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半枝莲提取物诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及对凋亡相关基因表达的影响 被引量:11
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作者 韦鹏涯 浦洪琴 +2 位作者 韦星 李朝敢 农嵩 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1270-1273,共4页
目的:探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbataextract,SBE)对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及凋亡相关基因survivin和caspase-3表达的影响。方法:体外培养肺癌SPC-A-1细胞,以2.5、5、10 mg/L SBE处理SPC-A-1细胞48h,并以2.5 mg/L顺铂(DDP)作为... 目的:探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbataextract,SBE)对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及凋亡相关基因survivin和caspase-3表达的影响。方法:体外培养肺癌SPC-A-1细胞,以2.5、5、10 mg/L SBE处理SPC-A-1细胞48h,并以2.5 mg/L顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,TUNEL法检测凋亡率,半定量RT-PCR检测survivin和caspase-3 mRNA表达。结果:与正常对照组相比,SBE各组细胞抑制率显著上升(P<0.001),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),Caspase-3 mRNA表达显著上升(P<0.05或P<0.01),Survivin mRNA表达明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:SBE具有诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调caspase-3及下调survivin基因表达有关。 展开更多
关键词 半枝莲 spc-A-1细胞 细胞凋亡 生存素 Caspase-3
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黄芪甲苷对非小细胞肺癌细胞A549、SPC-A1增殖凋亡的调控作用及其机制 被引量:14
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作者 吴安妮 袁力 +1 位作者 邢婧 王楠 《山东医药》 CAS 2021年第3期18-22,共5页
目的探讨黄芪甲苷对非小细胞肺癌细胞A549、SPC-A1增殖凋亡的调控作用及潜在的作用机制。方法分别用0、10、20、40、60、80、100μmoL/L的黄芪甲苷处理非小细胞肺癌细胞A549和SPC-A124 h后,用四甲基偶氮唑蓝染色法测算A549和SPC-A1细胞... 目的探讨黄芪甲苷对非小细胞肺癌细胞A549、SPC-A1增殖凋亡的调控作用及潜在的作用机制。方法分别用0、10、20、40、60、80、100μmoL/L的黄芪甲苷处理非小细胞肺癌细胞A549和SPC-A124 h后,用四甲基偶氮唑蓝染色法测算A549和SPC-A1细胞存活率,计算出黄芪甲苷的半数抑制浓度(IC_(50))。将IC_(50)的黄芪甲苷加入非小细胞肺癌细胞A549和SPC-A124 h,同时设立空白对照,采用原位末端转移酶标记法测算A549和SPC-A1细胞的凋亡率。实时荧光定量PCR检测Ki67、PCNA、Caspase-3、Caspase-9基因,免疫印迹法检测Cleaved Caspase3、Cleaved Caspase9、total-Akt、p-Akt蛋白。结果不同浓度黄芪甲苷处理后24 h,A549和SPC-A1的细胞活性均明显受到了抑制(P均<0.05),A549和SPC-A1细胞增殖的IC50分别为32.6μmol/L和29.4μmol/L。与空白对照比较,IC50的黄芪甲苷加入后,A549和SPC-A-1细胞凋亡率明显升高(P均<0.05)。与空白对照比较,黄芪甲苷加入后,A549、SPC-A1细胞增殖相关基因Ki67、PCNA下降(P均<0.05),凋亡相关基因Caspase-3和Caspase-9的mRNA和蛋白的表达均升高(P均<0.01),p-Akt表达下降(P<0.01)。结论黄芪甲苷可抑制非小细胞肺癌A549、SPC-A1的增殖,促进其凋亡,呈浓度依赖性;抑制Akt信号通路中p-Akt的表达可能是黄芪甲苷的作用机制之一。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 非小细胞肺癌细胞 A549细胞 spc-A1细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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二氢丹参酮Ⅰ对 QGY-7703 细胞和 SPC-A-1 细胞放射敏感性的影响 被引量:8
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作者 李如冰 吴强 +2 位作者 徐素娟 冯炎 罗厚蔚 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期29-33,共5页
利用体外细胞集落形成法研究二氢丹参酮Ⅰ对肿瘤细胞放射敏感性的影响。实验表明,二氢丹参酮Ⅰ对人肝癌细胞株(QGY7703)和人肺腺癌细胞株(SPCA1)有较强的细胞毒作用,半致死剂量LD50分别为8.86μmol... 利用体外细胞集落形成法研究二氢丹参酮Ⅰ对肿瘤细胞放射敏感性的影响。实验表明,二氢丹参酮Ⅰ对人肝癌细胞株(QGY7703)和人肺腺癌细胞株(SPCA1)有较强的细胞毒作用,半致死剂量LD50分别为8.86μmol/L和7.73μmol/L。该药物与X射线联合作用能增强细胞对射线的敏感性,1μmol/L的二氢丹参酮Ⅰ作用于有氧细胞1h后照射,对QGY7703细胞和SPCA1细胞的增敏比(SER)分别为1.42和1.62;QGY7703细胞和SPCA1细胞的氧增比(OER)分别为2.08和3.03。1μmol/L的二氢丹参酮Ⅰ在乏氧状态下对这两种细胞亦有放射增敏作用,QGY7703细胞的SER仍为1.42,而SPCA1细胞的SER增大为1.96。在分次照射实验中,1μmol/L的二氢丹参酮Ⅰ能完全抑制这两种细胞的亚致死性损伤修复(SLDR)。 展开更多
关键词 二氢丹参酮 肿瘤细胞 放射敏感性 SER OER
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汉黄芩素对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖和周期的影响 被引量:9
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作者 孙健 张扬 +2 位作者 温庆辉 张郑瑶 周秋丽 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2010年第18期169-172,共4页
目的:研究汉黄芩素对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖和周期的影响。方法:以不同浓度的汉黄芩素作用于SPC-A-1细胞,检测细胞抑制率、凋亡及细胞周期。结果:MTT法测得汉黄芩素的IC50为24.7 mg.L-1,能够明显抑制SPC-A-1细胞的集落形成能力。汉黄... 目的:研究汉黄芩素对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖和周期的影响。方法:以不同浓度的汉黄芩素作用于SPC-A-1细胞,检测细胞抑制率、凋亡及细胞周期。结果:MTT法测得汉黄芩素的IC50为24.7 mg.L-1,能够明显抑制SPC-A-1细胞的集落形成能力。汉黄芩素作用于SPC-A-1细胞后,荧光倒置显微镜下观察到细胞凋亡的形态学改变。Annexin V-FITC/PI双标法证实汉黄芩素可以诱导SPC-A-1细胞凋亡,并具有剂量依赖性。流式细胞仪结果显示,不同浓度汉黄芩素使SPC-A-1细胞周期出现显著的变化,10,20 mg.L-1汉黄芩素可将周期阻滞在G0/G1期,30,40 mg.L-1汉黄芩素则使细胞周期堆积在S期,并且随着给药剂量的增加,凋亡峰显著升高。结论:汉黄芩素能明显抑制SPC-A-1细胞增殖,诱导细胞凋亡,并对细胞G0/G1和S期具有阻滞效应,具有抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 汉黄芩素 spc—A-1细胞 增殖 周期
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香烟烟雾提取物对人呼吸道上皮细胞DNA损伤和凋亡的影响 被引量:8
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作者 付强 成静 +7 位作者 韩中博 李小兰 陈小燕 张鹏 肖徽 陶德定 胡俊波 龚建平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1191-1197,共7页
背景与目的:香烟烟雾可以致多种细胞发生DNA损伤已有报道证实。本研究旨在进一步阐明香烟烟雾提取物(cigarettesmokeextract,CSE)作用于正常人类支气管上皮细胞系(normalhumanbronchialepithelialcells,NHBE)和肺腺癌细胞系SPC-A1后引起... 背景与目的:香烟烟雾可以致多种细胞发生DNA损伤已有报道证实。本研究旨在进一步阐明香烟烟雾提取物(cigarettesmokeextract,CSE)作用于正常人类支气管上皮细胞系(normalhumanbronchialepithelialcells,NHBE)和肺腺癌细胞系SPC-A1后引起的DNA损伤和凋亡情况。方法:不同浓度的CSE作用于NHBE和SPC-A1细胞,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测两种细胞活性。荧光标记的磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)抗体特异性标记细胞核内DNA双链断裂(DNAdouble-strandbreaks,DSBs)处的γ-H2AX,然后用流式细胞仪定量检测并分析DNA损伤。用免疫印迹检测γ-H2AX表达。同时,亚G1峰法(SubG1peak)和AnnexinⅤ-FITC/碘化丙啶双染色流式细胞术检测CSE诱导的细胞凋亡。用激光共聚焦显微镜观察细胞损伤和凋亡形态学变化。结果:MTT结果显示,随CSE浓度和作用时间增加,细胞活性均逐渐降低。CSE可引起细胞DNA双链断裂,γ-H2AX最大值在作用后4h左右,然后逐渐降低。DNA损伤后平均12h可以出现凋亡。另外,激光共聚焦显微镜观察到两种细胞内的γ-H2AX量在细胞受到CSE刺激后快速大量的积聚,呈现典型细胞损伤的形态学变化,较为明显的凋亡形态学特征4h后方可出现。结论:CSE能直接引起NHBE和SPC-A1细胞的DNA损伤和凋亡,且存在着浓度和时间依赖关系。 展开更多
关键词 肺肿瘤/化学诱导 香烟烟雾提取物/毒性 Γ-H2AX DNA损伤 凋亡 流式细胞术
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花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响 被引量:8
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作者 涂硕 韦星 +3 位作者 万福生 余乐涵 陈丽萍 杨香生 《江西医学院学报》 CAS 2005年第5期24-27,共4页
目的探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响。方法采用体外培养,细胞毒(MTT法)实验、荧光显微镜观察细胞形态变化、DNA琼脂糖凝胶电泳测定DNA ladder及流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化。结果花边莲提取液能够抑... 目的探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响。方法采用体外培养,细胞毒(MTT法)实验、荧光显微镜观察细胞形态变化、DNA琼脂糖凝胶电泳测定DNA ladder及流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化。结果花边莲提取液能够抑制SPC-A-1细胞增殖,且呈剂量依赖性;观察到凋亡细胞典型的形态和生化特征,花边莲提取液作用48 h,SPC-A-1细胞均呈现凋亡细胞所特有的亚二倍体峰(sub-G1),凋亡率随药物浓度增加而增高,并使细胞生长停滞在S期,从而阻滞细胞周期的进行。结论花边莲提取液对SPC-A-1细胞具有增殖抑制作用,并可诱导SPC-A-1细胞凋亡,其机制可能与细胞周期的S期阻滞有关。 展开更多
关键词 花边莲 肺癌细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡相关基因survivin和caspase-3表达的影响 被引量:7
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作者 韦星 万福生 +2 位作者 涂硕 余乐涵 杨香生 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期17-19,共3页
目的探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡相关基因survivin和caspase-3表达的影响。方法采用体外培养人肺癌SPC-A-1细胞,实验随机分为正常对照组、花边莲处理组(浓度分别为12.5,25和50 m l/L)和顺铂(DDp25mg/L)组,半定量RT-PCR检测... 目的探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡相关基因survivin和caspase-3表达的影响。方法采用体外培养人肺癌SPC-A-1细胞,实验随机分为正常对照组、花边莲处理组(浓度分别为12.5,25和50 m l/L)和顺铂(DDp25mg/L)组,半定量RT-PCR检测survivin和caspase-3 mRNA表达水平,二步法免疫组化检测Survivin和Caspase-3蛋白表达变化。结果与正常对照组相比,花边莲各浓度组caspase-3 mRNA和蛋白表达显著上升(P<0.01),survivin mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论花边莲提取液诱导SPC-A-1细胞凋亡的分子机理可能与上调caspase-3基因表达和下调survivin基因表达有关。 展开更多
关键词 花边莲 spc-A-1细胞 细胞凋亡 SURVIVIN caspase-3
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毛蕊异黄酮抑制肺腺癌细胞增殖和迁移的miR-21/PTEN信号通路机制研究 被引量:7
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作者 周立霞 关洪全 +2 位作者 王淳 马贤德 王丹 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第12期1595-1602,共8页
目的:探讨毛蕊异黄酮(CA)通过调控微RNA-21(miR-21)/人类第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)信号通路对肺腺癌细胞增殖和迁移的抑制作用机制。方法:以人肺腺癌SPC-A1细胞为对象,采用MTT法检测不同剂量CA(5、15、25、50、75... 目的:探讨毛蕊异黄酮(CA)通过调控微RNA-21(miR-21)/人类第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)信号通路对肺腺癌细胞增殖和迁移的抑制作用机制。方法:以人肺腺癌SPC-A1细胞为对象,采用MTT法检测不同剂量CA(5、15、25、50、75、100μg/mL)作用12、24、48、72 h后的细胞增殖情况,并计算细胞存活率、30%细胞生长抑制浓度(IC30)和半数抑制浓度(IC50);采用Transwell迁移试验检测低、中、高剂量CA(50、75、100μg/mL)作用24 h后的细胞迁移情况,记录染色细胞数并计算细胞迁移抑制率;采用蛋白质印迹法和实时聚合酶链反应法检测低、中、高剂量CA(50、75、100μg/mL)作用24 h后细胞miR-21以及PTEN、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白及其mRNA的表达情况;检测细胞在分别转染miR-21模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)后,CA(75μg/mL)对其miR-21及PETN、VEGF、MMP-9蛋白表达的影响。结果:经50、75、100μg/mLCA作用12、24、48 h,25、50、75、100μg/mL CA作用72 h后,细胞存活率均显著降低(P<0.05或P<0.01);12~72 h各时间点CA的IC30值分别为82.24、50.45、46.34、31.81μg/mL,IC50值分别为108.06、73.35、70.08、49.89μg/mL。与正常对照组比较,CA各剂量组染色细胞数,低剂量组细胞中VEGF蛋白以及中、高剂量组细胞中miR-21,VEGF、MMP-9蛋白及其mRNA的相对表达量均显著减少或降低,且中、高剂量组显著少于或低于低剂量组,高剂量组显著少于或低于中剂量组(P<0.05或P<0.01);CA各剂量组细胞迁移率以及中、高剂量组细胞中PTEN蛋白及其mRNA的相对表达量均显著升高,且中、高剂量组显著高于低剂量组,高剂量组显著高于中剂量组(P<0.05或P<0.01)。转染miR-21mimic后,miR-21mimic组细胞miR-21及VEGF、MMP-9蛋白的相对表达量均较正常对照组显著升高,PTEN蛋白的相对表达量显著降低(P<0.01);加入CA干预后,细胞中miR-21及VEGF、MMP-9蛋白的相对表达量均� 展开更多
关键词 毛蕊异黄酮 微RNA-21/人类第10 号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物信号通路 肺腺癌 spc-A1 细胞 增殖 迁移 抑制作用 机制
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STAT1在非小细胞肺癌中的表达及对IL-2抗肿瘤作用的影响
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作者 赵嘉璐 孙蕾 +2 位作者 蓝秀 熊雪芳 李伟文 《浙江医学》 CAS 2024年第12期1239-1244,1279,I0003,共8页
目的探讨信号转导和转录激活因子1(STAT1)在非小细胞肺癌中的表达及对IL-2抗肿瘤作用的影响。方法回顾性选取2018年1月至2020年1月丽水市中心医院20例非小细胞肺癌患者外科手术切除的肺癌组织标本及距离肿瘤组织5 cm以上正常肺组织标本... 目的探讨信号转导和转录激活因子1(STAT1)在非小细胞肺癌中的表达及对IL-2抗肿瘤作用的影响。方法回顾性选取2018年1月至2020年1月丽水市中心医院20例非小细胞肺癌患者外科手术切除的肺癌组织标本及距离肿瘤组织5 cm以上正常肺组织标本,采用Western blot法检测两种标本中STAT1蛋白表达水平。利用慢病毒载体Lenti-增强绿色荧光蛋白(EGFP)或Lenti-STAT1转染非小细胞肺癌SPC-A-1细胞,将细胞分为空白组、Lenti-EGFP对照组和Lenti-STAT1组。采用平板克隆实验观察细胞克隆形成率。不同浓度(0、20、100、500 U/mL)IL-2处理细胞后,采用细胞计数试剂盒法检测细胞增殖活性,Transwell法检测0、100 U/mL IL-2处理后细胞迁移和侵袭能力,流式细胞仪分析0、100 U/mL IL-2处理后细胞凋亡百分比。观察IL-2对3组细胞抗肿瘤作用的影响。采用Western blot法检测3组细胞磷酸化STAT1(p-STAT1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平。结果肺癌组织中STAT1蛋白表达水平低于正常组织(P<0.001)。Lenti-STAT1组细胞增殖活性、迁移和侵袭能力均低于Lenti-EGFP对照组,细胞凋亡百分比高于Lenti-EGFP对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。用20、100、500 U/mL IL-2处理后,Lenti-STAT1组细胞增殖均低于Lenti-EGFP对照组(均P<0.05)。用100 U/mL IL-2处理后,Lenti-STAT1组细胞迁移和侵袭能力均低于Lenti-EGFP对照组,Lenti-STAT1组细胞凋亡百分比高于Lenti-EGFP对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。此外,IL-2未处理的Lenti-STAT1组细胞p-STAT1蛋白表达水平高于Lenti-EGFP对照组,ICAM-1蛋白表达水平低于Lenti-EGFP对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。用100 U/mL IL-2处理后,Lenti-STAT1组细胞p-STAT1蛋白表达水平高于Lenti-EGFP对照组,PCNA蛋白表达水平低于Lenti-EGFP对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论STAT1在非小细胞肺癌组织中表达明显下调,可抑制 展开更多
关键词 信号转导和转录激活因子1 spc-A-1细胞 白细胞介素-2 肺癌
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毛蕊异黄酮对肺腺癌SPC-A1细胞生长及凋亡的影响 被引量:2
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作者 刘佳芹 周立霞 +1 位作者 陈文现 杨航 《海南医学》 CAS 2023年第7期913-918,共6页
目的建立肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤模型,探讨毛蕊异黄酮对肺腺癌移植瘤生长及凋亡的影响。方法30只裸鼠(6~8周龄)适应性饲养一周后,将制备好的SPC-A1细胞悬液(浓度为5×105个/mL)经腋下皮下注射,拟建造SPC-A1肺腺癌细胞移植瘤模型... 目的建立肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤模型,探讨毛蕊异黄酮对肺腺癌移植瘤生长及凋亡的影响。方法30只裸鼠(6~8周龄)适应性饲养一周后,将制备好的SPC-A1细胞悬液(浓度为5×105个/mL)经腋下皮下注射,拟建造SPC-A1肺腺癌细胞移植瘤模型;按照裸鼠的重量及瘤体的体积大小,随机分为模型组、毛蕊异黄酮组、顺铂组,每组6只;记录各组裸鼠实验前后的体质量、瘤重、瘤体横径和纵径,并分析各组裸鼠模型的肿瘤抑制率,测估SPC-A1裸鼠移植瘤的体积大小及生长状况;通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记(TUNEL)测定法测定SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的凋亡状况;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定各组瘤体中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平。结果顺利构建了肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的模型。与模型组比较,毛蕊异黄酮组裸鼠瘤的瘤重[(1.20±0.19)g vs(0.98±0.14)g]明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),且抑瘤率为18.33%,表明毛蕊异黄酮能有效抑制SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的生长;TUNEL法检测的各组裸鼠移植瘤细胞的凋亡结果分析表明,与模型组比较,毛蕊异黄酮组凋亡率[(10.00±0.82)%vs(32.43±1.99)%]明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),证实毛蕊异黄酮可有效诱导肺腺癌SPC-A1细胞的凋亡作用;Western blot结果显示,毛蕊异黄酮能明显上调促凋亡相关蛋白Bax的表达水平,同时能明显下调抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论毛蕊异黄酮能够明显抑制SPC-A1裸鼠移植瘤的生长并促进肺癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 裸鼠 毛蕊异黄酮 肺腺癌 spc-A1细胞 凋亡
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花边莲提取液诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及其分子机制的研究 被引量:5
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作者 韦星 杨香生 +2 位作者 涂硕 赵小曼 万福生 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2006年第12期1648-1650,共3页
目的:探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及其可能分子机制。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,TUNEL法检测凋亡率,二步法免疫组化检测野生型P53、Survivin、NF-κB P65和Bc l-2蛋白表达变化。结果:花边莲提取液能够抑制SPC-A-1... 目的:探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及其可能分子机制。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,TUNEL法检测凋亡率,二步法免疫组化检测野生型P53、Survivin、NF-κB P65和Bc l-2蛋白表达变化。结果:花边莲提取液能够抑制SPC-A-1细胞增殖,且呈一定剂量—时间依赖性;随着药物浓度上升细胞凋亡率明显增高(P<0.01);P53蛋白表达显著上升(P<0.01),Survivin、NF-κB和Bc l-2蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论:花边莲取液能诱导SPC-A-1细胞凋亡,其分子机制可能与上调野生型P53蛋白表达和下调Survivin、NF-κB P65和Bc l-2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 花边莲 spc—A-1细胞 细胞凋亡 P^53 Survivin NF—κB P^65 Bcl-2
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LncRNA H19通过海绵miR-675和上调CDH13的表达促进肺癌的增殖、侵袭和上皮-间质转化 被引量:4
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作者 杜伟 王山水 张焕焕 《西部医学》 2022年第8期1121-1127,1132,共8页
目的探讨LncRNA H19对肺癌SPC-A1细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR检测LncRNA H19、miR-675和CDH13在SPC-A1细胞、BEAS-2B细胞中的差异表达;siRNA H19转染SPC-A1细胞,通过MTT、Transwell及We... 目的探讨LncRNA H19对肺癌SPC-A1细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR检测LncRNA H19、miR-675和CDH13在SPC-A1细胞、BEAS-2B细胞中的差异表达;siRNA H19转染SPC-A1细胞,通过MTT、Transwell及Western blot检测SPC-A1细胞的增殖、侵袭和EMT能力。miRanda软件和双荧光素酶报告基因实验分析LncRNA H19和miR-675之间的作用靶点和相关性。miR-675 inhibitor转染SPC-A1细胞,检测SPC-A1细胞的增殖、侵袭和EMT能力。检测上调LncRNA H19通过miR-675对SPC-A1细胞增殖、侵袭和EMT的影响。TargetScan软件和双荧光素酶报告基因实验分析miR-675和CDH13之间的作用靶点和相关性。siRNA CDH13转染SPC-A1细胞,检测SPC-A1细胞的增殖、侵袭和EMT能力。RT-qPCR和Western blot检测LncRNA H19通过miR-675对CDH13表达的影响。结果与BEAS-2B细胞相比,SPC-A1细胞中LncRNA H19和CDH13表达上调,miR-675表达下调(P<0.05)。siRNA H19转染SPC-A1细胞明显抑制了细胞的增殖、侵袭与EMT;LncRNA H19靶向且负调控miR-675;上调LncRNA H19通过miR-675表达促进SPC-A1细胞恶性发展。miR-675靶向且负调控CDH13。siRNA CDH13转染SPC-A1细胞明显抑制了细胞的增殖、侵袭与EMT。LncRNA H19通过miR-675上调CDH13表达。结论LncRNA H19通过海绵miR-675和上调CDH13表达促进了SPC-A1细胞增殖、侵袭和EMT。 展开更多
关键词 Lnc RNA H19 miR-675 CDH13 spc-A1细胞 增殖 侵袭
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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对肺癌SPC—A1细胞和非小细胞肺癌组织中抑癌基因甲基化的作用 被引量:4
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作者 方汉林 于在诚 +1 位作者 祝会斌 金永堂 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期658-663,共6页
目的观察分泌型卷曲相关篮白1(SFRP1)基凶在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的甲基化状态,研究抑甲基化制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza—CdR)对肺癌SPC—A1细胞中SFRP1、p16和O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因甲基化的影响... 目的观察分泌型卷曲相关篮白1(SFRP1)基凶在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的甲基化状态,研究抑甲基化制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza—CdR)对肺癌SPC—A1细胞中SFRP1、p16和O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因甲基化的影响。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)法和免疫组化sP法,检测60例NSCLC组织中SFRPl基因甲基化的状态和蛋白的表达,以21例肺良性病变组织作为对照。以5-Aza—CdR处理肺癌SPC—A1细胞,采用MSP法和RT—PCR法检测处理前后细胞中SFRP1、p16和MGMT基因的甲基化状态及相应mRNA的表达。结果SFRP1基因在60例NSCLC组织中的甲基化率为58.3%,明显高于肺良性病变组织(14.3%;X2=12.118,P=0.001);SFRP1基因的甲基化与NSCLC的分化程度和淋巴结转移情况有关(均P〈0.05)。SFRP1蛋白在35例SFRPI基因甲基化的NSCLC组织中的阴性表达率为68.6%,明显高于非甲基化的NSCLC组织(24.0%;x2=9.613,P=0.002);SFRPl蛋白的阴性表达与NSCLC的分化程度、临床分期以及淋巴结转移情况有关(均P〈0.05)。末用5-Aza—CdR处理时,SPC—A1细胞中SFRPI、p16和MGMT基因甲基化和mRNA的表达甚很低;应用不同浓度的5-Aza—dCR处理后,SPC—A1细胞中SFRP1、p16和MGMT基凶甲基化和mRNA的表达均显著上调(均P〈0.05)。结论SFRPl基因的甲基化与NSCI.C的发生发展密切相关;5-Aza—CdR能逆转SFRPI、p16和MGMT基凶的甲基化状态,促进其重新表达。 展开更多
关键词 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 非小细胞肺 spc—A1细胞 分泌型卷曲相关蛋白1 DNA甲基化
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丙戊酸钠对人肺癌SPC-A1细胞的增殖抑制作用及其机制 被引量:4
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作者 黄志宏 陈庆 +4 位作者 马刘红 陈志明 陈文朴 覃莉 蒋建伟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期606-609,共4页
目的探讨丙戊酸钠对人肺癌SPC-A1细胞的增殖抑制作用及其机制。方法采用MTT法及克隆形成抑制实验观察丙戊酸钠对肺癌SPC-A1细胞的增殖抑制作用,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞早期凋亡水平,Western blotting检测细胞抗凋亡蛋... 目的探讨丙戊酸钠对人肺癌SPC-A1细胞的增殖抑制作用及其机制。方法采用MTT法及克隆形成抑制实验观察丙戊酸钠对肺癌SPC-A1细胞的增殖抑制作用,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞早期凋亡水平,Western blotting检测细胞抗凋亡蛋白Bcl-xl,Bcl-2,Mcl-1及Caspase-9,Caspase-3表达的改变。结果不同浓度的丙戊酸钠作用于肺癌SPC-A1细胞48 h,均能显著抑制细胞增殖,SPC-A1细胞的IC50为1.8 mmol/L;丙戊酸钠能显著抑制SPC-A1细胞克隆形成,且导致显著的细胞凋亡,8 mmol/L的丙戊酸钠作用细胞48 h,细胞早期凋亡率达60.44%,细胞抗凋亡蛋白Bcl-xl,Bcl-2,Mcl-1表达减少,Caspase-9,Caspase-3蛋白酶切活化。结论丙戊酸钠通过诱导细胞凋亡,显著抑制肺癌SPC-A1细胞的增殖。 展开更多
关键词 丙戊酸钠 凋亡 肺癌 spc-A1细胞
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双氢青蒿素诱导肺癌SPC-A-1细胞周期阻滞的研究 被引量:4
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作者 穆德广 戚好文 +1 位作者 金发光 孙瑞琳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第3期372-374,共3页
目的:探讨双氢青蒿素对肺癌SPC-A-1细胞周期的阻滞作用及介导其周期阻滞的机制。方法:双氢青蒿素处理SPC-A-1细胞,PCR及免疫印迹检测生存素表达情况,基因转染建立生存素高表达SPC-A-1细胞,采用流式细胞术检测细胞周期变化。结果:双氢青... 目的:探讨双氢青蒿素对肺癌SPC-A-1细胞周期的阻滞作用及介导其周期阻滞的机制。方法:双氢青蒿素处理SPC-A-1细胞,PCR及免疫印迹检测生存素表达情况,基因转染建立生存素高表达SPC-A-1细胞,采用流式细胞术检测细胞周期变化。结果:双氢青蒿素可以诱导SPC-A-1细胞G2/M期周期阻滞,生存素表达下调,生存素高表达拮抗双氢青蒿素诱导的SPC-A-1细胞G2/M期周期阻滞。结论:生存素参与介导双氢青蒿素诱导的SPC-A-1细胞G2/M周期阻滞。 展开更多
关键词 肺肿瘤 双氢青蒿素 spc—A—1细胞 周期阻滞 生存素
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三草方不同极性部位及其配伍后对人肺腺癌SPC-A-1细胞的影响研究 被引量:3
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作者 邵振中 贾晓斌 +2 位作者 陈彦 封亮 施峰 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期581-583,共3页
目的:研究三草方的不同极性部位及其配伍后对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖活性的影响,筛选出最有效的抗癌部位,确定最合适的配伍方案。方法:采用醇提取法和水提取法分别制备三草方的95%、60%、30%醇提部位、水提部位和复方水煎液;以MTT法测... 目的:研究三草方的不同极性部位及其配伍后对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖活性的影响,筛选出最有效的抗癌部位,确定最合适的配伍方案。方法:采用醇提取法和水提取法分别制备三草方的95%、60%、30%醇提部位、水提部位和复方水煎液;以MTT法测定水煎液和各不同极性部位及其配伍后对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖活性的影响。结果:在三草方各极性部位中,60%醇提部位对人肺腺癌SPC-A-1细胞的IC50最低;60%和95%醇提部位配伍后有明显的协同抑瘤活性。结论:三草方95%和60%醇提部位之间的配伍为最合适的配伍方案;三草方的脂溶性部位具有良好的抗肺癌应用前景。 展开更多
关键词 三草方 极性部位 配伍 人肺腺癌spc-A-1细胞
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F-01A,an antibiotic,inhibits lung cancer cells proliferation 被引量:2
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作者 WANG Jing WU Xiao-Peng +3 位作者 SONG Xin-Ming HAN Chang-Ri CHEN Zhong CHEN Guang-Ying 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2014年第4期284-289,共6页
AIM: In an effort to identify novel, small molecules which can affect the proliferation of lung cancer cells, F-01A, a polyether antibiotic isolated from the fermentation broth of Streptomyces was tested. METHOD: F-01... AIM: In an effort to identify novel, small molecules which can affect the proliferation of lung cancer cells, F-01A, a polyether antibiotic isolated from the fermentation broth of Streptomyces was tested. METHOD: F-01A was tested for its antitumor properties on the lung cancer cell line SPC-A-1, at six doses(0.1, 0.5, 1, 2.5, and 5 μmol·L-1), using various cellular assays. Cell viability was measured by the MTT assay, Hochest 33258 was used to study nuclear morphology; DNA ladder and the loss of mitochondrial membrane potential were also evaluated. RESULTS: F-01A induces apoptosis against SPC-A-1 cells in a dose-dependent manner. The IC50 is 0.65 μmol·L-1, and the inhibition at 5 μmol·L-1 is 87.89%. Further, JC-1 staining indicates F-01A could induce the loss of mitochondrial membrane potential, and the DNA fragment is evident. CONCLUSION: Mechanistic analysis showed that F-01A induced apoptosis of cancer cells probably in the mitochondrial pathway. The antitumor actions of F-01A involve activation of the apoptotic pathway against SPC-A-1 cells, and it may be valuable for further drug development. 展开更多
关键词 APOPTOSIS Membrane potential spc-A-1 cells Polyether antibiotic
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扶肺煎抑制肺癌增殖和转移的体内外研究 被引量:1
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作者 陈观平 汪一帆 应栩华 《广州中医药大学学报》 CAS 2021年第5期1009-1017,共9页
【目的】观察扶肺煎对肺癌增殖和转移的抑制作用。【方法】(1)体外研究:制备扶肺煎含药血清,以信号转导与转录激活因子(STAT3)抑制剂AG490、顺铂为阳性对照药,培养人肺癌A549、SPC-A1细胞,采用细胞计数试剂盒8(CCK8)法测定细胞增殖情况... 【目的】观察扶肺煎对肺癌增殖和转移的抑制作用。【方法】(1)体外研究:制备扶肺煎含药血清,以信号转导与转录激活因子(STAT3)抑制剂AG490、顺铂为阳性对照药,培养人肺癌A549、SPC-A1细胞,采用细胞计数试剂盒8(CCK8)法测定细胞增殖情况,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Transwell实验观察细胞体外侵袭能力,蛋白免疫印迹法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白的表达。(2)体内研究:取48只SPF级雄性C57BL/6小鼠,建立Lewis肺癌移植瘤模型,给予不同剂量扶肺煎、顺铂(阳性对照药)灌胃,第15天处死小鼠并剥离肺脏观察转移灶情况,将移植瘤称质量,计算抑瘤率及肺转移抑制率,并采用免疫组织化学法检测移植瘤组织Cyclin D1、CDK4、p-STAT3表达。【结果】扶肺煎组的A549、SPC-A1细胞增殖能力、迁移及侵袭能力均低于空白对照组,接近AG490及顺铂处理水平。在体内,扶肺煎高剂量组、顺铂组的抑瘤率分别为26.67%、52.53%,肺转移抑制率分别达到了28.76%、33.82%,且各给药组p-STAT3、Cyclin D1、CDK4表达水平均有所下降(P <0.05或P <0.01)。【结论】扶肺煎可通过抑制STAT3蛋白的活化,降低Cyclin D1、CDK4的表达,起到控制肿瘤细胞生长及分化的作用,从而干预肺癌转移的形成。 展开更多
关键词 扶肺煎 肺癌 侵袭 转移 STAT3信号通路 A549细胞 spc-A1细胞 Lewis荷瘤小鼠
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舟山黄海葵粗提物抗人肺癌SPC-A1细胞的活性研究 被引量:1
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作者 张亚茹 罗李王 +4 位作者 杨最素 赵玉勤 余方苗 王飞 丁国芳 《中国药房》 CAS 北大核心 2015年第28期3947-3950,共4页
目的:研究舟山黄海葵(黄海葵)粗提物体外抗人肺癌SPC-A1细胞的活性。方法:通过反复冻融、丙酮沉淀等方法制备黄海葵粗提物。以质量浓度分别为0(空白对照)、0.625、1.25、2.5 mg/ml的黄海葵粗提物作用于SPC-A1细胞24、48、72 h后,采用MT... 目的:研究舟山黄海葵(黄海葵)粗提物体外抗人肺癌SPC-A1细胞的活性。方法:通过反复冻融、丙酮沉淀等方法制备黄海葵粗提物。以质量浓度分别为0(空白对照)、0.625、1.25、2.5 mg/ml的黄海葵粗提物作用于SPC-A1细胞24、48、72 h后,采用MTT法测定细胞活力,计算增殖抑制率、半数抑制浓度(IC50);24 h后分别通过HE染色、AO/EB荧光染色观察SPC-A1细胞形态学变化。结果:MTT法测定结果表明,黄海葵粗提物对人肺癌SPC-A1细胞具有显著的增殖抑制作用,随着黄海葵粗提物质量浓度的增加以及作用时间的延长,其对SPC-A1细胞的抑制率逐渐增高;作用24、48、72 h后的IC50分别为1.81、1.32、1.18 mg/ml;HE、AO/EB染色结果显示,相较于空白对照组,加药组细胞出现了细胞形态缩小、胞质内出现空泡、核固缩和核消失等明显的凋亡形态学改变。结论:舟山黄海葵粗提物对人肺癌SPC-A1细胞的增殖具有抑制作用。 展开更多
关键词 黄海葵粗提物 spc-A1细胞 增殖 凋亡
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TSA诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡的研究 被引量:1
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作者 伍俊 梁标 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期530-533,共4页
目的研究trichostatin A(TSA)诱导肺癌细胞系SPC-A-1细胞凋亡。方法 MTT法测定TSA对SPC-A-1的细胞毒性,荧光显微镜观察细胞DNA的变化,琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡,流式细胞仪分析细胞周期及线粒体膜电位的变化。结果 TSA对SPC-A-1细胞的... 目的研究trichostatin A(TSA)诱导肺癌细胞系SPC-A-1细胞凋亡。方法 MTT法测定TSA对SPC-A-1的细胞毒性,荧光显微镜观察细胞DNA的变化,琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡,流式细胞仪分析细胞周期及线粒体膜电位的变化。结果 TSA对SPC-A-1细胞的IC_(50)为3.36μg/mL。SPC-A-1细胞生长曲线表明,TSA浓度增高,细胞生长率明显下降,细胞凋亡可在1~16μg/mL TSA处理后24h出现。凋亡细胞主要表现为核染色质固缩,荧光染色增强,琼脂糖凝胶电泳图谱呈现“梯子状”电泳。TSA阻断细胞于G_1期。线粒体膜电位降低。结论 YSA可以诱导SPC-A-1细胞发生凋亡,途径可能是通过线粒体旁路。 展开更多
关键词 肺肿瘤 组蛋白乙酰基酶类 TRICHOSTATIN A 细胞凋亡 细胞周期 spc—A-1细胞
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