目的:建立血小板外膜蛋白复合物(outer membrane protein complex,OMPC)的攫取方法,为研制具有临床诊断价值的多克隆抗体提供依据。方法:分别以DTT裂解法、SDS破碎法、NP-40裂解法和TritonX-100裂解法提取血小板膜抗原,利用SDS-P...目的:建立血小板外膜蛋白复合物(outer membrane protein complex,OMPC)的攫取方法,为研制具有临床诊断价值的多克隆抗体提供依据。方法:分别以DTT裂解法、SDS破碎法、NP-40裂解法和TritonX-100裂解法提取血小板膜抗原,利用SDS-PAGE电泳、动物实验、蛋白免疫印迹分析和ELISA评价裂解效果和免疫原性。结果:在4种方法中,TritonX-100裂解法效果最好,其主要含有分子量从50.160kD的几乎所有血小板膜糖蛋白和少量小分子的蛋白。结论:TritonX-100裂解血小板获得的OMPC溶解性好、免疫原性强,具有广泛的抗原交叉反应性,以此作为动物免疫或作为偶联多糖抗原的载体具有很好的应用前景。展开更多
文摘目的:建立血小板外膜蛋白复合物(outer membrane protein complex,OMPC)的攫取方法,为研制具有临床诊断价值的多克隆抗体提供依据。方法:分别以DTT裂解法、SDS破碎法、NP-40裂解法和TritonX-100裂解法提取血小板膜抗原,利用SDS-PAGE电泳、动物实验、蛋白免疫印迹分析和ELISA评价裂解效果和免疫原性。结果:在4种方法中,TritonX-100裂解法效果最好,其主要含有分子量从50.160kD的几乎所有血小板膜糖蛋白和少量小分子的蛋白。结论:TritonX-100裂解血小板获得的OMPC溶解性好、免疫原性强,具有广泛的抗原交叉反应性,以此作为动物免疫或作为偶联多糖抗原的载体具有很好的应用前景。