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健脾和胃法通过IL-6/STAT3信号通路对食管癌细胞株EC9706生长的干预作用 被引量:15
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作者 吴耀松 金华彬 +3 位作者 陈玉龙 任闪闪 王朋辉 尚艺婉 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1198-1201,共4页
目的:通过观察健脾和胃法代表方六君子汤对EC9706细胞增殖以及细胞中IL-6/STAT3通路相关因子和蛋白表达的影响,探讨健脾和胃法及其代表方六君子汤治疗食管癌的分子机制。方法:用MTT法检测六君子汤乙酸乙酯提取物、Stattic、IL-6对EC970... 目的:通过观察健脾和胃法代表方六君子汤对EC9706细胞增殖以及细胞中IL-6/STAT3通路相关因子和蛋白表达的影响,探讨健脾和胃法及其代表方六君子汤治疗食管癌的分子机制。方法:用MTT法检测六君子汤乙酸乙酯提取物、Stattic、IL-6对EC9706细胞生长的影响;实验设空白组、六君子汤组、Stattic抑制剂组、六君子汤+Stattic抑制剂组、IL-6组、六君子汤+IL-6组、Stattic抑制剂组+IL-6组、六君子汤+Stattic抑制剂+IL-6组,空白组用RPMI 1640培养基,六君子汤组用六君子汤乙酸乙酯提取物和Stattic浓度均为其IC35,所有含IL-6组IL-6加入时间为两药孵育6h后加入,浓度为20ng/mL。利用Western Blot检测六君子汤乙酸乙酯提取物对细胞中STAT3和p-STAT3蛋白表达的影响。结果:六君子汤乙酸乙酯提取物、Stattic可以抑制EC9706细胞的增殖;IL-6可以促进细胞增殖,但无明显量效关系。六君子汤乙酸乙酯/Stattic孵育6h然后加入IL-6培养基,各实验组OD值与空白组比较均显著降低(P<0.05),表现为抑制细胞增殖。六君子汤乙酸乙酯提取物和Stattic及其联合用药可降低p-STAT3蛋白表达(P<0.05)及p-STAT3蛋白占STAT3蛋白比例(P<0.05)。结论:六君子汤乙酸乙酯部位可以干预IL-6/STAT3信号通路抑制EC9706细胞的增殖。 展开更多
关键词 健脾和胃法 六君子汤 stat3信号通路 EC9706细胞株
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川陈皮素抑制胃癌SGC-7901细胞侵袭能力的机制探讨 被引量:15
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作者 杨雪竹 张浩 +2 位作者 崔西玉 苏沛珠 李兆滔 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第18期3099-3104,共6页
目的:观察川陈皮素(nobiletin,Nob)对胃癌SGC-7901细胞侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:不同浓度的川陈皮素(0、30、60、120 mg/L)体外处理SGC-7901细胞。CCK8法检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变;... 目的:观察川陈皮素(nobiletin,Nob)对胃癌SGC-7901细胞侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:不同浓度的川陈皮素(0、30、60、120 mg/L)体外处理SGC-7901细胞。CCK8法检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变;免疫印迹法检测细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物(E-cadherin、Vimentin、Fibronectin)蛋白、MMP-9、STAT3、p-STAT3蛋白表达的改变。结果:CCK8和Transwell小室法检测结果显示,与对照组(0 mg/L)比较,川陈皮素可显著抑制SGC-7901细胞的增殖和侵袭能力;免疫印迹结果显示,随着川陈皮素浓度的增加,SGC-7901细胞E-cadherin蛋白表达逐渐上调,同时Vimentin、Fibronectin蛋白的表达量降低,MMP-9蛋白表达下调,STAT3总量未发生变化,但p-STAT3表达逐渐降低。结论:川陈皮素可降低胃癌SGC-7901细胞侵袭能力,其机制可能为通过抑制STAT3通路,继而抑制EMT。 展开更多
关键词 川陈皮素 SGC-7901细胞 侵袭 上皮间质转化 stat3信号通路
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养血解毒汤对咪喹莫特诱导的STAT3转基因小鼠银屑病样皮损的干预作用 被引量:13
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作者 阮智通 底婷婷 +6 位作者 王燕 赵京霞 解欣然 王明星 谢湘江 蒙玉娇 李萍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1091-1098,共8页
目的:观察养血解毒汤对咪喹莫特诱导的STAT3转基因小鼠银屑病样皮损的干预作用。方法:STAT3转基因小鼠24只,随机分为正常对照组、模型组、养血解毒汤组和甲氨蝶呤组,每组6只,采用外用咪喹莫特诱导皮肤银屑病样模型。分别观察皮损面积和... 目的:观察养血解毒汤对咪喹莫特诱导的STAT3转基因小鼠银屑病样皮损的干预作用。方法:STAT3转基因小鼠24只,随机分为正常对照组、模型组、养血解毒汤组和甲氨蝶呤组,每组6只,采用外用咪喹莫特诱导皮肤银屑病样模型。分别观察皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI),光镜下观察皮损组织形态学变化和表皮层厚度;采用皮肤水分油分测试笔检测小鼠背部皮肤水分和油分含量;免疫组织化学法检测皮损中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和T淋巴细胞表面标志CD3表达;采用实时荧光定量PCR技术检测皮损Th17类细胞因子(IL-17A、IL-17C、IL-22和RORγt)mRNA表达;采用Western blot检测皮损STAT3通路蛋白(STAT3、p-STAT3、JAK3、p-JAK3和SOCS3)的表达水平。结果:(1)养血解毒汤组PASI评分明显低于模型组,HE染色观察发现养血解毒汤组皮损表皮增生较模型组少,角化不全的细胞明显减少,皮肤厚度降低(P<0.01);(2)养血解毒汤组皮损油分和水分含量均明显高于模型组(P<0.05);(3)养血解毒汤组PCNA阳性表达远低于模型组(P<0.01);(4)养血解毒汤组脾脏重量低于模型组(P<0.05);(5)养血解毒汤组Th17相关因子(IL-17A、IL-17C、IL-22和RORγt)表达水平均低于模型组,此外,p-STAT3和p-JAK3表达量亦低于模型组,而SOCS3的表达高于模型组。结论:养血解毒汤可能通过抑制STAT3的磷酸化,减少Th17相关因子(IL-17A、IL-17C、IL-22和RORγt)的分泌,由此改善咪喹莫特诱导的STAT3转基因小鼠银屑病样皮损改变。 展开更多
关键词 银屑病 养血解毒汤 咪喹莫特 stat3信号转导通路
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姜黄素通过抑制STAT3通路调控人结肠癌耐奥沙利铂细胞株的耐药性 被引量:11
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作者 文坤明 冷敏 +3 位作者 程家平 陈正权 陈奕霖 曾庆良 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1056-1059,共4页
目的:探讨姜黄素(Cur)对人结肠癌耐奥沙利铂(Oxa)细胞株(SW620/OxR)的逆转耐药作用及其机制是否与抑制STAT3信号通路有关。方法:采用WST-1试剂检测Cur对SW620/OxR细胞株的半数抑制(IC50)浓度,选择IC50低一浓度梯度的Cur+2μmol/L Oxa作... 目的:探讨姜黄素(Cur)对人结肠癌耐奥沙利铂(Oxa)细胞株(SW620/OxR)的逆转耐药作用及其机制是否与抑制STAT3信号通路有关。方法:采用WST-1试剂检测Cur对SW620/OxR细胞株的半数抑制(IC50)浓度,选择IC50低一浓度梯度的Cur+2μmol/L Oxa作用于SW620/OxR细胞48 h(称为实验组),与仅加入2μmol/L的Oxa对照组比较,1采用流式细胞术检测细胞凋亡;2采用Western blot检测STAT3活化标志磷酸化STAT3(P-STAT3)蛋白及其下游耐药相关靶分子P糖蛋白(P-gp)的表达情况。结果:Cur对SW620/OxR细胞的IC50浓度为18.9μmol/L;实验组与对照组比较:1细胞凋亡率由(5.08±1.82)%上升到(30.69±2.94)%,实验组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);2P-STAT3及P-gp表达量均明显受抑制(P<0.05)。结论:Cur具有调控人结肠癌耐药细胞株耐药性的作用,可能与抑制STAT3信号通路,降低P-gp表达有关。 展开更多
关键词 结直肠癌 多药耐药 姜黄素 stat3信号通路
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竹节香附素A对人胃癌细胞株BGC-823细胞周期及STAT3信号通路的影响 被引量:11
5
作者 薛刚 邹玺 +1 位作者 周锦勇 王瑞平 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期78-81,共4页
目的研究竹节香附素A(Raddeanin A,RA)在体外对胃癌细胞BGC-823的周期阻滞作用及对STAT3信号通路的影响。方法应用MTT法检测RA对人低分化细胞BGC-823细胞的增殖影响,应用流式细胞仪检测RA对BGC-823细胞周期的阻滞作用,细胞划痕实验检测R... 目的研究竹节香附素A(Raddeanin A,RA)在体外对胃癌细胞BGC-823的周期阻滞作用及对STAT3信号通路的影响。方法应用MTT法检测RA对人低分化细胞BGC-823细胞的增殖影响,应用流式细胞仪检测RA对BGC-823细胞周期的阻滞作用,细胞划痕实验检测RA对BGC-823迁移、侵袭能力的影响,应用Western blot检测其对STAT3信号通路的影响。结果 RA在给药12、24、48h后,与对照组相比,对BGC-823细胞的增殖抑制有显著效果,呈现时间-浓度依赖关系。流式细胞周期结果显示,RA作用于人胃癌细胞BGC-823 12h后,S期比例与对照组相较显著上升,而G2/M期比例下降,表明细胞被阻滞于S期。在浓度为8、16μmol/L时,镜下显示迁移过去的胃癌细胞数目均明显低于对照组,Western blot结果显示RA能下调p-STAT3蛋白的表达。结论 RA能有效抑制人胃癌细胞的增殖并阻滞其细胞周期于S期,并且抑制STAT3信号通路中p-STAT3的表达。 展开更多
关键词 竹节香附素A 人胃癌细胞BGC-823 细胞周期 stat3信号通路
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双氢青蒿素通过抑制STAT3增加非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的敏感性 被引量:11
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作者 蔡雪婷 杨杰 +1 位作者 胡春萍 曹鹏 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第18期2013-2019,共7页
探讨了双氢青蒿素联合吉非替尼对人非小细胞肺癌细胞(吉非替尼敏感细胞株PC-9和吉非替尼耐药细胞株H1975)的抑制效果及协同机制.运用噻唑蓝法和克隆形成实验,比较双氢青蒿素和吉非替尼单独给药和联合给药对肺癌细胞存活率和克隆形成能... 探讨了双氢青蒿素联合吉非替尼对人非小细胞肺癌细胞(吉非替尼敏感细胞株PC-9和吉非替尼耐药细胞株H1975)的抑制效果及协同机制.运用噻唑蓝法和克隆形成实验,比较双氢青蒿素和吉非替尼单独给药和联合给药对肺癌细胞存活率和克隆形成能力的影响;利用Western blot检测单独给药和联合给药时EGFR信号通路和STAT3信号通路的变化.实验结果显示,双氢青蒿素和吉非替尼联合使用优于单独给药,联合用药指数值分别为0.751(PC-9细胞)和0.766(H1975细胞).吉非替尼诱导激活的STAT3反馈激活途径导致非小细胞肺癌对TKI产生耐药,双氢青蒿素可抑制吉非替尼激活的STAT3且不影响其TKI活性,提示双氢青蒿素可以作为解决TKI耐药的候选药物. 展开更多
关键词 双氢青蒿素 吉非替尼 非小细胞肺癌 协同效应 stat3信号通路
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RNA干扰UBQLN1基因表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及机制研究 被引量:9
7
作者 胡潺潺 李青山 +5 位作者 刘兰芳 梁云微 朱翠敏 张晶晶 李爱科 王锐 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1315-1320,共6页
目的:观察抑制泛素1(UBQLN1)基因表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法:Western blot检测UBQLN1在乳腺癌T47D、BT549、MDA-MB-231、MCF7细胞中相对于正常乳腺上皮细胞MCF-10A的蛋白表达;用LipofectamineTM2000将干扰UBQLN1表达... 目的:观察抑制泛素1(UBQLN1)基因表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法:Western blot检测UBQLN1在乳腺癌T47D、BT549、MDA-MB-231、MCF7细胞中相对于正常乳腺上皮细胞MCF-10A的蛋白表达;用LipofectamineTM2000将干扰UBQLN1表达的siRNA(UBQLN1-siRNA)转染MDA-MB-231细胞,同时转染阴性对照组(NC组),并设置空白对照组,收集转染48 h的细胞Western blot检测其UBQLN1的蛋白表达;CCK8法检测UBQLN1-siRNA转染24 h、48 h和72 h的细胞活力;流式细胞仪及Transwell小室分别检测UBQLN1-siRNA转染48 h的细胞凋亡率及侵袭能力;Western blot检测促凋亡蛋白p53和抑凋亡蛋白Survivin、侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)及STAT3和磷酸化的信号转导与转录因子3 (p-STAT3)的蛋白表达。结果:与MCF-10A细胞比较,UBQLN1在T47D、BT549、MDA-MB-231、MCF7乳腺癌细胞中的表达均显著升高(P<0. 01);与NC组比较,UBQLN1-siRNA组UBQLN1的蛋白表达显著降低,24 h、48 h和72 h的细胞活力均显著降低,细胞凋亡率显著升高,细胞侵袭能力显著降低,Survivin、MMP-2、MMP-9和pSTAT3的蛋白表达均显著降低,p53蛋白表达显著升高(P <0. 01),三组间STAT3的蛋白表达差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:抑制乳腺癌细胞中UBQLN1基因表达可降低乳腺癌细胞活力和侵袭能力,并诱导细胞凋亡和下调STAT3信号通路。 展开更多
关键词 乳腺癌 UBQLN1基因 增殖 凋亡 侵袭 stat3信号通路
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胃复春胶囊通过STAT3信号通路促进人胃癌细胞凋亡 被引量:4
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作者 潘海春 祁大庆 +2 位作者 陈琳慧 汪玲羽 万林春 《浙江中医药大学学报》 CAS 2023年第3期227-233,共7页
[目的]研究胃复春胶囊对人胃癌MKN-49P细胞的作用,为胃复春胶囊在抗消化道肿瘤方面的应用提供新的依据。[方法]受试样品为经胃复春胶囊饲喂大鼠的含药血清。胃癌MKN-49P细胞与不同浓度的胃复春胶囊含药血清共同孵育,采用噻唑蓝(methy th... [目的]研究胃复春胶囊对人胃癌MKN-49P细胞的作用,为胃复春胶囊在抗消化道肿瘤方面的应用提供新的依据。[方法]受试样品为经胃复春胶囊饲喂大鼠的含药血清。胃癌MKN-49P细胞与不同浓度的胃复春胶囊含药血清共同孵育,采用噻唑蓝(methy thiazolyl tetrazolium,MTT)法及流式细胞术分别检测细胞活力和细胞凋亡情况;JC-1染色检测线粒体膜电位的变化;免疫印迹法检测信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT 3)蛋白及与细胞凋亡相关的蛋白表达情况。[结果]胃复春胶囊含药血清能够剂量和时间依赖地抑制MKN-49P细胞的生长,并可诱导MKN-49P细胞凋亡。浓度为0~100μg·mL-1的胃复春胶囊含药血清作用于MKN-49P细胞24 h后,细胞活力呈剂量依赖性降低;JC-1染色显示线粒体膜电位降低;经过25、50、100μg·mL-1的胃复春胶囊含药血清分别处理24 h后,胃复春胶囊含药血清处理组细胞中STAT3的磷酸化减弱。[结论]胃复春胶囊含药血清能抑制胃癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与STAT3信号通路有关,该结果为胃复春胶囊在临床上治疗胃癌提供了依据。 展开更多
关键词 胃复春胶囊 含药血清 胃癌 MKN-49P细胞 stat3信号通路 凋亡 剂量依赖 时间依赖
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青藤碱通过调控STAT3及NF-κB信号通路对多发性骨髓瘤U266细胞增殖、凋亡的影响 被引量:3
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作者 王莹莹 周世颖 +5 位作者 陈洁 乔璎 赵逸 吴佳玙 吴英理 翁巍 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期1634-1638,共5页
目的探讨青藤碱对骨髓瘤U266细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制。方法将培养好的U266细胞用不同浓度青藤碱(0、0.5、1、2 mmol/L)处理,空白对照组加入0.5%浓度的DMSO。用CCK-8检测U266细胞的增殖;流式细胞术检测细胞的凋亡;Western blo... 目的探讨青藤碱对骨髓瘤U266细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制。方法将培养好的U266细胞用不同浓度青藤碱(0、0.5、1、2 mmol/L)处理,空白对照组加入0.5%浓度的DMSO。用CCK-8检测U266细胞的增殖;流式细胞术检测细胞的凋亡;Western blot法检测各组细胞的增殖相关蛋白、凋亡相关蛋白、信号转导与转录激活因子(STAT3)及基因结合核因子(NF-κB)信号通路相关蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,青藤碱处理组U266细胞凋亡率增加,增殖能力降低,抗凋亡相关蛋白Bcl-2及Mcl-1表达水平下降、cleaved caspase-3、cleaved PARP表达水平上调,STAT3、NF-κB信号通路活性降低,表现为p-STAT3、p-IκBα的表达水平下降。结论青藤碱通过下调STAT3及NF-κB信号通路活性,促进骨髓瘤U266细胞凋亡。 展开更多
关键词 青藤碱 骨髓瘤 U266细胞 stat3信号通路 NF-ΚB信号通路
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补肾调经方在种植窗期经STAT3信号通路改善超促排卵小鼠胚胎着床的作用及机制 被引量:8
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作者 段彦苍 李志丽 +10 位作者 刘蔚 傅天 杨江霞 王雅慧 张亚尧 郝任娟 余慧雯 杜惠兰 徐华洲 马惠荣 宋翠淼 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期648-654,共7页
目的观察补肾调经方对控制性超促排卵(COH)小鼠种植窗期子宫内膜信号转导和转录活化因子3(STAT3)信号通路的影响,探讨其改善胚胎着床的作用及机制。方法昆明小鼠60只,随机分为模型组、补肾调经方组和正常组,每组20只。妊娠第4天每组处... 目的观察补肾调经方对控制性超促排卵(COH)小鼠种植窗期子宫内膜信号转导和转录活化因子3(STAT3)信号通路的影响,探讨其改善胚胎着床的作用及机制。方法昆明小鼠60只,随机分为模型组、补肾调经方组和正常组,每组20只。妊娠第4天每组处死10只小鼠,放射免疫法检测血清雌二醇(E_2)、孕酮(P)水平,Western blot法检测子宫内膜白血病抑制因子(LIF)、磷酸化信号转导和转录活化因子3(P-STAT3)蛋白的含量,免疫组化法检测子宫内膜瘦素及瘦素受体(OB-R)的表达。妊娠第8天处死各组剩余小鼠,观察平均胚胎着床数。结果与正常组比较,模型组小鼠血清E_2降低(P<0.05),P升高(P<0.01);子宫内膜LIF、P-STAT3的含量下降(P<0.01),内膜上皮细胞瘦素及OB-R蛋白的表达降低(P<0.01);平均胚胎着床数减少(P<0.01)。与模型组比较,补肾调经方组小鼠血清P降低(P<0.05);子宫内膜LIF、P-STAT3蛋白的含量升高(P<0.01),内膜上皮细胞瘦素表达增加(P<0.05);平均胚胎着床数增多(P<0.01)。结论补肾调经方可改善COH小鼠胚胎着床,其机制可能与调控种植窗期子宫内膜STAT3信号通路相关蛋白有关。 展开更多
关键词 补肾调经方 控制性超促排卵 子宫内膜 信号转导和转录活化因子3信号通路 小鼠
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STAT3通路调控miR-223抑制NLRP3表达对脓毒症炎症反应的影响及作用机制 被引量:2
11
作者 张啸 龚园其 +2 位作者 蓝海兵 王萌 王舒 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1793-1796,1802,共5页
目的:探讨STAT3通路调控miR-223抑制NLRP3表达对脓毒症炎症反应的影响及作用机制。方法:50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-NC组、miR-223组和miR-223抑制剂组,每组10只。观察各组大鼠肝、肺组织病理形态;检测各组大鼠肝、肺组织mi... 目的:探讨STAT3通路调控miR-223抑制NLRP3表达对脓毒症炎症反应的影响及作用机制。方法:50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-NC组、miR-223组和miR-223抑制剂组,每组10只。观察各组大鼠肝、肺组织病理形态;检测各组大鼠肝、肺组织miR-223表达、血清炎症细胞因子表达、肝、肺组织STAT3、NLRP3蛋白表达。结果:与对照组相比,其余各组大鼠肝、肺组织结构均被破坏,miR-223组较优于模型组。模型组大鼠肝、肺组织miR-223表达降低(P<0.05)。与对照组相比,其余各组TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高,IL-10水平降低。与模型组相比,miR-223组、miR-NC组TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低,IL-10水平升高(P<0.05)。与对照组相比,其余各组大鼠肝、肺组织STAT3蛋白表达降低,NLRP3蛋白表达升高(P<0.05),与模型组相比,miR-NC组、miR-223组、miR-233抑制剂组STAT3表达升高,NLRP3蛋白表达降低(P<0.05);与miR-233组相比,miR-233抑制剂组STAT3蛋白表达升高,NLRP3蛋白表达降低(P<0.05)。结论:STAT3通路调控miR-223抑制NLRP3信号通路抑制脓毒症大鼠炎症反应。 展开更多
关键词 脓毒症 miR-223 stat3信号通路 NLRP3信号通路 炎症反应
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骨髓间充质干细胞对急性肝衰竭的治疗作用及机制 被引量:7
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作者 马虎成 王鑫 +2 位作者 吴旻娜 袁献温 施晓雷 《中华肝胆外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期694-699,共6页
目的探索骨髓间充质干细胞(MSCs)分泌的炎症相关因子及其对急性肝衰竭(ALF)的治疗作用。方法获取并鉴定sD大鼠MSCs。收集MSCs条件培养基(MSCs—CM)检测炎症相关因子。SD大鼠分为三组:ALF+达尔伯克氏改良伊格尔培养基(DMEM)组... 目的探索骨髓间充质干细胞(MSCs)分泌的炎症相关因子及其对急性肝衰竭(ALF)的治疗作用。方法获取并鉴定sD大鼠MSCs。收集MSCs条件培养基(MSCs—CM)检测炎症相关因子。SD大鼠分为三组:ALF+达尔伯克氏改良伊格尔培养基(DMEM)组:D-氨基半乳糖(D—Gal)诱导大鼠ALF后静脉输注DMEM 1ml;ALF+MSCs组:诱导ALF后静脉输注MSCs 1ml(约1×10^6);ALF+MSCs—CM组:诱导ALF后静脉输注MSCs—CM 1ml。检测各组大鼠生化指标、4周存活率、组织病理学和炎症因子水平。评估直接输注外源性重组大鼠白介素10(IL-10)与给予抗白介素10抗体后输注MSCs-CM对ALF大鼠转氨酶的影响。检测给予IL—10后ALF大鼠肝脏磷酸化STAT3(pSTAT3)水平,评估AG490(STAT3信号通路抑制剂)能否逆转IL-10的治疗作用。结果ALF+DMEM组、ALF+MSCs组和ALF+MSCs—CM组给予D—Gal第3天血清ALT分别为1709.8±372.1、865.5±52.8、964.7±414.6U/L,AST分别为4234.0±807.3、2440.8±511.9、2739.8±587.3U/L,TBil分别为79.3±10.9、43.8±7.0、61.2±6.7μg/L。三组28天存活率分别为10.0%、80.0%、70.0%;炎症因子干扰素(IFN-γ)分别为69.8±4.7、46.4±4.3、54.6±2.4pg/ml,IL-113分别为58.5±7.6、40.5±6.9、44.1±6.0pg/ml,IL-6分别为71.9±16.1、38.4±7.7、45.3±9.0pg/ml,IL-10分别为38.3±6.0、75.4±11.1、59.6±11.9pg/ml。蛋白芯片检测提示MSCs-CM表达多种炎症相关细胞因子,其中IL-10的水平最为显著。与ALF组(ALT:1709.8±372.1U/L,AST:4234.0±807.3U/L)比较,单独使用IL-10(ALT:1126.9±419.3U/L,AST:2370.8±561.2U/L)能显著降低转氨酶水平,同时给予抗IL-10抗体(ALT:1568.5±325.4U/L,AST:4043.7±819.0U/L)则能中和ISCs-CM(ALT:964.7±414.6U/L,AST:2739.8±587.3U/L)的治� 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 急性肝衰竭 条件培养基 免疫调节 stat3信号通路
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黄芪甲苷调控JAK2/STAT3/CXCL12信号通路抑制炎症细胞浸润改善小鼠胃炎的机制研究 被引量:1
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作者 江晓涛 杨泽虹 +5 位作者 王姝烨 安金琪 黄远程 邹雨杉 文艺 李培武 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第2期447-456,共10页
【目的】探讨黄芪甲苷对胃炎的抑炎作用及机制。【方法】(1)体外实验:应用1、2.5、5、10、20μg·mL-1脂多糖(LPS)诱导GES-1细胞24 h,确定LPS诱导GES-1细胞炎症模型的最佳浓度。在GES-1细胞炎症模型的基础上,使用0.1、1、10μg·... 【目的】探讨黄芪甲苷对胃炎的抑炎作用及机制。【方法】(1)体外实验:应用1、2.5、5、10、20μg·mL-1脂多糖(LPS)诱导GES-1细胞24 h,确定LPS诱导GES-1细胞炎症模型的最佳浓度。在GES-1细胞炎症模型的基础上,使用0.1、1、10μg·mL-1浓度的黄芪甲苷分别干预24 h,明确黄芪甲苷最佳的干预浓度。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)方法测定黄芪甲苷对细胞活性的影响;采用AutoDock软件对黄芪甲苷和信号传导和转录激活因子3(STAT3)进行分子对接,验证两者的相互作用;采用Western Blot法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和CXCL12蛋白表达水平。(2)体内实验:采用LPS法诱导胃炎小鼠模型,应用黄芪甲苷和p-STAT3抑制剂干预1周后,免疫组织化学法和Western Blot法检测胃黏膜p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血浆中CXCL12的含量。【结果】(1)体外实验结果显示:10μg·mL-1是LPS诱导GES-1细胞炎症模型的最佳浓度,选用黄芪甲苷10μg·mL-1开展后续实验。分子对接结果显示,黄芪甲苷与STAT3具有较高的亲和力。与空白对照组比较,LPS诱导组GES-1细胞p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平显著升高(P<0.001);黄芪甲苷组和p-STAT3抑制剂组p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平较LPS诱导组显著降低(P<0.01)。(2)体内实验结果显示:与空白对照组比较,模型组小鼠胃黏膜p-STAT3、CXCL12蛋白水平和血浆中CXCL12含量显著上调(P<0.01或P<0.001);黄芪甲苷和p-STAT3抑制剂组胃炎小鼠胃黏膜p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平和血浆中CXCL12含量显著下调(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】黄芪甲苷通过抑制JAK2/STAT3信号通路降低CXCL12的表达,抑制炎症细胞浸润,达到改善胃炎小鼠胃黏膜炎症的作用。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 胃炎 抑炎作用 stat3信号通路 CXCL12 GES-1细胞 小鼠
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槲皮素对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响 被引量:7
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作者 傅浩 尚静雯 李敏 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第3期434-437,共4页
目的:研究槲皮素对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响。方法:将体外培养的皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞分为3组,分别用0、10、40μmol/L槲皮素处理48 h,采用CCK-8法测定细胞增殖活性,细胞周期检测试剂盒测定细胞周期,Western blot法测定细胞中CDK... 目的:研究槲皮素对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响。方法:将体外培养的皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞分为3组,分别用0、10、40μmol/L槲皮素处理48 h,采用CCK-8法测定细胞增殖活性,细胞周期检测试剂盒测定细胞周期,Western blot法测定细胞中CDK4、Cyclin D1、STAT3和p-STAT3蛋白的表达。结果:槲皮素能够浓度和时间依赖性地抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖(P<0.001)。与0μmol/L槲皮素组比较,10、40μmol/L槲皮素组细胞G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少;CDK4、Cyclin D1、STAT3和p-STAT3蛋白相对表达量降低(P<0.05)。与10μmol/L槲皮素组比较,40μmol/L槲皮素组细胞G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少;CDK4、Cyclin D1、STAT3和p-STAT3蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论:槲皮素可能通过抑制STAT3信号通路抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖。 展开更多
关键词 槲皮素 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 stat3信号通路 增殖
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miR-200c通过靶向细胞能量代谢和多种信号通路调控三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的恶性生物学行为 被引量:7
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作者 杨月 陈龙 +1 位作者 方婷 章丹丹 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期9-18,共10页
目的:考察miR-200c对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞MDA-MB-231的增殖、凋亡和迁移的影响及其代谢相关的分子机制。方法:以过表达miR-200c的MDA-MB-231(miR-200c-231)细胞、无过表达miR-200c的阴性对照细胞miR-N... 目的:考察miR-200c对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞MDA-MB-231的增殖、凋亡和迁移的影响及其代谢相关的分子机制。方法:以过表达miR-200c的MDA-MB-231(miR-200c-231)细胞、无过表达miR-200c的阴性对照细胞miR-NC-231及其移植瘤裸鼠模型为研究对象,qPCR检测细胞和移植瘤组织中miR-200c及其他相关基因的表达水平,免疫组化技术分析瘤组织中Ki67阳性细胞数量,Transwell小室法检测细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blotting检测细胞及组织中增殖、迁移和代谢相关信号通路多种蛋白的表达,Seahorse能量代谢检测仪检测细胞的基础耗氧率(oxygen comsumpition rate,OCR)、细胞外酸度(extracellular acidification rate,ECAR)和代谢表型变化,液相质谱联用技术检测细胞中代谢产物的变化。结果:miR-200c-231细胞及其移植瘤组织中miR-200c表达较miR-NC-231细胞显著增加(P<0.05或P<0.01),miR-200c-231移植瘤质量和体积均显著下降、瘤组织中Ki67阳性细胞数明显减少(P<0.01),miR-200c-231细胞的迁移能力下降、细胞凋亡率提高(均P<0.01)。同时伴随着ZEB1/2、Vimentin、cyclinD1的表达下调及cleaved PARP表达的提高(P<0.05或P<0.01),STAT1/3和NF-κB的磷酸化水平降低(均P<0.05)而cAMP通路蛋白的磷酸化水平提高(P<0.05)。miR-200c-231细胞的OCR提高和ECAR降低、色氨酸2,3-加二氧酶(tryptophan-2,3-dioxygenase 2,TDO2)表达下降(P<0.05或P<0.01),细胞内10种抗肿瘤代谢物质含量提高(P<0.05或P<0.01)。结论:miR-200c靶向TDO2调控TNBC细胞MDA-MB-231胞内抗肿瘤代谢产物水平、促使细胞代谢类型由依赖糖酵解为主向有氧呼吸类型转化,并失活STAT3和NF-κB通路而激活c AMP通路,从而影响MDA-MB-231细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 MIR-200C 三阴性乳腺癌 MDA-MB-231细胞 增殖 迁移 凋亡 能量代谢 stat3信号通路
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基于STAT3信号通路调节Th17细胞增殖探讨温阳化浊通络方治疗系统性硬化病机制 被引量:7
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作者 韩立 吕芹 +3 位作者 郭克磊 卞华 臧文华 张鹏 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期1697-1701,共5页
目的:研究温阳化浊通络方对Th17细胞增殖的影响,探讨其对STAT3信号通路的调控作用,明确该方治疗系统性硬化病(SSc)的免疫调控机制。方法:收集SSc患者外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单核细胞,人Th17分选试剂盒分选Th17细胞,同时制... 目的:研究温阳化浊通络方对Th17细胞增殖的影响,探讨其对STAT3信号通路的调控作用,明确该方治疗系统性硬化病(SSc)的免疫调控机制。方法:收集SSc患者外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单核细胞,人Th17分选试剂盒分选Th17细胞,同时制备温阳化浊通络方含药血清。荧光染料CFSE标记Th17细胞后,流式细胞术检测含药血清对Th17细胞增殖的影响。采用RT-qPCR和细胞免疫荧光技术检测含药血清对Th17细胞中JAK2、STAT3/p-STAT3 mRNA和蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,各剂量含药血清组可剂量依赖性地抑制Th17细胞的增殖(P<0.01);阳性对照组对Th17细胞的增殖抑制作用介于含药血清低剂量和高剂量组之间(P<0.01,P<0.05);各含药血清组可剂量依赖性地降低JAK2和STAT3 mRNA和蛋白的表达,并可剂量依赖性地降低p-STAT3的表达(P<0.05,P<0.01);阳性对照组抑制JAK2和STAT3/p-STAT3表达的作用强于各含药血清组(P<0.01)。结论:温阳化浊通络方可抑制Th17细胞的增殖,其机制可能与抑制STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 温阳化浊通络方 信号转导和转录激活因子3信号通路 TH17 系统性硬化病 机制 免疫调控 细胞增殖
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miR-455-3p靶向HIPK2调控高糖环境下成骨细胞的增殖和凋亡 被引量:6
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作者 匡嘉兵 申文娟 +4 位作者 马永刚 徐昊 张克良 沈波 许闫严 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第11期1641-1646,共6页
背景:以往研究表明多种miRNA在骨形成中发挥作用,miR-335-5p可保护成骨细胞免受氧化应激,对枸橼酸铁铵诱导的成骨细胞具有保护作用,但miR-335-5p对高糖环境下成骨细胞增殖和凋亡的影响尚未可知。目的:探讨miR-455-3p靶向HIPK2对高糖环... 背景:以往研究表明多种miRNA在骨形成中发挥作用,miR-335-5p可保护成骨细胞免受氧化应激,对枸橼酸铁铵诱导的成骨细胞具有保护作用,但miR-335-5p对高糖环境下成骨细胞增殖和凋亡的影响尚未可知。目的:探讨miR-455-3p靶向HIPK2对高糖环境下成骨细胞增殖和凋亡的影响。方法:双荧光素酶报告基因分析法验证miR-455-3p对HIPK2的靶向作用。体外用高糖诱导MC3T3-E1细胞,分为空白组、高糖组、高糖+miR-control组、高糖+miR-455-3p组、高糖+si-control组、高糖+si-HIPK2组、高糖+miR-455-3p+pcDNA组和高糖+miR-455-3p+pcDNA-HIPK2组。qRT-PCR检测miR-455-3p和HIPK2mRNA的表达,MTT法检测细胞存活率,流式细胞检测细胞凋亡,Westernblot检测HIPK2、p-STAT3和STAT3蛋白的表达。结果与结论:①HIPK2是miR-455-3p的靶基因,miR-455-3p可负性调控HIPK2的表达;②高糖处理可抑制miR-455-3p的表达,促进HIPK2的表达;③过表达miR-455-3p或抑制HIPK2表达均可促进高糖条件下MC3T3-E1细胞的存活和抑制凋亡;④过表达HIPK2可部分逆转miR-455-3p对高糖条件下成骨细胞的存活促进和凋亡抑制作用;⑤miR-455-3p通过调控HIPK2抑制成骨细胞中p-STAT3的表达;⑥结果表明,miR-455-3p通过靶向下调HIPK2抑制高糖诱导的成骨细胞凋亡,促进成骨细胞增殖,这可能与抑制STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 miR-455-3p HIPK2 高糖 成骨细胞 细胞凋亡 stat3信号通路
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miR-495-3p靶向BUB1调控STAT3信号通路对食管癌细胞生物学行为的影响
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作者 杨晖 石宁 +3 位作者 陈晓伟 宋雪杰 周茜 司富春 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第8期1446-1454,共9页
目的 探讨miR-495-3p靶向苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1(BUB1)调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对食管癌细胞生物学行为的影响。方法 使用cDNA芯片技术筛选出食管癌组织和正常组织差异表达基因,并用生物信息学方法进行分... 目的 探讨miR-495-3p靶向苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1(BUB1)调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对食管癌细胞生物学行为的影响。方法 使用cDNA芯片技术筛选出食管癌组织和正常组织差异表达基因,并用生物信息学方法进行分析。运用TargetScan数据库对miRNA的靶基因进行预测,并用双荧光素酶报告基因检测技术进行验证。将KYSE150细胞分为空白对照组、NC mimics组和miR-495-3p mimics组。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖活力。用流式细胞术测定细胞周期和凋亡。通过定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定BUB1 mRNA的表达水平。通过蛋白质印迹法(Western blot)测量BUB1、STAT3、磷酸化(p)-STAT3、细胞周期蛋白B1(CCNB1)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白水平。用划痕和Transwell小室实验测定细胞的迁移和侵袭能力。结果 差异表达基因参与生物学过程、信号通路和网络构建主要与细胞周期相关,BUB1是关键的核心(Hub)基因,miR-495-3p靶向调控BUB1。体外实验表明,过表达miR-495-3p能显着抑制食管癌细胞的生长、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡和G2/M期阻滞。过表达miR-495-3p处理后,食管癌细胞中Caspase-3、Caspase-9表达量升高(P<0.01),而Bcl-2、BUB1、CCNB1、CDK1、p-STAT3表达量降低(P<0.01)。STAT3信号通路也被发现在此过程中发挥着重要作用。结论 miR-495-3p可能通过下调BUB1介导STAT3信号通路影响食管癌细胞的生物学行为。 展开更多
关键词 食管癌 miR-495-3p BUB1 stat3信号通路 生物学行为
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基于JAK3/STAT3信号通路探讨热敏灸对银屑病模型大鼠皮损的影响及作用机制
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作者 陈楚 欧阳厚淦 +2 位作者 朱绪映 齐艳喆 王姿 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第6期102-107,共6页
目的探讨热敏灸对银屑病模型大鼠皮损的影响,基于JAK3/STAT3信号通路探讨其作用机制。方法采用5%咪喹莫特乳膏于大鼠背部和手少阳三焦经循行路线处皮肤进行银屑病造模,将SD大鼠随机分为空白组、模型组和治疗组,治疗组于“外关”进行灸疗... 目的探讨热敏灸对银屑病模型大鼠皮损的影响,基于JAK3/STAT3信号通路探讨其作用机制。方法采用5%咪喹莫特乳膏于大鼠背部和手少阳三焦经循行路线处皮肤进行银屑病造模,将SD大鼠随机分为空白组、模型组和治疗组,治疗组于“外关”进行灸疗,每次40min,连续7d,根据敏化状态分为热敏灸组和艾灸组。HE染色观察皮损组织病理变化,ELISA检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-23含量,免疫组化检测皮损组织p-JAK3、p-STAT3阳性表达,RT-qPCR检测皮损组织JAK3、STAT3、IL-17A、IL-17F mRNA表达。结果与空白组比较,模型组大鼠皮损组织突出、肥厚,伴大量炎性细胞浸润,血清TNF-α、IL-1β、IL-23含量显著增加(P<0.01),皮损组织p-JAK3、p-STAT3阳性表达显著升高(P<0.01),JAK3、STAT3、IL-17A、IL-17F mRNA表达显著上升(P<0.01);与模型组比较,热敏灸组大鼠皮损组织棘层肥厚程度减轻,无明显炎性细胞浸润,血清TNF-α、IL-1β、IL-23含量显著减少(P<0.01),皮损组织p-JAK3、p-STAT3阳性表达显著降低(P<0.05,P<0.01),JAK3、STAT3、IL-17A、IL-17F mRNA表达显著下降(P<0.05,P<0.01);与艾灸组比较,热敏灸组血清TNF-α、IL-1β含量显著减少(P<0.05,P<0.01),皮损组织p-JAK3阳性表达显著降低(P<0.05)。结论热敏灸能改善银屑病模型大鼠病理症状,其机制可能与抑制JAK3/STAT3信号通路,减少调节性T细胞17分化及促炎细胞因子分泌有关。 展开更多
关键词 热敏灸 银屑病 JAK3/stat3信号通路 大鼠
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SHIP1调控STAT3信号通路对白血病Jurkat细胞活力和凋亡的影响 被引量:6
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作者 方鹏 张诺芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期87-93,共7页
目的:探讨含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶1(SHIP1)通过调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对人白血病细胞活力和凋亡的影响。方法:以白血病Jurkat细胞为研究对象,将转染空载体和SHIP1过表达载体的细胞分别记为阴性对照(NC)组和SHIP... 目的:探讨含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶1(SHIP1)通过调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对人白血病细胞活力和凋亡的影响。方法:以白血病Jurkat细胞为研究对象,将转染空载体和SHIP1过表达载体的细胞分别记为阴性对照(NC)组和SHIP1组,同时以不作处理的细胞为空白对照(control)组,用real-time PCR和Western blot检测转染效果,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的caspase-3(cleaved caspase-3)、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白水平。同时,用STAT3信号通路抑制剂AG490作用于control组和SHIP1组细胞,分别记为control+AG490组和SHIP1+AG490组,再观测上述指标的变化。结果:分别与control组和NC组比较,SHIP1组SHIP1的mRNA表达水平和蛋白水平均显著升高(P<0.05);细胞存活率显著降低(P<0.05);细胞凋亡率显著升高(P<0.05);cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);p-STAT3蛋白水平显著降低(P<0.05)。分别与control组和control+AG490组比较,SHIP1+AG490组的细胞存活率显著降低(P<0.05);cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);p-STAT3蛋白水平显著降低(P<0.05);细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论:SHIP1能够通过抑制STAT3信号通路抑制人白血病细胞生长,促进白血病细胞凋亡。 展开更多
关键词 白血病 含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶1 细胞活力 细胞凋亡 stat3信号通路
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