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基于上转发光免疫层析技术的常见食源性致病菌快速检测方法研究与评价 被引量:16
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作者 李春凤 赵勇 +6 位作者 王晓英 张平平 刘晓 孙崇云 杨瑞馥 王成彬 周蕾 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期128-132,共5页
目的研制针对4种常见食源性致病菌:甲型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi A)、乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B)、大肠埃希菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的基于上... 目的研制针对4种常见食源性致病菌:甲型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi A)、乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B)、大肠埃希菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的基于上转发光免疫层析技术(UPT-LF)的快速定量检测试纸,并对其检测性能进行评价。方法以上转发光纳米颗粒(UCP-NPs)作为示踪物,基于双抗体夹心检测模型,研制针对上述4种靶标菌的UPT-LF试纸;以4种靶标菌的系列浓度标准菌悬液作为标准样品,评价试纸的敏感性、特异性、线性和精密性,并进行模拟染菌食品的检测,评价模拟样品阳性检出率。结果针对4种靶标菌的UPT-LF试纸均具有良好的线性,相关系数r为0.985-0.996;检测敏感性达10^5-10^6CFU/ml,与其他近缘菌株无交叉反应;对乳制品、饮料、小食品、水产、肉类等细菌污染的食品检出率较高。结论该研究建立的对4种常见食源性致病菌进行快速检测的UPT-LF,简便快速,具有良好的敏感性、特异性和线性定量能力,操作性能可满足食品安全检测的要求。 展开更多
关键词 上转发光纳米颗粒 侧流术 定量检测 食源性致病菌 甲型副伤寒沙门菌 乙型副伤寒沙门菌 大肠埃希菌O157∶H7 副溶血弧菌
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中国四省甲型副伤寒分离株脉冲场凝胶电泳分析及分型数据库建立 被引量:15
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作者 李伟 崔志刚 +6 位作者 张政 田克诚 钟豪杰 朱凤才 梁未丽 章丽娟 阚飙 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期871-874,共4页
目的对中国4个甲型副伤寒流行省份的分离株进行标准化脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型分析。方法对来自4个省的甲型副伤寒沙门菌利用XbaⅠ酶切染色体DNA进行PFGE分析,利用BioNumerics建立数据库和进行相似性聚类。结果分离自1998-2002年的89... 目的对中国4个甲型副伤寒流行省份的分离株进行标准化脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型分析。方法对来自4个省的甲型副伤寒沙门菌利用XbaⅠ酶切染色体DNA进行PFGE分析,利用BioNumerics建立数据库和进行相似性聚类。结果分离自1998-2002年的89株甲型副伤寒分离株共有11种PFGE带型,这些菌株中具有优势带型。有3种带型相似性在96.3%,这3种带型的菌株占到分析菌株的86.5%,并在不同省份和年度中出现。结论建立了中国甲型副伤寒沙门菌的用于网络监测分析的PFGE技术和数据库,近年中国部分省份的甲型副伤寒沙门菌分离株PFGE型别集中,存在同型菌株的广泛流行。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 脉冲场凝胶电泳 分子分型
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贵州省2000年甲型副伤寒沙门菌分离株16SrRNA基因型分析 被引量:11
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作者 田克诚 阚飙 +2 位作者 吕太富 游旅 张玉琼 《疾病监测》 CAS 2001年第12期445-447,共3页
近年来贵州省出现甲型副伤寒的流行。为探讨贵州省不同地区甲型副伤寒流行菌株的分子流行病学特征以及菌株间的相关关系 ,对贵州省 6个地 (市 ) 2 0 0 0年部分甲型副伤寒沙门菌分离株进行染色体DNA基因限制性酶切 16srRNA探针杂交图谱... 近年来贵州省出现甲型副伤寒的流行。为探讨贵州省不同地区甲型副伤寒流行菌株的分子流行病学特征以及菌株间的相关关系 ,对贵州省 6个地 (市 ) 2 0 0 0年部分甲型副伤寒沙门菌分离株进行染色体DNA基因限制性酶切 16srRNA探针杂交图谱分析。PstⅠ酶切后进行的杂交显示 6 4株均为一个基因型 ,然后进一步采用BglⅠ、SalⅠ两个内切酶对其中部分菌株进行酶切杂交分析 ,核糖体杂交谱上仍没有差异 。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 分子流行病学 核糖体基因分型 贵州
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基于TaqMan探针四重荧光PCR检测甲型、乙型、丙型副伤寒和伤寒沙门菌 被引量:11
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作者 许龙岩 袁慕云 +2 位作者 孙薇 柯碧霞 洪烨 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期298-302,共5页
目的建立基于Taq Man探针四重荧光PCR检测甲型、乙型、丙型副伤寒和伤寒沙门菌的方法。方法根据甲型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi A,SPA)、乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B,SPB)、丙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi... 目的建立基于Taq Man探针四重荧光PCR检测甲型、乙型、丙型副伤寒和伤寒沙门菌的方法。方法根据甲型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi A,SPA)、乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B,SPB)、丙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi C,SPC)和伤寒沙门菌(Salmonella typhi,ST)的特异序列分别设计引物SPAP、SPBP、SPCP和STP,在探针的5'端分别标记TET、ROX、FAM、HEX,建立基于Taq Man探针四重荧光PCR检测方法。结果 SPAP、SPBP、SPCP和STP分别扩增出5株SPA、4株SPB、7株SPC和11株ST,而其他血清型沙门菌和17株非沙门菌扩增结果阴性。SPAP、SPBP、SPCP和STP扩增效率分别为84.5%、101.8%、92.4%和90.9%,线性相关系数(R^2)分别为0.996、0.975、0.996和0.984。结论建立的方法特异性高、敏感性强,可用于SPA、SPB、SPC和ST的特异性检测。 展开更多
关键词 四重荧光PCR 甲型副伤寒沙门菌 乙型副伤寒沙门菌 丙型副伤寒沙门菌 伤寒沙门菌 食品检测
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江苏省三起甲型副伤寒爆发菌株与散发菌株的基因型及药物敏感性比较 被引量:11
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作者 高瞻 庄菱 +2 位作者 潘浩 汪华 俞晓进 《中华传染病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第3期159-162,共4页
目的 比较江苏省三地区连续发生的甲型副伤寒爆发与散发菌株在分子水平的联系 ,及其药物敏感性。方法 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)分析方法 ,对爆发及散发菌株进行基因分型 ,采用K B法对两类菌株进行药敏测定。结果  31株菌呈四个... 目的 比较江苏省三地区连续发生的甲型副伤寒爆发与散发菌株在分子水平的联系 ,及其药物敏感性。方法 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)分析方法 ,对爆发及散发菌株进行基因分型 ,采用K B法对两类菌株进行药敏测定。结果  31株菌呈四个基因型图谱 ,爆发与散发菌株中基因Ⅰ型皆占优势 ,爆发株对链霉素、氨苄西林、头孢拉啶的耐药率从 4.6 %~ 2 5 .9%。结论 RAPD方法能给予表型相同的甲型副伤寒菌株进行基因分型 ,基因Ⅰ型为江苏省甲型副伤寒的优势菌株。 展开更多
关键词 甲型副伤寒 分子流行病学 药敏试验 RAPD
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28 292份临床血液标本细菌培养结果 被引量:11
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作者 孔繁林 储从家 +2 位作者 管新龙 李杰芬 杨宇溪 《中国感染控制杂志》 CAS 2011年第3期209-213,共5页
目的调查某院临床送检血液标本中病原菌的分布特征。方法采用mimiⅥTAL全自动荧光血培养仪、Bact/ALERT 3D培养仪和ⅥTEK32自动细菌鉴定仪对该院1999-2008年临床送检的28 292人份55 606瓶血标本进行培养鉴定,对培养结果作统计分析。结果... 目的调查某院临床送检血液标本中病原菌的分布特征。方法采用mimiⅥTAL全自动荧光血培养仪、Bact/ALERT 3D培养仪和ⅥTEK32自动细菌鉴定仪对该院1999-2008年临床送检的28 292人份55 606瓶血标本进行培养鉴定,对培养结果作统计分析。结果 28 292份临床血液标本进行需氧和厌氧培养,其中5 837份细菌培养阳性,阳性率20.63%;需氧生长和厌氧生长分别占阳性培养的83.50%(4 874/5 837)和82.30%(4 804/5 837)。共检出各种临床细菌43属117种5 837株,其中甲型副伤寒沙门菌4 486株,占76.85%,2001年(1 263株)、2004年(740株)和2006年(713株)为检出高峰年份。除外传染病因子,菌群组成以革兰阳性球菌为主,革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌、真菌的比例为65.73:25.30:2.74。凝固酶阴性葡萄球菌占阳性检出菌(沙门菌属除外)的37.46%(493/1 316),居分离菌首位,并有逐年上升趋势(x^2=127.81,P<0.01)。近年真菌的分离率也在逐渐升高(x^2=29.77,P<0.01)。专性厌氧菌占全部分离菌的0.38%(22/5837),占除沙门菌属外的1.67%(22/1316)。结论同时做需氧和厌氧培养可以提高细菌培养的阳性检出率。甲型副伤寒沙门菌的持续检出和某些条件致病菌(凝固酶阴性葡萄球菌和真菌)的上升趋势应引起临床的高度关注。 展开更多
关键词 血培养 细菌培养 病原学 甲型副伤寒沙门菌 凝固酶阴性葡萄球菌 真菌
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杭州地区伤寒及甲型副伤寒沙门菌流行菌株分子特征的研究 被引量:10
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作者 汪皓秋 潘劲草 +5 位作者 葛玉梅 俞骅 郑伟 张蔚 孟冬梅 严杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期711-715,共5页
目的了解并确定2002-2008年杭州地区伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌优势菌株的分子特征。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点串联重复序列分析(MLVA)或多位点序列分型(MLST)对2002-2008年杭州地区分离的31株伤寒沙门菌、404株... 目的了解并确定2002-2008年杭州地区伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌优势菌株的分子特征。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点串联重复序列分析(MLVA)或多位点序列分型(MLST)对2002-2008年杭州地区分离的31株伤寒沙门菌、404株甲型副伤寒沙门菌进行分型并分析。结果404株甲型副伤寒沙门菌可分为6个PFGE型,P1型和P2型属于同一个克隆系,99.0%(400/404)菌株属于该克隆系,其中P1型菌株占该克隆系菌株的93.3%(373/400)。31株伤寒沙门菌株存在高度多样性,可分为14个PFGE型、28个MLVA型(分辨率90.3%)、3个MLST型。根据MLVA各型靶位点多态性差异,本地区流行的伤寒沙门菌株与东南亚地区菌株相近,但与欧洲菌株差距较大,呈高度多态性的可变串联重复序列(VNTR)位点TR1、TR2、Sal02可作为本地区伤寒沙门菌株的检测标志。伤寒沙门菌株MLST型别包括了目前国际上发现的所有3个型别,但以ST2型为主(23/31,74.2%)。结论近年杭州地区甲型副伤寒疫情由同一亚系菌株感染所致,但本地区流行的伤寒沙门菌株呈现高度多样性。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 脉冲场凝胶电泳 多位点串联重复序列分析 多位点序列分型
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2008年-2010年上海市部分伤寒副伤寒沙门菌耐药分析及分子分型 被引量:8
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作者 张雯霞 陈敏 +3 位作者 张曦 陈洪友 席曼芳 王刚毅 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第2期285-286,289,共3页
目的:了解上海市2008年-2010年伤寒、副伤寒沙门菌的耐药及分子分型特点,初步掌握伤寒、副伤寒沙门菌的分子流行特点,为今后的防制工作提供科学依据。方法:采用WHO推荐的改良K-B纸片法,对18株伤寒、副伤寒沙门菌进行13种抗生素敏感性试... 目的:了解上海市2008年-2010年伤寒、副伤寒沙门菌的耐药及分子分型特点,初步掌握伤寒、副伤寒沙门菌的分子流行特点,为今后的防制工作提供科学依据。方法:采用WHO推荐的改良K-B纸片法,对18株伤寒、副伤寒沙门菌进行13种抗生素敏感性试验;运用脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)方法对18株伤寒、副伤寒沙门菌进行分子分型及聚类分析。结果:18株伤寒副伤寒沙门菌对利福平100%耐药,对奈啶酸的耐药率为44.4%,其中伤寒沙门菌对奈啶酸的耐药率为37.5%,5株甲型副伤寒沙门菌对奈啶酸100%耐药,乙型副伤寒对奈啶酸无耐药株。所有菌株对其他11种抗生素均敏感;18株伤寒、副伤寒沙门菌共产生16种PGFE带型,有3株甲型副伤寒沙门菌表现为同一PFGE型别。结论:2008年-2010年伤寒、副伤寒沙门菌对抗生素的敏感性较高;甲型副伤寒沙门菌之间有较高的同源性,伤寒沙门菌的PFGE带型比较分散。 展开更多
关键词 伤寒、副伤寒沙门菌 药物敏感试验 脉冲场凝胶电泳 分子分型
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云南省元江县2010-2011年一起甲型副伤寒暴发调查与处置 被引量:9
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作者 王树坤 王志刚 +6 位作者 张晓和 阳波 吴强 阚飙 周燕华 杨汝松 闫梅英 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期200-204,共5页
目的 现场调查一起甲型副伤寒暴发疫情的原因并进行处置。方法 对2010-2011年发生在云南省元江县的一起甲型副伤寒暴发进行流行病学特征描述,采用病例对照研究、环境卫生学检测调查引起暴发的危险因素及污染源,对病例标本进行病原分... 目的 现场调查一起甲型副伤寒暴发疫情的原因并进行处置。方法 对2010-2011年发生在云南省元江县的一起甲型副伤寒暴发进行流行病学特征描述,采用病例对照研究、环境卫生学检测调查引起暴发的危险因素及污染源,对病例标本进行病原分离及耐药检测,针对流行病学及实验室检测结果采取控制措施。结果 全县10个乡镇均有甲型副伤寒病例发生,2010年4月至2011年8月期间共报告病例600例,各乡镇发病率不同且发病水平随着与城区受污染蔬菜地距离增加呈减弱趋势。病例对照研究结果发现,吃生蔬菜是甲型副伤寒暴发的主要危险因素(OR=65.3,P〈0.001)。调查发现病例管理不规范,病例排泄物进入城区污水沟。医院和城区污水中分离到甲型副伤寒沙门菌。采取政府主导的禁售及禁种污染田蔬菜并加强医院污水消毒等措施后,暴发得到有效控制。结论 城区、医院污水用于蔬菜田灌溉和生吃蔬菜区域性习惯共同作用促成污水-蔬菜-人群的传播循环,导致该起大型暴发流行。以政府为主导的干预措施对控制暴发起到了关键作用。 展开更多
关键词 甲型副伤寒 甲型副伤寒沙门菌 暴发 流行病学调查
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不同介质中甲型副伤寒沙门氏菌的热失活特性 被引量:8
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作者 张佩佩 牛会敏 +3 位作者 李苗云 赵改名 崔文明 孙灵霞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第14期58-63,共6页
研究甲型副伤寒沙门氏菌在不同介质中热失活规律,对接种10~8 CFU/g甲型副伤寒沙门氏菌的不同介质进行55、63、72℃热处理,测定处理后样品中甲型副伤寒沙门氏菌的菌体浓度。应用Dose Resp模型拟合在3种温度下志贺氏菌的动力学模型,用D值(... 研究甲型副伤寒沙门氏菌在不同介质中热失活规律,对接种10~8 CFU/g甲型副伤寒沙门氏菌的不同介质进行55、63、72℃热处理,测定处理后样品中甲型副伤寒沙门氏菌的菌体浓度。应用Dose Resp模型拟合在3种温度下志贺氏菌的动力学模型,用D值(decimal reduction time)表示甲型副伤寒沙门氏菌在不同介质中的耐热情况。结果表明:甲型副伤寒沙门氏菌的热失活曲线运用Dose Resp模型拟合较好,相关系数均在0.97以上。甲型副伤寒沙门氏菌在不同介质中的D值不同,在蛋白质和脂肪含量较高的灌肠肥瘦肉1∶1(m/m)中D值较大,相对耐热。55℃条件下热处理25.0 min,63℃热处理2.03 min,72℃热处理0.31 min后,一般肉制品中甲型副伤寒沙门氏菌均能被杀死。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门氏菌 热失活 动力学模型 D值
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甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白的分离、纯化和鉴定 被引量:6
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作者 胡明冬 徐剑铖 +3 位作者 周长喜 冯英凯 龚传明 毛宝龄 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期599-603,共5页
目的提纯甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白并鉴定。方法选用甲型副伤寒沙门菌,经自制的液体培养基扩大培养后,酸裂解法初步分离出鞭毛蛋白,用AKTAExplorer蛋白纯化系统除盐,弱阴离子交换层析纯化。纯化的蛋白用SDS-PAGE、Westernblot和磷钨酸... 目的提纯甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白并鉴定。方法选用甲型副伤寒沙门菌,经自制的液体培养基扩大培养后,酸裂解法初步分离出鞭毛蛋白,用AKTAExplorer蛋白纯化系统除盐,弱阴离子交换层析纯化。纯化的蛋白用SDS-PAGE、Westernblot和磷钨酸负染扫描电子显微镜(scanningelectronmicrocopy,SEM)观察并摄片鉴定。考马斯亮蓝法测定所获得鞭毛蛋白的产量。结果SDS-PAGE提示纯化的鞭毛蛋白为一条相对分子质量(Mr)为52×103蛋白带;免疫印迹试验亦提示条带在Mr52×103处;SEM观察发现该鞭毛蛋白呈丝状;三者均证实该蛋白为同一均质蛋白。蛋白定量测得每克湿重的细菌可提取(4.8±0.5)mg鞭毛蛋白。结论经酸裂解法可获得高产量的鞭毛蛋白,且易于纯化和鉴定。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 鞭毛蛋白 鉴定 AKTA Explorer蛋白纯化系统 沙门菌鞭毛蛋白 蛋白纯化 SDS-PAGE Western 扫描电子显微镜
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2013-2015年郑州67株甲型副伤寒沙门菌分子分型与耐药研究 被引量:7
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作者 赵嘉咏 张胜勇 +4 位作者 张白帆 穆玉姣 苏佳 黄学勇 许汴利 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期881-885,共5页
目的 分析2013—2015年郑州甲型副伤寒沙门菌临床分离株的耐药状况与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子型别特征。方法 于2013—2015年,从郑州发热伴出疹症候群监测系统2个哨点医院内,分离经病例血培养和粪便培养的67株甲型副伤寒沙门菌... 目的 分析2013—2015年郑州甲型副伤寒沙门菌临床分离株的耐药状况与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子型别特征。方法 于2013—2015年,从郑州发热伴出疹症候群监测系统2个哨点医院内,分离经病例血培养和粪便培养的67株甲型副伤寒沙门菌,其中2013年11株,2014年7株,2015年49株。根据国际PulseNet网络实验室公布的沙门菌PFGE分型操作规程与美国临床实验室标准化协会沙门菌K-B法药敏试验方案,对67株甲型副伤寒沙门菌进行药敏试验与PFGE脉冲场凝胶电泳分子分型分析。结果 67株甲型副伤寒沙门菌对13种抗生素均有不同程度的耐药,有65株为多重耐药株(97.0%),其中耐2~3种的为5株(7.5%),耐5~8种的为41株(61.2%),耐9~10种的为11株(16.4%),耐11~12种的为8株(11.9%)。经XbaⅠ酶切与脉冲场凝胶电泳后,67株甲型副伤寒沙门菌共获得10种带型(PTYA1~10),每种带型包含1~48株菌株,相似度为94.31%~100%。其中PTYA3包含48株菌,为其优势带型;PTYA1、9包含6株菌;PTYA2、4、5、6、7、8、10各包含1株菌。结论 郑州市临床分离的甲型副伤寒沙门菌耐药状况普遍比较严重,PFGE带型呈现多样性的同时又具有较显著的优势带型特点,部分带型与其对应的耐药谱具有一定的关联性与聚集性。 展开更多
关键词 沙门菌 甲型副伤寒 电泳 凝胶 脉冲场 抗药性
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甲型副伤寒沙门菌株的脉冲电场凝胶电泳分型研究 被引量:7
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作者 陈忠妙 徐景野 +9 位作者 郑官增 江夏明 金春光 王琳娜 何宏明 刘令初 裘丹红 郑伟 王满琴 何浙生 《国外医学(流行病学.传染病学分册)》 2005年第3期140-142,共3页
目的探讨台州地区甲型副伤寒沙门菌株的流行病学特征及分型情况。方法用脉冲电场凝胶电泳(PFGE)方法进行分型。结果根据细菌染色体DNA的XbaⅠ酶切图谱,可将台州地区患者中分离的65株甲型副伤寒沙门菌分成9个PFGE型别(X1~X9)。来自温岭... 目的探讨台州地区甲型副伤寒沙门菌株的流行病学特征及分型情况。方法用脉冲电场凝胶电泳(PFGE)方法进行分型。结果根据细菌染色体DNA的XbaⅠ酶切图谱,可将台州地区患者中分离的65株甲型副伤寒沙门菌分成9个PFGE型别(X1~X9)。来自温岭菌株有6个PFGE型,三门菌株有4个PFGE型,玉环菌株仅有2个PFGE型,其中X2为优势菌型。结论分型研究表明,甲型副伤寒沙门菌核型上虽在台州地区存在着县区性差异,但均以X2为主要流行菌型,从而提示了同一个克隆群内的菌株广泛传播可能是造成台州地区甲型副伤寒流行的主要原因。 展开更多
关键词 脉冲电场凝胶电泳 分型研究 沙门菌株 甲型副伤寒沙门菌 台州地区 流行病学特征 染色体DNA 酶切图谱 XbaⅠ PFGE 流行菌型 E型 性差异
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甲型副伤寒沙门氏菌噬菌体PSPA1感染宿主相关基因分析 被引量:6
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作者 毛普加 洪愉 +5 位作者 冯金 冯梦蝶 许泽仰 黄芬 井申荣 曾韦锟 《医学分子生物学杂志》 CAS 2014年第2期85-89,共5页
目的分析影响甲型副伤寒沙门氏菌(副甲)噬菌体(PSPA1)感染宿主相关基因。方法诱导副甲利福平抗性株(副甲Rif^+);将副甲Rif^+与SM10λpir/pSC189接合转座,噬菌体PSPA1处理转座菌液后,涂布卡那霉素、利福平双抗平板筛选转座... 目的分析影响甲型副伤寒沙门氏菌(副甲)噬菌体(PSPA1)感染宿主相关基因。方法诱导副甲利福平抗性株(副甲Rif^+);将副甲Rif^+与SM10λpir/pSC189接合转座,噬菌体PSPA1处理转座菌液后,涂布卡那霉素、利福平双抗平板筛选转座突变菌;提取抗噬菌体突变菌基因组,热不对称PCR、回收片段并测序;测序结果提交NCBI进行序列比对,确定转座质粒插入副甲基因组的位点。结果成功诱导出副甲Rif^+;筛选到6株抗噬菌体的突变菌;测序、NCBI比对发现6个不同的插入基因。结论利用转座子插入获得抗噬菌体感染甲型副伤寒沙门氏菌突变体,对这些突变体进行PCR、测序分析,说明可能有6个基因及相应的酶或蛋白与抗噬菌体相关,为进一步分析噬菌体与寄主菌相互作用关系提供基础。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 接合转移转座 突变菌 噬菌体
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伤寒和甲型副伤寒沙门菌复合PCR检测 被引量:4
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作者 赵志晶 王斌 +3 位作者 梁昊宇 计国欣 曾明 辜清吾 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期238-239,共2页
目的建立用于快速和特异检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的复合PCR方法。方法根据rfbS、rfbEf、liC和vi基因序列设计4对PCR引物,对54株沙门菌和其他菌属的菌株进行复合PCR检测。结果采用所建立的复合PCR方法可分别检测到伤寒和甲型副... 目的建立用于快速和特异检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的复合PCR方法。方法根据rfbS、rfbEf、liC和vi基因序列设计4对PCR引物,对54株沙门菌和其他菌属的菌株进行复合PCR检测。结果采用所建立的复合PCR方法可分别检测到伤寒和甲型副伤寒沙门菌的3条和2条特异性条带带型,可与其他菌株带型准确分开。结论本研究建立的复合PCR方法可用于检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 复合PCR
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云南玉溪地区甲型副伤寒沙门菌的耐药性变迁 被引量:6
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作者 孔繁林 储从家 +1 位作者 管新龙 罗次节 《中国临床药学杂志》 CAS 2005年第3期182-184,共3页
目的了解本地区甲型副伤寒沙门菌对几种临床常用药物的耐药现状,重点讨论培氟沙星的耐药性变迁。方法就本院1999年1月至2004年8月从患者临床标本中分离的2335株甲型副伤寒沙门菌,对几种临床常用抗菌药物的药敏试验结果作动态分析。结果... 目的了解本地区甲型副伤寒沙门菌对几种临床常用药物的耐药现状,重点讨论培氟沙星的耐药性变迁。方法就本院1999年1月至2004年8月从患者临床标本中分离的2335株甲型副伤寒沙门菌,对几种临床常用抗菌药物的药敏试验结果作动态分析。结果甲型副伤寒沙门菌对培氟沙星的耐药率已由1999年的0上升到2004年的98.1%(P<0.01),MIC90≥4mg·L-1;头孢噻肟、头孢他啶、头孢西丁、亚胺培南、呋喃妥因以及复方磺胺甲口恶唑的耐药率均相对较低,MIC90分别为≤4、8、4、4、32和10mg·L-1。结论甲型副伤寒沙门菌对培氟沙星的耐药率上升迅速;临床需加强对氟喹诺酮类药物的合理使用。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 培氟沙星 耐药率
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杨梅果实提取物抗小鼠腹泻作用的研究 被引量:6
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作者 周洁 汪仕韬 +2 位作者 孙石磊 汪何雅 姚卫蓉 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期323-326,共4页
目的研究杨梅果实提取物的抗小鼠腹泻作用,包括预防和治疗作用。方法给小鼠腹腔注射甲型副伤寒沙门菌造成急性腹泻模型,经口灌胃杨梅果实提取物溶液,通过腹泻次数研究提取物对小鼠腹泻的预防作用;先灌胃杨梅果实提取物溶液再给小鼠注射... 目的研究杨梅果实提取物的抗小鼠腹泻作用,包括预防和治疗作用。方法给小鼠腹腔注射甲型副伤寒沙门菌造成急性腹泻模型,经口灌胃杨梅果实提取物溶液,通过腹泻次数研究提取物对小鼠腹泻的预防作用;先灌胃杨梅果实提取物溶液再给小鼠注射菌液致泻,记录腹泻次数以研究提取物对小鼠腹泻的治疗作用。结果灌胃杨梅果实提取物的小鼠的腹泻次数均有明显的下降,且醇提物的作用效果要好于水提物。结论杨梅果实提取物对甲型副伤寒沙门菌引起的小鼠腹泻具有一定的预防和治疗作用。 展开更多
关键词 杨梅 提取物 甲型副伤寒沙门菌 预防 止泻
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2005-2009年贵州省伤寒和副伤寒沙门菌耐药性分析 被引量:5
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作者 游旅 韦小瑜 +2 位作者 马青 刘英 田克诚 《医学动物防制》 2011年第8期687-690,共4页
目的分析贵州省伤寒和甲型副伤寒沙门菌的耐药状况,为临床用药及防控提供依据。方法采用改良K-B法对伤寒、甲型副伤寒沙门菌株进行药物敏感试验。结果贵州省9个市(州、地)26个县(区)的113株伤寒沙门菌和518株甲型副伤寒沙门菌对10... 目的分析贵州省伤寒和甲型副伤寒沙门菌的耐药状况,为临床用药及防控提供依据。方法采用改良K-B法对伤寒、甲型副伤寒沙门菌株进行药物敏感试验。结果贵州省9个市(州、地)26个县(区)的113株伤寒沙门菌和518株甲型副伤寒沙门菌对10种抗生素进行药物敏感性测定。其中伤寒沙门菌除对C IP不耐药,对其余9种抗生素均有不同程度的耐药,甲副沙门菌仅对CFT、NAL、SMZ有不同程度耐药,耐药率达0.88%~95.95%,个别地区出现了对第三代头孢类药的多重耐药株。结论贵州省伤寒、甲副沙门菌耐药情况已较为严重,尤其是多重耐药菌可能会造成伤寒和甲型副伤寒的流行或暴发。加强耐药性监测,指导临床合理用药,对预防控制伤寒和甲型副伤寒具有重要意义。 展开更多
关键词 伤寒菌 甲型副伤寒菌 耐药性
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深圳社区感染沙门菌耐药基因调查与同源性分析 被引量:5
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作者 吴伟元 王辉 +5 位作者 陆坚 吴劲松 徐英春 陈民钧 卢月梅 吴文苑 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期431-436,共6页
目的调查深圳社区感染沙门菌耐药特点和分子机制,并进行同源性分析。方法收集深圳市人民医院2002--2007年临床分离沙门菌共93株,PCR和DNA测序分析沙门菌gyrA、gyrB、parC和pare基因QRDR的突变,PCR检测质粒介导喹诺酮耐药基因qnr和aac... 目的调查深圳社区感染沙门菌耐药特点和分子机制,并进行同源性分析。方法收集深圳市人民医院2002--2007年临床分离沙门菌共93株,PCR和DNA测序分析沙门菌gyrA、gyrB、parC和pare基因QRDR的突变,PCR检测质粒介导喹诺酮耐药基因qnr和aac(6’)-Ib—CF,B内酰胺酶基因blaTEE、blaSHV、blaOKA和blaCTX-M基因,以及I类整合子,PFGE对沙门菌进行分子分型。结果伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌对氨苄西林、氯霉素、复方磺胺甲嗯唑、头孢曲松和环丙沙星敏感率为96%-100%;52%(13/25)伤寒沙门菌和95%(61/64)甲型副伤寒沙门菌对萘啶酸耐药。24%(6/25)萘啶酸耐药伤寒沙门菌和94%(60/64)萘啶酸耐药甲型副伤寒沙门菌对环丙沙星敏感性降低(MIC0.125—1μg/mL)。75株萘啶酸耐药环丙沙星敏感沙门菌仅GyrA的QRDR均存在第83位或87位单个氨基酸替代,其中Ser83Phe突变占91%(68/75)。2株环丙沙星耐药沙门菌在QRDR中均携带GyrA上2个点突变和parC上1个点突变。93株沙门菌均未发现质粒介导的qnr和aac(6’)-,6-基因。1株头孢曲松耐药甲型副伤寒沙门菌检测到blaCTX-M-14。基因,且该基因上游存在插入序列ISEcpl。3株多重耐药沙门菌均存在一个1900bp的I类整合子,其基因盒均为dhfrXII-orfF—aadA2,同时携带blaTEM-1或blaOXA-30基因。25株伤寒沙门菌共有22种不同的PFGE带型,64株甲型副伤寒沙门菌的PFGE带型平均相似性为91%。90例患者均系社区感染,6例甲型副伤寒患者发病前30天内曾前往外地旅行。结论深圳社区感染伤寒和甲型副伤寒沙门菌对萘啶酸耐药率较高,沙门菌GyrA的QRDR点突变是萘啶酸耐药的重要机制,甲型副伤寒沙门菌菌株问遗传同源性极高,来自同一克隆。 展开更多
关键词 沙门菌 伤寒 沙门菌 甲型副伤寒 抗药性 细菌 萘啶酸 Β内酰胺酶 电泳 凝胶 脉冲场
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伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的稳定L型外膜蛋白和染色体DNA酶切研究 被引量:5
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作者 王和 唐七义 +1 位作者 徐英 解薇亚 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 1992年第4期18-20,共3页
非高渗培养基传代培养的伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的稳定L型丧失了主要外膜蛋白、特异性表面抗原和染色体DNA部分片段,保留了沙门氏菌共同的内部抗原和形成L型独特的表面抗原。提示伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的稳定L型多种特性的丧失同... 非高渗培养基传代培养的伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的稳定L型丧失了主要外膜蛋白、特异性表面抗原和染色体DNA部分片段,保留了沙门氏菌共同的内部抗原和形成L型独特的表面抗原。提示伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的稳定L型多种特性的丧失同其基因或主要外膜蛋白的缺失有关。 展开更多
关键词 伤寒杆菌 副伤寒杆菌 稳定L型
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