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日本血吸虫SjPP基因原核表达蛋白的酶活性
1
作者
姚利晓
王欣之
+2 位作者
傅志强
陶丽红
林矫矫
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期555-558,共4页
分别以磷酸苏氨酸多肽(K-R-pT-I—R—R)和4-硝基苯基磷基二钠盐(pNPP)为底物,研究原核表达的日本血吸虫丝/苏氨酸蛋白磷酸酶重组蛋白rSjPP的酶活性,检测二价金属阳离子(Mn^2+、Ni^2+、Mg^2+、Ca^2+)、温度、pH值对rSjPP酶...
分别以磷酸苏氨酸多肽(K-R-pT-I—R—R)和4-硝基苯基磷基二钠盐(pNPP)为底物,研究原核表达的日本血吸虫丝/苏氨酸蛋白磷酸酶重组蛋白rSjPP的酶活性,检测二价金属阳离子(Mn^2+、Ni^2+、Mg^2+、Ca^2+)、温度、pH值对rSjPP酶活性的影响。结果显示,rSjPP重组蛋白可以有效地水解磷酸苏氨酸多肽,具有丝/苏氨酸蛋白磷酸酶活性。rSjPP酶活性的最适温度为60℃,最适pH值为8.0。1~4mmol/L Ni^2+对rSjPP酶活力有促进作用,但Mn^2+、Mg^2+、Ca^2+等阳离子对rSjPP的酶活力影响不大。
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关键词
日本血吸虫
丝/苏氨酸蛋白磷酸酶
酶活性
影响因子
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职称材料
绿僵菌第五类Ser/Thr蛋白磷酸酶基因的克隆及表达特征分析
被引量:
1
2
作者
徐飞
彭国雄
夏玉先
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期360-367,共8页
【目的】克隆绿僵菌第五类Ser/Thr蛋白磷酸酶(PP5)基因,了解该基因及其编码产物的结构特征和两种产孢模式(微循环产孢和正常产孢)中的表达特征。【方法】通过绿僵菌中PP5基因EST序列与全基因组数据库比对,获得PP5基因DNA序列;通过同源...
【目的】克隆绿僵菌第五类Ser/Thr蛋白磷酸酶(PP5)基因,了解该基因及其编码产物的结构特征和两种产孢模式(微循环产孢和正常产孢)中的表达特征。【方法】通过绿僵菌中PP5基因EST序列与全基因组数据库比对,获得PP5基因DNA序列;通过同源蛋白比对预测PP5基因的DNA结构并设计引物,PCR扩增获取PP5全长cDNA序列;通过在线分析工具及生物软件进行蛋白结构分析。采用实时荧光定量PCR检测PP5基因在两种产孢模式中的表达特征。【结果】PP5基因长2100 bp,含7个外显子和6个内含子;cDNA开放阅读框长为1428 bp(GenBank登录号HQ317137),编码475个氨基酸;一级、二级及三级结构分析均显示较保守的蛋白磷酸酶结构特征。实时荧光定量PCR分析表明,PP5基因在绿僵菌微循环产孢的不同阶段表达水平具有显著性差异,特别是在孢子接种16、24、32 h高表达,而在正常产孢模式下表达量非常少。【结论】克隆了绿僵菌的PP5基因,详细了解了该基因及其编码产物的结构特征,发现了该基因在微循环产孢孢子形成后期高表达的重要特征,为进一步研究该基因在微循环产孢中的功能奠定了基础。
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关键词
绿僵菌
微循环产孢
ser
/
thr
蛋白磷酸酶
实时荧光定量PCR
原文传递
题名
日本血吸虫SjPP基因原核表达蛋白的酶活性
1
作者
姚利晓
王欣之
傅志强
陶丽红
林矫矫
机构
中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海动物生物技术研究中心
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期555-558,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863)项目(2006AA10A207)
国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD06A09)
文摘
分别以磷酸苏氨酸多肽(K-R-pT-I—R—R)和4-硝基苯基磷基二钠盐(pNPP)为底物,研究原核表达的日本血吸虫丝/苏氨酸蛋白磷酸酶重组蛋白rSjPP的酶活性,检测二价金属阳离子(Mn^2+、Ni^2+、Mg^2+、Ca^2+)、温度、pH值对rSjPP酶活性的影响。结果显示,rSjPP重组蛋白可以有效地水解磷酸苏氨酸多肽,具有丝/苏氨酸蛋白磷酸酶活性。rSjPP酶活性的最适温度为60℃,最适pH值为8.0。1~4mmol/L Ni^2+对rSjPP酶活力有促进作用,但Mn^2+、Mg^2+、Ca^2+等阳离子对rSjPP的酶活力影响不大。
关键词
日本血吸虫
丝/苏氨酸蛋白磷酸酶
酶活性
影响因子
Keywords
Schistosoma
japonicura
ser
/
thr
protein
phosphatase
enzymatic
activity
impact
factor
分类号
S852.35 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
绿僵菌第五类Ser/Thr蛋白磷酸酶基因的克隆及表达特征分析
被引量:
1
2
作者
徐飞
彭国雄
夏玉先
机构
重庆大学生物工程学院基因工程研究中心
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期360-367,共8页
基金
生物源农药创制与技术集成及产业化开发(200903052)
211工程(S-09104)~~
文摘
【目的】克隆绿僵菌第五类Ser/Thr蛋白磷酸酶(PP5)基因,了解该基因及其编码产物的结构特征和两种产孢模式(微循环产孢和正常产孢)中的表达特征。【方法】通过绿僵菌中PP5基因EST序列与全基因组数据库比对,获得PP5基因DNA序列;通过同源蛋白比对预测PP5基因的DNA结构并设计引物,PCR扩增获取PP5全长cDNA序列;通过在线分析工具及生物软件进行蛋白结构分析。采用实时荧光定量PCR检测PP5基因在两种产孢模式中的表达特征。【结果】PP5基因长2100 bp,含7个外显子和6个内含子;cDNA开放阅读框长为1428 bp(GenBank登录号HQ317137),编码475个氨基酸;一级、二级及三级结构分析均显示较保守的蛋白磷酸酶结构特征。实时荧光定量PCR分析表明,PP5基因在绿僵菌微循环产孢的不同阶段表达水平具有显著性差异,特别是在孢子接种16、24、32 h高表达,而在正常产孢模式下表达量非常少。【结论】克隆了绿僵菌的PP5基因,详细了解了该基因及其编码产物的结构特征,发现了该基因在微循环产孢孢子形成后期高表达的重要特征,为进一步研究该基因在微循环产孢中的功能奠定了基础。
关键词
绿僵菌
微循环产孢
ser
/
thr
蛋白磷酸酶
实时荧光定量PCR
Keywords
Metarhizium
anisopliae
microcycle
conidiation
ser
/
thr
protein
phosphatase
type
5
quantitative
real
time
PCR
分类号
S476.12 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
日本血吸虫SjPP基因原核表达蛋白的酶活性
姚利晓
王欣之
傅志强
陶丽红
林矫矫
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
下载PDF
职称材料
2
绿僵菌第五类Ser/Thr蛋白磷酸酶基因的克隆及表达特征分析
徐飞
彭国雄
夏玉先
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
原文传递
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
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