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洛铂诱导顺铂耐药卵巢癌SKOV3/DDP细胞的凋亡 被引量:18
1
作者 刘萍萍 张灿珍 王羽丰 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期829-832,894,共5页
目的探讨洛铂体外诱导人卵巢癌顺铂耐药SKOV3/DDP细胞凋亡及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度和时间洛铂对SKOV3/DDP细胞的生长抑制作用,并与其亲本细胞SKOV3(敏感株)相比较;进一步通过光镜及透射电镜观察SKOV3/DDP... 目的探讨洛铂体外诱导人卵巢癌顺铂耐药SKOV3/DDP细胞凋亡及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度和时间洛铂对SKOV3/DDP细胞的生长抑制作用,并与其亲本细胞SKOV3(敏感株)相比较;进一步通过光镜及透射电镜观察SKOV3/DDP细胞的形态学改变;并采用流式细胞仪检测细胞周期变化。结果洛铂作用SKOV3/DDP细胞的增殖呈时间剂量依赖模式受到抑制,与SKOV3细胞相比,差异无统计学意义(P>0.05);一定浓度的SKOV3/DDP作用一定时间,可诱导SKOV3/DDP细胞发生凋亡;光镜和透射电镜下可见典型的凋亡细胞形态学改变;流式细胞技术分析发现洛铂作用首先引起细胞周期分布的改变,随用药时间的延长,凋亡率逐渐升高。结论洛铂通过诱导凋亡而抑制体外培养的SKOV3/DDP细胞生长,其机制可能与细胞G0/G1期阻滞有关。 展开更多
关键词 洛铂(乐铂) 卵巢肿瘤 细胞凋亡 skov3 skov3/ddp
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奈达铂体外诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞凋亡的机制 被引量:4
2
作者 王莉 刘汉锋 +2 位作者 蔡正文 蓝东 覃海园 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1216-1220,共5页
目的探讨研究奈达铂(NDP)体外对人卵巢癌顺铂原发耐药细胞株SKOV3和继发耐药株SK-OV3/DDP的抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测体外不同时间不同浓度的NDP对SKOV3及SKOV3/DDP细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FCM)... 目的探讨研究奈达铂(NDP)体外对人卵巢癌顺铂原发耐药细胞株SKOV3和继发耐药株SK-OV3/DDP的抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测体外不同时间不同浓度的NDP对SKOV3及SKOV3/DDP细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FCM)测定给药前后细胞凋亡率及周期分布变化;半定量PCR分析凋亡基因Bcl-2,Bax,caspase-3,caspase-9及反应肿瘤细胞侵袭力的基因MMP-2的表达变化。结果 NDP能明显抑制SKOV3及SKOV3/DDP生长,呈时间-剂量依赖性;流式结果显示随时间、浓度增加,SKOV3和SKOV3/DDP细胞凋亡明显增加,S期细胞的比例增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,Bcl-2、MMP-2表达减少,Bax,caspase-3,caspase-9表达增加。结论 NDP可抑制SKOV3和SKOV3/DDP细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡,细胞S期阻滞,下调Bcl-2及上调Bax,caspase-3,caspase-9的表达有关;同时可下调MMP-2的表达,有利于降低卵巢癌细胞的侵袭力。 展开更多
关键词 奈达铂 skov3 skov3/ddp 细胞凋亡 顺铂耐药
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PI-103对人卵巢癌细胞株SKOV3/DDP顺铂化疗效果的影响 被引量:6
3
作者 刘俊 蔡云朗 +2 位作者 任慕兰 吴迪 曾娅 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2013年第5期574-579,共6页
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双抑制剂PI-103对卵巢癌耐顺铂株SKOV3/DDP顺铂化疗效果的影响。方法:将PI-103、顺铂及两者联合分别作用于SKOV3/DDP细胞,采用CCK-8法检测细胞生长情况,流式细胞技术检测... 目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双抑制剂PI-103对卵巢癌耐顺铂株SKOV3/DDP顺铂化疗效果的影响。方法:将PI-103、顺铂及两者联合分别作用于SKOV3/DDP细胞,采用CCK-8法检测细胞生长情况,流式细胞技术检测药物单独或联合作用对细胞凋亡的影响;应用Western blot检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、核糖体蛋白(rpS6)、磷酸化rpS6(p-rpS6)以及凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax蛋白表达变化。结果:PI-103能够抑制SKOV3/DDP细胞增殖,且呈浓度、时间依赖性;联合用药可以明显增加对细胞生长抑制和凋亡作用。PI-103能下调Akt和rpS6的磷酸化水平,促DDP上调Bax和下调Bcl-2的表达。结论:PI-103抑制PI3K/Akt/mTOR信号传导通路,促DDP上调促凋亡蛋白及下调抗凋亡蛋白的表达,从而抑制癌细胞生长,诱导其凋亡,增加卵巢癌耐顺铂株SKOV3/DDP细胞对DDP的化疗效果。 展开更多
关键词 PI-103 人卵巢浆液性乳头状囊腺癌顺铂耐药细胞株 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B 哺乳动物 雷帕霉素靶体蛋白信号通路 顺铂
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重楼皂苷Ⅶ与二氧化硅纳米复合体对卵巢癌耐药性的体外影响 被引量:4
4
作者 杨瑞琦 戚洁 +2 位作者 张嘉玲 王飞 范丽梅 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期1859-1861,共3页
目的 探讨重楼皂苷Ⅶ联合二氧化硅纳米复合体对于卵巢癌的耐药性.方法 应用MTT法测定重楼皂苷Ⅶ联合二氧化硅纳米复合体对人卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP的增殖抑制率;流式细胞术和Hoechst 33342染色法检测重楼皂苷Ⅶ联合二氧化硅纳米复合... 目的 探讨重楼皂苷Ⅶ联合二氧化硅纳米复合体对于卵巢癌的耐药性.方法 应用MTT法测定重楼皂苷Ⅶ联合二氧化硅纳米复合体对人卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP的增殖抑制率;流式细胞术和Hoechst 33342染色法检测重楼皂苷Ⅶ联合二氧化硅纳米复合体对人卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP的细胞凋亡率及细胞周期时相分布的影响;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的表达改变.结果 重楼皂苷Ⅶ对SKOV3/DDP细胞的增殖有明显抑制作用,抑制率随药物浓度增加而增高,具有明显的量-效关系(P<0.05).重楼皂苷Ⅶ、二氧化硅纳米复合体对SKOV3/DDP细胞作用48、24 h组比较细胞增殖抑制率均明显提高(P<0.05).Hoechst 33342染色结果显示,50及100μmol/L的重楼皂苷Ⅶ作用SKOV3/DDP细胞24 h后,不同剂量均能引起细胞出现凋亡的典型表现,即细胞核的深染、凝集和固缩.与阴性对照组比较早期凋亡细胞比例明显增高.蛋白灰度分析结果,与对照组比24 h重楼皂苷Ⅶ处理SKOV3/DDP细胞,50和100 μmol/L剂量组组裂解caspase 3分别增高了5.71倍和11.06倍,Bcl-2表达分别下降了33.3%和61.1%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 重楼皂苷Ⅶ、二氧化硅纳米复合体对SKOV3/DDP增殖有明显抑制作用,呈明显的浓度依赖性,与时间有相关性,它可引起早期凋亡SKOV3/DDP细胞比例显著增加. 展开更多
关键词 重楼皂苷Ⅶ 人卵巢癌耐药细胞 skov3/ddp 细胞增殖
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Vandetanib对人卵巢癌细胞抑制作用机制探讨 被引量:2
5
作者 宋文爽 叶元 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第20期1589-1593,共5页
目的探讨Vandetanib对人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞株SKOV3和卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的增殖抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测体外不同时间不同浓度的Vandetanib对SKOV3及SKOV3/DDP细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度(IC50);流... 目的探讨Vandetanib对人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞株SKOV3和卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的增殖抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测体外不同时间不同浓度的Vandetanib对SKOV3及SKOV3/DDP细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测药物对细胞凋亡及其周期分布变化;采用蛋白质印迹法分析凋亡基因Bcl-2、Bax及反映肿瘤细胞侵袭力的基因MMP-2的蛋白表达变化。结果与对照组相比,Vandetanib能明显抑制SKOV3和SKOV3/DDP生长,呈时间-剂量依赖性,IC50值均呈明显减小趋势。32μmol/L的Vandetanib作用SKOV3和SKOV3/DDP 72h后,抑制率分别为(43.21±0.92)%和(56.74±1.09)%,64μmol/L的Vandetanib作用SKOV3和SKOV3/DDP72h后,抑制率分别为(55.37±1.21)%和(79.20±0.39)%,耐药株SKOV3/DDP的抑制率明显高于敏感株SKOV3,差异有统计学意义,P<0.05。流式细胞术结果显示,随时间浓度的增加,两种细胞凋亡明显增加,G1期细胞增加,S期和G2期细胞减少,差异有统计学意义,P<0.05。蛋白印迹法结果显示,药物作用于SKOV3细胞株Bcl-2、MMP-2表达减少,Bax表达无明显变化;药物作用于SKOV3/DDP细胞株Bcl-2表达减少,Bax表达增加,耐药株不表达MMP-2。结论 Vandetanib对两种细胞株生长有明显的呈时间及浓度依赖性的抑制作用,可以诱导细胞凋亡并将细胞阻滞于G1期,其机制与下调Bcl-2/Bax、MMP-2表达有关,有利于降低卵巢癌细胞的侵袭力。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 VANDETANIB skov3 skov3/ddp BCL-2/BAX 细胞凋亡 流式细胞术
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ERCC1基因表达与磁性Fe_3O_4纳米颗粒逆转卵巢癌细胞耐药性的关系 被引量:3
6
作者 居蓉 刘嘉茵 姜智 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期312-315,共4页
目的探讨磁性Fe3O4纳米颗粒(Fe3O4-MNPs)逆转人卵巢癌顺铂耐药细胞株(SKOV3/DDP)的耐药性的可能性及其机理。方法将SKOV3/DDP分为对照组、顺铂组、Fe3O4-MNPs组、顺铂+Fe3O4-MNPs组等4个组,流式细胞技术测定细胞凋亡、电感耦合等离子体... 目的探讨磁性Fe3O4纳米颗粒(Fe3O4-MNPs)逆转人卵巢癌顺铂耐药细胞株(SKOV3/DDP)的耐药性的可能性及其机理。方法将SKOV3/DDP分为对照组、顺铂组、Fe3O4-MNPs组、顺铂+Fe3O4-MNPs组等4个组,流式细胞技术测定细胞凋亡、电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测细胞内顺铂的含量,及RT-PCR检测切除DNA修复基因ERCC1 mRNA在SKOV3/DDP中的表达。结果在顺铂+Fe3O4-MNPs组中,细胞凋亡率及细胞内铂含量均高于顺铂组(P<0.05);ERCC1 mRNA的表达明显低于顺铂组(P<0.05)。结论Fe3O4-MNPs可以逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性,其作用可能是通过提高细胞内铂浓度、下调ERCC1表达来逆转SKOV3/DDP对顺铂的耐药。 展开更多
关键词 磁性纳米Fe3O4颗粒 skov3/ddp 耐药逆转 ERCC1基因
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雷公藤多苷增强耐顺铂人上皮性卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂敏感性的体外研究 被引量:3
7
作者 刘文成 谭布珍 +3 位作者 占欣璐 胡辉 黄根华 曹青 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2017年第12期1364-1370,共7页
目的:探讨雷公藤多苷(GTW)对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株(SKOV3/DDP)的顺铂(DDP)增敏作用及机制。方法:将对数生长期的SKOV3/DDP细胞随机分为8组:空白对照组、10μg/mL DDP组、50μg/mL GTW组、800μg/mL GTW组、3 200μg/mL GTW组、10... 目的:探讨雷公藤多苷(GTW)对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株(SKOV3/DDP)的顺铂(DDP)增敏作用及机制。方法:将对数生长期的SKOV3/DDP细胞随机分为8组:空白对照组、10μg/mL DDP组、50μg/mL GTW组、800μg/mL GTW组、3 200μg/mL GTW组、10μg/mL DDP+50μg/mL GTW组、10μg/mL DDP+800μg/mL GTW组、10μg/mL DDP+3 200μg/mL GTW组,利用CCK-8法、流式细胞术、Western blot法检测各组细胞生长、细胞凋亡以及细胞谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)基因蛋白、P-糖蛋白(MDR1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3的表达。结果:DDP与GTW联用在抑制SKOV3/DDP细胞生长作用上呈现相加效应;800、3 200μg/mL GTW分别与10μg/mL DDP联用后,可显著促进SKOV3/DDP细胞凋亡,下调p-STAT3的表达(P<0.05)。结论:GTW可显著增强SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能是下调STAT3信号通路中的p-STAT3表达。 展开更多
关键词 雷公藤多苷 skov3/ddp 顺铂 增敏作用 STAT3
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磁性纳米四氧化三铁颗粒对卵巢癌细胞株SKOV3/DDP耐药的逆转作用 被引量:3
8
作者 吉金萍 姜智 +1 位作者 陈宝安 夏国华 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2012年第10期196-198,共3页
目的探讨磁性纳米四氧化三铁颗粒(Fe3O4-MNPs)逆转人卵巢癌顺铂耐药细胞株(SKOV3/DDP)耐药性的机制。方法将SKOV3/DDP细胞分为对照组、顺铂(DDP)组、Fe3O4-MNPs组和DDP+Fe3O4-MNPs组,用Westernblot方法检测P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药相关蛋... 目的探讨磁性纳米四氧化三铁颗粒(Fe3O4-MNPs)逆转人卵巢癌顺铂耐药细胞株(SKOV3/DDP)耐药性的机制。方法将SKOV3/DDP细胞分为对照组、顺铂(DDP)组、Fe3O4-MNPs组和DDP+Fe3O4-MNPs组,用Westernblot方法检测P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药相关蛋白(LRP)和多耐药相关蛋白1(MRP1),电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP)法测定细胞内铂含量。结果 DDP+Fe3O4-MNPs组P-gp、LRP和MRP1蛋白表达水平较DDP组下降明显(P<0.05)。DDP+Fe3O4-MNPs组细胞内铂含量明显高于DDP组(P<0.05)。结论 Fe3O4-MNPs逆转耐药的作用机制可能与Fe3O4-MNPs促进DDP进入细胞内,下调P-gp、LRP和MRP1蛋白表达,提高细胞内DDP浓度有关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 抗药性 肿瘤 磁性纳米四氧化三铁颗粒 skov3/ddp
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hMLH1基因对人卵巢癌耐药细胞株顺铂敏感性的研究 被引量:2
9
作者 舒丹 曾飚 +2 位作者 何华 李渊渊 钟玲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期2527-2529,共3页
目的探讨错配修复基因hMLH1对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP顺铂耐药的逆转作用及其机制。方法分别用重组质粒pcDNA3.1-hMLH1和空质粒pcDNA3.1转染SKOV3/DDP细胞。RT-PCR和Western blot检测hMLH1的表达。MTT检测转染前后SKOV3/DDP细胞对... 目的探讨错配修复基因hMLH1对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP顺铂耐药的逆转作用及其机制。方法分别用重组质粒pcDNA3.1-hMLH1和空质粒pcDNA3.1转染SKOV3/DDP细胞。RT-PCR和Western blot检测hMLH1的表达。MTT检测转染前后SKOV3/DDP细胞对顺铂敏感性的变化。经顺铂DDP作用后,流式细胞术和Westernblot法检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,瞬时转染24h后,SKOV3/DDP细胞中hMLH1 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05)。MTT结果显示,转染细胞的IC50值(13.95±2.45)较未转染的细胞(94.16±5.18)明显减小。流式细胞仪和Westernblot检测结果表明,顺铂作用24h后,转染了重组质粒的耐药细胞的凋亡率提高到(33.33±2.31)%,同时凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达受到抑制(1.35±0.39),与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 hMLH1基因能增强卵巢癌耐药细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与降低该耐药细胞内Bcl-2的表达水平,促进细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 错配修复 HMLH1 卵巢癌 skov3/ddp 耐药
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干扰LRP16基因表达对人卵巢癌耐药SKOV3/DDP细胞耐药性的影响及机制研究 被引量:2
10
作者 于丹 伍志强 +3 位作者 梅倩 韩为东 丁佳佳 孟元光 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第14期2606-2610,2640,共6页
目的:探究干扰人白血病相关蛋白16(LRP16)基因表达对人卵巢癌耐药SKOV3/DDP细胞耐药性的影响及其相关机制。方法:采用Real-time PCR和蛋白免疫印迹(WB)检测LRP16在敏感组(SKOV3细胞)、耐药组(SKOV3/DDP细胞)、LRP16干扰组(SKOV3/DDP细胞... 目的:探究干扰人白血病相关蛋白16(LRP16)基因表达对人卵巢癌耐药SKOV3/DDP细胞耐药性的影响及其相关机制。方法:采用Real-time PCR和蛋白免疫印迹(WB)检测LRP16在敏感组(SKOV3细胞)、耐药组(SKOV3/DDP细胞)、LRP16干扰组(SKOV3/DDP细胞-稳定转染LRP16 shRNA质粒)和NC组(即阴性对照组,SKOV3/DDP细胞-稳定转染阴性对照质粒)细胞中的表达情况;MTT试验检测LRP16对SKOV3/DDP细胞耐药性的影响;彗星试验检测LRP16对顺铂(DDP)诱导DNA损伤的影响;流式细胞术(FCM)试验检测细胞凋亡变化;WB试验检测PTEN、p-Akt和NF-κB蛋白表达水平。结果:LRP16干扰组细胞的耐药指数(RI)值(3.19±0.21)显著低于耐药组细胞(6.84±0.37)(P<0.05)。DDP(25μmol/L)处理24 h后,LRP16干扰组DNA损伤的细胞百分比、细胞凋亡百分比均显著低于耐药组和NC组(P均<0.05),而耐药组和NC组比较差异无统计学意义(P>0.05);LRP16干扰组细胞PTEN蛋白相对表达量高于耐药组和NC组(P均<0.05),而p-Akt和NF-κB相对表达量低于耐药组和NC组(P均<0.05)。结论:干扰LRP16基因表达可逆转卵巢癌耐药SKOV3/DDP细胞的耐药性,PTEN/Akt/NF-κB可能是其中的关键信号通路。 展开更多
关键词 LRP16 卵巢癌 耐药 skov3/ddp
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Beclin1表达抑制SKOV3/DDP细胞增殖机制探讨 被引量:2
11
作者 孙阳 刘佳华 +2 位作者 晋龙 眭玉霞 赖力 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第17期1329-1333,共5页
目的:探讨自噬基因Beclin1通过影响血管生成素的表达对SKOV3/DDP细胞增殖抑制的可能机制。方法:脂质体包裹重组构建pcDNA3.1-Beclin1和pSUPER-Beclin1质粒后,分别体外转染SKOV3/DDP细胞,并筛选稳定表达株,通过实时荧光定量RT-PCR检测不... 目的:探讨自噬基因Beclin1通过影响血管生成素的表达对SKOV3/DDP细胞增殖抑制的可能机制。方法:脂质体包裹重组构建pcDNA3.1-Beclin1和pSUPER-Beclin1质粒后,分别体外转染SKOV3/DDP细胞,并筛选稳定表达株,通过实时荧光定量RT-PCR检测不同细胞株中Beclin1、Ang-1、Ang-2及Tie-2受体mRNA表达,蛋白质印迹法检测Beclin1、Ang-1、Ang-2及Tie-2蛋白水平变化,MTT法测定细胞生长增殖情况。结果:pcDNA3.1-Bec组Beclin1mRNA定量为31.39±3.16,明显高于未转染对照组的1.03±0.08,P<0.001;而pSUPER-Bec组为0.29±0.05,较对照组明显降低,P=0.003。pcDNA3.1-Bec组Ang-1mRNA定量为6.13±0.29,明显低于对照组的9.28±0.53,P=0.023。pSUPER-Bec组Ang-2mRNA定量为7.33±0.35,较对照组的11.36±0.59明显降低,P=0.021。pSUPER-Bec组Tie-2mRNA定量为7.96±0.38,与空白对照组的13.23±0.61相比亦明显降低,P=0.018。MTT法检测结果提示,pcDNA3.1-Bec组转染48h吸光度值为1.13±0.06,72h为1.21±0.05,96h为1.39±0.06;与未转染对照组的1.24±0.05、1.49±0.05及1.93±0.06比较,细胞增殖均明显减慢,F值分别为11.136、20.827和41.633,P值分别为0.029、0.011和0.005。pSUPER-Bec组转染48h为1.52±0.06,72h为1.88±0.06,96h为2.16±0.08,与对照组比较,细胞增殖均明显增快,F值分别为18.976、33.819和15.265,P值分别为0.012、0.007和0.016。结论:Beclin1过度表达能抑制SKOV3/DDP细胞增殖,其机制可能与Ang及其Tie-2受体的异常表达和平衡失调有关。 展开更多
关键词 BECLIN1 增殖 血管生成素 TIE-2受体 skov3 ddp
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雷公藤内酯醇通过抑制HIF-1α通路逆转卵巢癌耐药的研究 被引量:2
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作者 朱四红 谭布珍 +1 位作者 胡辉 陈庚发 《实用癌症杂志》 2021年第11期1741-1745,共5页
目的探讨雷公藤内酯醇逆转人卵巢癌SKOV3/DDP细胞耐药的作用机制。方法Western blot检测雷公藤内酯醇对SKOV3/DDP细胞HIF-1α蛋白的表达影响,以及SKOV3/DDP转染HIF-1α干扰质粒后HIF-1α、MMP2、Sorcin、VEGF的表达情况;TUNEL染色观察... 目的探讨雷公藤内酯醇逆转人卵巢癌SKOV3/DDP细胞耐药的作用机制。方法Western blot检测雷公藤内酯醇对SKOV3/DDP细胞HIF-1α蛋白的表达影响,以及SKOV3/DDP转染HIF-1α干扰质粒后HIF-1α、MMP2、Sorcin、VEGF的表达情况;TUNEL染色观察转染后的细胞凋亡情况。结果与SKOV3/DDP组细胞相比,SKOV3/DDP+TP组的HIF-1α的表达明显降低(P<0.05);转染HIF-1α干扰质粒后的SKOV3/DDP细胞的HIF-1α蛋白、MMP2、Sorcin、VEGF的表达水平均显著下降(P<0.05),凋亡细胞数目显著增加(P<0.05)。结论雷公藤内酯醇可能通过抑制卵巢癌SKOV3/DDP细胞中HIF-1α信号通路,进而导致MMP2、Sorcin、VEGF蛋白表达下降,促进细胞凋亡,抑制卵巢癌细胞的生长,从而逆转卵巢癌细胞的耐药性,增加其对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 卵巢癌 skov3/ddp HIF-1Α SORCIN
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神经酰胺增强卵巢癌顺铂敏感性的体外研究
13
作者 孙莉娜 徐曼 +1 位作者 胡玉芳 瞿全新 《现代妇产科进展》 CSCD 2012年第7期540-543,共4页
目的:探讨神经酰胺增强卵巢癌顺铂敏感性的作用及机制,为筛选有效的卵巢癌顺铂耐药逆转剂提供实验依据。方法:本研究采用MTT法测定不同剂量的C6-神经酰胺(Ceramide C6)(5、10、20、40μmol/L)对卵巢癌顺铂化疗的增敏作用,以RT-PCR、West... 目的:探讨神经酰胺增强卵巢癌顺铂敏感性的作用及机制,为筛选有效的卵巢癌顺铂耐药逆转剂提供实验依据。方法:本研究采用MTT法测定不同剂量的C6-神经酰胺(Ceramide C6)(5、10、20、40μmol/L)对卵巢癌顺铂化疗的增敏作用,以RT-PCR、Westernblot法检测Ceramide C6对肿瘤细胞Bcl-2 mRNA及其蛋白表达的影响,应用流式细胞技术观察Ceramide C6对肿瘤细胞凋亡的影响。结果:Ceramide C6对SKOV3、SKOV3/DDP细胞生长有抑制作用,与DDP联合应用时可增强DDP敏感性。SKOV3细胞中,与对照组相比,不同浓度Ceramide C6使顺铂敏感性分别增加了7.23%、20.14%、45.02%、57.75%。SKOV3/DDP细胞中,顺铂敏感性分别增加了23.08%、24.57%、45.86%、65.78%。随Ceramide C6浓度增加,SKOV3和SKOV3/DDP细胞中Bcl-2 mRNA及蛋白表达逐渐减低,差异有统计学意义(F=41.780,P=0.000;F=223.258,P=0.000;F=98.306,P=0.000;F=224.687,P=0.000)。Ceramide C6可增加SKOV3、SKOV3/DDP细胞凋亡率,差异有统计学意义(F=135.625,P=0.000;F=224.906,P=0.000)。结论:神经酰胺可能通过抑制肿瘤细胞Bcl-2 mRNA及其蛋白表达,诱导肿瘤细胞凋亡途径,增强顺铂对卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞体外生长的抑制作用,在一定程度上逆转了卵巢癌顺铂耐药。 展开更多
关键词 卵巢癌 skov3 skov3/ddp 顺铂 耐药 凋亡 神经酰胺
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同源异形盒基因D8表达与卵巢癌顺铂耐药的相关性研究
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作者 刘达宾 孙蓬明 +3 位作者 宋一一 毛晓丹 林琳 林芬 《福建医药杂志》 CAS 2015年第4期1-4,共4页
目的检测同源异型盒基因D8(HOXD8)在人卵巢癌非顺铂耐药株SKOV3和顺铂耐药细胞株SKOV3-DDP细胞株中的表达,探讨卵巢癌顺铂耐药的机制。方法应用细胞活性测定实验(XTT实验)检测SKOV3、SKOV3-DDP细胞株经顺铂处理后的半数抑制浓度,荧光定... 目的检测同源异型盒基因D8(HOXD8)在人卵巢癌非顺铂耐药株SKOV3和顺铂耐药细胞株SKOV3-DDP细胞株中的表达,探讨卵巢癌顺铂耐药的机制。方法应用细胞活性测定实验(XTT实验)检测SKOV3、SKOV3-DDP细胞株经顺铂处理后的半数抑制浓度,荧光定量PCR、ELISA检测HOXD8在这两种细胞株中的表达。结果随着顺铂浓度的增加,细胞抑制率增高,显示出明显的剂量依赖关系;SKOV3-DDP细胞株经顺铂作用后,细胞抑制率明显低于SKOV3细胞株。荧光定量PCR及ELISA试验结果显示,与SKOV3细胞株比较,SKOV3-DDP细胞株中HOXD8mRNA及蛋白的相对表达量均明显升高,差异有统计学意义。结论 HOXD8表达的升高与卵巢癌细胞顺铂耐药存在明确的相关性。 展开更多
关键词 HOXD8 卵巢癌 顺铂耐药 skov3 skov3-ddp
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Effect of low dose fractionated radiation on reversing cisplatin resistance in ovarian carcinoma via VEGF and mTOR 被引量:1
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作者 Xingyan Ju Shihai liu +4 位作者 Donghai Liang Tao Jiang Ronghui Yuan Wei Zhao Hongsheng Yu 《Oncology and Translational Medicine》 2017年第4期143-150,共8页
Objective To investigate the mechanism of low-dose fractionated radiation on reversing cisplatin resistance in ovarian carcinoma via vascular endothelial growth factor(VEGF) and mammalian target of rapamycin(mTOR) in ... Objective To investigate the mechanism of low-dose fractionated radiation on reversing cisplatin resistance in ovarian carcinoma via vascular endothelial growth factor(VEGF) and mammalian target of rapamycin(mTOR) in vivo.Methods Human cisplatin-resistant ovarian carcinoma cells(SKOV3/DDP) were injected into nude mice to establish ovarian cancer xenografts. The mice were randomly divided into three groups: a control group, a low-dose fractionated radiation(LDRFT) group, and a conventional-dose radiation group. Each group was exposed to 0 cGy, 50 cGy, and 200 cGy radiation, respectively, for 4 weeks, up to a total of 8.0 Gy. Mice in the LDFRT group were irradiated twice daily with 6 hour intermissions on day 1 and 2 of every week for a total of 4 weeks. Conventional-dose group mice were given a single 200 cGy radiation dose on the first day each week for a total of 4 weeks. Maximum horizontal and vertical diameters of the tumors were measured every other day and used to create a tumor growth curve. After 4 weeks of irradiation, we dissected the tumor tissue and calculated the tumor inhibition rate. RT-PCR detected the expression of VEGF and m TOR, and Western blots detected the expression of corresponding proteins.Results Both LDRFT and conventional-dose radiation inhibited the growth of tumor cells, and growth of tumors in the two radiation groups compared with growth in the control group were significantly different(P < 0.05). The rate of tumor inhibition in the LDFRT group(37.5603%) was lower than in the conventionaldose group(47.4446%), but there was no significant difference(P 0.05). Compared with the other two groups, the m RNA expression of VEGF was significantly lower in the LDFRT group(P < 0.05), but there was no obvious difference between the conventional-dose and control groups. There was no obvious difference in the m RNA expression of m TOR among the three groups, but the expression of the protein p-m TOR was lower in the LDFRT group(P < 0.05), as confirmed by Western blotting.Conclusion LDFRT is as e 展开更多
关键词 LOW-DOSE fractionated RADIATION ovarian carcinoma resistance skov3/ddp VEGF mTOR
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奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP移植瘤增殖的影响
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作者 耿丽琴 史悦华 +2 位作者 沈杨 张云霞 任慕兰 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1649-1651,F0003,共4页
目的探讨奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤生长的影响。方法将SKOV3/DDP细胞接种雌性BALB/c-nu/nu裸鼠右腋前皮下构建移植瘤动物模型,成瘤后随机分成4组。奥曲肽组(A):奥曲肽100μg.kg-1.d-1,用药28 d;顺铂组(B):顺铂4 ... 目的探讨奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤生长的影响。方法将SKOV3/DDP细胞接种雌性BALB/c-nu/nu裸鼠右腋前皮下构建移植瘤动物模型,成瘤后随机分成4组。奥曲肽组(A):奥曲肽100μg.kg-1.d-1,用药28 d;顺铂组(B):顺铂4 mg.kg-1.d-1,成瘤后第1、8、15、22天用药;联合组(C):奥曲肽和顺铂联用;对照组(D):生理盐水对照。用药4周后处死裸鼠,取肿瘤标本计算瘤重和瘤体积,并采用免疫组织化学法检测瘤块中生长抑素受体2(SSTR2)和表皮生长因子受体(EGFR)的表达。结果各用药组肿瘤标本的瘤重、瘤体积均低于D组,C组的瘤重、瘤体积低于A、B组(P<0.01)。各组移植瘤细胞均有SSTR2表达;EGFR表达量D组显著高于其他各组(P<0.01),C组及A组EGFR表达量低于其他两组(P<0.01)。结论奥曲肽能抑制人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP的裸鼠移植瘤的生长,并与顺铂有协同作用。 展开更多
关键词 奥曲肽 耐顺铂卵巢癌 skov3/ddp 生长抑素受体2 表皮生长因子受体
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腹腔热化疗中卵巢癌细胞对顺铂敏感性影响的体外研究 被引量:8
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作者 马焱 瞿全新 张秀艳 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期1153-1156,共4页
目的:探讨腹腔热疗对卵巢癌细胞顺铂敏感株的化疗增敏作用及对顺铂耐药株的逆转耐药作用,并分析其作用机制.为腹腔热疗增加顺铂化疗敏感性及逆转卵巢癌顺铂耐药提供实验依据。方法:MTT法研究常温及41℃不同作用时间下温热联合顺铂对卵... 目的:探讨腹腔热疗对卵巢癌细胞顺铂敏感株的化疗增敏作用及对顺铂耐药株的逆转耐药作用,并分析其作用机制.为腹腔热疗增加顺铂化疗敏感性及逆转卵巢癌顺铂耐药提供实验依据。方法:MTT法研究常温及41℃不同作用时间下温热联合顺铂对卵巢癌细胞敏感株SKOV3、卵巢癌细胞顺铂耐药株SKOV3/DDP的生长抑制作用。Western bloting法检测常温及41℃不同作用时间下ERCC1基因表达水平。结果:41℃下作用60、90min时对SKOV3细胞生长的抑制作用大,差异有显著性,P<0.001。热处理对SKOV3/DDP细胞生长有抑制作用,不同时间差异有统计学意义。热疗联合顺铂在常温或41℃下,SKOV3细胞对顺铂的敏感性不同,差异有统计学意义(P<0.001)。且41℃作用90min时敏感性最大(P=0.002),对顺铂的敏感性提高79.885%。热处理不同时间,SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性增加,差异有显著性,P<0.001。41℃ 90min SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性提高37.129%。在SKOV3细胞中,ERCC1表达水平较SKOV3/DDP细胞降低,F=32.175,P<0.001。热疗联合顺铂与常温下相比,SKOV3、SKOV3/DDP细胞中ERCC1基因表达水平差异无统计学意义,F=0.962,P=0.443。结论:热疗对卵巢癌细胞SKOV3及其顺铂耐药亚株SKOV3/DDP细胞有生长抑制作用;热疗联合顺铂可以增加SKOV3细胞对顺铂的敏感性,可以部分逆转SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性,且最佳作用时间为41℃90min;ERCC1表达增加与卵巢癌顺铂耐药有关,但热疗联合顺铂对ERCC1基因表达水平无明显影响,热疗可能通过其他途径增加肿瘤细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 卵巢癌 skov3skov3/ddp 顺铂 热疗 耐药 ERCC1基因
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lncRNA FAL1通过调控MAPK通路对卵巢癌细胞化疗耐药性的影响及其机制 被引量:9
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作者 栗浩然 王雅莉 +2 位作者 李红娟 相元翠 刘会敏 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2021年第4期333-340,共8页
目的观察lncRNA FAL1在卵巢癌细胞及其耐药细胞株中的表达差异,探索下调lncRNA FAL1对细胞化疗耐药性的影响及机制。方法qRT-PCR法检测SKOV3和COC1细胞及其耐药细胞株FAL1基因表达水平,转染FAL1-siRNA下调FAL1基因,MTT检测细胞增殖能力,... 目的观察lncRNA FAL1在卵巢癌细胞及其耐药细胞株中的表达差异,探索下调lncRNA FAL1对细胞化疗耐药性的影响及机制。方法qRT-PCR法检测SKOV3和COC1细胞及其耐药细胞株FAL1基因表达水平,转染FAL1-siRNA下调FAL1基因,MTT检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆能力,Western blot法检测细胞耐药相关蛋白MDR-1、MPR-1、ABCG2和MAPK通路相关蛋白p38 MAPK、ERK1/2、JNK磷酸化水平。将已转染FAL1-siRNA的SKOV3/DDP和COC1/DDP细胞注射到BALB/c裸鼠皮下,定期测量瘤体积并称重。结果与SKOV3和COC1细胞比较,SKOV3/DDP和COC1/DDP细胞对DDP的敏感度降低,FAL1基因的表达水平升高(P<0.01)。转染FAL1-siRNA后,SKOV3/DDP和COC1/DDP细胞对DDP的敏感度增加(P<0.01),侵袭能力(P<0.05)和克隆能力降低(P<0.01),细胞中MDR-1、MPR-1、ABCG2表达水平(P<0.01)和p38 MAPK、ERK1/2、JNK磷酸化水平降低(P<0.05),皮下移植瘤的体积和瘤质量显著降低(P<0.01)。结论下调lncRNA FAL1可显著降低卵巢癌耐顺铂细胞株的化疗耐药性,抑制耐药细胞在体内的增殖能力,其作用机制与抑制MAPK信号通路的活化有关。 展开更多
关键词 卵巢癌 化疗耐药性 lncRNA FAL1 MAPK信号通路 skov3/ddp细胞
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雷公藤多甙对耐顺铂人上皮卵巢癌细胞体外活性的影响及机制研究 被引量:7
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作者 占欣璐 谭布珍 +4 位作者 钟焰英 刘文成 胡辉 曹青 何远桥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1017-1022,共6页
目的:探讨传统中药雷公藤多甙(Tripterygium Wilfordii Hook.F.,GTW)对耐顺铂人上皮卵巢癌细胞体外活性的影响及机制研究。方法:将顺铂、不同浓度雷公藤多甙及二者联合处理SKOV3/DDP细胞24 h,于倒置相差显微镜及荧光倒置显微镜下观察细... 目的:探讨传统中药雷公藤多甙(Tripterygium Wilfordii Hook.F.,GTW)对耐顺铂人上皮卵巢癌细胞体外活性的影响及机制研究。方法:将顺铂、不同浓度雷公藤多甙及二者联合处理SKOV3/DDP细胞24 h,于倒置相差显微镜及荧光倒置显微镜下观察细胞形态学变化;采用Hochest 33258染色法计算细胞平均凋亡率;流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot检测P13K/Akt/NF-κB信号通路相关因子PI3K、T-AKT、p-AKT(ser473)、IκBα、NF-κB、Bcl-2的表达变化。结果:SKOV3/DDP细胞经不同浓度雷公藤多甙处理24 h后,出现典型的凋亡样改变;且凋亡率呈浓度依赖性,顺铂联合组凋亡率较相应单药组明显升高;SKOV3/DDP细胞经雷公藤多甙处理24 h后,S期细胞比例明显升高,升高程度呈浓度依赖性(P<0.05),雷公藤多甙与顺铂联合组S期细胞比例与相应单药组相比均明显升高;雷公藤单药及雷公藤、顺铂联合处理SKOV3/DDP细胞24 h后,p-AKT、NF-κB、Bcl-2蛋白表达明显下调。结论:雷公藤多甙可使耐顺铂人上皮卵巢癌SKOV3/DDP细胞周期阻滞于S期并诱导其凋亡,与小剂量顺铂联用效用明显增加,其机制可能与p-AKT、NF-κB、Bcl-2表达下调,抑制P13K/Akt/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 雷公藤多甙 skov3/ddp细胞 卵巢癌 凋亡 化疗增敏
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蒽醌修饰物KA-4s抑制SKOV3/DDP细胞增殖并诱导铁死亡
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作者 赵英丹 李欣晓 +4 位作者 许淑妹 陈强健 杨盈盈 侯华新 黎丹戎 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第3期356-363,共8页
目的:探讨蒽醌修饰物KA-4s在体外对人顺铂耐药卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖的影响和诱导细胞铁死亡的机制。方法:将SKOV3/DDP细胞分为对照组和不同浓度(2μmol/L、5μmol/L和7μmol/L)的蒽醌修饰物KA-4s组。采用MTT法检测单药KA-4s和顺铂(D... 目的:探讨蒽醌修饰物KA-4s在体外对人顺铂耐药卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖的影响和诱导细胞铁死亡的机制。方法:将SKOV3/DDP细胞分为对照组和不同浓度(2μmol/L、5μmol/L和7μmol/L)的蒽醌修饰物KA-4s组。采用MTT法检测单药KA-4s和顺铂(DDP)对SKOV3/DDP细胞活力的影响,划痕实验检测细胞的迁移能力,线粒体绿色荧光探针(Mito-Tracker Green)检测线粒体形态改变,透射电镜观察线粒体超微结构。以铁死亡诱导剂RSL3为阳性对照组,用DCFA-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,比色法检测细胞内总铁蛋白含量,western blotting检测铁死亡相关蛋白GPX4、FSP1的表达情况。结果:KA-4s和顺铂作用48 h后,卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖均明显受到抑制,相比顺铂,KA-4s的抑制作用更强(P<0.001),并能抑制细胞迁移。经KA-4s处理后线粒体受损,线粒体结构改变,膜密度增大,嵴减少甚至消失。与空白对照组相比,阳性RSL3组和KA-4s组SKOV3/DDP细胞内ROS水平升高(均P<0.001),5μmol/L KA-4s组总铁离子含量显著升高(P<0.001),卵巢癌SKOV3/DDP细胞中GPX4、FSP1蛋白的表达均降低(P<0.01),但正常卵巢IOSE80细胞中GPX4表达均无改变。结论:KA-4s能抑制SKOV3/DDP细胞增殖、迁移并诱导细胞铁死亡。 展开更多
关键词 蒽醌修饰物 skov3/ddp细胞 铁死亡 谷胱甘肽过氧化物酶4 活性氧
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