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仙台病毒F基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达及抗原性分析
被引量：
5
1
作者
曲连东
蒋良丰
+6 位作者
刘家森
司昌德
郭东春
姜骞
林欢
韩凌霞
刘娣
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期347-350,共4页
为真核表达仙台病毒(SeV)融合蛋白(F)基因,本研究根据GenBank登录的SeV F基因序列设计合成一对特异性引物,以pMD18-T-F阳性重组质粒为模板扩增F基因,并将其克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac HTa中,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受...
为真核表达仙台病毒(SeV)融合蛋白(F)基因,本研究根据GenBank登录的SeV F基因序列设计合成一对特异性引物,以pMD18-T-F阳性重组质粒为模板扩增F基因,并将其克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac HTa中,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受态细胞DH10Bac,提取重组杆粒rBacmid-F,经PCR鉴定正确将rBacmid-F转染Sf9细胞,连续传代后,细胞病变明显。经SDS-PAGE分析,成功表达了相对分子量为65ku左右的F蛋白,western blot和ELISA分析表明重组F蛋白具有良好的抗原性。
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关键词
仙台病毒
F基因
重组杆状病毒表达系统
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职称材料
烟芽夜蛾囊泡病毒3h株编码的3H-117蛋白能干扰AcMNPV的口服活性
被引量：
1
2
作者
李诗薇
欧阳依依
+4 位作者
杨长锦
童悦
甘佳敏
黄国华
于欢
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期131-144,共14页
【目的】囊泡病毒是一类体液传播的昆虫病毒,具有特殊的致病历程和良好的生防应用潜力。烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)是我国分离的第一株囊泡病毒,其编码的3H-117蛋白被报道为HvAV-3h病毒粒子的结...
【目的】囊泡病毒是一类体液传播的昆虫病毒,具有特殊的致病历程和良好的生防应用潜力。烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)是我国分离的第一株囊泡病毒,其编码的3H-117蛋白被报道为HvAV-3h病毒粒子的结构蛋白。【方法】为了进一步探究3h-117基因的功能,本研究以Bac-to-Bac昆虫表达系统为研究平台,将3h-117插入到苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nuclepolyhedrovirus,AcMNPV)的基因组中,成功构建了具有口服活性的重组病毒AcMNPV-117。【结果】通过与野生型病毒(AcMNPV-Egfp)的比较,证实在感染Sf9细胞72–96 h后,AcMNPV-117的出芽型病毒粒子产量以及病毒DNA的拷贝数显著降低,且AcMNPV-117的多角体明显增大。进一步的生测结果表明,AcMNPV-117对三龄甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)的90%致死浓度明显高于AcMNPV-Egfp。此外,被病毒感染的甜菜夜蛾幼虫生长相对健康幼虫明显减缓,且试虫的日均取食量也因病毒的感染而被抑制。共聚焦结果表明,3H-117与AcMNPV-117感染后宿主细胞核骨架的聚集过程相关,提示3H-117在囊泡病毒感染过程中可能具有瓦解宿主细胞核的功能。【结论】本研究的结果进一步验证了3h-117的功能,为囊泡病毒的分子生物学研究奠定了基础。
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关键词
烟芽夜蛾囊泡病毒3h株
重组杆状病毒
苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒
Bac-to-Bac昆虫表达系统
生物活性测定
原文传递
题名
仙台病毒F基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达及抗原性分析
被引量：
5
1
作者
曲连东
蒋良丰
刘家森
司昌德
郭东春
姜骞
林欢
韩凌霞
刘娣
机构
黑龙江省农业科学院博士后工作站
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期347-350,共4页
基金
国家科技基础平台工作专项(2003DIA75033)
文摘
为真核表达仙台病毒(SeV)融合蛋白(F)基因,本研究根据GenBank登录的SeV F基因序列设计合成一对特异性引物,以pMD18-T-F阳性重组质粒为模板扩增F基因,并将其克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac HTa中,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受态细胞DH10Bac,提取重组杆粒rBacmid-F,经PCR鉴定正确将rBacmid-F转染Sf9细胞,连续传代后,细胞病变明显。经SDS-PAGE分析,成功表达了相对分子量为65ku左右的F蛋白,western blot和ELISA分析表明重组F蛋白具有良好的抗原性。
关键词
仙台病毒
F基因
重组杆状病毒表达系统
Keywords
Sendai
Virus
F
gene
recombinant
baculovirus
expression
system
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
烟芽夜蛾囊泡病毒3h株编码的3H-117蛋白能干扰AcMNPV的口服活性
被引量：
1
2
作者
李诗薇
欧阳依依
杨长锦
童悦
甘佳敏
黄国华
于欢
机构
湖南农业大学植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期131-144,共14页
基金
湖南省自然科学基金(2019JJ50234)
湖南省大学生创新训练项目(S201910537056)。
文摘
【目的】囊泡病毒是一类体液传播的昆虫病毒,具有特殊的致病历程和良好的生防应用潜力。烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)是我国分离的第一株囊泡病毒,其编码的3H-117蛋白被报道为HvAV-3h病毒粒子的结构蛋白。【方法】为了进一步探究3h-117基因的功能,本研究以Bac-to-Bac昆虫表达系统为研究平台,将3h-117插入到苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nuclepolyhedrovirus,AcMNPV)的基因组中,成功构建了具有口服活性的重组病毒AcMNPV-117。【结果】通过与野生型病毒(AcMNPV-Egfp)的比较,证实在感染Sf9细胞72–96 h后,AcMNPV-117的出芽型病毒粒子产量以及病毒DNA的拷贝数显著降低,且AcMNPV-117的多角体明显增大。进一步的生测结果表明,AcMNPV-117对三龄甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)的90%致死浓度明显高于AcMNPV-Egfp。此外,被病毒感染的甜菜夜蛾幼虫生长相对健康幼虫明显减缓,且试虫的日均取食量也因病毒的感染而被抑制。共聚焦结果表明,3H-117与AcMNPV-117感染后宿主细胞核骨架的聚集过程相关,提示3H-117在囊泡病毒感染过程中可能具有瓦解宿主细胞核的功能。【结论】本研究的结果进一步验证了3h-117的功能,为囊泡病毒的分子生物学研究奠定了基础。
关键词
烟芽夜蛾囊泡病毒3h株
重组杆状病毒
苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒
Bac-to-Bac昆虫表达系统
生物活性测定
Keywords
Heliothis
virescens
ascovirus
3h(HvAV-3h)
recombinant
baculovirus
Autographa
californica
multiple
nuclepolyhedrovirus(AcMNPV)
Bac-to-Bac
insect
expression
system
biological
assays
分类号
S476.13 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
仙台病毒F基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达及抗原性分析
曲连东
蒋良丰
刘家森
司昌德
郭东春
姜骞
林欢
韩凌霞
刘娣
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
5
下载PDF
职称材料
2
烟芽夜蛾囊泡病毒3h株编码的3H-117蛋白能干扰AcMNPV的口服活性
李诗薇
欧阳依依
杨长锦
童悦
甘佳敏
黄国华
于欢
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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