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电针对脊髓损伤模型大鼠热休克蛋白70及其mRNA的影响 被引量：9
1
作者 徐维蓉 王强利 +1 位作者 王奕 郭春荣 《上海针灸杂志》 2009年第9期550-553,共4页
目的探讨电针对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后热休克蛋白70(Hsp70)及其mRNA(Hsp70mRNA)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠,随机分为电针组、模型组和假手术组。采用改良的Allen法建立大鼠急性脊髓损伤模型,电针组动物手术后2h即给予电针处理... 目的探讨电针对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后热休克蛋白70(Hsp70)及其mRNA(Hsp70mRNA)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠,随机分为电针组、模型组和假手术组。采用改良的Allen法建立大鼠急性脊髓损伤模型,电针组动物手术后2h即给予电针处理。分别在1d、2d和3d处死动物,应用实时荧光定量PCR方法检测脊髓损伤部Hsp70mRNA,应用免疫组织化学结合图像定量分析方法检测Hsp70表达。结果手术后1d时模型组和电针组Hsp70mRNA表达量与假手术组比较均明显增高(P<0.05),随后逐渐下降,至3d时已降至假手术组水平。电针组Hsp70mRNA表达下降速率明显较模型组缓慢,Hsp70mRNA表达量在2d时仍明显高于模型组(P<0.05)。模型组和电针组Hsp70蛋白表达也是1d时最高,以后逐渐下降;电针组Hsp70表达在各时间段均明显高于模型组(P<0.05)。结论电针治疗可以增加脊髓损伤大鼠脊髓损伤部Hsp70及其mRNA的表达,减少细胞毒性,从而抑制神经元的凋亡和死亡。 展开更多
关键词 电针 脊髓损伤 热休克蛋白70 基因表达 实时荧光定量pcr 免疫组织化学
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实时荧光定量PCR HBV-DNA检测系统性能验证方法的探讨 被引量：7
2
作者 李艳梅 江忠勇 李志强 《西南国防医药》 CAS 2018年第12期1177-1179,共3页
目的探讨实时荧光定量PCR HBV-DNA检测系统的性能验证方法。方法根据中国合格评定国家认可委员会(CNAS)有关要求,并参照美国国家临床实验室标准化协会(CLSI)相关EP文件,对本实验室HBV-DNA检测系统的性能验证方法进行试验设计,采用实时... 目的探讨实时荧光定量PCR HBV-DNA检测系统的性能验证方法。方法根据中国合格评定国家认可委员会(CNAS)有关要求,并参照美国国家临床实验室标准化协会(CLSI)相关EP文件,对本实验室HBV-DNA检测系统的性能验证方法进行试验设计,采用实时荧光定量PCR方法对临床血清标本进行检测。结果低、高两个浓度水平的重复性精密度(CV批内)分别为1.47%、0.79%,中间精密度(CV批间)分别为2.09%、0.995%。标准定值血清测量值的对数与认定值偏差均≤±0.4。线性范围验证的回归方程为y=1.005x-0.2633,R2=0.9991(P <0.01),范围为(1×102～5×109)IU/ml。检测下限为100 IU/ml。结论本实验室HBV-DNA检测系统性能符合要求,设计的性能验证方法可行性好,可为建立有关系统性能验证的标准化操作规程(SOP)提供参考依据。 展开更多
关键词 检测性能 验证 实时荧光定量pcr HBV-DNA 精密度
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非免疫性胎儿水肿与HPV-B19病毒的关系及检测 被引量：4
3
作者 张晓波 顾依群 +5 位作者 汪颖南 卢利娟 王爱春 谢俊玲 孙云飞 贾红梅 《诊断病理学杂志》 CSCD 2015年第9期526-528,533,共4页
目的探讨非免疫性胎儿水肿(NIHF)与人微小病毒(HPV-B19)感染的关系,以及HPV-B19病毒感染的发病机制、病理特点和检测方法等。方法回顾性分析13例非免疫性胎儿水肿的尸检资料及临床资料,复习相关的文献,对13例尸检病例的胎盘组织应用实... 目的探讨非免疫性胎儿水肿(NIHF)与人微小病毒(HPV-B19)感染的关系,以及HPV-B19病毒感染的发病机制、病理特点和检测方法等。方法回顾性分析13例非免疫性胎儿水肿的尸检资料及临床资料,复习相关的文献,对13例尸检病例的胎盘组织应用实时荧光定量聚合酶链反应方法进行HPV-B19病毒等5项微生物检测,分析HPV-B19病毒在非免疫性胎儿水肿中感染的情况。结果 13例中2例伴有胎儿颈部淋巴管水囊瘤,6例同时合并其他脏器畸形,1例染色体检查为21-三体。13例中2例HPV-B19病毒(+)。结论 HPV-B19病毒感染是引起非免疫性胎儿水肿的重要病因之一。实时荧光定量PCR技术可以是确定HPV-B19病毒感染较好的检测方法。 展开更多
关键词 非免疫性胎儿水肿 人类微小病毒B19 实时荧光定量聚合酶链法
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PTK787对早产儿视网膜病变大鼠模型血管内皮生长因子及其受体mRNA表达的影响 被引量：2
4
作者 阮豫才 唐兰芬 +3 位作者 陈日玲 蔡娜莉 谭建新 方玉兰 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2012年第8期1231-1233,共3页
目的:研究受体酪氨酸激酶亚群抑制剂PTK787对早产儿视网膜病变(ROP)大鼠模型血管内皮生长因子(VEGF)及其受体VEGFR-2 mRNA的影响。方法:建立波动氧(80%和10%氧浓度24 h交替)诱导的SD大鼠ROP模型。67只新生SD大鼠随机设立空气组、模型组... 目的:研究受体酪氨酸激酶亚群抑制剂PTK787对早产儿视网膜病变(ROP)大鼠模型血管内皮生长因子(VEGF)及其受体VEGFR-2 mRNA的影响。方法:建立波动氧(80%和10%氧浓度24 h交替)诱导的SD大鼠ROP模型。67只新生SD大鼠随机设立空气组、模型组、治疗组(腹腔注射PTK787 50 mg/kg);每组随机抽取6只新生鼠,利用实时定量荧光PCR,观察生后12天及第17天的视网膜组织VEGF与VEGFR-2 mRNA表达,数据采用比较CT值法(2-CT法)分析基因相对表达量。选择GAPDH为内参。结果:12天及17天模型组较对照组VEGF与VEGFR-2 mRNA表达量明显增多,而治疗组未见异常。结论:PTK787对ROP病变大鼠模型VEGF与VEGFR-2 mRNA表达呈明显的负性调控作用。 展开更多
关键词 早产儿视网膜病变 血管内皮生长因子 PTK787 实时定量荧光pcr
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采用实时荧光定量PCR技术比较提取土壤真菌DNA方法的差异 被引量：5
5
作者 王淑芳 马桂珍 +1 位作者 钱媛媛 陈月 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第33期20318-20321,共4页
[目的]采用实时荧光定量PCR技术比较手提方式和OMEGA微量土壤DNA提取试剂盒获得土壤中真菌DNA的差异。[方法]接种5个梯度稀释的辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)菌丝到灭菌土壤中,并设置不接种的样品为阴性对照。采用手提方式和OMEGA... [目的]采用实时荧光定量PCR技术比较手提方式和OMEGA微量土壤DNA提取试剂盒获得土壤中真菌DNA的差异。[方法]接种5个梯度稀释的辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)菌丝到灭菌土壤中,并设置不接种的样品为阴性对照。采用手提方式和OMEGA土壤微量DNA提取试剂盒分别提取制备的土壤样品,采用实时荧光定量PCR方法和辣椒疫霉菌的特异性引物对土壤样品中的辣椒疫霉菌进行定量,并对结果进行比较,分析两种方法的特点。[结果]手提方式和试剂盒方式获得的土壤真菌DNA受土壤中杂质的影响较小,并且均能获得适合实时荧光定量PCR技术的模板DNA。采用试剂盒方式获得的辣椒疫霉菌定量结果比手工提取方式获得的辣椒疫霉菌定量结果平均高2.78倍。[结论]采用OMEGA微量土壤DNA提取试剂盒方法获得的菌体基因组DNA的量较多,定量结果更精确;手提方法所需试剂均为常用生化试剂,方便获得且价格低廉。因此,两种方法各有优势,可以根据实际情况选择。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr 真菌 土壤DNA
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