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多效生长因子通过JNK信号通路负调控Schlafen2基因表达 被引量：2
1
作者 方玲 胡迎春 +5 位作者 杨柳 刘梦伊 刘昕 潘兴斌 吴德昌 霍艳英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1135-1139,共5页
实验室前期研究发现,多效生长因子(pleiotrophin,PTN)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞中Schlafen2(Slfn2)基因高表达.为了探讨Ptn沉默诱导Slfn2基因表达可能涉及的信号通路,应用Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50ng/μl)对Ptn沉... 实验室前期研究发现,多效生长因子(pleiotrophin,PTN)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞中Schlafen2(Slfn2)基因高表达.为了探讨Ptn沉默诱导Slfn2基因表达可能涉及的信号通路,应用Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50ng/μl)对Ptn沉默细胞JNK磷酸化水平的影响;应用Northern印迹分别检测JNK和p38通路特异性抑制剂对Ptn沉默细胞Slfn2基因转录水平的影响.结果发现,Ptn沉默细胞内JNK磷酸化水平高于对照细胞,外源性PTN处理后沉默细胞内JNK磷酸化水平下调;阻断JNK通路呈时间依赖性抑制Ptn沉默细胞中Slfn2基因转录,阻断p38通路对Ptn沉默细胞中Slfn2转录水平没有明显影响.结果提示,Ptn可能通过抑制其下游JNK/MAPK通路来负调控Slfn2的表达. 展开更多
关键词 多效生长因子 基因沉默 c-jun氨基末端激酶(JNK信号通路) schlafen2
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Schlafen2基因在细胞中的表达及其生物学特性研究 被引量：2
2
作者 刘梦伊 周乔丹 +7 位作者 胡迎春 方玲 于雷 张煦 刘昕 潘兴斌 吴德昌 霍艳英 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2008年第3期228-231,共4页
目的:建立Schlafen2(Slfn2)基因稳定表达的细胞系以进一步研究其生物学功能。方法:构建pEGFP-Slfn2真核表达载体;瞬时转染pEGFP-Slfn2载体及其对照载体于NIH/3T3细胞,观察细胞中Slfn2基因的表达及分布;稳定转染pEGFP-Slfn2及其对照空载... 目的:建立Schlafen2(Slfn2)基因稳定表达的细胞系以进一步研究其生物学功能。方法:构建pEGFP-Slfn2真核表达载体;瞬时转染pEGFP-Slfn2载体及其对照载体于NIH/3T3细胞,观察细胞中Slfn2基因的表达及分布;稳定转染pEGFP-Slfn2及其对照空载体于NIH/3T3细胞,G418筛选获得抵制的细胞株,用Northern印迹进一步鉴定Slfn2在各细胞株中的表达情况;利用细胞生长曲线和Transwell细胞侵袭实验检测Slfn2对细胞增殖及迁移能力的影响。结果:本研究获得了稳定表达Slfn2的细胞株,该基因表达的蛋白在细胞核及细胞浆均有分布;稳定表达该基因的细胞株的增殖及迁移能力均显著降低。结论:Slfn2基因可能是一个潜在的肿瘤抑制基因。 展开更多
关键词 schlafen2 细胞增殖 迁移 转染 基因表达
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白细胞介素1在多效生长因子对Schlafen2基因负性调控中的作用 被引量：1
3
作者 方玲 胡迎春 +5 位作者 杨柳 刘梦伊 刘昕 潘兴斌 吴德昌 霍艳英 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2008年第1期23-26,共4页
目的:在多效生长因子(pleiotrophin,Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)在多效生长因子对Schlafen2(Slfn2)基因负性调控中发挥的作用。方法:本研究用Ptn-siRNA B/MEF241细... 目的:在多效生长因子(pleiotrophin,Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)在多效生长因子对Schlafen2(Slfn2)基因负性调控中发挥的作用。方法:本研究用Ptn-siRNA B/MEF241细胞的培养液培养对照NC细胞不同时间,通过Northern杂交检测NC细胞中Slfn2表达水平变化;应用RT-PCR和Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50 ng/μl)作用对Ptn沉默细胞内IL-1表达水平的影响;分别使用重组人白细胞介素1受体拮抗剂(rhIL-1ra)和IL-1α中和抗体阻断IL-1的作用通路,检测Ptn稳定沉默细胞中Slfn2基因表达变化。结果:Ptn沉默细胞培养液可以诱导对照细胞Slfn2表达;外源性PTN能抑制沉默细胞中IL-1α和IL-1f6的表达;IL-1受体拮抗剂(rhIL-1ra)和IL-1α中和抗体可抑制Ptn沉默细胞中Slfn2表达。结论:Ptn可能部分通过分泌性的细胞因子间接调控Slfn2基因表达,并且鉴定出在此调控过程中IL-1家族是其中一种非常重要的调控因子。 展开更多
关键词 多效生长因子 基因沉默 白细胞介素1 schlafen2 基因表达 生长物质
原文传递
白细胞介素-1通过JNK信号通路调控Schlafen2基因的表达 被引量：1
4
作者 胡迎春 方玲 +4 位作者 周乔丹 陈忠民 李刚 吴德昌 霍艳英 《生物技术通讯》 CAS 2008年第6期803-806,共4页
目的:在多效生长因子(Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素-1(IL-1)调控Schlafen2(Slfn2)基因表达的机制。方法:应用Northernblot检测Ptn沉默细胞Ptn-siRNAB/MEF241处于不同生长密度时Slfn2基因... 目的:在多效生长因子(Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素-1(IL-1)调控Schlafen2(Slfn2)基因表达的机制。方法:应用Northernblot检测Ptn沉默细胞Ptn-siRNAB/MEF241处于不同生长密度时Slfn2基因的表达变化,以确定Ptn沉默细胞中Slfn2基因的表达是否受到某种分泌性细胞因子的调控;用不同浓度的IL-1α中和抗体及IL-1受体拮抗剂处理Ptn沉默细胞,通过Northern blot检测细胞内Slfn2表达的抑制情况;用不同浓度的IL-1α中和抗体及IL-1受体拮抗剂处理Ptn沉默细胞不同时间,通过Western blot检测细胞中JNK磷酸化水平;Northern blot检测SP600125(JNK/MAPK通路抑制剂)对Ptn沉默细胞中Slfn2基因表达的影响。结果:Ptn沉默细胞中Slfn2基因的表达水平同细胞密度相关;用中和抗体和受体拮抗剂阻断IL-1通路,Slfn2表达受到显著抑制;IL-1受到抑制会影响JNK通路的活化;阻断JNK通路,Slfn2的表达受到显著抑制。结论:IL-1可以通过JNK通路诱导Slfn2的表达。 展开更多
关键词 多效生长因子 白细胞介素-1 JNK通路 schlafen2基因 基因表达
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