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实时荧光定量PCR技术的操作实践
被引量:
42
1
作者
杨怡姝
孙晓娜
+3 位作者
王小利
沈思嗣
李泽琳
曾毅
《实验室研究与探索》
CAS
北大核心
2011年第7期15-19,共5页
采用Mx3000P型实时荧光定量PCR仪,以SYBRGreen I法相对定量技术为例,设计1例检测针对HIV-1 vpr基因的特异性siRNA基因沉默效果的实验。介绍了实时荧光定量PCR技术上机前样本的制备过程、检测程序及相关参数的设置方法等操作流程;结合...
采用Mx3000P型实时荧光定量PCR仪,以SYBRGreen I法相对定量技术为例,设计1例检测针对HIV-1 vpr基因的特异性siRNA基因沉默效果的实验。介绍了实时荧光定量PCR技术上机前样本的制备过程、检测程序及相关参数的设置方法等操作流程;结合熔解曲线、扩增曲线进行结果分析;强调了实验整体设计、引物设计与PCR反应体系的优化和内参的恰当选择在实时荧光定量PCR技术中的重要性。
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关键词
荧光定量PCR
sybr
green
i
扩增曲线
熔解曲线
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职称材料
题名
实时荧光定量PCR技术的操作实践
被引量:
42
1
作者
杨怡姝
孙晓娜
王小利
沈思嗣
李泽琳
曾毅
机构
北京工业大学生命科学与生物工程学院
出处
《实验室研究与探索》
CAS
北大核心
2011年第7期15-19,共5页
基金
国家重点基础研究发展(973)计划项目(2009CB930202)
北京市教委科研项目(KM200810005015)
+1 种基金
北京市自然科学基金项目(5072003)
北京工业大学校青年基金项目(X1015001201001)
文摘
采用Mx3000P型实时荧光定量PCR仪,以SYBRGreen I法相对定量技术为例,设计1例检测针对HIV-1 vpr基因的特异性siRNA基因沉默效果的实验。介绍了实时荧光定量PCR技术上机前样本的制备过程、检测程序及相关参数的设置方法等操作流程;结合熔解曲线、扩增曲线进行结果分析;强调了实验整体设计、引物设计与PCR反应体系的优化和内参的恰当选择在实时荧光定量PCR技术中的重要性。
关键词
荧光定量PCR
sybr
green
i
扩增曲线
熔解曲线
Keywords
real-t
i
me
fluorescent
quant
i
tat
i
ve
PCR
sybr
green
i
ampl
i
f
i
cat
i
on
plots
d
i
ssoc
i
at
i
on
curve
分类号
G633.91 [文化科学—教育学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时荧光定量PCR技术的操作实践
杨怡姝
孙晓娜
王小利
沈思嗣
李泽琳
曾毅
《实验室研究与探索》
CAS
北大核心
2011
42
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