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ART1基因沉默对小鼠结肠癌CT26细胞转移潜能的影响及作用机制的研究 被引量：2
1
作者 宋光林 唐怡 +2 位作者 王娅兰 徐剑侠 熊薇 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期490-496,共7页
目的:通过沉默精氨酸特异性单-ADP-核糖基化作用转移酶-1(arginine-specic mono-ADP-ribosytransferase-1,ART1)基因的表达,探讨其对小鼠结肠癌CT26细胞转移潜能的影响及可能的作用机制。方法:采用慢病毒转染系统将特异性针对ART1基因的... 目的:通过沉默精氨酸特异性单-ADP-核糖基化作用转移酶-1(arginine-specic mono-ADP-ribosytransferase-1,ART1)基因的表达,探讨其对小鼠结肠癌CT26细胞转移潜能的影响及可能的作用机制。方法:采用慢病毒转染系统将特异性针对ART1基因的ART1-shRNA转入结肠癌CT26细胞中,在荧光显微镜下观察转染效率;分别采用RT-PCR和蛋白质印迹法鉴定ART1基因沉默的效果;采用Transwell小室侵袭实验和黏附实验观察ART1基因沉默对CT26细胞侵袭及黏附能力的影响;明胶酶谱法测定ART1基因沉默对CT26细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metall oproteinase-2,MMP-2)及MMP-9蛋白活性的影响;蛋白质印迹法检测对ART1、RhoA(Ras homolog gene family,member A)、ROCK1(Rho-associated coiled-coil contanining kinase 1)、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响。结果:成功获得了ART1基因沉默的稳定细胞株;ART1-shRNA转染组CT26细胞的侵袭及黏附抑制率分别为39.63%和40.70%,与空白对照组相比,ART1基因沉默后CT26细胞侵袭和黏附能力降低(P<0.05);MMP-2和MMP-9蛋白的活性降低,RhoA、ROCK1、MMP-2及MMP-9蛋白的表达量均被下调(P<0.05)。结论:ART1基因沉默可降低CT26细胞的侵袭和黏附能力,可能与ART1基因沉默后下调RhoA、ROCK1、MMP-2和MMP-9的表达以及MMP-2和MMP-9蛋白的活性有关,提示ART1基因在结肠癌侵袭和转移中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 ADP核糖基化因子 RNA 小分子干扰 rho相关激酶类 基质金属蛋白酶类 CT26细胞
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