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大鼠神经干细胞生长及增殖规律的体外研究 被引量：4
1
作者 陈请国 付勇 +4 位作者 王显红 吴小慧 朱锐 李泽文 龚树生 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第16期747-750,共4页
目的：体外无血清条件下培养胚鼠神经干细胞，观察其生长及分化情况。方法：取孕16～18d SD系大鼠的胚胎海马组织，在含EGF、bFGF和B27的DMEM／F12培养基中培养，电子显微镜下观察其增殖分化过程，并通过免疫荧光方法鉴定分化后的细胞... 目的：体外无血清条件下培养胚鼠神经干细胞，观察其生长及分化情况。方法：取孕16～18d SD系大鼠的胚胎海马组织，在含EGF、bFGF和B27的DMEM／F12培养基中培养，电子显微镜下观察其增殖分化过程，并通过免疫荧光方法鉴定分化后的细胞类型。结果：神经干细胞在无血清培养基中生长旺盛，8d左右就可以形成胞体透亮、折光性好的干细胞球，分化后的细胞显示NSE、GFAP免疫阳性。结论：无血清培养条件下神经干细胞生长良好，而在含血清的培养基中可以分化为神经元和星形胶质细胞。 展开更多
关键词 胚鼠 无血清培养基 神经干细胞 分化
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骨髓内皮细胞无血清条件培养液对骨髓内皮细胞增殖的促进作用 被引量：3
2
作者 周小莹 王绮如 +2 位作者 黄艳红 程腊梅 谭孟群 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期199-204,共6页
本文通过制备小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液(serum-free murine bone marrow endothelial cell conditioned medium, mBMEC-CM),经超滤分为分子量>10 kDa组分和<10 kDa组分,分别观察mBMEC-CM原液及其组分以及外源性细胞因子... 本文通过制备小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液(serum-free murine bone marrow endothelial cell conditioned medium, mBMEC-CM),经超滤分为分子量>10 kDa组分和<10 kDa组分,分别观察mBMEC-CM原液及其组分以及外源性细胞因子对小鼠骨髓内皮细胞集落生成的影响。用Wright’S Giemsa染色计数内皮细胞集落及检测骨髓内皮细胞的vWF,通过[3H]- TdR掺入量,观察mBMEC-CM原液及其组分以及外源性细胞因子对小鼠骨髓内皮细胞增殖的影响,并用分子杂交方法检测内皮细胞表达的细胞因子,从几个方面来研究mBMEC-CM对骨髓内皮细胞增殖的作用。结果显示,骨髓内皮细胞vWF 检测阳性。mBMEC-CM原液及其分子量>10 kDa组分能刺激骨髓内皮细胞集落增殖,且能明显增加骨髓内皮细胞[3H]-TdR 掺入量;分子量<10 kDa组分对骨髓内皮细胞集落增殖无明显刺激作用,也不能增加骨髓内皮细胞[3H]-TdR掺入量。外源加入IL-6、IL-11、SCF、GM-CSF、VEGF、bFGF 6种细胞因子能明显刺激骨髓内皮细胞集落增殖,SCF、VEGF、bFGF能明显增加骨髓内皮细胞[3H]-TdR掺入量。Atlas array膜杂交实验显示骨髓内皮细胞内源性表达GM-CSF、SCF、MSP-1、endothelin-2、thymosin β10、connective tissue GF、PDGF-A chain、MIP-2α、PlGF、neutrophil activating protein ENA-78、INF-γ、IL-1、IL-6、IL-13、IL-11、inhibin-α等细胞因子的mRNA。上述结果提示,骨髓内皮细胞无血清条件培养液对骨髓内皮细胞增殖具有促进作用。 展开更多
关键词 骨髓内皮细胞 无血清条件培养液 增殖
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E-不同培养方法对胚胎干细胞生物学特性的影响
3
作者 宁芳 刘琪 《全科口腔医学电子杂志》 2019年第24期3-5,共3页
目的探讨胚胎干细胞经过拟胚体的形成与直接诱导分化是否影响胚胎干细胞的特性。方法观察不同培养方法经过相同的诱导条件后胚胎干细胞形态学的变化,进行基因表达及免疫表型的检测。结果从形态学来看,经过拟胚体的培养后诱导分化和直接... 目的探讨胚胎干细胞经过拟胚体的形成与直接诱导分化是否影响胚胎干细胞的特性。方法观察不同培养方法经过相同的诱导条件后胚胎干细胞形态学的变化,进行基因表达及免疫表型的检测。结果从形态学来看,经过拟胚体的培养后诱导分化和直接诱导分化后都有鹅卵石样的细胞生成,PCR结果显示:两组细胞在同一诱导条件下均能表达牙上皮相关基因,且经过拟胚体培养后的诱导组表达更强。细胞表型的变化与PCR结果相一致。结论经过拟胚体的培养方法诱导效率高于直接培养后的诱导分化。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 拟胚体 成釉细胞无血清条件培养液
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成釉细胞微环境对胚胎干细胞特性的影响
4
作者 宁芳 《口腔医学》 CAS 2020年第1期22-25,共4页
目的研究胚胎干细胞诱导后成牙分化的可行性。方法使用成釉细胞无血清条件培养液诱导胚胎干细胞分化,观察诱导后细胞形态学变化以及体外检测基因表达和免疫表型分析。结果成釉细胞无血清条件培养液诱导胚胎干细胞后,拟胚体的外周有鹅卵... 目的研究胚胎干细胞诱导后成牙分化的可行性。方法使用成釉细胞无血清条件培养液诱导胚胎干细胞分化,观察诱导后细胞形态学变化以及体外检测基因表达和免疫表型分析。结果成釉细胞无血清条件培养液诱导胚胎干细胞后,拟胚体的外周有鹅卵石样的细胞,类似于上皮样的细胞生成。同时,诱导组细胞中可检测CK14、AMBN及AMGN mRNA的表达,DMP1和DSPP表达阴性,进一步免疫表型分析显示,诱导组胚胎干细胞表达CK14、AMBN及AMGN阳性。结论利用成釉细胞无血清条件培养液分泌的信号分子在体外模拟上皮的微环境,使得胚胎干细胞实现了向牙源性上皮细胞方向的表型转化。 展开更多
关键词 成釉细胞无血清条件培养液(ASF-CM) 胚胎干细胞 牙源性上皮
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小鼠胎肝基质细胞高活性造血刺激因子的纯化及性能研究
5
作者 胡维明 陈家佩 +3 位作者 陈惠鹏 陶来宝 齐淑华 孙志贤 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第3期251-256,共6页
对我室克隆的小鼠胎肝基质细胞林(MFLSC株)的无血清培养上清中的造血活性物质进行了初步纯化。通过离子交换层析和凝胶过滤层析两步分离,从中得到一高活性的造血刺激因子,称为基质细胞造血刺激因子-1(SHF-1)。经凝胶过滤及电泳结果估测... 对我室克隆的小鼠胎肝基质细胞林(MFLSC株)的无血清培养上清中的造血活性物质进行了初步纯化。通过离子交换层析和凝胶过滤层析两步分离,从中得到一高活性的造血刺激因子,称为基质细胞造血刺激因子-1(SHF-1)。经凝胶过滤及电泳结果估测,此因子是分子量约为70kD的单体蛋白,耐碱,较耐热。在体外它对小鼠骨髓粒系、红系祖细胞、多向祖细胞及多能造血干细胞均有刺激作用。 展开更多
关键词 小鼠胎肝基质细胞株 无血清培养上清 造血刺激因子
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小鼠骨髓内皮细胞条件培养液复合FL及TPO对HPP-CFC及CFU-GM增殖的影响 被引量：5
6
作者 那晓东 王绮如 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期316-320,共5页
通过传代培养小鼠骨髓内皮细胞 ,收集无血清条件培养液 (ECM) ,并经超滤得到大于 10kD的浓缩液 ,分别观察ECM和大于 10kD的浓缩液复合flt3ligand (FL)及thrombopoietin (TPO)对体外培养HPP CFC、CFU GM的影响。结果表明 :ECM或大于 10k... 通过传代培养小鼠骨髓内皮细胞 ,收集无血清条件培养液 (ECM) ,并经超滤得到大于 10kD的浓缩液 ,分别观察ECM和大于 10kD的浓缩液复合flt3ligand (FL)及thrombopoietin (TPO)对体外培养HPP CFC、CFU GM的影响。结果表明 :ECM或大于 10kD的浓缩液对HPP CFC、CFU GM的生长均有支持作用 ;FL或 /和TPO与ECM或大于 10kD的浓缩液合用能加强对HPP CFC、CFU GM生长的刺激作用 ;FL加TPO与ECM或大于 10kD的浓缩液合用对HPP CFC、CFU GM生长的刺激作用更加明显 ;选择FL和TPO特异性的引物 ,用RT PCR技术未能检测到小鼠骨髓内皮细胞有FL和TPOmRNA的表达。 展开更多
关键词 骨髓内皮细胞 无血清条件培养液 造血调控 小鼠 祖细胞 CFU-GM
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小鼠骨髓内皮细胞分泌的细胞因子对造血干/祖细胞增殖的影响 被引量：3
7
作者 李卫民 黄艳红 +1 位作者 蒋德昭 王绮如 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期45-49,共5页
应用小鼠骨髓内皮细胞株细胞传代培养 ,收集无血清条件培养液 (mBMEC CM) ,经超滤分成大于 10kD和小于 10kD两组分 ,分别观察两组分的mBMEC CM对小鼠骨髓造血干 /祖细胞CFU GM ,HPP CFC ,CFU E ,BFU E和CFU Meg的影响。结果表明 :含分... 应用小鼠骨髓内皮细胞株细胞传代培养 ,收集无血清条件培养液 (mBMEC CM) ,经超滤分成大于 10kD和小于 10kD两组分 ,分别观察两组分的mBMEC CM对小鼠骨髓造血干 /祖细胞CFU GM ,HPP CFC ,CFU E ,BFU E和CFU Meg的影响。结果表明 :含分子量大于 10kD物质的mBMEC CM的保留液能明显刺激CFU GM ,HPP CFC ,CFU E ,BFU E和CFU Meg生长 ;含分子量小于 10kD物质的mBMEC CM的超滤液能明显抑制CFU GM ,HPP CFC ,CFU E ,BFU E和CFU Meg生长。分子杂交结果显示 ,小鼠骨髓内皮细胞有多种细胞因子mRNA表达 ,其中首次发现小鼠骨髓内皮细胞有thymosin β4 ,MIP 2α,IL 11,IL 13 ,IFN γ和MSP 1等细胞因子mRNA表达 。 展开更多
关键词 骨髓内皮细胞 细胞因子 细胞增殖 造血细胞
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