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腺病毒介导突变Rip2基因对膀胱上皮细胞清除克雷伯杆菌的影响
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作者 刘行海 刘伟 +3 位作者 隋鹏诺 黄宁 王伯瑶 吴琦 《四川解剖学杂志》 2008年第1期2-4,共3页
目的探讨受体相互作用蛋白2(Rip2)在克雷伯杆菌所致的尿路感染中的作用。方法使用含有突变Rip2基因(mRip2)、绿色荧光蛋白(GFP)基因的复制缺陷腺病毒(Ad-mRip2-GFP)感染人膀胱上皮癌细胞T24细胞,表达GFP为转染成功标志,观察转染率,同时... 目的探讨受体相互作用蛋白2(Rip2)在克雷伯杆菌所致的尿路感染中的作用。方法使用含有突变Rip2基因(mRip2)、绿色荧光蛋白(GFP)基因的复制缺陷腺病毒(Ad-mRip2-GFP)感染人膀胱上皮癌细胞T24细胞,表达GFP为转染成功标志,观察转染率,同时感染含有GFP基因腺病毒做对照,利用克雷伯杆菌临床分离株Kp5与细胞37℃孵育4、24、48小时,用平板培养菌落计数活菌数。结果刺激后,在感染Ad-mRip2-GFP的T24细胞清除胞内Kp5能力下降,与Ad-GFP组比较P<0.01。结论Rip2可以阻断膀胱上皮细胞的清除克雷伯杆菌作用,提示Rip2在膀胱上皮细胞的天然免疫中可能起重要作用。 展开更多
关键词 尿路感染 受体相互作用蛋白2 天然免疫 腺病毒载体
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人RIP2基因启动子绿色荧光蛋白表达载体的构建与鉴定 被引量:1
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作者 蒋宇 胡巢凤 +1 位作者 曾琪 孙丽萍 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期140-144,共5页
目的:构建人RIP2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体。方法:根据特定限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含人RIP2基因启动子不同长度2段序列,构建含人RIP2基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2-RIP2(750 bp)wt、pEGFP-C2... 目的:构建人RIP2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体。方法:根据特定限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含人RIP2基因启动子不同长度2段序列,构建含人RIP2基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2-RIP2(750 bp)wt、pEGFP-C2-RIP2(941 bp)wt,用VspⅠ和NheⅠ双酶切鉴定重组质粒,进行DNA序列分析,重组质粒经阳离子聚合物JetPeiTM介导转染HEK293细胞48 h后观察。结果:酶切鉴定和序列测定证实目的基因已插入重组质粒;细胞转染结果表明,重组质粒转染HEK293细胞均能表达绿色荧光,其中构建的pEGFP-C2-RIP2(750 bp)wt重组质粒绿色荧光表达强于pEGFP-C2-RIP2(941 bp)wt。结论:成功构建2段不同长度的人RIP2基因启动子绿色荧光蛋白表达载体。 展开更多
关键词 受体相互作用蛋白2启动子(rip2启动子) 载体 绿色荧光蛋白 基因表达
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