加；而随着温度的升高，增效剂的增效作用无显著提高。 展开更多
关键词 OB增效剂 斜纹夜蛾核多角体病毒 斜纹夜蛾 温度
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Methoprene对SpltNPV增殖及其LC_(50)的影响 被引量：1
6
作者 刘永平 李广宏 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期308-312,316,共6页
通过对斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)在其不同龄期宿主体内增殖情况的研究,探索保幼激素类似物(JHA)methoprene促进SpltNPV在其宿主体内增殖的途径,为今后广泛利用methoprene进行高效率、低成本增殖昆虫杆状病毒杀虫剂提供理论依据和方... 通过对斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)在其不同龄期宿主体内增殖情况的研究,探索保幼激素类似物(JHA)methoprene促进SpltNPV在其宿主体内增殖的途径,为今后广泛利用methoprene进行高效率、低成本增殖昆虫杆状病毒杀虫剂提供理论依据和方法.运用正交组合的方法筛选3种主要因子(病毒感染浓度、methoprene用量和methoprene施用时间)对提高病毒增殖产量进行最佳组合实验.实验确立了以1×107PIBs/mL感染6龄刚蜕皮的斜纹夜蛾幼虫,并于感染第1天滴加10μL methoprene的最佳组合方法,病毒总产量和平均病毒产量分别可达1 856.0×108PIBs和62.2×108PIBs.并测定了methoprene处理对SpltNPV病毒LC50的影响.经methoprene处理后,病毒的LC50由1.578×107PIBs/mL增加至9.151×107PIBs/mL. 展开更多
关键词 斜纹夜蛾 METHOPRENE 斜纹夜蛾核多角体病毒 增殖 LC50
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斜纹夜蛾核多角体病毒感染甜菜夜蛾细胞的研究
7
作者 余倩 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期85-89,共5页
研究发现斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)不能成功感染同属甜菜夜蛾(S.exigua,Se)昆虫,为深入研究SpltNPV在离体Se301细胞中的感染进程以及病毒感染失败的原因,对感染后Se301细胞进行DNA复制、... 研究发现斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)不能成功感染同属甜菜夜蛾(S.exigua,Se)昆虫,为深入研究SpltNPV在离体Se301细胞中的感染进程以及病毒感染失败的原因,对感染后Se301细胞进行DNA复制、病毒基因转录以及病毒蛋白表达等检测。结果显示被感染的Se301细胞中病毒完成了DNA的复制和病毒早、晚期基因转录,但检测不到极晚期基因多角体基因(polyhedrin)的表达,病毒的蛋白表达受阻从而影响了病毒完成复制周期。研究发现病毒蛋白表达受阻是SpltNPV在Se301细胞中无法形成子代病毒,完成整个病毒复制的主要原因,这为深入研究其感染失败机理奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 Se301细胞 蛋白表达
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斜纹夜蛾成虫带核型多角体病毒的巢式PCR检测 被引量：1
8
作者 蒲小明 邓海滨 +6 位作者 路征 张景欣 孙大元 沈会芳 刘平平 林壁润 杨祁云 《中国农学通报》 2023年第9期128-133,共6页
旨在建立一种快速、可靠的斜纹夜蛾成虫带核型多角体病毒(Spodoptera litura Nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)的分子检测方法,以克服目前常规PCR技术很难检测到斜纹夜蛾成虫带病毒的缺陷。以SpltNPV的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖转移酶(ecd... 旨在建立一种快速、可靠的斜纹夜蛾成虫带核型多角体病毒(Spodoptera litura Nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)的分子检测方法,以克服目前常规PCR技术很难检测到斜纹夜蛾成虫带病毒的缺陷。以SpltNPV的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖转移酶(ecdysteroid UDP-glucosyltransferase,egt)基因为检测对象,基于该基因序列设计了巢式PCR引物,其中一对外侧引物egt-F/R和一对内侧引物egt1-F/R,并研究斜纹夜蛾成虫带毒的巢式PCR检测可靠性。结果表明:基于egt基因的巢式PCR方法可以特异性扩增SpltNPV的DNA,引物egt-F/R的扩增检测最低限为10-7μg/μL;且基于引物egt-F/R的两轮普通PCR无法检测出成虫带毒,而采用巢式PCR方法可有效扩增出目的egt片段,巢式PCR检测方法的灵敏度比两轮普通PCR检测方法提高2个数量级。因此,本研究成功建立了基于SpltNPV的egt基因的巢式PCR检测技术,该方法为斜纹夜蛾成虫带毒、传毒等流行病学研究提供了可靠的技术支撑。 展开更多
关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 成虫 EGT 巢式PCR 检测
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斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)基因组EcoRI-G片段的序列分析
9
作者 李镇 龙綮新 +3 位作者 袁美妗 贺雄雷 庞义 王王旬章 《中国病毒学》 CSCD 2002年第2期119-124,共6页
斜纹夜蛾核多角体病毒 (SpltNPV)基因组EcoRI G片段全长 745 0bp ,包括 7个开放读码框 :vp39、lef 4、cg30、p91、vp33、tlp2 0、AcMNPVORF81同源基因和一个同源区 (hr)。基因组排列比较分析发现 ,这些基因在基因组中的排列 。
关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 基因组EcoRI-G片段 序列分析
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自然界斜纹夜蛾核型多角体病毒的基因型多态性(英文)
10
作者 刘艳荷 王利华 方继朝 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期372-378,共7页
【目的】从基因组序列角度进一步揭示自然界斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)的基因型多态性。【方法】病毒克隆A5,F1,X3和X15分别以活体克隆法分离自SpltNPV埃及株、日本福冈株和日本小笠原株... 【目的】从基因组序列角度进一步揭示自然界斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)的基因型多态性。【方法】病毒克隆A5,F1,X3和X15分别以活体克隆法分离自SpltNPV埃及株、日本福冈株和日本小笠原株。根据SpltNPV基因组全序列(GenBank登录号:AF325155)和海灰翅夜蛾核型多角体病毒(S.littoralis NPV,SpliNPV)部分基因序列(GenBank登录号:X99377,X99376和X98924)设计引物,PCR扩增获得A5,F1,X3和X15的多角体蛋白(polyhedrin,polh)基因和ORF18～ORF23序列。【结果】根据多角体蛋白基因序列,X3和X15属于SpltNPV型,而A5和F1属于SpliNPV型。将A5,F1,X3和X15的ORF18～ORF23与SpltNPV和SpliNPV相应的基因序列进行同源性比较。结果发现,F1与SpliNPV以及X3与SpltNPV的核苷酸序列相似性高,但X3的ORF20在172～558nt处缺失387bp。尽管依据多角体蛋白基因序列X15属于SpltNPV型,但对于ORF18～ORF23序列,X15与SpliNPV的相似性高于与SpltNPV的相似性。同样,A5属于SpliNPV型,ORF18～ORF20与SpliNPV相应的核苷酸序列相似性高,但ORF21与SpltNPV相应的核苷酸序列一致性为100%,特别是ORF22,SpltNPV的特有序列出现在A5的基因组中,而且与SpltNPV的ORF22一致性为100%;反过来,ORF23又与SpliNPV相应的核苷酸序列相似性高。【结论】所有这些都表明,SpltNPV在自然界不仅存在基因型多态性,而且即使属于同一基因型,它们的基因组序列也有显著差异。可利用SpltNPV在自然界的这种异质性筛选适宜防治斜纹夜蛾幼虫的株系。 展开更多
关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 病毒克隆 基因型 基因组 多态性
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