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用反向点杂交快速检测中国人β—地中海贫血基因突变 被引量:29
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作者 张基增 徐湘民 +1 位作者 马维芳 单越新 《第一军医大学学报》 CSCD 1993年第1期1-5,共5页
将一系列针对中国人18种β-地中海贫血(β-地贫)基因突变的ASO探銈固定在尼龙膜条上。用此膜条与用5′端生物素化引物扩增获得的β-珠蛋白基因片段杂交。再用酶标抗生物素蛋白及底物系统检出。用本法检测已知的18种中国人β-地贫突变样... 将一系列针对中国人18种β-地中海贫血(β-地贫)基因突变的ASO探銈固定在尼龙膜条上。用此膜条与用5′端生物素化引物扩增获得的β-珠蛋白基因片段杂交。再用酶标抗生物素蛋白及底物系统检出。用本法检测已知的18种中国人β-地贫突变样品,可准确识别这些突变的杂合子.纯合子和双重杂合子或正常DNA。应用此项技术经一二次杂交即可确定β-地贫基因型。这一技术不依赖同位素,操作简便,检测范围广。可望在我国β-地贫的大样本人群基因调查和临床普及产前诊断上起推动作用。 展开更多
关键词 地中海贫血 反向点杂交 基因
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HBV基因型在我国九省市的分布及与临床指标的关系 被引量:26
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作者 张韧 王敏 +4 位作者 符瑞佳 邝枣园 王宁宁 计勇 何蕴韶 《分子诊断与治疗杂志》 2010年第3期152-155,共4页
目的用反向斑点杂交检测HBV基因型的方法 ,了解我国HBV基因型的分布及其临床意义。方法利用反向斑点杂交对我国云南、江苏、浙江、新疆、北京、辽宁、福建、湖南、广东等9个省市的HBV阳性患者血清,和广州地区的肝癌患者术前血清进行HBV... 目的用反向斑点杂交检测HBV基因型的方法 ,了解我国HBV基因型的分布及其临床意义。方法利用反向斑点杂交对我国云南、江苏、浙江、新疆、北京、辽宁、福建、湖南、广东等9个省市的HBV阳性患者血清,和广州地区的肝癌患者术前血清进行HBV基因分型,并结合其临床指标进行相关性分析。结果 706例被分型的标本中,A型占0.1%(1/706)、B型占46.2%(326/706)、C型占49.0%(346/706)、D型占1.6%(11/706)、混合感染占3.1%(22/706)。HBV基因型与患者的年龄、性别、e抗体、e抗原差异没有统计学意义;肝癌患者的HBV基因型与肿瘤包膜、病灶数量、肝炎史、浸润、血管侵入、转移、临床分期、肿瘤家族史、饮酒史以及一些生化指标等差异也没有统计学意义。但发现了HBV基因型与病毒载量之间的关联具有统计学意义(P<0.01)。结论我国HBV基因型以B、C型为主,两者之间的感染人数差别不明显。我国还有少量D型分布,更少量的A型。HBV基因型与HBV病毒载量之间的关联具有统计学意义(P<0.01),提示HBV基因型可能影响患者体内HBV的复制。 展开更多
关键词 HBV基因型 反向斑点杂交 分布
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应用PCR结合反向斑点杂交技术检测β-地中海贫血 被引量:15
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作者 李翠莲 杨跃煌 代宏剑 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2007年第1期9-12,16,共5页
目的探讨一种简便、高效可同时检测β-地中海贫血多基因位点突变的基因诊断技术。方法采用多聚酶链反应(PCR)结合反向斑点杂交(RDB)技术。结果486例疑诊患者共检测出175例为β-地中海贫血,检出9种基因突变类型22种组合形式,包括纯合子... 目的探讨一种简便、高效可同时检测β-地中海贫血多基因位点突变的基因诊断技术。方法采用多聚酶链反应(PCR)结合反向斑点杂交(RDB)技术。结果486例疑诊患者共检测出175例为β-地中海贫血,检出9种基因突变类型22种组合形式,包括纯合子、杂合子以及双重杂合子。结论β-地中海贫血基因突变类型多样,基因组合形式复杂,多聚酶链反应结合反向斑点杂交技术(PCR/RDB)简便、高效、准确可靠,适于β-地中海贫血的基因诊断和实验研究,可作为常规方法推广用于临床标本的检测和产前诊断。 展开更多
关键词 反向斑点杂交 Β-地中海贫血 基因诊断
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厦门地区β地中海贫血基因突变类型及产前基因诊断研究 被引量:14
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作者 吴琦嫦 周裕林 +3 位作者 江雨 曾炳勋 王文博 许亚松 《中国优生与遗传杂志》 2007年第12期25-26,共2页
目的分析厦门地区β地中海贫血基因突变类型及其频率,探讨β地中海贫血产前基因诊断的意义。方法2006年3月至2007年2月,对在本院遗传咨询门诊就诊,怀疑有地中海贫血的249例患者,应用聚合酶链反应反向斑点杂交(PCR-RDB)技术进行β地贫基... 目的分析厦门地区β地中海贫血基因突变类型及其频率,探讨β地中海贫血产前基因诊断的意义。方法2006年3月至2007年2月,对在本院遗传咨询门诊就诊,怀疑有地中海贫血的249例患者,应用聚合酶链反应反向斑点杂交(PCR-RDB)技术进行β地贫基因检测,对夫妻双方均确诊为β地贫的孕妇采用超声介导下羊膜腔穿刺术或脐血穿刺术进行产前基因诊断。结果249例患者中检测到7种基因突变类型,其中654M/N 26例,占42.6%,41-42M/N 25例,占41.0%,17M/N 4例,占6.5%,71-72M/N 2例,占3.2%,-28M/N 2例,占3.2%,-29M 1例,占1.6%,27/28M1例,占1.6%。发现三对已妊娠的夫妻均患有轻型β地贫,并进行β地贫产前基因诊断,确诊2例胎儿为重型β地贫,1例为轻型β地贫。结论研究结果为在厦门地区开展β地中海贫血的遗传咨询和产前诊断提供了有价值的基础资料,产前诊断是阻止该病重症患儿出生的最有效手段。 展开更多
关键词 Β地中海贫血 基因突变 产前诊断 反向斑点杂交
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应用反向点杂交法检测α-地中海贫血点突变 被引量:11
5
作者 郭广洲 陈延娥 +1 位作者 廖生赟 周敏 《热带医学杂志》 CAS 2008年第8期785-787,共3页
目的建立一种临床上切实可行的非缺失型α-地中海贫血基因检测方法。方法中国人常见的非缺失α-地中海贫血为αCSα、αQSα、αWSα3种类型,针对此3个位点设计特异性带有生物素标记的引物进行PCR扩增,扩增产物与固定在膜条上的寡核苷... 目的建立一种临床上切实可行的非缺失型α-地中海贫血基因检测方法。方法中国人常见的非缺失α-地中海贫血为αCSα、αQSα、αWSα3种类型,针对此3个位点设计特异性带有生物素标记的引物进行PCR扩增,扩增产物与固定在膜条上的寡核苷酸探针进行杂交,并通过一系列显色反应分析结果。结果分别分析3种突变类型的正常及突变位点信号,明确检测样品在3个位点是否发生了突变,及是否为突变纯合子或杂合子,验证了该方法可诊断非缺失型!-地中海贫血点突变。结论该检测方法结果可靠,且简便易行,对实验室仪器设备要求不高,适合于在临床推广。 展开更多
关键词 Α-地中海贫血 点突变 反向点杂交
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女性下生殖道解脲脲原体的基因分型与致病性研究 被引量:8
6
作者 覃春容 任晓慧 +4 位作者 吴若松 张帝开 史成军 程刚 胡斌 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第4期204-206,共3页
目的运用反相斑点杂交技术进行解脲脲原体(UU)基因分型,揭示正常携带状态及感染状态下解脲脲原体的基因型,并建立一个能用于临床标本直接分型的简单、实用、可靠性好的解脲脲原体基因分型方法。方法对有阴道炎症状和体征的病例组和正常... 目的运用反相斑点杂交技术进行解脲脲原体(UU)基因分型,揭示正常携带状态及感染状态下解脲脲原体的基因型,并建立一个能用于临床标本直接分型的简单、实用、可靠性好的解脲脲原体基因分型方法。方法对有阴道炎症状和体征的病例组和正常体检人群进行病史询问、临床检查,先取阴道分泌物,采用FQ-PCR做解脲脲原体检测。设计分型引物,对FQ-PCR阳性标本用反相斑点杂交进行解脲脲原体基因型鉴定。结果病例组与对照组解脲脲原体基因型的检出率差异无显著性,总检出率为89.1%。对照组中解脲脲原体以parvum群(微小脲原体)为主(79.3%),其检出率较女性下生殖道感染患者高(P=0.018),而且以其中的1,3,6基因型的单型别为主(82.6%)。病例组解脲脲原体两群感染(16.2%)较对照组高(6.9%),差异有显著性(P=0.033),其中以T960群与Parvum群1型的多型别感染较高(P=0.009);在多型别感染中1型的检出率病例组较对照组高(P=0.026),而单型别感染中1型的检出率在对照组高(P=0.000)。结论parvum群,尤其是1,3,6的单型别在正常人群携带的可能性较大。而女性下生殖道感染患者解脲脲原体的两群感染较正常体检人群高,尤以T960群与parvum群中1型的多型别感染较正常体检人群高,提示T960群有可能和1型起协同作用或独自导致疾病。 展开更多
关键词 解脲脲原体 反相斑点杂交 基因型
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Profile, spectrum and significance of hepatitisB virus genotypes in chronic HBV-infected patients in Yunnan, China 被引量:9
7
作者 Hutcha Sriplung Virasakdi Chongsuvivatwong Alan Geater 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2008年第3期271-279,共9页
BACKGROUND: There are significant variations in the geographical distribution of hepatitis B virus (HBV) genotypes throughout the world, and some genotypes are associated with different clinical outcomes. Eight genoty... BACKGROUND: There are significant variations in the geographical distribution of hepatitis B virus (HBV) genotypes throughout the world, and some genotypes are associated with different clinical outcomes. Eight genotypes of human HBV (designated A-H) have been reported. The present study was designed to examine the distribution of HBV genotypes among patients at various stages of chronic type B liver disease in Yunnan Province, China, and to explore its significance and the relationship of HBV genotype with gender and age, clinical spectrum of chronic HBV infection, and viral replicative activity. METHODS: Serum samples from 126 patients with chronic HBV infection from Yunnan Province, including 26 chronic asymptomatic HBV carriers (ASC), 61 patients with chronic hepatitis B (CHB) (21 mild, 30 moderate and 10 severe), 20 patients with chronic fulminant hepatic failure (CFHF), 12 patients with HBV-related liver cirrhosis (LC) and 7 patients with HBV-related hepatocellular carcinoma (HCC) were analyzed using reverse dot blot (RDB) methodology, which is based on the reverse hybridization principle for HBV genotyping. The relations of HBV genotype with gender and age, clinical patterns, and serological data of the patients were analyzed. RESULTS: In this series, genotypes A, B, C, and D were found. 38.1% patients (48/126) belonged to B, 54.8% (69/126) to C, 0.8% (1/126) to D, 1.6% (2/126) to a mixture of B and C, and 1.6% (2/126) to a mixture of A and C. 3.2% patients (4/126) had unknown genotypes. No other genotypes (E, F, G, and H) were found. Genotypes B and C were predominant. There was a statistically significant difference in the distributions of genotypes C and B (chi(2)=7.04, P=0.008), and C was the dominant genotype in all patient categories. The rate of genotype B in the mild CHB group was significantly higher than that in the moderate and severe groups (chi(2)=12.16, P=0.0001; chi(2)=11.98, P=0.001, respectively), the ASC group (chi(2)=5.46, P=0.02), the CFHF group (chi(2)=5.53, P=0.019), and the LC/HCC gr 展开更多
关键词 hepatitis B virus GENOTYPE reverse dot blot distribution clinical interrelation
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单管多重PCR结合RDB技术在α-地贫产前诊断中的应用 被引量:9
8
作者 肖奇志 周玉球 +2 位作者 张永良 谢建红 郑勤 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第3期271-273,共3页
目的基因诊断结果在α-地贫的产前诊断中具有决定意义。采取两种不同技术原理的方法验证产前诊断结果,是保证产前诊断结果可靠性的基本要求。本文探讨检测常见非缺失型α-地贫的RDB技术作为单管多重PCR技术产前诊断α-地贫验证方法的可... 目的基因诊断结果在α-地贫的产前诊断中具有决定意义。采取两种不同技术原理的方法验证产前诊断结果,是保证产前诊断结果可靠性的基本要求。本文探讨检测常见非缺失型α-地贫的RDB技术作为单管多重PCR技术产前诊断α-地贫验证方法的可行性。方法采用双盲法,对73例α-地贫产前诊断的标本分别采用针对中国人3种常见缺失型α-地贫突变的单管多重gap-PCR技术和针对常见3种非缺失α-地贫点突变的RDB法进行分析,根据单管多重PCR技术扩增产物电泳图谱和RDB膜条上显色的斑点分别判断某一个标本缺失型和非缺失α-地贫的突变类型,且与引产或出生后胎儿脐带血中HbBart′s定量结果进行比对。结果单管多重PCR和RDB技术均能分别准确检出常见缺失型和非缺失型α-地贫各种突变类型。如将两者结合分析,还能提供相互佐证的重要信息:对于--SEA、-α3.7和-α4.2自身或相互组合的各种基因型标本,其RDB膜条的杂交斑点均不显色;而--SEA与αCSα、αQSα和αWSα组合的基因型标本该突变的正常对照点不显色。α-地贫产前诊断结果与胎儿脐带血电泳结果完全吻合。结论单管多重PCR结合RDB技术同时应用于α-地贫的基因诊断,可保证产前诊断的可靠性,值得在临床遗传诊断实验室中推广应用。 展开更多
关键词 地中海贫血 酶联免疫吸附测定 产前诊断 反向点杂交
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用反向杂交法进行β地中海贫血的产前诊断32例 被引量:9
9
作者 钟梅 金志魁 +1 位作者 马维芳 张绍云 《中国优生与遗传杂志》 1995年第3期17-18,25,共3页
本文应用反向点杂交术(RDB),进行β地中海贫血的产前诊断。根据中国人地贫的突变基因频率的分布情况,制备两种膜条,一种为“通用”膜条,上面结合了中国人7种常见突变的ASO探针;二为“稀少”膜条,结合了检测中国人少见的... 本文应用反向点杂交术(RDB),进行β地中海贫血的产前诊断。根据中国人地贫的突变基因频率的分布情况,制备两种膜条,一种为“通用”膜条,上面结合了中国人7种常见突变的ASO探针;二为“稀少”膜条,结合了检测中国人少见的11种突变的ASO探针。用此方法进行产前诊断32例,只需一、二次杂交,就能准确区分β地贫不同突变类型的纯合子、杂合子、双重杂合子及正常等位基因。这一技术不依赖同位素、操作简便、检测范围广,可望在我国β地贫的大样本的人群基因调查和临床普及产前诊断起推动作用。 展开更多
关键词 产前诊断 Β地中海贫血 反向杂交 ASO 杂合子 突变 中国人 普及 准确 中国
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贵州地区重型β-地中海贫血基因突变类型分析 被引量:8
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作者 刘兴梅 苏莉 +3 位作者 李贵芳 吴娴 王茹蕾 黄盛文 《贵阳医学院学报》 CAS 2016年第4期407-409,413,共4页
目的:了解贵州地区重型β-地中海贫血基因突变类型及分布情况。方法:1 980例疑诊的β-地中海贫血贵州籍患者,采用反向斑点杂交技术对中国人群中8种常见和9种少见β-地中海贫血基因突变类型进行检测,对检出的突变基因型及其分布频率进行... 目的:了解贵州地区重型β-地中海贫血基因突变类型及分布情况。方法:1 980例疑诊的β-地中海贫血贵州籍患者,采用反向斑点杂交技术对中国人群中8种常见和9种少见β-地中海贫血基因突变类型进行检测,对检出的突变基因型及其分布频率进行分析。结果:共检出128例重型β-地中海贫血,其中纯合子62例,双重杂合子66例;共检出14种突变基因型,按分布频率大小前4种依次为CD17/CD17(28.13%)、CD41-42/CD17(23.44%)、CD41-42/CD41-42(17.19%)、IVS-Ⅱ-654/CD17(7.81%);共检出等位基因突变类型8种,前4种依次为CD17(46.09%)、CD41-42(35.16%)、IVS-Ⅱ-654(10.55%)和-28(5.08%)。结论:贵州地区重型β-地中海贫血基因突变类型以CD17、CD41-42、IVS-Ⅱ-654最常见。 展开更多
关键词 Β-地中海贫血 基因 突变 反向点杂交 贵州
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深圳地区不孕不育患者α、β地中海贫血分子流行病学回顾性分析 被引量:7
11
作者 王丽娟 朱元昌 +5 位作者 尹彪 蔡靖 吴彤华 李观贵 胡晓东 曾勇 《中国优生与遗传杂志》 2013年第2期17-19,共3页
目的回顾性分析深圳地区不孕不育患者α、β地中海贫血的携带率及基因类型。方法采集7358例不孕不育患者外周血,通过单管多重PCR(Gap-PCR)及DNA反向斑点杂交(reverse dot blot,RDB)方法,分析缺失型α-和突变型β-地中海贫血的基因类型... 目的回顾性分析深圳地区不孕不育患者α、β地中海贫血的携带率及基因类型。方法采集7358例不孕不育患者外周血,通过单管多重PCR(Gap-PCR)及DNA反向斑点杂交(reverse dot blot,RDB)方法,分析缺失型α-和突变型β-地中海贫血的基因类型。结果深圳不孕不育患者α、β地中海贫血基因总携带率为9.01%,缺失型α-地中海贫血基因携带率为6.58%,突变型β-地中海贫血基因携带率为2.69%,α、β-复合型地中海贫血基因携带率为0.27%。在缺失型α-地中海贫血中,--SEA/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα3种基因型检出率最高,占总缺失型的98.55%;β-地中海贫血中主要的5种基因型分别是CD41-42/N、654/N、-28/N、CD17/N、βE/N,占β-地中海贫血的92.42%。结论深圳地区不孕不育患者地中海贫血发病率较高,该研究为本地区不孕不育人群开展遗传咨询、植入前遗传学诊断和产前诊断等提供有价值的基础资料。 展开更多
关键词 Α-地中海贫血 Β-地中海贫血 单管多重PCR 反向斑点杂交
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珠海地区慢性丙型肝炎患者的HCV基因分型研究 被引量:6
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作者 李宇雄 杨永强 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第5期1071-1073,共3页
目的:了解珠海地区丙型肝炎患者的HCV基因分型情况,为丙型肝炎病毒的诊断和预防及治疗提供有力依据。方法:将53例HCV-RNA阳性的血清标本先逆转录为cDNA后,对其进行PCR扩增,然后采用反向点杂交技术(RDB)对扩增产物进行基因分型检测。结果... 目的:了解珠海地区丙型肝炎患者的HCV基因分型情况,为丙型肝炎病毒的诊断和预防及治疗提供有力依据。方法:将53例HCV-RNA阳性的血清标本先逆转录为cDNA后,对其进行PCR扩增,然后采用反向点杂交技术(RDB)对扩增产物进行基因分型检测。结果:样本53例,共检出4种基因型,比例分别为1b型占60.38%,2 a型占7.55%,3b型占16.98%,6 a型占15.09%。结论:珠海地区HCV基因型以1b型为主,6 a型和3b型次之,2 a型比例相对较低,3b型高于全国其他地区。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 反向点杂交 基因分型
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疑为地中海贫血人群3000例β-地中海贫血筛查及基因突变类型分析 被引量:5
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作者 陈善昌 汤伟光 +2 位作者 胡静云 陈栋 彭小媚 《广西医学》 CAS 2015年第6期807-809,共3页
目的了解疑为地中海贫血人群β-地中海贫血基因突变类型。方法采用PCR体外扩增结合DNA芯片反向点杂交技术,检测3000例疑为地中海贫血者17种β-地中海贫血基因突变类型。结果 3 000例中β-地中海贫血基因突变携带率为26.27%(788/3 000)。... 目的了解疑为地中海贫血人群β-地中海贫血基因突变类型。方法采用PCR体外扩增结合DNA芯片反向点杂交技术,检测3000例疑为地中海贫血者17种β-地中海贫血基因突变类型。结果 3 000例中β-地中海贫血基因突变携带率为26.27%(788/3 000)。788例β-地中海贫血基因突变者中男455例占57.74%,女333例占42.26%;杂合子占86.93%(685/788),双重杂合子占9.01%(71/788),纯合子占4.06%(32/788)。CD41-42(-TTCT)位点突变构成比最高,在685例杂合子中占50.36%(345/685),32例纯合子中占71.88%(23/32),71例双重杂合子中占52.11%(37/71)。788例β-地中海贫血基因突变携带者中共发现基因突变类型10个,部分患者有两种或两种以上突变。其中突变率最高的为CD41-42(-TTCT),占51.40%(405/788),其次为IVS-Ⅱ-654(C→T)占17.26%(136/788);-28(A→G)占13.96%(110/788)。结论疑为地中海贫血人群的β-地中海贫血基因突变携带率较高,建议将地中海贫血筛查列入常规体检、婚检和孕检,以降低重症地中海贫血患儿的出生率。 展开更多
关键词 Β-地中海贫血 基因突变 反向点杂交 体检人群
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广东湛江地区β地中海贫血基因突变类型的研究 被引量:3
14
作者 郑克勤 周汝滨 +2 位作者 李永全 陈小萍 廖霞 《中国优生与遗传杂志》 1999年第2期24-25,共2页
经血液学方法检出的湛江地区β地贫杂合子36例,用聚合酶链反应扩增其β珠蛋白基因,再经反向点杂交确定基因突变类型。结果表明共有5种β地贫基因,其中CD41-42(-TCTT)21例,占583%;IVS2nt654(C... 经血液学方法检出的湛江地区β地贫杂合子36例,用聚合酶链反应扩增其β珠蛋白基因,再经反向点杂交确定基因突变类型。结果表明共有5种β地贫基因,其中CD41-42(-TCTT)21例,占583%;IVS2nt654(C→T)9例,占25%;β-28(A→G)3例,占83%;CD17(A→T)2例,占56%;CD71-72(+A)1例,占28%。本研究结果对在本地区开展地贫基因分析、婚姻指导和产前诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 Β地中海贫血 基因突变 反向点杂交 基因诊断
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结肠癌转移相关潜在微小RNA(miRNA)的分离与鉴定(英文) 被引量:4
15
作者 王燕 张金莉 +1 位作者 彭莉萍 张晟春 《遵义医学院学报》 2015年第5期479-487,共9页
目的构建在两种结肠癌细胞株SW480和SW620中微小RNA的差异表达文库,分离与结肠癌转移具有潜在相关性的微小RNA。方法以具有不同转移潜能的结肠癌细胞株SW480和SW620为材料,应用改良抑制性消减杂交联合反向斑点杂交技术,分离在两种细胞... 目的构建在两种结肠癌细胞株SW480和SW620中微小RNA的差异表达文库,分离与结肠癌转移具有潜在相关性的微小RNA。方法以具有不同转移潜能的结肠癌细胞株SW480和SW620为材料,应用改良抑制性消减杂交联合反向斑点杂交技术,分离在两种细胞中差异表达的微小RNA,利用生物软件BLAST及MIREAP将分离到的微小RNA序列进行分析比对。结果鉴定出在SW480和SW620之间表达有明显差异的24种微小RNA,其中4种为新发现的微小RNA,并提交至Gen Bank数据库。这些微小RNA中经文献查询已知部分参与了结肠癌的发生发展过程,部分在基因转录、细胞周期循环、信号传导和细胞凋亡过程具有一定的功能。结论经过改良的抑制消减杂交技术可以高效地分离不同标本间差异表达的微小RNA;本研究得出的结果可为结肠癌细胞转移的分子生物学机制研究提供新的方向。 展开更多
关键词 微小RNA 结直肠癌 转移 抑制性消减杂交 反向斑点杂交技术
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湖南部分地区β地中海贫血分子遗传学背景调查 被引量:4
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作者 胡浩 刘沁 +1 位作者 贾政军 王华 《中国优生与遗传杂志》 2015年第3期12-13,共2页
目的调查湖南地区育龄人群中β地中海贫血(β地贫)基因的突变类型及其构成比。方法采集血液学筛查阳性个体及其配偶样本,应用PCR结合反向斑点杂交法进行β地贫基因分析。结果在2610例检测对象中,1540例为β地贫基因杂合突变携带者。共... 目的调查湖南地区育龄人群中β地中海贫血(β地贫)基因的突变类型及其构成比。方法采集血液学筛查阳性个体及其配偶样本,应用PCR结合反向斑点杂交法进行β地贫基因分析。结果在2610例检测对象中,1540例为β地贫基因杂合突变携带者。共检测到12种突变,其中以IVS-2-654(C-T)、CD41-42(-CTTT)和CD17(A-T)为最常见突变,上述3种突变类型占所有检出突变的84.73%。结论湖南地区β地贫基因突变构成比具有区域性特征,需在地贫的预防干预中应给予足够重视。 展开更多
关键词 Β地中海贫血 基因突变 反向斑点杂交
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改进反向点杂交方法检测脑肿瘤基因突变 被引量:3
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作者 顾建文 章翔 +2 位作者 李侠 费舟 柴玉波 《第四军医大学学报》 2000年第9期1090-1093,共4页
目的 探讨利用改进的反向点杂交方法检测已知细胞因子及肿瘤相关基因在胶质瘤、听神经瘤及脉络丛乳头状瘤中表达及突变的可行性 .方法 分别提取正常脑组织和胶质瘤、听神经瘤、脉络丛乳头状瘤组织中的总 RNA,并反转录为 c DNA,随机引... 目的 探讨利用改进的反向点杂交方法检测已知细胞因子及肿瘤相关基因在胶质瘤、听神经瘤及脉络丛乳头状瘤中表达及突变的可行性 .方法 分别提取正常脑组织和胶质瘤、听神经瘤、脉络丛乳头状瘤组织中的总 RNA,并反转录为 c DNA,随机引物法标记探针 ,与点于特殊尼龙膜上的已知分子进行反向杂交 .结果 该方法可同时检测多种基因在四种组织中的表达 ,其中 BMP- 6、GH,Sis,m dm 2在四种组织中均有较高水平表达 ,而 BMP- 7,IL- 1,- 11,- 12 ,TGF- α,G- CSF,TPO,Endostatin,nm2 3,raf,p5 3,c- er B2 ,ANG在四种组织中均为低表达 ;其余基因在四种组织中的表达水平有较大的差异 .结论 改进的反向点杂交方法可同时检测多种基因的表达 ,并在不同的组织间进行比较 。 展开更多
关键词 反向点杂交 脑肿瘤 基因突变
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反向点杂交技术联合血常规检测对β-地贫基因的诊断价值
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作者 林青 温晓静 +1 位作者 赖有美 钟宏文 《医学信息》 2024年第21期146-149,共4页
目的研究反向点杂交(RDB)技术联合血常规检测对β-地贫基因的诊断价值。方法选取2021年1月-2023年3月我院收治的60例β-地中海贫血患者为研究组,并选取同期在我院体检的健康人群60名为对照组,均进行血常规和RDB技术检测。比较两组人群... 目的研究反向点杂交(RDB)技术联合血常规检测对β-地贫基因的诊断价值。方法选取2021年1月-2023年3月我院收治的60例β-地中海贫血患者为研究组,并选取同期在我院体检的健康人群60名为对照组,均进行血常规和RDB技术检测。比较两组人群血常规指标[红细胞分布宽度(RDW)、红细胞体积(MCV)、红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞血红蛋白量(MCH)],ROC曲线分析不同检查方法(血常规、RDB、血常规+RDB)诊断β-地贫基因的效能。结果研究组RDW大于对照组,MCV、MCHC、MCH低于对照组(P<0.05);ROC曲线显示,血常规+RDB检查对β-地贫基因检出率为97.86%,高于血常规、RDB单独检测(P<0.05),而血常规与RDB检测对β-地贫基因检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论RDB技术联合血常规检测可提高对β-地贫基因的诊断价值,一定程度减小漏诊、误诊情况,为临床诊治β-地中海贫血提供更可靠的参考,可作为临床筛查诊断β-地贫基因的首选方法。 展开更多
关键词 反向点杂交技术 血常规检测 β-地贫基因
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反向多点杂交技术检测胶质瘤相关基因表达的研究 被引量:2
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作者 杨冰 黄强 +2 位作者 徐启武 王爱东 陈寒春 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期372-376,共5页
目的利用反向点杂交技术检测胶质瘤相关基因谱在胶质瘤组织中的表达情况,为这些基因在胶质瘤恶性进展中的作用提供依据并找出具有进一步研究价值的基因,同时对基因芯片结果进行验证。方法分别提取正常脑和胶质瘤标本中的总RNA,并反转录... 目的利用反向点杂交技术检测胶质瘤相关基因谱在胶质瘤组织中的表达情况,为这些基因在胶质瘤恶性进展中的作用提供依据并找出具有进一步研究价值的基因,同时对基因芯片结果进行验证。方法分别提取正常脑和胶质瘤标本中的总RNA,并反转录为cDNA,随机引物法标记探针,与点于带正电荷尼龙膜上的基因片断进行反向杂交。用复日SmartView图像分析软件进行处理,将各个基因的表达强度和β-actine进行比对,根据比值作相关基因的半定量分析。结果Ⅱ级胶质瘤中表达上调的基因33条,下调19条,10条差异不明显;Ⅲ级胶质瘤中37条基因上调,17条基因下调,8条差异不明显;Ⅳ级胶质瘤中26条上调,20条下调,16条差异不明显。经单因素方差分析,差异具有统计学意义(P<0.05)的有10、11、19、24、28、29和56号基因。结论反向点杂交可以同时检测数十个基因的表达,并对表达量高低进行半定量分析。通过这种方法我们发现eps8、A20mRNA在胶质瘤中的高表达。其在胶质瘤中的高表达具有进一步研究的价值。 展开更多
关键词 胶质瘤 相关基因表达 高表达 上调 反向点杂交 恶性进展 反向杂交 差异 结论 正电荷
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反向斑点杂交法快速检测HBV基因型反应条件的优化和建立 被引量:3
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作者 赵丽 张文露 +4 位作者 胡源 刘彦辰 赖国旗 杨凤 黄爱龙 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期85-89,共5页
利用反向斑点杂交技术,设计出特异性基因分型探针,并将探针固定在带正电荷的尼龙膜上,与PCR扩增带有地高辛标记的临床血清样本进行杂交。通过优化杂交反应条件,建立起简单、快速、特异地检测HBV基因型的方法。利用该方法对重庆地区临床... 利用反向斑点杂交技术,设计出特异性基因分型探针,并将探针固定在带正电荷的尼龙膜上,与PCR扩增带有地高辛标记的临床血清样本进行杂交。通过优化杂交反应条件,建立起简单、快速、特异地检测HBV基因型的方法。利用该方法对重庆地区临床样本进行分型检测,并与直接测序结果比较。结果表明新建的HBV基因分型方法可对拷贝数在103以上的血清样本准确分型,特异性达到96.67%。重庆地区感染HBV主要以B型为主。 展开更多
关键词 反向斑点杂交 HBV 基因型 临床样本
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