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Cytopathological evaluations combined RNA and protein analyses on defined cell regions using single frozen tissue block 被引量:10
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作者 HONG LI, XIAO YAN CHEN, QING You KONG, JIA LIULaboratory of Cell Biology and Molecular Genetics,College of Basic Medical Sciences, Dalian Medical University, Dalian 116027, China 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期117-121,共5页
The co-existence of multiple cell components in tissue samples is the main obstacle for precise molecular evaluation on defined cell types. Based on morphological examination, we developed an efficient approach for pa... The co-existence of multiple cell components in tissue samples is the main obstacle for precise molecular evaluation on defined cell types. Based on morphological examination, we developed an efficient approach for paralleled RNA and protein isolations from an identical histological region in frozen tissue section.The RNA and protein samples prepared were sufficient for RT-PCR and Western blot analyses, and the results obtained were well coincident each other as well as with the corresponding parameters revealed from immunohistochemical examinations. By this way, the sampling problem caused by cell-cross contamination can be largely avoided, committing the experimental data more specific to a defined cell type. These novel methods thus allow us to use single tissue block for a comprehensive study by integration of conventional cytological evaluations with nucleic acid and protein analyses. 展开更多
关键词 Genetic Techniques Blotting Western FREEZING Humans IMMUNOHISTOCHEMISTRY RNA Research Support Non-U.S. Gov't reverse transcriptase Polymerase Chain Reaction Specimen Handling Stomach Neoplasms
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乙型肝炎病毒反转录酶区耐药突变患者HBsAg主要亲水区免疫逃逸相关突变研究 被引量:8
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作者 黄碧霞 刘妍 +7 位作者 思兰兰 陈容娟 李晓东 罗丹 刘璐洁 王钧 徐东平 刘新光 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期526-530,共5页
目的分析RT耐药突变患者乙肝表面抗原(HBsAg)主要亲水区(MHR)免疫逃逸相关突变的特点。方法回顾性分析2007年7月-2017年8月于解放军总医院第五医学中心接受NAs抗病毒治疗并行耐药检测的6917例C基因型CHB患者的临床资料,并根据是否发生... 目的分析RT耐药突变患者乙肝表面抗原(HBsAg)主要亲水区(MHR)免疫逃逸相关突变的特点。方法回顾性分析2007年7月-2017年8月于解放军总医院第五医学中心接受NAs抗病毒治疗并行耐药检测的6917例C基因型CHB患者的临床资料,并根据是否发生耐药突变分为HBV RT耐药突变组与HBV RT野生组,比对两组HBsAg MHR免疫逃逸相关突变的特点。结果经抗病毒治疗的CHB患者HBV RT耐药相关突变总体检出率为37.37%(2585/6917);且HBV RT耐药突变组HBsAg MHR总体突变率显著高于HBV RT野生组(30.00%vs.17.13%,P<0.05);HBV RT耐药突变组患者的sQ101K/R/H、sS114T/A/L、sT/I126S/N/A、sG130N/R/K/A、sM133T/I、sS143T/L、sA159V/G、sE164D/G等单点突变检出率均高于HBV RT野生组(P<0.05)。结论HBV RT耐药突变患者具有更高的HBsAg MHR免疫逃逸相关突变检出率,提示MHR免疫逃逸相关突变与HBV RT耐药突变密切相关。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 反转录酶区 耐药突变 主要亲水区 免疫逃逸相关突变
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乙型肝炎病毒逆转录酶区N236T单独突变与N236T+A181T联合突变患者临床特征的比较 被引量:7
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作者 赵攀 徐东平 +2 位作者 李晓东 李乐 钟彦伟 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期834-837,共4页
目的了解乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区N236T单独突变患者与逆转录酶区N236T+A181T联合突变患者核苷(酸)类药物应用情况和病毒学特点的异同。方法对发生HBV逆转录酶区N236T单独突变与逆转录酶区N236T+A181T联合突变的慢性乙型肝炎患者的... 目的了解乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区N236T单独突变患者与逆转录酶区N236T+A181T联合突变患者核苷(酸)类药物应用情况和病毒学特点的异同。方法对发生HBV逆转录酶区N236T单独突变与逆转录酶区N236T+A181T联合突变的慢性乙型肝炎患者的血清HBsAg、HBVDNA和丙氨酸转氨酶(ALT)水平进行检测和HBV基因分型,并对所有患者的核苷(酸)类药物治疗史进行回顾性调查。结果逆转录酶区N236T单独突变组与逆转录酶区N236T+A181T联合突变组相比较,两者血清HBsAg水平的差异无统计学意义(P=0.9755),但后者血清HBVDNA(P=0.0014)和ALT(P=0.0032)水平高于前者。此外,C型较B型容易发生rtN236T+rtA181T联合突变(40%vs20.45%,P=0.0235),由拉米夫定换用阿德福韦的治疗方式容易引起病毒突变。结论 HBV逆转录酶区N236T单独突变患者与逆转录酶区N236T+A181T联合突变患者在引起突变的核苷(酸)类药物的使用情况上存在一致性(拉米夫定换用阿德福韦),但基因型构成和血清病毒学指标存在明显差异。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 逆转录酶区 突变 阿德福韦
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A~D基因型乙型肝炎病毒全长逆转录酶区PCR方法的建立及应用 被引量:6
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作者 刘宝明 李彤 +9 位作者 董建平 胥婕 李晓光 严平 王凤水 闫玲 李文鹏 金晖 杨靖娴 庄辉 《肝脏》 2008年第5期379-383,共5页
目的建立适用于扩增我国常见的乙型肝炎病毒(HBV)A~D基因型全长逆转录酶(RT)区(包含全长HBsAg编码区)的聚合酶链反应(PCR)法,并确定其在分析临床标本中的应用价值。方法建立我国HBV基因序列库,设计适用于扩增A~D基因型HBV全长RT区引物... 目的建立适用于扩增我国常见的乙型肝炎病毒(HBV)A~D基因型全长逆转录酶(RT)区(包含全长HBsAg编码区)的聚合酶链反应(PCR)法,并确定其在分析临床标本中的应用价值。方法建立我国HBV基因序列库,设计适用于扩增A~D基因型HBV全长RT区引物,以A~D基因型HBV重组质粒为模板建立半巢式PCR(snPCR)法,并确定该法灵敏度。用所建立的snPCR对44份HBV DNA定量阳性(>5.0×102拷贝/ml)慢性乙型肝炎患者血清标本进行扩增及PCR产物直接测序。结果琼脂糖凝胶电泳及测序证实,snPCR可扩增A~D基因型HBV全长RT区,对A、B、C和D基因型HBV质粒扩增的灵敏度分别为1.2×103、7.0×102、6.0×102和6.0×102拷贝/ml。snPCR检测HBV DNA>5×102拷贝/ml血清标本的阳性率为88.64%(39/44),扩增阴性血清标本HBV DNA滴度均处于103拷贝/ml水平。扩增目的产物经直接测序确证无误。生物信息学分析显示,样品中B和C基因型分别占35.90%(14/39)和64.10%(25/39);其中15.38%(6/39)发生RT区变异,包括4例为已知耐药变异;7例(17.95%)存在HBsAg编码区变异,其中2例为已知免疫逃逸变异;6例(15.38%)发生RT区和HBsAg编码区"镜像改变"。结论建立了一种新的扩增全长RT区(涵盖全长HBsAg编码区)的snPCR。该法结合直接测序法,可同时分析我国HBVA~D基因型已知和潜在的耐药变异位点。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 逆转录酶区 基因型 耐药变异 免疫逃逸变异
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乙型肝炎病毒逆转录酶区预存耐药研究 被引量:4
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作者 罗新月 韩峰 张琳 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期786-789,共4页
目的探讨未经核苷(酸)类似物治疗的乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV P基因逆转录(RT)区准种异质性及预存耐药情况,为临床抗病毒治疗药物选择提供理论依据。方法 2011年10月至2013年4月期间于中国医科大学附属盛京医院感染科住院的60例慢性HB... 目的探讨未经核苷(酸)类似物治疗的乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV P基因逆转录(RT)区准种异质性及预存耐药情况,为临床抗病毒治疗药物选择提供理论依据。方法 2011年10月至2013年4月期间于中国医科大学附属盛京医院感染科住院的60例慢性HBV感染者为研究对象。检测HBV P RT区准种异质性及预存耐药情况;乙型肝炎病毒血清学标志物检测采用化学发光法;乙型肝炎病毒载量测定采用Tag Man实时荧光定量PCR法。HBV P RT准种异质性及预存耐药检测应用克隆测序法。结果 60例患者中32例(53.3%)检测出RT区基因变异,其中乙肝病毒携带者组、慢性乙型肝炎组和乙肝肝硬化组之间相比差异无统计学意义(P>0.05)。对HBV RT区的核苷酸序列分析共发现31种变异模式。拉米夫定预存耐药8例(1.33%)、恩替卡韦预存耐药5例(0.83%),阿德福韦酯预存耐药7例(1.16%)。乙肝肝硬化组准种复杂性(38.3%)明显高于慢性乙型肝炎(2.83%)和乙肝病毒携带者(1.33%)。e抗原(HBe Ag)阳性组RT区变异发生率为52.6%,阴性组为54.5%,两组差异无统计学意义。结论 HBV逆转录酶区核苷(酸)预存耐药天然存在,变异模式多种多样。HBV不同感染阶段RT区各耐药位点变异发生率差异无统计学意义,但乙肝肝硬化组准种复杂性明显高于慢性乙型肝炎和乙型肝炎病毒携带者。HBe Ag阳性和阴性HBV感染者RT区基因变异率差异无统计学意义。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 逆转录区 预存耐药 基因变异
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乙型肝炎病毒逆转录酶区耐药突变对血清乙型肝炎病毒表面抗原水平的影响
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作者 张小曼 马筱秋 +2 位作者 许正锯 张纯瑜 何彩婷 《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》 CAS 2023年第5期324-332,共9页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区(RT)耐药突变对血清HBV表面抗原(HBsAg)水平的影响。方法采用聚合酶链反应(PCR)产物直接测序法分析2016年1月至2021年12月于联勤保障部队第九一〇医院感染科接受核苷(酸)类药物(NAs)治疗的402例慢... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区(RT)耐药突变对血清HBV表面抗原(HBsAg)水平的影响。方法采用聚合酶链反应(PCR)产物直接测序法分析2016年1月至2021年12月于联勤保障部队第九一〇医院感染科接受核苷(酸)类药物(NAs)治疗的402例慢性乙型肝炎(CHB)患者RT区序列,根据RT区耐药突变情况分为HBV RT野生组(181例)和HBV RT耐药突变组(221例,其中A181突变患者33例、V191突变患者15例、L180+M204V突变患者82例、M204I突变患者91例)。采用非参数秩和检验(Mann-Whitney U)探讨血清HBsAg水平的影响因素及HBV RT区耐药突变对血清HBsAg水平的影响;采用Spearman相关性分析探讨HBV RT耐药突变组血清HBsAg与HBV DNA相关性。结果入组402例CHB病例中,HBV RT野生组患者血清HBsAg、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)B型基因所占比例显著高于HBV RT耐药突变组,差异均有统计学意义(Z=-3.426、P=0.001,Z=-2.347、P=0.019,Z=-2.532、P=0.011,Z=-10.387、P=0.001)。HBV RT耐药突变组患者中,A181突变组、V191突变组、L180+M204V突变组、M204I耐药突变组血清HBsAg水平均显著低于HBV RT野生组(Z=2.475、P=0.013,Z=2.148、P=0.032,Z=2.115、P=0.034,Z=2.449、P=0.014)。HBV DNA水平在各突变组间两两比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。血清HBsAg水平与HBV DNA载量在A181突变组、L180M+M204V突变组和M204I突变组中均呈显著正相关性(r=0.486、P=0.004,r=0.578、P<0.001,r=0.369、P<0.001)。结论HBV RT区A181、V191、L180及M204V位点突变显著降低了CHB患者血清HBsAg水平。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 逆转录酶区 耐药突变 乙型肝炎病毒表面抗原 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸
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鸡端粒酶反转录酶启动子区克隆及序列分析
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作者 邹亚学 孙莹 +2 位作者 潘风光 郑梅竹 张玉静 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期499-502,共4页
根据GenBank(AY505015)报道的鸡端粒酶反转录酶序列设计了1对特异性引物,以鸡淋巴瘤细胞(MDCC-MSB1)总核酸为模板进行PCR。PCR产物连接到pMD19-T载体进行测序,通过BLAST对GenBank进行同源性搜索,并用DNAMAN分子生物学软件进行分析。结... 根据GenBank(AY505015)报道的鸡端粒酶反转录酶序列设计了1对特异性引物,以鸡淋巴瘤细胞(MDCC-MSB1)总核酸为模板进行PCR。PCR产物连接到pMD19-T载体进行测序,通过BLAST对GenBank进行同源性搜索,并用DNAMAN分子生物学软件进行分析。结果测得MDCC-MSB1启动子区全长为997 bp,其中G+C占50.78%。与国外报道的端粒酶反转录酶(AY505015)启动子区序列同源性为99.22%。与人端粒酶反转录酶启动子区相比:二者在起始密码子之前约250 bp均有1个E-box,但在chTERT启动子区新增加了4个c-Myb位点,而3个c-Ets2和WT1位点缺失,其他基序二者的分布基本相似。二者启动子区富含CpG岛,延伸到编码区。 展开更多
关键词 鸡端粒酶 反转录酶 启动子区 转录因子结合基序
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逆转录酶区A181T/V和A181T/V+N236T变异的乙型肝炎病毒感染者临床特征分析
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作者 李平 杨志国 +3 位作者 张馨 常静霞 高蕾 汪茂荣 《实用肝脏病杂志》 CAS 2014年第1期37-40,共4页
目的比较逆转录酶区A181T/V变异与A181T/V+N236T变异的乙型肝炎病毒感染者临床特征的异同。方法对55例发生rtA181T/V单独变异和34例发生rtA181T/V+rtN236T联合变异的乙型肝炎病毒感染者既往核苷(酸)类似物治疗情况进行回顾,对耐药时谷... 目的比较逆转录酶区A181T/V变异与A181T/V+N236T变异的乙型肝炎病毒感染者临床特征的异同。方法对55例发生rtA181T/V单独变异和34例发生rtA181T/V+rtN236T联合变异的乙型肝炎病毒感染者既往核苷(酸)类似物治疗情况进行回顾,对耐药时谷丙转氨酶、谷草转氨酶、HBV M、HBV DNA等指标进行检测,并根据耐药测序结果确定病毒的基因型。结果阿德福韦单药治疗患者发生A181T/V+N236T变异较A181T/V变异的比例高(57.6%对42.4%,P<0.05),而拉米夫定换用(或加用)阿德福韦治疗患者发生A181T/V变异较A181T/V+N236T变异的比例高(75.5%对24.5%,P<0.05);在89例患者中B基因型和C基因型分别是14例和75例,不同变异在B或C基因型中的分布无统计学差异;A181T/V变异与A181T/V+N236T变异相比,两组患者的年龄、性别构成、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、HBV DNA、HBsAg定量、HBeAg状态等指标均无统计学差异。结论不同的核苷(酸)类似物治疗可导致A181T/V变异和A181T/V+N236T变异模式的差异,但这两种变异感染者临床指标无明显差异。 展开更多
关键词 乙型肝炎 乙型肝炎病毒逆转录酶区 核苷类耐药 变异
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5例应用恩替卡韦治疗的慢性HBV感染者发生HBV逆转录酶区单独A181位点突变的分析 被引量:19
9
作者 赵攀 钟彦伟 徐东平 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第3期289-291,共3页
目的探讨恩替卡韦与HBV逆转录酶区单独A181位点突变的关系。方法对5例应用恩替卡韦治疗后逆转录酶区出现单独A181位点突变的慢性HBV感染者做回顾性调查与随访,并分析其突变前后病毒学指标的变化。结果 5例应用恩替卡韦治疗的慢性HBV感... 目的探讨恩替卡韦与HBV逆转录酶区单独A181位点突变的关系。方法对5例应用恩替卡韦治疗后逆转录酶区出现单独A181位点突变的慢性HBV感染者做回顾性调查与随访,并分析其突变前后病毒学指标的变化。结果 5例应用恩替卡韦治疗的慢性HBV感染者中,3例发生逆转录酶区A181V突变的病例均对恩替卡韦产生了应答,2例发生逆转录酶区A181T突变的病例血清HBV DNA也出现了明显下降。结论 5例应用恩替卡韦治疗的慢性HBV感染者逆转录酶区的单独A181位点的突变为自然产生,HBV逆转录酶区发生自然突变的临床意义需要进一步明确。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 肝炎病毒 乙型 点突变 基因 病毒 恩替卡韦
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再谈乙型肝炎病毒反转录酶区/表面抗原区基因变异的临床发生特点及意义 被引量:9
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作者 刘妍 徐东平 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期361-366,共6页
在我国,拉米夫定(LAM)、阿德福韦酯(ADV)和恩替卡韦(ETV)长期广泛用于临床抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗,导致恩替卡韦耐药患者累积增加,耐药变异形式复杂多样,其挽救治疗也成了临床关注的重点问题。HBV聚合酶/反转录酶(RT)区/表面抗原(HBsA... 在我国,拉米夫定(LAM)、阿德福韦酯(ADV)和恩替卡韦(ETV)长期广泛用于临床抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗,导致恩替卡韦耐药患者累积增加,耐药变异形式复杂多样,其挽救治疗也成了临床关注的重点问题。HBV聚合酶/反转录酶(RT)区/表面抗原(HBsAg)S区基因重叠,核苷(酸)类似物引起的耐药变异可同时造成S区基因变异,其中rt A181T变异可同时引起sW172终止突变,形成截短型HBsAg,影响疾病进展;rt A181T有时还可引起sW172非终止变异,其临床发生特点和意义尚不明确;HBsAg阴转是慢性乙型肝炎功能性治愈的重要标志,但临床上有少数患者可同时检出血清HBsAg和HBs Ab阳性,其意义与机制尚未完全明确。我们的研究发现,发生在HBsAg主要亲水区(MHR)的免疫逃逸相关变异多见于隐匿性HBV感染患者和HBsAg/HBs Ab双阳性的HBV感染患者,其中如发生新增N-糖基化变异,则进展为肝细胞癌的风险显著增加;从患者分离的免疫逃逸变异株可显著降低HBsAg的抗原性和反应性。上述研究有助于深入认识HBV RT/S基因变异发生的临床特点、机制和意义,帮助临床合理制定抗病毒治疗方案,预测疾病进展风险。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 反转录酶区 耐药变异 HBsAg主要亲水区 免疫逃逸相关变异
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核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎患者HBV逆转录酶区变异的研究 被引量:4
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作者 李健 曾文兴 +1 位作者 方颖慧 曾小平 《实验与检验医学》 CAS 2017年第4期466-474,共9页
目的分析核苷(酸)类似物治疗的慢性乙型肝炎患者HBV逆转录酶区耐药相关变异位点、变异位点组合模式、HBV DNA水平和HBeAg等特征,为临床应用核苷(酸)类似物抗乙肝病毒治疗提供参考。方法纳入研究的141例慢性乙型肝炎患者,使用NAs治疗的10... 目的分析核苷(酸)类似物治疗的慢性乙型肝炎患者HBV逆转录酶区耐药相关变异位点、变异位点组合模式、HBV DNA水平和HBeAg等特征,为临床应用核苷(酸)类似物抗乙肝病毒治疗提供参考。方法纳入研究的141例慢性乙型肝炎患者,使用NAs治疗的107例为治疗组,未使用药物抗病毒治疗的34例为对照组。采用线性探针反向杂交法(PCRRLP)检测HBV逆转录酶区耐药相关变异位点,实时荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒DNA水平,酶联免疫吸附试验检测乙肝免疫标记物,并对耐药相关变异的特点和研究病例的临床资料进行统计学分析。结果核苷(酸)类似物治疗效果不佳组耐药相关变异检出率(82.5%)明显高于未治疗的对照组(5.9%)和抗病毒治疗有效组(有效组10例未检出耐药相关变异)(P<0.01)。97例核苷(酸)类似物抗病毒效果不佳的病例中80例检出140个耐药相关变异位点,包括rtM204I 45个、rtM204V 32个、rtA181V 28个、rtL180M 25个、rtN236T 10个;变异位点组合模式主要有:rtL180M+rtM204I、rtM204V、rtM204I+rtM204V、rtA181V+rtM204V、rtM204I、rtA181V+rtN236T等;51个对NAs应答不佳病例耐药变异检出率70.59%,46个病毒学突破病例耐药变异检出率95.65%,差异明显(P<0.01)。NAs单药治疗病例早于多药治疗病例检出耐药相关位点(P<0.01);NAs治疗时间越长,耐药变异检出率越高(P<0.01);病例HBV-DNA水平等级越高,耐药变异检出率也越高(P<0.01)。结论⑴NAs治疗慢性乙型肝炎可导致HBV逆转录酶区变异,NAs抗乙型肝炎病毒效果不佳与HBV逆转录酶区变异密切相关;⑵不同NAs药物导致慢性乙肝患者HBV逆转录酶区变异位点、变异模式特点不同;⑶NAs治疗慢性乙型肝炎的用药种类与方式、治疗时长,患者HBV-DNA水平等对HBV逆转录酶区发生耐药变异均可能产生重要影响。提示在NAs治疗前、治疗过程合适时间点检测NAs耐药相关变异位点和HBV DNA水平,可为临床慢� 展开更多
关键词 核苷(酸)类似物 慢性乙型肝炎 耐药 HBV逆转录酶区 基因变异
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乙型肝炎病毒逆转录酶区PCR产物测序方法的建立及应用
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作者 陆仁飞 吴月平 +1 位作者 张宏萍 周敏 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第8期1032-1033,共2页
目的建立乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区PCR产物测序方法,检测HBV耐药突变位点及基因型。方法采用了巢式PCR方法,分别在HBV基因组逆转录(RT)区头尾设计内外两对引物,扩增全长RT区1 223bp序列。并用该方法对已经完成测序的HBV B、C基因型,... 目的建立乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区PCR产物测序方法,检测HBV耐药突变位点及基因型。方法采用了巢式PCR方法,分别在HBV基因组逆转录(RT)区头尾设计内外两对引物,扩增全长RT区1 223bp序列。并用该方法对已经完成测序的HBV B、C基因型,拉米夫定耐药株,恩替卡韦耐药株全长重组质粒扩增RT区来验证方法的保真度;用该方法从病毒载量1×103~1×108 copys/mL HBV血清中扩增RT区来验证方法的灵敏度;通过对4例临床标本的检测来验证方法的实用性。结果建立了乙型肝炎病毒逆转录酶区PCR产物测序方法;以已经完成测序的HBV B、C基因型,拉米夫定耐药株,恩替卡韦耐药株全长重组质粒为模板扩增RT区序列,测序结果与已知序列确证无误,有很好保真度;能从病毒载量1×103~1×108copys/mL HBV血清中扩增到目标序列,有很好的灵敏度;能从临床患者血清中扩增HBV RT区并测序,序列分析后能为临床提供HBV核苷(酸)类似物耐药位点突变及HBV基因型信息。结论建立了一种具有很好保真度、灵敏度以及实用性的HBV逆转录酶区PCR产物测序方法。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 逆转录酶区 PCR产物测序
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抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39轻链可变区基因的克隆与序列分析
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作者 沈树泉 周筱梅 +2 位作者 黄强 周丽英 杜子威 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 1996年第2期72-74,共3页
从抗人脑胶质瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,并以Oligo(dT)柱纯化mRNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)直接扩增出318bp的轻链可变区(VL)cDNA片断,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了S... 从抗人脑胶质瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,并以Oligo(dT)柱纯化mRNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)直接扩增出318bp的轻链可变区(VL)cDNA片断,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了SZ-39单抗轻链可变区基因。这为今后进一步制备基因工程抗体打下基础。 展开更多
关键词 单克隆抗体 可变区基因 胶质瘤 脑肿瘤
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